UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID FACULTAD DE MEDICINA TESIS DOCTORAL MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR PRESENTADA POR Luis López-Durán Stern DIRECTOR: Hipólito Durán Sacristán Madrid, 2015 © Luis López-Durán Stern, 1976 Potenciales bioelectricos en el callo de fractura y su correlación histológica : estudio experimental POTÊNCIALES BIOELECTRICOS EN EL CALLO DE FRACTURA SU CORRELACION HIST0L06ICA (ESTUDIO EXPERIMENTAL) TOMO - 1 s U M A R I 0 s u M A R I 0 p a g in a I n t r o d u c c i d n ................................................................................................... 1 R é v i s i o n de l a l i t e r a t u r a .................................................................... 6 1 - C é l u l a s O s t e o b l a s t o s ...................................................................... 6 O s t e o c i t o s ........................................................................... 12 O s t e o c l a s t o s ...................................................................... 21 2 - M a t r i z o s e a S u s t a n c i a f u n d a m e n ta l ................................................. 25 M u c o p o l i s a c a r i d o s à c i d o s .......................................... 29 Las g l i c o p r o t e i n a s ........................................................ 33 Colageno ................................................................................ 40 C a l c i f i c a c i d n .................................................................... 61 M i n e r a i .................................................................................. 79 El c a l l o de f r a c t u r a ......................................................................... 91 Hem orrag ia .......................................................................................... 92 I n f l a m a c i d n ....................................................................................... 95 Hematoma ............................................................................................... 101 C a l l o p e r i o s t a l .............................................................................. 105 C a l l o m edu la r .................................................................................. 119 V a s c u l a r i z a c i d n .............................................................................. 122 C a r t i l a g o ............................................................................................ 132 P a c t o r e s m ecan icos ...................................................................... 137 Fendmenos e l d c t r i c o s ................................................................................ 147 H i p d t e s i s de t r a b a j o ................................................................................ 178 M a t e r i a l y m e t o d o s ......................................................................... 179 IV A MIS PADRES S e n o r e s ; A lo l a r g o de l o s c in c o anos que nos ha c o s t a d o l a r e a l i z a c i o n de e s t a t e s i s , hemos p o d ido a p r e c i a r c l a r a m e n t e , no p o r m ani - da menos r e a l , l a d i f i c u l t a d e x i s t a n t e en n u e s t r o p a i s p a r a e l d e - s a r r o l l o de un t r a b a j o de i n v e s t i g a c i o n e x p e r i m e n t a l que q u i e r a t ^ n e r e l menor g rado de h o n e s t i d a d c i e n t i f i c a t o l e r a b l e . D i f i c u l t a d e s que se a c r e c e n t a n p a r a l o s c l i n i c o s cuando eji t r a n en e l t e r r e n o de l a s c i e n c i a s b a s i c a s , a l t e n e r que a p r e n d e r una nueva m e t o d o l o g i a d e s d e c e ro y r e v i s a r t em as que se a l e j a n ap^ r e n t e m e n t e de su p r à c t i c a d i a r i a , aunque c o n s t i t u y e n su fundamento r e a l . Pe ro no es e s t e l u g a r p a r a l a m e n t a c i o n e s , s i n o p a r a r e n d i r t r i b u t e a t o d o s a q u e l l o s s i n cuya ayuda no h u b i e r a s i d e p o s i b l e l a r e a l i z a c i d n de e s t a t e s i s , a l s e r a l f i n a l e s t a una l a b o r c o l e c t i - v a . En p r i m e r l u g a r hemos de c i t a r a l P r o f e s o r D. H i p d l i t o Du­ r a n S a c r i s t d n , d i r e c t o r de e s t a t e s i s , j u n t o a q u i e n he d e s a r r o l l a do t o d a mi v i d a u n i v e r s i t a r i a . El P r o f e s o r Durdn ha s a b i d o , a lo l a r g o de e s t e s a n o s , e n c a r r i l a r m e con s u s c o n s e j o s a l a consecj i - c i d n de l a t e s i s , l i b e r a n d o m e de mas de una o b l i g a c i d n d i a r i a y r ^ corddndome de fo rma c o n s t a n t e l a n e c e s i d a d p e r e n t o r i a de l l e v a r a buen t é r m in o e s t a l a b o r . Al P r o f e s o r D. A n ton io G a l l e g o F e r n a n d e z debo l a p o s i b i l i - dad de h a b e r r e a l i z a d o d ig n am e n te e s t e t r a b a j o a l p o n e r a mi d i s p o s i c i o n su s c o n s e j o s y a n a l i s i s c r i t i c o s de l o s d a t e s o b t e n i d o s , - ex ig iendome una a c t i v i d a d r e g l a d a a l o l a r g o d e l e x p e r i m e n t o , cu­ ya s b a s e s m a t e r i a l e s me p r o p o r c i o n o a s im is m o , j u n t o con l a ayuda - de sus c o l a b o r a d o r e s . De e s t o s , r e c o r d a r é a D. A n ton io L a f u e n t e cuya ayuda tecn_i ca en l a f a b r i c a c i d n de l o s e l e c t r o d e s , y su ç o n s e j o d i a r i o a lo - l a r g o d e l t i em po que du ro l a f a s e e x p e r i m e n t a l manteniéndome s i e m - p r e en l a v i a p r e v i a m e n t e f i j a d a , ha s i d e de un v a l o r i n a p r e c i a b l e , Ademas, l a c o l a b o r a c i o n d e l Dr .D . J a v i e r Yageya , y a u l t i m a h o r a - de l a D ra . Comas, me f a c i l i t a r o n g rande m en te e l manejo de l o s a n i ­ males . He de m enc iona r as imismo a l P r o f e s o r D. A g u s t i n B u l lo n Ra­ m i r e z , q u i d n me c o lo c d j u n t o a l o s D r e s . Merchan y F u r id l o s cua - l e s me g u i a r o n en l a i n t e r p r e t a c i d n de l o s h a l l a z g o s m o r f o I d g i c o s . Por u l t i m o he de c i t a r a t o d o s mis companeros d e l S e r v i c i o d e l P r o f e s o r D. H i p d l i t o Duran , y en e s p e c i a l a l Dr . A l a r c d n , q u i e nes me s u p l i e r o n a lo l a r ^ o de e s t o s anos en e l t r a b a j o d i a r i o mas de una v e z . He de s e n a l a r a p a r t e a l a S r t a . C oncepc idn S anchez , q u i e n ha r e a l i z a d o m a t e r i a l m e n t e , con un e s p i r i t u de p e r f e c c i d n y una — c o n c i e n c i a de t r a b a j o i n h a b i t u a l , l a l a b o r que a q u i p r e s e n t o , en - cuya p r i m e r a f a s e c o l a b o r d , sacando t i e m po a l t i e m p o . Carmen Diez y Ja ime V i a n i que ha d e s a r r o l l a d o una l a b o r f o t o g r d f i c a i n g e n t e - p a r a que p u d i e r a o b t e n e r l a s imagenes a q u i r e c o g i d a s . Mi f a m i l i a t o d a e l l a , y en e s p e c i a l mi m u je r y mi h i j a s a ­ i l ben lo que l e s debo p o r l o c u a l no l o s menc ionaremos mds . P a r a c o n c l u i r r e c o r d a r e a q u e l l o s amigos que desde l a ado^ ■ l e s c e n c i a c o n s i d e r a r o n que e l i n t e n t o de una c r e a t i v i d a d c i e n t i f i ­ ca d e b i a s e r l a l a b o r p r i n c e p s de mi v i d a . A t o d o s , muchas g r a c i a s . I l l I N T R O D U C C I O N I N T R O D U C C I O N Hemos e l e g i d o e l tema d e l c a l l o de f r a c t u r a como T e s i s D o c t o r a l , y a q u e , su e s t u d i o s i g u e p l a n t e a n d o g r a n numéro de p ro b le m as a p e s a r de s e r , - s i s e q u i e r e , una de l a s c u e s t i o n e s màs c l a s i c a s en e l e s t u d i o de l a f i s i o - p a t o l o g i a o s e a q u e , t a n t o en s u d e s c r i p c i o n como en su i n t e r p r e t a c i d n , va - cambiando con e l t i em po a medida que cambian l o s c o n o c im ie n t o s y l a s t e o r i a s en u s o s o b r e l a f i s i o l o g i a d s e a . E l e s t u d i o de l a s f r a c t u r a s puede e n f o c a r s e d e s d e muy d i v e r s e s puoi t o s de v i s t a , segun lo contemplemos d e s d e su f a c e t a s o c i a l o d e s d e l a b i £ - q u i m i c a . Desde un p u n to de v i s t a s o c i a l l a s f r a c t u r a s son un fendmeno p a t o l ^ g i c o que a p a r e c e con una f r e c u e n c i a c r e c i e n t e , lo que podemos c o n s i d e r a r dê b i d o a v a r i e s f a c t o r e s t a l e s como: 1 . - Un mayor numéro de p e r s o n a s con o c u p a c i d n l a b o r a l i n d u s t r i a l - con un mayor r i e s g o t r a u m à t i c o . 2 . - Un aumento d e l p a rq u e m d v i l de l o s p a r s e s a medida que c r e c e - s u r e n t a , con lo que e l r i e s g o de a c c i d e n t e v i a r i o aumenta nm c h o . Una mayor f r e c u e n c i a de l o s v i a j e s , que f a v o r e c e tam b idn l o s - a c c i d e n t e s p o r o t r o s med ios de locom oc idn como es e l f e r r o c ^ - r r i l . A s i , y s egun De Anquin , en e l ano 1969 se p r o d u c f a n 1000 muer- t o s d i a r i o s p o r a c c i d e n t e de c i r c u l a c i d n en e l mundo. Kun t^ - c h e r , s e n a l a en su l i b r o que en e l ano I960 hubo 13 .900 muer^ - t o s p o r t r à f i c o en A l e m a n ia . P a r a n u e s t r o p a i s , P a l a c i o s ( s ^ gun d a t o s de l a J e f a t u r a C e n t r a l de T r à f i c o ) , s e n a l a b a como - m u e r to s en l a s 24 h o r a s una c i f r a de 1 , 189xlO^/Km. y p a r a e l - ano 1966 p o r cada 1000 v e h i c u l o s 1 ,5 3 3 m u e r to s y 2 6 ,3 4 7 heri^ - d o s , con un t o t a l de 3287 a c c i d e n t e s . Pe ro e s t o no es u n i f o r ­ me, y t i e n e i n t e r é s a n a l i z a r e l numéro de p o l i t r a u m a t i z a d o s a t e n d i - dos en l o s d i f e r e n t e s s e r v i c i o s que a e l l o se d e d i c a n , segun e l d e - s a r r o l l o d e l p a i s . M o n t i c e l l i en Roma, e n t r e 1962 y 1965 e n c u e n t r a 199 m u er to s e n t r e 18 .972 a c c i d e n t e s a t e n d i d o s . De M a r n e f f e , e n t r e 1962 y 1969, r e c o g e 372 p o l i t r a u m a t i z a d o s , en t a n t o que S i l v a en — S i n g a p u r , e n t r e 1967 y 1969, r e c o g e 477 c a so s s i n s e n a l a r e l p é r i o ­ de de t iempo dur a n t e e l c u a l s e e x t i e n d e d i c h a r e v i s i o n ( 1 , 2 , 7 - 9 , 1 1 , 1 2 ) 3 . - Mayor s o b r e v i d a d e l enferme c a n c e r o s o con una g r a n f r e c u e n c i a de - a p a r i c i o n de m e t a s t a s i s o s e a s , que d e t e r m i n a n una mayor a b u n d a n c ia de f r a c t u r a s , y a q u e , p o r e l m e jo r e s t a d o g e n e r a l que p r e s e n t a n hoy e s t o s e n fe rm e s y su aumentada s o b r e v i d a , e x i g e n un t r a t a m i e n t o de - d i c h a s l e s i o n e s . Po r e l l o e n c o n t r a m o s cada vez mas r e f e r e n c i a s s o ­ b r e e l tema en l a l i t e r a t u r a e s p e c i a l i z a d a , de forma que K a tz n e r — d e s c r i b e 33 y Dossa 40 f r a c t u r a s p a t o l o g i c a s t r a t a d a s con buen re^ - s u l t a d o en e n fe rm e s de e s t e t i p o ( 3 , 6 ) . Vemos, p u e s , que e l numéro a b s o l u t e de f r a c t u r a s va en l a a c t u a l i d a d en - aumento y p l a n t e a una s e r i e de p rob lem as que e x i g e n una s o l u c i o n . E s t o s p r o b l e ­ mas se pueden e n f o c a r desde v a r i a s v e r t i e n t e s : I ) En su a s p e c t o e c o n d m i c o - s o c i a l , y a q u e , p o r un l a d o d é t e r m i n a una e l e v a d a — p é r d i d a de h o r a s de t r a b a j o d e b id o a l a l e n t i t u d con que c u r a n e s t a s l e s i o n e s . - P é r d i d a de 1 r e n d i m i e n t o l a b o r a l que i n c i d e d e s f a v o r a b l e m e n t e en e l p r o c e s o de — p r o d u c c i d n , lo que en p a i s e s de e s t r u c t u r a c a p i t a l i s t a en e s p e c i a l , l l e v a a l d e - s a r r o l l o de t é c n i c a s que p e r m i t a n una mas r â p i d a y m e jo r r e c u p e r a c i d n d e l l e s i o - nado p a r a e l t r a b a j o , con un d e s c e n s o d e l numéro de i n d i v i d u o s que p a s a n a l a — c l a s e p a s i v a y se c o n v i e r t e n en una c a r g a econdmica p a r a e s a s o c i e d a d . ( 1 0 , 1 3 ) . I I ) Desde e l pu n to de v i s t a b i o q u i m i c o , en e l e s t u d i o d e l hueso y su f i s i o l o g i a encon t ram os una g r a n d i f i c u l t a d a l t r a t a r s e de un t e j i d o cuya s u s t a n c i a fundameri t a l e s t a c a l c i f i c a d a y e n t o r c e p e , po r t a n t o , e l a n a l i s i s de l a s f u n c i o n e s c e l u l ^ r e s , que h a s t a hace r e l a t i v a m e n t e poco no e r a n c o n o c i d a s . E l hueso e s un t e j i d o c o n j u n t i v o e s p e c i a l i z a d o que cumple d e n t r o d e l o r g a n i s m e dos f u n c i o n e s : p o r un l a d o una q u i m i c a , de r e s e r v o r i o de i o n e s im p r e s c i n d i b l e s p a r a e l m a n t e n im ie n t o d e l medio i n t e r n o como son e l c a l c i o , - f d s f o r o , magnes io y , en menor g r a d o , e l s o d i o y e l p o t a s i o . Po r o t r o l ado - cumple u n a f u n c i d n m e c à n ic a de s o s t é n formando e l e s q u e l e t o . Ambas m i s i o n e s de pe nden de l a s u s t a n c i a f u n d a m e n ta l c a l c i f i c a d a que a c t u a de d e p o s i t o y de b a s e m e c à n ic a r f g i d a . La f u n c i d n b i o q u i m i c a se puede e s t u d i a r a n i v e l d e l hueso como t e j i ­ do . Po r e l c o n t r a r i o l a f u n c i o n m e c à n ic a l a podemos e n c a r a r de dos m a n e r a s : p o r un l a d o a n i v e l de t e j i d o , t a m b ié n como hueso en g e n e r a l , m a n i f e s t a n d o - u n a s c a r a c t e r f s t i c a s d e t e r m i n a d a s y p o r o t r o a n i v e l de d rgano c o n c r e t e de l a economfa, con una fo rma p a r t i c u l a r , y de a c u e r d o con e l l a y con e l l u g a r que ocupa en e l e s q u e l e t o , e s t à s o m e t id o a unas s o l i c i t a c i o n e s m ec à n ic a s da­ das a l a s que ha de a d e c u a r s e . En l a a c t u a l i d a d sabemos , d e s d e que i n i c i a r a l o s e s t u d i o s d e l hueso Duhamel en 1740, que e l mismo no es un t e j i d o i n e r t e , s i n o que e s t a som e t id o a unos cambios c o n s t a n t e s d e b id o s a su a c t i v i d a d c e l u l a r . (4) P o r e l l o , en su e s t u d i o nos e n c o n t r a m o s con v a r i o s e l e m e n t o s a consJ_ d e r a r : 1) Como t e j i d o c o n j u n t i v o c o n t a r d con unas c é l u l a s , unas f i b r a s y - una s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l , que a l e s t a r c a l c i f i c a d a e x i g i r à e l c o n o c im ie n to d e l m i n e r a l d e p o s i t a d o , l a r e l a c i o n e n t r e l o s d i f e r e n t e s e le m en to s de e s t e - t e j i d o y l a f u n c i o n r e c t o r a de l a s c é l u l a s ; l a o s t e o g e n e s i s y l a r e a b s o r c i é n o s e a . 2) El e s t u d i o de l a s dos f u n c i o n e s a n t e s s e n a l a d a s , l a b i o q u i m i c a - y l a m e c é n ic a y l a s s e n a l e s p a r t i c u l a r e s de cada una de e s t a s f u n c i o n e s que d e t e r m i n a r é n una r e s p u e s t a o s e a . Las s e n a l e s a l a s que es s e n s i b l e e l hueso pueden c o n s i d e r a r s e en un p r i n c i p i o d i f e r e n t e s p a r a su m i s i o n de d e p o s i t o y p a r a l a de s o s t é n . A n i v e l de t e j i d o p r o p i a m e n t e d i c h o podemos a s u m i r en una p r i m e r a h i p o t e s i s que l a r e s p u e s t a c e l u l a r e s u n i t a r i a , en e l s e n t i d o q u e , aunque l o s e s t i m u l o s s e a n d i f e r e n t e s , l a c a p a c i d a d de r e s p u e s t a c e l u l a r e s l i m i - t a d a a l t r a t a r s e de c é l u l a s e s p e c i a l i z a d a s d e n t r o de un o rgan i sm e p l u r i c e l u l a r . E s t e numéro l i m i t a d o de r e s p u e s t a s se p o d r à combinar e n t r e s i en e l t i e m p o y en e l e s p a c i o p a r a d a r una s o l u c i o n i n t e g r a d a , més c o m p le ja , a l o s e s t i m u l o s a l o s que son s o m e t i d a s d i c h a s c é l u l a s y t e n i e n d o en euen t a , ademas , l o s d i f e r e n t e s t i p o s c e l u l a r e s que pueden c om bina rse p a r a cum p l i r d i c h a f u n c i o n . A s i , a n t i c i p a n d o n o s a lo que vamos a e s t u d i a r a l g o mas d e t e n i d a - mente a c o n t i n u a c i o n , s i una r e s p u e s t a e s l a r e a b s o r c i é n y o t r a e l d e p o s ^ t o m i n e r a l , e s t a s p o d r à n h a c e r s e a l a z a r d e n t r o de t o d a l a masa o s e a s i r e s p o n d e n a un e s t i m u l o b i o q u i m i c o ; p e r o se o r i e n t a r é n en e l e s p a c i o y - a p a r e c e r à n en l u g a r e s d e t e r m i n a d o s de l o s h u e s o s como e s t r u c t u r a s c o n c r e - t a s , de a c u e r d o a su s s o l i c i t a c i o n e s m e c à n i c a s . Los e s t i m u l o s b i o q u i m i c o s que dan l u g a r a una r e s p u e s t a de depésj^ t o o r e a b s o r c i é n o s e a se conocen en l a a c t u a l i d a d b a s t a n t e b i e n , son de - n a t u r a l e z a ho rmona l y hemos de c o n s i d e r a r como s e n a l e s l a p a ra to h o rm o n a , l a c a l c i t o n i n a y l a s fo rm as a c t i v a s de l a v i t a m i n a D, e l 1,25 OH c o l i c a l - c i f e r o l . La n a t u r a l e z a y f u n c i é n de l o s e s t i m u l o s m ec a n ic o s y su a c c i é n s ^ b r e l a e s t r u c t u r a , han e s t a d o so ra e t id o s d u r a n t e mucho t iempo a p o l é m ic a - en e l s e n t i d o de a c e p t a r que l o s mismos puedan a l t e r a r l a e s t r u c t u r a d e l h u e s o ; p e ro no su fo rm a que e s t a c o n d i c i o n a d a g e n é t i c a m e n t e . Si a c e p t a - mos que l o s e s t i m u l o s raecénicos e l e m e n t a l e s ( c o m p r e n s io n , t r a c c i o n y c ^ z a l l a ) d e t e r m i n a n l a e s t r u c t u r a o s e a , deberemos a v e r i g u a r como d e t e r m i n a n una r e s p u e s t a c e l u l a r c o o r d i n a d a y c o n g r u e n t e con d i c h o e s t i m u l o . Desde l o s t r a b a j o s de Yamada y Yashuda se conocen l a s p r o p i e d a d e s p i e z o e l é c t r i c a s d e l hueso y se a c e p t a p o r lo g e n e r a l que l o s m ic ro p o te n c L a l e s , a s f g e n e r a d o s , son l a s s e n a l e s que c o n d i c i o n a n l a r e s p u e s t a c e l u l a r - a l o s e s t i m u l o s m e c a n ic o s . P e r o e s t o s no son l o s u n i c o s p o t e n c i a l e s que - se han d e t e c t a d o a n i v e l o s e o , F r i e d e n b e r g , e t c . , han d e m o s t ra d o p o t e n c i a ­ l e s en r e p o s e , que s e m o d i f i c a n t r a s l a p r o d u c c i d n de f r a c t u r a s , y que no t i e n e n que v e r en p r i n c i p i o con l o s de o r i g a n p i e z o e l é c t r i c o . Ante e s t o s d a t o s , no t o t a l m e n t e c o n c o r d a n t e s e n t r e s i , i n t e n t â m e s - en e s t e e s t u d i o a n a l i z a r l o s p o t e n c i a l e s d s e o s de r e p o s e , l a i n f l u e n c i a d e l s i s t e m a n e r v i o s o s o b r e e l l e s y su v a r i a c i d n t r a s l a f r a c t u r a desde e l momen t o de su p r o d u c c i d n h a s t a l a c o n s o l i d a c i d n de l a m i s m a , c o r r e l a c i o n â n d o l o s - con l a e v o l u c i d n h i s t o l d g i c a d e l c a l l o . Hemos e l e g i d o e s t a fo rm a de e n f o c a r e l p rob le m a por c o n s i d e r a r que d u r a n t e l a r e p a r a c i d n f r a c t u r a r i a l a r e s p u e s t a c e l u l a r no puede e s t a r c o n d i c i o n a d a p o r p o t e n c i a l e s p i e z o e l d c t r i c o s , ya q u e , l a u n i d a d m ec a n ic a d e l hueso e s t a p é r d i d a y no se r é c u p é r a una e s t a b i - l i d a d s u f i c i e n t e h a s t a muy avanzado e l c a l l o . La c r i t i c a que se puede hu - c e r a e s t e p l a n t e a m i e n t o es que e l e s t i m u l o p a r a e l p r o c e s o c i c a t r i z a l , no e s de o r i g e n e l é c t r i c o y que l o s p o t e n c i a l e s p i e z o e l d c t r i c o s son ün ica m en te r e s p o n s a b l e s de l o s r e m o d e la m ie n to s d s e o s s e c u n d a r i o s . El e s t u d i o h i s t o l d g i c o b u s c a dos f i n e s ; 1 . - C o n t r o l m o r f o l d g i c o d e l c a l l o y su e v o l u c i d n . 2 . - C o n f r o n t a r l o s h a l l a z g o s o b t e n i d o s con lo s d a t o s s e h a l a d o s po r o t r o s a u t o r e s en l a s r e s p u e s t a s a e s t i m u l o s ho rm ona le s y corn - p r o b a r l a p o s i b i l i d a d a n t e s e n u n c i a d a de una r e s p u e s t a c e l u l a r u n i t a r i a f r e n t e a d i f e r e n t e s e s t i m u l o s . Haremos en p r i m e r l u g a r una r e v i s i d n de l o s p u n t o s de l a f i s i o l o g i a d s e a que mas nos i n t e r e s a n . R E V I S I O N DE LA L I T E R A T U R A I - C E L U L A S E l O s t e o b l a s t o O s t e o c i t o s O s t e o c l a s t o s REVISION DE LA. LITERATURA El hue so como t e j i d o c o n j u n t i v o a p a r e c e formado a p a r t i r de unas c é l u l a s m esenqu im a les l l a m a d a s o s t e o b l a s t o s , que se r o d e a n de una s u s t a n ­ c i a f u n d a m e n ta l r i c a en f i b r a s c o l é g e n a s denominada o s t e o i d e , que a l ca.1 c i f i c a r s e se t r a n s f o r m a en hueso e i n c l u y e en su i n t e r i o r a l o s o s t e o b l a s t o s , que se c o n v i e r t e n a s f en o s t e o c i t o s , c é l u l a s e s t r e l l a d a s con p r o l o n - g a c i o n e s q u e , a t r a v é s de l o s c a n a l i c u l o s a b i e r t o s en l a s u s t a n c i a fund_a m e n t a l m i n e r a l i z a d a , comunican unos con o t r o s e s t a b l e c i e n d o c o n t a c t o s eri t r e s f con l o s o s t e o b l a s t o s de l a s u p e r f i c i e , a s f como, con l o s v a s o s eri c a r g a d o s de n u t r i r e s t a s c é l u l a s que a p a r e c e n a i n t e r v a l e s r e g u l a r e s . En o t r o s p u n t o s e l t e j i d o é s e o es r e a b s o r b i d o , t a m b ié n p o r c é l u l a s , denomina das o s t e o c l a s t o s , que a c t u a n o r i g i n a n d o unas zonas de c o n t o r n o s n f t i d o s - c o n o c i d a s como l a g u n a s de Howship. Vamos a comenzar c o n s i d e r a n d o p r i m e r o t o d o s l o s componen tes d e l h ue so como t e j i d o , h a c i e n d o una p r i m e r a a p r o x i m a c i o n e s t â t i c a y p o r lo — t a n t o i n e x a c t a . D e s c r i b i r e m o s s u s p a r t i c u l a r i d a d e s h i s t o l o g i c a s s i n p r ^ o c u p a r n o s , en un p r i n c i p i o , de su o r i g e n y d e v e n i r , a s f como de su f im - c i o n ( lo c u é l haremos en una segunda p a r t e t r a s l a d e s c r i p c i é n morfolég_i c a ) . 1 C E L U L A S El O s t e o b l a s t o Una de l a s p r i n c i p a l e s d i f i c u l t a d e s con l a que nos e n c o n t r am o s es l a d e f i n i c i é n de qué e s un o s t e o b l a s t o , y s i g u i e n d o a B o r d i e r (45 ) s o l o vamos a c o n s i d e r a r c o m o ta ie s l a s c é l u l a s a c t i v a s , - f o r m a d o r a s de h u e s o , c a p a c e s de p r o d u c i r c o lé g e n o y de c a l c i f i c a r l o . Aim que G o o d s i r , Tomes y Morgan y M u e l l e r h a b f a n d e s c r i t o a n t e s e s t a s c é l u l a s , f u e Gegenbauer en 1864 q u i é n c o n s i d é r é e s t a s c é l u l a s d e l p e r i o s t i o como l a s p r o d u c t o r a s de hu e s o y , p o r t a n t o , r e s p o n s a b l e s de l a r e p a r a c i o n o s e a l l a m a n d o l a s o s t e o b l a s t o s . ( 31, 43 ) Los o s t e o b l a s t o s a c t i v e s m id en e n t r e 15 y 80 m i c r a s de d i à m e t r o , con un taraano medio e n t r e l a s 20 y 30 m i c r a s , A pa recen s o b r e l a s s u p e r f i c i e s - donde se forma h u e s o , en una capa c e l u l a r c o n t i n u a con una d i s p o s i c i é n seji d o e p i t e l i a l . P r e s e n t a n u n i o n e s e n t r e l a s c é l u l a s de fo rm a d i s c o n t i n u a t ^ mando una d i s t r i b u c i é n e n d o t e l i a l , como han d e m o s t ra d o D o t t y y S c h o f f i e l d - ( 23 ) y M athews (39.50). En l o s p u n t o s de g r a n a c t i v i d a d fo rm a d o ra l o s o s ­ t e o b l a s t o s p a r e c e n e s t r a t i f i c à r s e , toman una d i s p o s i c i o n o b l i c u a y s e im br^ can l o s unos con l o s o t r o s como l a s t e j a s ; p e r o en g e n e r a l fo rman un e s t r a - t o en e m p a l i z a d a u n i c e l u l a r d i r e c t a m e n t e s o b r e p u e s t o s a l h u e s o . E s t a s c é l u l a s p r e s e n t a n un a s p e c t o p r i s m é t i c o , p i r i f o r m e , con un d i à m e t r o mayor de 20 a 30 m i c r a s . El n u c l e o en l a s zonas de f o r m a c i o n a c t i v a de hue so se encuejn t r a a l e j a d o de e s t a s u p e r f i c i e , e s d e c i r , m u e s t r a una p o l a r i d a d n e g a t i v a , - e s g r a n d e , o v o i d e o , en g e n e r a l p o b re en c r o m a t i n a y con 1-3 n u c l e o l o s , que segun C a p p e l l i n son màs i n t e n s o s d u r a n t e l a f a s e de f o rm a c i o n de o s t e o i d e - p a r a d e s a p a r e c e r en e l memento que e l o s t e o b l a s t o queda e n g loba do c o n v i r t i à i dose en o s t e o c i t o . E l n u c l e o t i e n e 2 raembranas y p o r o s e s c a s o s . Cameron - d e s c r i b e e l acumulo de m a t e r i a l n u c l e a r en t o r n o a l o s p o r o s . ( 17, 20, 44 ) Aunque N o v i k o f f y Krompecher ( 300) p i e n s a n en l a p o s i b i l i d a d de d i v i s i o n e s a m i t é t i c a s de l o s o s t e o b l a s t o s , V e i d e n r e i c h y P r i t c h a r d ( 4 2 , 5 1 ) — a f i r m a n que e s t a s c é l u l a s no se d i v i d e n , lo que c o n f i r m a n l o s t r a b a j o s de Owen y Tonna, S c o t t y Remagen ( 46,49), con t i m i d i n a t r i t i a d a , l o s c u a l e s - a f i r m a n que e s t a s c é l u l a s en f a s e de o s t e o b l a s t o no se d i v i d e n , s i n o que - p r e c e d e n de o t r a s p r e c u r s o r a s que se denominan en g e n e r a l p r e o s t e o b l a s t o s , que son l o s q u e , s egun Manabe (318) 1975, r a u e s t r a n una a c t i v i d a d d i v i s o - r i a a l margen de l a c é l u l a mesenquimal i n d i f e r e n c i a d a . Dicho a u t o r i n d i c a l a e x i s t e n c i a de una d i v i s i é n de l o s o s t e o b l a s t o s ; p e r o creemos que se r ^ - f i e r e a l a s c é l u l a s i n t e r m e d i a s denominadas en l a a c t u a l i d a d p r e o s t e o b l a s - t o s , s i t u a d a s e n t r e l a c é l u l a mesenquimal i n d i f e r e n c i a d a , de l a que més tar^ de h a b l a r e m o s , y e l o s t e o b l a s t o p r o p i a m e n t e d i c h o , d i r e c t a m e n t e s u p e r p u e s t o s o b r e l a s u p e r f i c i e o s t e o i d e y e n c a r g a d o de s u p r o d u c c i o n . Los n u c l e o s de l o s o s t e o b l a s t o s se t i n e n someramente con e l P e u l g e n , lo que i n d i c a su e s c a so c o n t e n i d o en A.D.N. y a p o y a r f a , a s f mismo, l a f a l t a de d i v i s i o n m i t o t i c a de l o s mismos a n t e s p o s t u l a d a . ( 14, 18, 20, 24, 26, 37, 40, 45, 53 ) El c i t o p l a s m a m u e s t r a p o r e l c o n t r a r i o una marcada b a s o f i l i a que es una de l a s mâs i n t e n s a s de l a economfa . Con e l a z u l de m e t i l e n o se t i n e - e l c i t o p l a s m a p o r e n t e r o , con e x c e p c i o n de una zona en t o r n o a l n u c l e o que se conoce como v a c u o l a y u x t a n u c l e a r y que c o r r e s p o n d e a l a p a r a t o de G o lg f . La b a s o f i l i a e s màs i n t e n s a en l a s c é l u l a s de a c t i v i d a d y d e s a p a r e c e en lo que a lg u n o de l o s a u t o r e s c o n s i d e r a n como o s t e o b l a s t o s en r e p o s e , es d e c i r , l a s c é l u l a s de l a s u p e r f i c i e o s e a que no e s t à n en f a s e de s f n t e s i s , a s f c^ mo en l o s o s t e o c i t o s . E l c i t o p l a s m a con l a h i s t o l o g f a o r d i n a r i a p a r e c e fY namente g r a n u l a d o . La b a s o f i l i a d e l c i t o p l a s m a i n d i c a una i n t e n s a a c t i v i d a d d e l A.R.N. y a que e s t a t i n c i o n se p i e r d e s i se t r a t a e l hueso con r i b o - n u c l e a s a s y , - s e g u n G a i l l a r d (28 ) , es i n d i c e de una e l e v a d a s f n t e s i s p r o t e i c a . Cape l l i n s e n a l a que en e l embr ion de p o l i o l a b a s o f i l i a a p a r e c e p r im e ro en e l n u c l e o l o , d e l c u a l p a s a a l c i t o p l a s m a c o lo c é n d o s e en t o r n o a l a membrana - n u c l e a r , p a r a luego d i s p e r s a r s e a todo e l c i t o p l a s m a cuando l a c é l u l a e s t é t o t a l m e n t e d i f e r e n c i a d a y t i e n e l u g a r l a s f n t e s i s de l a m a t r i z o r g é n i c a - o s e a . E s t a b a s o f i l i a , como y a hemos s e n a l a d o , d e s a p a r e c e cuando l a c é l u l a s e t r a n s f o r m a en o s t e o c i t o , quedando i n c l u f d a en e l m a t e r i a l m i n e r a l i z a d o . P a r a Ham, l a b a s o f i l i a se debe a l a g r a n f r e c u e n c i a de r ib o s o m a s u n i d o s a l r e t f c u l o e n d o p l a s m é t i c o . (29) El r e t f c u l o e n d o p l a s m é t i c o R.E . y l o s r i b o s o m a s , s egun B o r d i e r (45) , son e l o r g a n i t o c e l u l a r més i m p o r t a n t e de l o s o s t e o b l a s t o s y e x p l i c a n su - b a s o f i l i a . El r e t f c u l o e n d o p l a s m a t i c o es de l a v a r i e d a d r u g o s a . Compone e l R .E . en una s e r i e de p l a ç a s o c a n a l i c u l o s de membrana d o b l e , con un e^ p a c i o c l a r o e n t r e e l l a s y de c o n te n i d o u n i f o r m e , p e r o de mayor d e n s i d a d - que e l c i t o p l a s m a . Se d i s p o n e en p a r a l e l o a l p o l o s e c r e t o r de l a c é l u l a - e n t r e é s t e y e l n u c l e o . En a l g u n a s zonas d e l R.E. se p ro d u c e n e x p a n s i o n e s de su l u z d é n d o le a s p e c t o de v e s f c u l a s , l o que segun Cameron no e s t é en r e ­ l a c i o n con e l e s t a d o f u n c i o n a l de l a s c é l u l a s . Segun S c o t t , B e n e d e t t i - (15 ) , e t c . . Las v e s f c u l a s d e l R.E. e s t é n r e l l e n a s de un m a t e r i a l amorfo d e n s o . ( 14, 17-20 ) . Sobre l a c a r a e x t e r n a de e s t a s l am ina s de a d h i e r e un g r a n numéro - de r ib o s o m a s q u e , s e g u n Cameron ( 20 ) , toman una d i s p o s i c i o n en e s p i r a l o e n c a d e n a . En t o d o s l o s o s t e o b l a s t o s a c t i v o s se puede o b s e r v a r una zona y u x t a ­ n u c l e a r q u e , como y a hemos s e n a l a d o a n t e s , no se t i n e con l o s c o l o r a n t e s - h a b i t u a l e s y que S c h a f f e r denomino l a v a c u o l a y u x t a n u c l e a r . F e l l c o n s i d é ­ r é r e p r e s e n t a b a e l a p a r a t o de G olg i que se h a b f a d e s t r u i d o p o r l o s f i j a d o - r e s h a b i t u a l e s y l a l la m é imagen n e g a t i v a d e l G o l g i . H e l l e r d i c e que s é l o a p a r e c e en l o s o s t e o b l a s t o s mas g r a n d e s y mas a c t i v o s . Con l a s t i n c i o n e s m e t a l i c a s p a r a l a m i c r o s c o p i a o r d i n a r i a , se d e m u e s t r a que e s t a formado e l a p a r a t o de Golg i p o r una r e t i c u l a de e l e m e n t o s o s m i é f i l o s que se h a c en mâs d i f u s o s en l a f a s e s e c r e t o r i a , p a r a d i s m i n u i r de volumen cuando l a c é l u l a se e n v u e lv e en o s t e o i d e . Segun F e l l (26) su e s t a d o de mayor o menor corn - p l e j i d a d r e f l e j a e l g rado de a c t i v i d a d c e l u l a r y puede o b s e r v a r s e l a emi - g r a c i é n de sus v e s i c u l a s d e n t r o de l a c é l u l a . Con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r é n i c o se ha v i s t o que e l G o lg i d e l ostejo - b l a s t o e s t a muy b i e n d e f i n i d o segun Cameron ( 1 7 ) , Rob inson (47 ) , y e s t a i n t e g r a d o po r una s e r i e de s a c o s v a c i o s , p o r g r a n d e s v a c u o l a s y p o r pê - q u e n a s v e s i c u l a s . P r é s e n t a , a d i f e r e n c i a d e l r e t f c u l o e n d o p l a s m a t i c o de d i s t r i b u c i é n i r r e g u l a r , una d i s p o s i c i é n o r g a n i z a d a en c a v i d a d e s u n i d a s a - membranas . P a r e c e d e r i v a r de o t r a s e s t r u c t u r a s membranosas de l a c é l u l a , a s f p a r a unos a u t o r e s se o r i g i n a de l a membrana c i t o p l a s m â t i c a , y p a r a — o t r o s d e l r e t f c u l o e n d o p l a s m a t i c o . J u e g a e l a p a r a t o de G o lg i un p a p e l f u n d a m e n ta l en l a s e c r e c i é n c e l u l a r . Se s u e l e c o l o c a r e n t r e e l n u c l e o y e l p o l o s e c r e t o r i o de l a c é l u l a . Segun Ham (29) es un acumulo de v e s f c u l a s membranosas l i s a s , a p i n a d a s - unas s o b re o t r a s en l a p r o x im id a d d e l n u c l e o , con d i s p o s i c i é n a r q u e a d a que en su z ona convexa se abomban y l i b e r a n unas e s t r u c t u r a s l l a m a d a s v a c u o l a s , cuyo c o n t e n i d o se c onde nsa m i e n t r a s e m ig ran h a c i a l a s u p e r f i c i e c e l u l a r . - Las membranas de 1 a p a r a t o de G o l g i , segun Ham, se forman a p a r t i r d e l r e t ^ c u l o e n d o p l a s m a t i c o , son p e q u e h a s , de s u p e r f i c i e l i s a y se l l a m a n v e s f c u - l a s de t r a n s f e r e n c i a . E s t é n l l e n a s de p r o t e f n a s s i n t e t i z a d a s en e l R . E . , que a l p a s a r a l a p a r a t o de G o lg f maduran. Al l l e g a r a l a membrana c e l u l a r s e e l i m i n a n l a s v a c u o l a s d e s c r i t a s , c o n t r i b u y e n d o a s f a l a s e c r e c i o n c e l u ­ l a r . Veremos e l p a p e l que j u e g a n en l a s f n t e s i s d e l c o la g e n o y su c a l c i f i - c a c i d n . Ya V e i d e n r e i c h y D u b r u e i l h a b f a n d e s c r i t o en e l i n t e r i o r de e s t a s - c é l u l a s l a e x i s t e n c i a de v e s f c u l a s q u e , s e gun Rasmussen, t i e n e n de 200 a 400 X y segun H e l l e r - S t e i n b e r g miden de 0 , 3 a 0 , 6 m i c r a s y son P . A . S . po s i t i v a s . Con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r é n i c o se ha v i s t o que l a s v e s f c u l a s — t i e n e n una membrana ù n i c a con un c o n t e n i d o de m a t e r i a l denso c o n s i d e r a d o - p o r F i t t o n J a c k s o n como m u c o s o p o l i s a c é r i d o s y p r o t e f n a s , y su numéro v a r f a de a c u e r d o con l a a c t i v i d a d s e c r e t o r i a de l a c é l u l a . ( 1 6 , 2 1 , 2 7 , 3 0 , 5 1 ) Se e n c u e n t r a n t a m b ié n a lg u n o s c u e rp o s c o n s i d e r a d o s como I f p i d o s po r A s c e n z f . Al c o n t r a r i o que en l o s p r e o s t e o b l a s t o s se c o n s i d é r a en g e n e r a l que l a e x i s t e n c i a de g lu c é g e n o es e s c a s a ; p e r o con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r é ­ n i c o , S c o t t ha d e m o s t r a d o l a e x i s t e n c i a de un m a t e r i a l f i n a m e n t e g r a n u l a r - en l a p e r i f e r i a de l a c é l u l a , que i n t e r p r é t a como g l u c é g e n o . Las m i t o c o n d r i a s son l o s o r g a n i t o s c e l u l a r e s que a l b e r g a n l a s cado nas e n z i m é t i c a s r e s p i r a t o r i a s , a p a r e c e n con una f r e c u e n c i a r e l a t i v a , p e ro no e x c e s i v a , y t i e n e n un tamaho ap rox im ado de 0 , 2 m i c r a s . Segun F e l l , en l o s o s t e o b l a s t o s g r a n d e s y a c t i v o s a p a r e c e n en d i s p o s i c i é n r a d i a l en t o r ­ no a l a p a r a t o de G o l g f . E s t a d i s p o s i c i é n y su numéro aumentan desde l o s - p r e o s t e o b l a s t o s h a s t a l o s o s t e o b l a s t o s , d i sm inuyendo d e s p u é s cuando l a c é ­ l u l a se t r a n s f o r m a en o s t e o c i t o . P r i t c h a r d , con e l M.E. ha c o n f i rm a d o que se acum ulan en l a p e r i f e r i a c e l u l a r y que son i g u a l e s que l a s de l a s demés c é l u l a s d e l t e j i d o c o n j u n t i v o s i n m o s t r a r v a r i a c i o n e s e s p e c i a l e s , es d e c i r , t i e n e n una d o b l e membrana, c r e s t a s b i e n d e s a r r o l l a d a s , fo rm a de b a s t é n y - en o c a s i é n g r a n u l e s en su i n t e r i o r . Po r u l t i m o , s e d e s c r i b e n en su i n t e r i o r l a p r e s e n c i a de m i c r o t u b o s y m i c r o f i l a m e n t o s , s i e n d o m e jo r c o n o c i d a l a f u n c i é n de l o s p r i m e r o s . Tay­ l o r ( 22 ) , en e l e p i t e l i o de l a v e j i g a , m u e s t r a su r e l a c i é n con e l t r a n s _ 10 p o r t e de a g u a . P a r e c e que s u f u n c i o n y numéro se e s t i m u l a p o r e l A.M.P. c^ c l i c o y Rasmussen s e n a l a que i n t e r v e n d r i a n en e l t r a n s p o r t e i n t r a c e l u l a r . - P o r o t r o l a d o , E h r l i c h , e t c . (25 ) han dem os t rado p o r e s t u d i o s con c o l c h J c i n a y v i m b l a s t i n a que l o s m i c r o t u b o s e s t é n en r e l a c i o n con e l t r a n s p o r t e - de p r o d u c t o s d e l a p a r a t o de G o lg i a l e x t e r i o r de l a c é l u l a ; y en c o n c r e t e - p a r a l o s o s t e o b l a s t o s i n t e r v i e n e n en e l t r a n s p o r t e d e l p r o c o l é g e n o a l a m^ t r i z e x t r a c e l u l a r . ( 1 6 , 2 2 ,3 9 ,5 0 ,5 2 ) Hemos de s e n a l a r , como ya d i j i m o s a n t e s , que l o s o s t e o b l a s t o s p r e s e n t a n p r o l o n g a c i o n e s c i t o p l a s m é t i c a s que e n t r a n en c o n t a c t e de manera a i s l a d a con l o s o s t e o b l a s t o s v e c i n o s , como en un e n d o t e l i o . Se i n c l u y e n en e l o^ - t e o i d e y e n t r a n en c o n t a c t e con l o s o s t e o c i t o s de l a p r o f u n d i d a d a t r a v é s - de l o s c a n a l e s que hay en l a m a t r i z c a l c i f i c a d a . P a r a P r i t c h a r d (44 ) - t a m b i é n van a tomar c o n t a c t e con l o s p r e o s t e o b l a s t o s , en t a n t o que B o r d i e r y Rasmussen ( 4 5 ) l e n i e g a n . Segun e s t o s a u t o r e s l a s p r o l o n g a c i o n e s de - l o s o s t e o b l a s t o s c o n t r i b u y e n a fo rm a r un s i n c i t i o c e l u l a r que d e s c r i b i r e m o s d e s p u é s . Mathews l a s c o n s i d é r a més f r e c u e n t e s en l o s o s t e o b l a s t o s j o v e n e s , d i sm inuyendo con l a edad y t r a s l a a d m i n i s t r a c i o n de c o r t i s o n a . P a u t a r d ha d e s c r i t o con e l m. e . , e n o t r o t i p o de p r o l o n g a c i o n e s cito^ p l a s m é t i c a s , l a e x i s t e n c i a de c u e rp o s d e n s o s que p a r e c e n e s t a r en r e l a c i o n - con e l comienzo de l a c a l c i f i c a c i o n y l a s l l a m a e x t r u s i o n e s p ro to p la sm a t_ i - c a s q u e , s egun B o n u c c i , s e r f a n d i s t i n t a s de l a s p r o l o n g a c i o n e s h a b i t u a l e s - de l o s o s t e o b l a s t o s e n c a r g a d a s de l o s c o n t a c t o s c e l u l a r e s y que se l i b e r a n en fo rma de v e s i c u l a s p i n o c i t o c i c a s . Los o s t e o b l a s t o s , i g u a l que l o s o s t e o c i t o s de s u p e r f i c i e , pueden m_q d i f i c a r su fo rm a de a c u e r d o a s u e s t a d o f u n c i o n a l , l o que es e s p e c i a l m e n t e marcado t r a s l a a d m i n i s t r a c i é n de c a l c i t o n i n a , que p r o d u c e una c o n t r a c c i é n - de l a s c é l u l a s aumentando a s f l o s e s p a c i o s e n t r e e l l a s y p r o d u c i e n d o un — g r a n acumulo de Ca y P en e l i n t e r s t i c i o , como m u e s t r a n l o s e s t u d i o s con p i r o a n t i m o n a t o de Mathews ( 50) . 11 O s t e o c i t o s Son l a s c é l u l a s d e r i v a d a s de l o s o s t e o b l a s t o s una vez que quedan eii g l o b a d a s en l a s u s t a n c i a f u n d a m e n ta l c a l c i f i c a d a , donde s u f r e n una s e r i e - de t r a n s f o r m a c i ones m o r f o l é g i c a s y e n c o r r e s p o n d e n c i a f u n c i o n a l e s , que h a ^ t a hace r e l a t i v a m e n t e poco t i em po e r a n mal c o n o c id a s y p o r e l l o se l a s co^ s i d e r a b a c é l u l a s de s i g n i f i c a c i o n f u n c i o n a l muy e s c a s a , se s u p o n i a que t e ^ minaban m ûriendo y d ejan d o ,e s p e c i a l m e n t e e n e l a d u l t e , l a g u n a s v a c i a s que p o d i a n h i p e r m i n e r a l i z a r s e como ha d e m o s t r a d o Jowsey ( 6 9 ) . Los o s t e o c i t o s son l a s c é l u l a s mas f r e c u e n t e s d e l h u e s o , ya q u e , - Baud ( 5 5 ) c o n s i d é r a que hay ap rox im adam en te 2 6 .0 0 0 p o r mm3. Su f r e c u e ^ c i a v a r i a de unas é r e a s a o t r a s , lo que se debe a l a i n t e n s i d u d de l a actj_ v i d a d o s t e o b l a s t i c a , que v a r f a de unas zonas a o t r a s . A s f , en e l hueso em b r i o n a r i o a p a r e c e un mayor numéro de o s t e o c i t o s con una d i s t r i b u c i é n i r r e ­ g u l a r , en t a n t o q u e , en e l hueso l a m i n a r a d u l t o hay menos y e s t é n mejor 0£ denados en su d i s t r i b u c i é n , son mas a l a r g a d o s y con més p r o c e s o s c i t o p l a s - m é t i c o s . E l e s q u e l e t o j o v e n es mas r i c o en o s t e o c i t o s que e l d e l a d u l t o . (14) Los o s t e o c i t o s no m u e s t r a n una m o r f o l o g f a u n i t a r i a , s i n o que e s t a - v a r f a con e l t i em po y r e f l e j a , s egun l a s i n v e s t i g a c i o n e s de Baud, B e la n g e r , V i t t a l f , Remagen, S c hu lz ( 5 8 , 6 0 , 7 9 , 8 3 ) , e l e s t a d o f u n c i o n a l de l o s mismos que se e n c u e n t r a en r e l a c i é n con e l m e ta b o l i s m o d e l c a l c i o . J a n d e y B e l a n g e r c o n s i d e r a n t r è s f a s e s en l a v i d a d e l o s t e o c i t o ; 1 ) F a s e j u v e n i l . R e c i é n i n c l u f d o s en e l hue so a p a r e c e n l o s o s t e o c ^ t o s con una e s t r u c t u r a muy s i m i l a r a l a de l o s o s t e o b l a s t o s . 2 ) O s t e o c i t o m adu ro . P r é s e n t a una f a s e a c t i v a de r e a b s o r c i é n é s e a con un aumento de tamaho en l a l a g u n a o s t e o c i t a r i a cuyo bo rde - o s t e o i d e t i e n e una mayor a p e t e n c i a b a s é f i l a en l a s t i n c i o n e s - h i s t o l é g i c a s o r d i n a r i a s . 12 3) F a s e d e g e n e r a t i v a . La c é l u l a muer e d e j a n d o l a l a g u n a v a c i a que, como hemos s e n a l a d o , se puede h i p e r c a l c i f i c a r , dando una imagen de m i c r o p e t r o s i s - s e g u n F r o s t , Jowsey ( 6 4 , 6 7 ) , e t c . . - En c o n t r a de e s t a t e o r f a h a y d a t o s que p a r e c e n i n d i c a r que e l o s t e ^ c i t o se r é c u p é r a y es capaz de s i n t e t i z a r de nuevo h u e s o , e s l a f a s e l lanm da p o r Baud y V i t t a l i ( 5 8 , 8 4 ) de o s t e o p l a s i a . Por o t r o l a d o se h a demo^ t r a d o que l a imagen de p i c n o s i s s e p r o d u c e , a s i mismo, t r a s e l e s t i m u l o - con c a l c i t o n i n a y r e p r e s e n t a r i a , po r t a n t o , un momento de r e p o s e f u n c i o n a l c e l u l a r , s egun Rasmussen . Hoy p a r e c e a c e p t a r s e p o r l a mayor i a , que e l o s ­ t e o c i t o t i e n e una a c t i v i d a d t a n t o l i t i c a como f o rm a d o ra de h u e s o , a l mar - gen de que pueda d e g e n e r a r y m o r i r como han d e m o s t r a d o , f u e r a de t o d a du_ d a , J o w se y , J e e , F r o s t ( 6 6 , 6 8 ) . Cuando e l o s t e o b l a s t o queda i n c l u i d o en l a f a s e m i n e r a i y s e t r a n s fo rm a en o s t e o c i t o , p i e r d e volumen y e m i t e p r o l o n g a c i o n e s c i t o p l a s m é t i c a s l a t é r a l e s , ademés de l a s que y a p r e s e n t a b a como o s t e o b l a s t o . P r o lo n g a c ^ o n e s que se i n t r o d u c e n en l o s c a n a l i c u l o s de l a s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l miræ r a l i z a d a , p o n i e n d o en c o n t a c t e unos o s t e o c i t o s con o t r o s y con l a s c é l u l a s s u p e r f i c i a l e s fo rm ando , po r t a n t o , un s i n c i t i o . Las z o n a s de u n i o n c e l u l a r son é r e a s de c o n t a c t e como l o s desmoso- mas e p i t e l i a l e s . Segun H o l t r o p , son r e g i o n e s de mayor p e r m e a b i l i d a d p a r a e l p a s o de i o n e s y p r o t e f n a s de b a j o p e s o m o l e c u l a r de unas c é l u l a s a — o t r a s . La f o r m a c i é n de e s t e s i n c i t i o c e l u l a r t i e n e i m p o r t a n c i a , como de^ c r i b i r e m o s mas a d e l a n t e , p a r a l a h o m e o s t a s i s m i n e r a l , p u e s t o q u e , s é p a r a l a f a s e m i n e r a i o s e a d e l l i q u i d e e x t r a c e l u l a r g e n e r a l . (52) La membrana d e l c u e rp o c e l u l a r t i e n e una m o r f o l o g f a d i f e r e n t e se ̂ - gun l a a c t i v i d a d f u n c i o n a l . B i e n a p a r e c e p l e g a d a m o s t r an d o i n c l u s e micro b e l l o s i d a d e s , o b i e n a p a r e c e con e s t r u c t u r a l i s a . E l n u c l e o de l o s o s t e o _ c i t e s e s g r a n d e , ocupa una g r a n p a r t e de l a c é l u l a y , a v e c e s , t i e n e un - n u c l e o l o y un c o n te n i d o f i n a m e n t e g r a n u l o s o . La membrana n u c l e a r e s d o b l e . 13 Los o s t e o c i t o s j é v e n e s , l l a m a d o s o s t e o i d e s , t i e n e n un r e t f c u l o end^ p l é s m ic o r u g o s o , muy b i e n d e s a r r o l l a d o y con a b u n d a n t e s r i b o s o m a s . Hay un a p a r a t o de G o lg f formado de v e s f c u l a s y v a c u o l a s . Las m i t o c o n d r i a s s on r ^ dondas y p e q u e h a s . A p a re ce n a l g u n o s l i s o s o m a s . Cuando e l o s t e o c i t o se ce a d u l t o p i e r d e g r a n c a n t i d a d de su r e t f c u l o e n d o p l a s m i c o , que a p a r e c e - formado p r e p o n d e r a n t e m e n t e p o r g r a n d e s c i s t e r n a s . Disminuye b a s t a n t e e l - numéro de r ib o s o m a s q u e , aunque son menos f r e c u e n t e s que en e l o s t e o b l a s t o , son lo s u f i c i e n t e m e n t e a b u n d a n te s como p a r a h a c e r a p a r e c e r e l c i t o p l a s m a - de c a r é c t e r b a s é f i l o en l a s t i n c i o n e s p a r a e l m ic . o r d i n a r i o . E l a p a r a t o de G olgf ocupa e l mismo p u e s t o que en e l o s t e o b l a s t o , e s d e c i r , en l a zona y u x t a n u c l e a r y e s t a fo rm ado , s o b re t o d o , p o r p i l a s de membranas y p e que has v e s f c u l a s . Las m i t o c o n d r i a s en fo rma de b a s t o n e s p r e s e n t a n con f r e c u e n c i a e n t r e su s c r e s t a s g r é n u l o s d e n s o s de 300 a 500 % de d i a m e t r o , que son si_ m i l a r e s a l o s que a p a r e c e n en l o s o s t e o c l a s t o s . Hay, a s f mismo, g l u c é g e n o q u e , con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r é n i c o , a p a r e c e en forma de g r é n u l o s con una membrana de 200 2 de d i é m e t r o y de d i s t r i b u c i é n i r r e g u l a r o a s o c i a d o s - en g ru p o s j u n t o a l o s que se d e m u e s t r a l a e x i s t e n c i a de v e s f c u l a s l i p f ( H - c a s . Todas e s t a s e s t r u c t u r a s i n d i c a n q u e , aunque mas l e n t a m e n t e como ha - d em os t rado Baud ( 5 8 ) con l e u c i n a m arcada con t r i t i o , e s t a s c é l u l a s s i n _ t e t i z a n p r o t e f n a s y m u c o p o l i s a c é r i d o s . ( 5 5 - 6 0 , 6 7 , 7 8 , 7 9 , 8 3 ) En d i v e r s a s z ona s d e l hueso l o s o s t e o c i t o s a d u l t o s m u e s t r a n una d i ^ m in u c ié n d e l r e t f c u l o e n d o p l a s m é t i c o y un aumento de l a s m i t o c o n d r i a s que en o c a s i o n e s e s t é n h i n c h a d a s con g r é n u l o s d e n s o s en su i n t e r i o r . Apa recen en numéro mayor o menor v e s f c u l a s l i s o s é m i c a s que se acorapahan de l a demqs t r a c i é n h i s t o q u f m i c a de f o s f a t a s a é c i d a y o t r o s enz im as p r o t e o l f t i c o s ( t ^ do e l l o f n d i c e de l a a c t i v i d a d I f t i c a de e s t a s c é l u l a s ) . Ninguno de l o s - o r g a n i t o s c e l u l a r e s d e s c r i t o s , p é n é t r a a p a r e n t e m e n t e en l a s p r o l o n g a c i o n e s c i t o p l a s m é t i c a s que se d i s t r i b u y e n p o r l o s c a n a l i c u l o s é s e o s . Hemos de d e s c r i b i r p o r f i n e l u l t i m o t i p o m o r f o l é g i c o de o s t e o c i t o . E s t e se r e t r a e , t i e n e un n u c l e o p i c n é t i c o y v a c u o l a s a u t o f é g i c a s en su c i _ t o p l a s m a . Es lo que R e c k l i n g h a u s e n denominé l a o n c o l i s i s . C l é s i c a m e n t e - se ha c o n s i d e r a d o a e s t o s o s t e o c i t o s como c é l u l a s m u e r t a s o en v f a s de de^ t r u c c i é n ; p e r o y a hemos s e h a l a d o a n t e s que e s t e mismo e s t a d o se p ro d u c e - 14 t r a s l a a d m i n i s t r a c i é n de c a l c i t o n i n a , r e c u p e r a n d o e l o s t e o c i t o en o n c o l i ­ s i s , a l cabo de un a s h o r a s , su m o r f o l o g f a n o r m a l . Como s e n a l a Mathews son cambios s i m i l a r e s a l o s que se p u e d e n o b s e r v a r en l o s o s t e o b l a s t o s t r a s l a a d m i n i s t r a c i é n de l a misma h o r m o n a . ( 2 2 , 5 0 , 7 7 ) Debe d i f e r e n c i a r s e ; a ) c é l u l a s r e t r a i d a s con v e r d a d e r a d e s i n t e g r a c i é n d e l n u c l e o , a l t j e r a c i o n e s c l a r a s en e l e s p a c i o p e r i l a c u n a r con g r a n acdmulo de m a t e r i a l f l o c u l a r y d e s i n t e g r a c i é n p a r c i a l de l a l é m in a o s m i o f i l a , v a c u o l a s a u t o f é g i - c a s c e l u l a r e s e i n c l u s e l i s i s c e l u l a r , t o d o e l l o f n d i c e de una v e r d a d e r a - m uer te c e l u l a r q u e , s egun J a n d e (6 7 ) , s ucede c e r c a de l a s s u p e r f i c i e s - e n d o s t a l e s en e l hu e s o en c r e c i m i e n t o y , s egun Luk y J e e ( 68 ) , en e l hueso c o r t i c a l a d u l t o en l a s zonas més a l e j a d a s de l o s c a p i l a r e s . P o r tar i t o , p o d r f a c o n s i d e r a r s e l a m u er t e o s t e o c i t a r i a c o n s e c u e n c i a de l a i s q u e m ia . b) f r e n t e a e l l o e s t é n l o s o s t e o c i t o s a d u l t o s s a n o s que a l o s 8 nû n u t o s de l a a d m i n i s t r a c i é n de c a l c i t o n i n a se r e t r a e n con s e rv a n d o e l n u c l e o y e l r e s t o de l a s e s t r u c t u r a s c e l u l a r e s en b ue na s c o n d i c i o n e s y , como — Mathews (22 ) ha m o s t r a d o , se r o d e a n en e l e s p a c i o l a c u n a r que p o r l a re ̂ t r a c c i é n c e l u l a r ha aumentado mucho de tamaho , de f o s f a t o c é l c i c o . Es un e s t a d o t r a n s i t o r i o , y a q u e , e s t a s c é l u l a s r e c u p e r a n su m o r f o l o g f a no rm a l - a l cabo de 2 h o r a s . En un p r i n c i p i o se p e n s é que e l no o c upa r l o s o s t e o c i t o s p l e n a m e n t e su l a g u n a e r a un a r t e f a c t o de t é c n i c a , como aün s o s t i e n e en l a a c t u a l i d a d J a f f e ( 31 ) ; p e r o d e s p u é s se ha v i s t o que e s un e x p o n e n te de su a c t i y i - dad f u n c i o n a l y p a r e c e que a l l l e g a r l a m u e r t e , l a c é l u l a s e r e t r a e ocupan do s é l o una p a r t e de su l a g u n a . E n t r e l a membrana c e l u l a r y l a zona c om ple tam en te m i n e r a l i z a d a hay un e s p a c i o que en l a s l a g u n a s de l o s o s t e o c i t o s j é v e n e s e s menor , m i e n t r a s qué en l o s que p r e s e n t a n una a c t i v i d a d r e a b s o r t i v a e s mayor y m u e s t r a una e s t r u c t u r a d e t e r m i n a d a . 15 En l a s fo rm as j d v e n e s y a d u l t a s n o r m a l e s , e l e s p a c i o p e r i c e l u l a r o^ c i l a e n t r e 0 , 5 y 0 , 1 m i c r a . Segün Remagen ( 4 6 ) se e n c u e n t r a ocupado - p o r m u c o p o l i s a c â r i d o s y f i b r i l l a s con l a e s t r i a c i d n t i p i c a de c o ld g e n o . 1 . - En l o s o s t e o c i t o s j d v e n e s en f a s e f o r m a d o r a , l a membrana c e l u - l a r e s t d t o t a l m e n t e en c o n t a c t e con l a p a r e d de l a l a g u n a y se d i f e r e n c i a e n t r e l a m a t r i z t o t a l m e n t e c a l c i f i c a d a y e l o s t e o i d e d i r e c t a m e n t e en cori - t a c t o con l a membrana c e l u l a r , una zona de c a r â c t e r t i n t o r i a l d i s t i n t o 11^ mada m a t r i z p é r i l a c u n a r p o r Wasseman y Y a e g e r , que t i e n e unas f i b r a s c o l d _ g ê n a s mds p r o m i n e n t e s y mayor c a n t i d a d de s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l . (86) En l a f a s e de r e a b s o r c i d n en e s t a z o n a , comienza a a p a r e c e r un matje r i a l f l o c u l a r que t e r m i n a p o r o c u p a r t o d o e l e s p a c i o p e r i c e l u l a r . E s t e ma_ t e r i a l f l o c u l a r e s t à formado p o r m u c o p o l i s a c d r i d o s y es un p r o d u c t o de d e - g r a d a c i d n de l a m a t r i z . A l a vez a p a r e c e una l a m in a o s m i d f i l a e n t r e l a t.o_ na de m a t e r i a l f l o c u l a r y l a m a t r i z m i n e r a l i z a d a . Por d e n t r o , en l a zona de m a t e r i a l f l o c u l a r , a p a r e c e n t a m b ié n f i b r a s c o l d g e n a s de d i s p o s i c i d n — i r r e g u l a r . Los o s t e o c i t o s j d v e n e s y r e c i é n fo rm ados ocupan t o d a l a l a g u n a que p r é s e n t a unos b o r d e s n i t i d o s y c l a r o s , aunque con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r d n j ^ co se o b s e r v a l a e x i s t e n c i a de p r o t u s i o n e s de m i n e r a i c a l c i f i c a d o f u e r a de l a l i n e a l i m i t a n t e g e n e r a l d e l mismo. S a lvo en l o s p u n t o s donde l a c é l u l a e s t d muy c e r c a de l a p a r e d de l a l a g u n a , en cuyo ca so l a membrana a p a r e c e l i s a , en l o s demas p u n t o s no g u a r d a n r e l a c i d n l a s p l i c a t u r a s de l a membra_ na o s t e o c i t a r i a con e l b o r d e de l a l a g u n a segun Remagen ( 78 ) 2 . - En l a s f o rm a s a d u l t a s donde bay un aumento de l o s l i s o s o m a s y e x i s t e u n a a c t i v i d a d r e a b s o r t i v a , l a l a g u n a a p a r e c e a um en tada de tamano y l a c é l u l a no l a ocupa p l e n a m e n t e . E l r e b o r d e de l a l a g u n a s e t i n e con - a z u l de t o l u i d i n a y a p a r e c e de c o n t o r n o i r r e g u l a r . La r e a b s o r c i d n cjo m ienza en l a r e g i d n de l a p a r e d de l a l a g u n a que e s t a j u n t o a l p o l o c i t o _ p l a s m à t i c o d e l o s t e o c i t o p a r a e x t e n d e r s e d e s p u é s a l r e d e d o r . 16 La membrana se p l i e g a y p r é s e n t a i n c l u s e m i c r o v e l l o s i d a d e s , p a r e c e h a b e r - una f o r m a c i o n de v a c u o l a s p o r m i c r o f a g o c i t o s i s . A pa re ce n l i s o s o m a s y m i t ^ c o n d r i a s h i n c h a d a s con g r a n u l e s d e n s e s en s u i n t e r i o r . Segun Baud ( 56 ) e l p r i m e r paso e s l a r e a b s o r c i d n m i n e r a i que t r a n s c u r r e s i n cambios m orfo - I d g i c o s c i t o p l a s m a t i c o s y s d l o cuando se p r o d u c e l a r e a b s o r c i d n de l a ma­ t r i z o r g a n i c a , que e x ig e l a p r e s e n c i a de e nz im as p r o t e o l i t i c o s , a p a r e c e n - l o s l i s o s o m a s . La r e a b s o r c i d n o s t e o c i t a r i a a p a r e c e en e l 3 , 9 % de l o s o s t e o c i t o s - en e l hue so a d u l t o n o r m a l . B o r d i e r , J a n d e y B e l a n g e r ( 45 , 67 ) s e n a l a n que n i aun p o r e l e s t f m u l o maximo de p a r a t o h o r m o n a se a c t i v a n t o d o s l o s o^ t e o c i t o s , lo que i n d i c a r i a l a e x i s t e n c i a de p o b l a c i o n e s o s t e o c i t a r i a s d i f ^ r e n t e s . En l a s zonas donde se p ro d u ce l a r e a b s o r c i d n , e l hueso se t r a n s f o ^ ma e n un m a t e r i a l amor fo , de poca d e n s i d a d , con e s p i c u l a s m i n é r a l e s de nm y o r d e n s i d a d s u e l t a s en l a zona p e r i c e l u l a r de l a l a g u n a . Los c r i s t a l e s - de h i d r o x i a p a t i t a d e s a p a r e c e n en p r i m e r l u g a r y a c o n t i n u a c i d n lo hacen l a s f i b r a s c o l â g e n a s . La c é l u l a y s u s p r o l o n g a c i o n e s se m a n t i e n e n i n t a c t a s ; - p e r o s i e l p r o c e s o de r e a b s o r c i d n se e x t i e n d e e x c e s i v a m e n te puede l l e g a r a l a m u e r t e c e l u l a r . Rasmussen, e t c . (60) s e n a l a n po r o t r o l a d o , que se pu_e den f u s i o n a r v a r i a s l a g u n a s o s t e o c i t a r i a s e n t r e s i , o r i g i n a n d o c a v id a d e s - r e a b s o r t i v a s m a y o r e s . Ademas, puede t e n e r l u g a r l a f u s i d n de v a r i e s o s t e o c i t e s , o r i g i n a n d o l a a p a r i c i d n de o s t e o c l a s t o s m u l t i n u c l e a d o s , lo que es - muy marcado en e l P a g e t y en e l r em ode lado d e l hueso e m b r i o n a r i o . I g u a l que hay una r e a b s o r c i d n , hay una f o r m a c i d n d s e a a p a r t i r de - l o s o s t e o c i t o s , como p a r e c e i n d i c a r e l qué en t o r n o a a l g u n o s o s t e o c i t o s - a d u l t e s se forme una zona de m a t r i z c a l c i f i c a d a que se d i f e r e n c i a d e l r e s ­ t e p o r su f a s e m i n e r a i que e s de mener d e n s i d a d , y l a s f i b r a s c o l a g e n a s , - ademds de s e r mâs f i n a s se e n c u e n t r a n o r i e n t a d a s de manera d i f e r e n t e . Los e s t u d i o s con g l i c i n a marcada con t r i t i o y l o s e s t u d i o s de t e t r a c i c l i n a de V i t t a l i , c o r r o b o r a n e s t a n e o f o r m a c i d n d s e a o s t e o c i t a r i a . ( 83 , 84 ) En l o s o s t e o c i t o s fo rm a d o re s hay un nuevo aumento d e l r e t i c u l o end_o p l a s m a t i c o rugoso con aumento de l o s r i b o s o m a s , un a p a r a t o de G o lg i v a c uo - 17 l a r b i e n d e s a r r o l l a d o y l a s m i t o c o n d r i a s p i e r d e n e l c a r d c t e r edem a to so que r ao s t ra b a n en l a s zonas de r e a b s o r c i d n . Las p r o l o n g a c i o n e s o s t e o c i t a r i a s que p e n e t r a n en l o s c a n a l i c u l o s cu yo d id m e t r o no rm a l e s de 1580 % a p r o x i m a d a m e n t e , e s t d n fo rm ados p o r un - haz de f i l a m e n t o s r o d e a d o s de una membrana c i t o p l a s m d t i c a . P o r f u e r a e ^ - t d n s e p a r a d o s de l a m a t r i z m i n e r a l i z a d a p o r una c a p a de m u c o p o l i s a c d r i d o s . E l m a t e r i a l f l o c u l a r y l a l a m in a o s m i d f i l a e s t à n s i e m p re p r é s e n t e s , aun en l a f a s e f o r m a t i v a ( 5 8 , 7 8 , 7 9 )* Los c a n a l i c u l o s se e n s a n c h a n c l a r a m e n t e d_u r a n t e l a f a s e de r e a b s o r c i d n . Vamos a a n a l i z a r a c o n t i n u a c i d n l a e s t r u c t u r a d e l s i n c i t i o c e l u l a r en v i r t u d d e l c u d l , l o s o s t e o c i t o s de l a s u s t a n c i a m i n e r a l i z a d a comunican e n t r e s i m e d i a n t e su s p r o l o n g a c i o n e s con l a s c d l u l a s que c u b r e n l a supe r f j^ c i e d s e a e n d o s t a l , p e r i o s t a l y de l o s c a n a l e s de H a v e r s , que en l a a c tu a l j _ dad se c o n s i d e r a n t a m b ié n p a r t e de l a s u p e r f i c i e e n d o s t a l . Hemos de s e n a _ l a r que l a s c é l u l a s de e s t a s s u p e r f i c i e s en e l hueso a d u l t o son a p l a n a d a s . P a r a unos a u t o r e s s o n o s t e o c i t o s y p a r a o t r o s , como P r i t c h a r d , o s t e o b l a s - t o s en r e p o s e . P a r a d i f e r e n c i a r e s t a s c é l u l a s de l o s o s t e o b l a s t o s a c t i v e s creemos que e s m e jo r l l a m a r l a s c é l u l a s l i m i t a n t e s como Baud, u o s t e o c i t o s - de s u p e r f i c i e como B o r d i e r . Las zonas de c o n t a c t e i n t e r c e l u l a r b i e n e s t u d i a d a s p o r L o e w e n s t e i n , 1967-1972 , se p ro d u c e n t a n t e " i n v i v o " como en c u l t i v e s de t e j i d o s . A - t r a v é s de e s a s zonas hay una mayor c o m u n ic ac id n de e l e c t r o l i t o s y s u s t a n - c i a s con un PM h a s t a 10 .000 como h a medido e s t e a u t o r con m i c r o e l e c t r o d o s , y , s egun é l , e s t d e n r e l a c i d n con l a c o n c e n t r a c i d n l o c a l de C a l c i o que a s u n i v e l e s de 10"? M . , m i e n t r a s que en e l e s p a c i o e x t r a c e l u l a r e s de — —3 ^10 M. A s i mismo, ha d e m os t ra do L o e w e n s t e in que e l aumento de l a con c en _ t r a c i d n c i t o p l a s m a t i c a de Ca'*"*’ rompe l o s p u n t o s de u n i d n , como s ucede - i n m e d ia t a m e n te t r a s l a l e s i d n c e l u l a r , y d é t e r m i n a que l a s c é l u l a s i n t a c - t a s se a i s l e n d e l medio a l d e s c o n e c t a r s e de l a s c é l u l a s d a n a d a s . ( 7 0 , 7 1 ) E s t o s p u n t o s de u n i d n d e m o s t r a d o s c l a r a m e n t e e n t r e o s t e o c i t o s y os 18 t e o b l a s t o s en e l hueso j o v e n , s e h a c e n mas e s c a s o s en e l hueso a d u l t o en e l c u a l toman , en o c a s i o n e s , a s p e c t o de c a n a l ( Mathews ) . Segun L o e w e n s t e i n , t i e n e n mucha i m p o r t a n c i a en e l paso de i n f o r m a c i d n de unas c é l u l a s a o t r a s y , p o r t a n t o , j u e g a n un g r a n p a p e l en l o s mecanismos de r e g u l a c i é n c e l u l a r . E l s i n c i t i o c e l u l a r se i n t e r p o n e e n t r e l o s c a p i l a r e s y l a s u s t a n c i a m i n e r a l , formando un drea, de i n t e r c a m b i o de aprox im adam en te 250 mm2/mm3 de h u e s o , con lo que e l e s q u e l e t o g l o b a l d e l a d u l t o r e p r é s e n t a unos 1 .3 0 0 m2 de s u p e r f i c i e de i n t e r c a m b i o m i n e r a l , en c o m p a rac io n con l o s 12 ra ̂ que i n - t e g r a n l a s s u p e r f i c i e s de l o s c a n a l e s de H avers y d e l hueso t r a b e c u l a r e s - p o n j o s o . (61) Los e s t u d i o s de Neuman ( 73 ) e s t a b l e c i e r o n que e l c o m p a r t im e n te - l i q u i d e e x t r a c e l u l a r é seo l . e . o . e s r i c e en K"*", p o b r e en Na"*" y en Ca'** y - su r e g u l a c i é n e s t d c l a r a m e n t e s o m e t i d a a l c o n t r o l c e l u l a r . E s t e e s p a r i o - p a r e c e e s t a r s e p a r a d o p o r l a b a r r e r a c e l u l a r d e l e s p a c i o e x t r a c e l u l a r genje r a l I . e . g . d e l h u e s o . Owen 1973 (76 ) no e n c u e n t r a , u sando a lb u m in a - una c l a r a s e p a r a c i é n de ambos c o r p a t i m e n t o s , p e r o no n i e g a s u e x i ^ - t e n c i a que p a r e c e en l a a c t u a l i d a d a c e p t a d a p o r l a m ay o r i a de l o s a u t o r e s que se ocupan d e l t em a . Los t r a b a j o s de B e r r i d g e y Osmann, Mathews, e t c . ( 2 2 , 5 0 , 7 9 ) han - e s t a b l e c i d o e l c o n c e p t o de membrana l i m i t a n t e f u n c i o n a l , y p a r a a c e p t a r su e x i s t e n c i a l a s c é l u l a s que l a i n t e g r a n deben de r e u n i r una s e r i e de c o n d i _ c i o n e s que s on ; 1) P o l a r i z a c i o n c e l u l a r 2) Zonas de c o n t a c t e c e l u l a r e s p e c i a l i z a d o (como de d e s c r i b i r ) l o s que acabamos 3) M i c r o v e l l o s i d a d e s 4) I n t e r d i g i t a c i o n e s c e l u l a r e s 5) E x i s t e n c i a de una l a m in a b a s a i o una e s t r u c t u r da p o r m u c o p o l i s a c d r i d o s a s i m i l a r , i n t e g r a . 6) A c t i v i d a d p i n o c i t o c i c a c e l u l a r 19 7) P r e s e n c i a de m i c r o t u b u l o s y m i c r o f i l a m e n t e s Todos e s t o s d a t e s s e han p o d ido r e c o g e r en e l hueso a n i v e l de l o s - o s t e o b l a s t o s - o s t e o c i t o s ; como hemos d e s c r i t o a n t e r i o r m e n t e , con lo c u a l p a _ r e c e p o d e r a c e p t a r s e l a e x i s t e n c i a de e s t a membrana l i m i t a n t e a n i v e l o s e o . En l o que no e s t à n t o d o s l o s a u t o r e s de a c u e r d o es en su f i s i o l o g i s _ mo. Talmage, Mathews, Remagen, Neuman ( 39, 73 , 82 ) c o n s i d e r a n en cori - j u n t e , s i g u i e n d o e l esquema o r i g i n a l d e l p r i m e r o , que e l I . e . g . p a s a r i a a t r a v é s de l o s d i f e r e n t e s p o r e s h a c i a e l l . e . o . l i b r e m e n t e y l a c o n c e n t r a - c i é n de s o l u t é s a su n i v e l , se m a n t e n d r i a p o r una a c c i é n m e t a b o l i c a c e l u l a r de t r a n s p o r t e c o n t r a c o r r i e n t e de i o n e s descle e l l . e . o . a l I . e . g . , a b s q r b i e n d o e l Cat"*" a n i v e l de l a s u p e r f i c i e c e l u l a r en c o n t a c t e con e l o s t e o i _ de y, a t r a v é s de m i t o c o n d r i a s y m i c r o t u b u l o s , s é r i a v e r t i d o e l Ca^^ a l — I . e . g . de donde p a s a r i a a l a s a n g r e . En apoyo de e s t a t e o r i a , e s t a r i a l a - p r e s e n c i a de g r à n u l o s de Ca^^ en l a s m i t o c o n d r i a s y m i c r o t u b u l o s , a s i como de v e l l o s i d a d e s en l a s u p e r f i c i e c e l u l a r cuya m o r f o l o g i a v a r i a segun l o s - d i f e r e n t e s e s t i m u l o s ho rm o n a le s a l o s que se someten e s t a s c é l u l a s . P r e n t e a e s t o s d a t o s Neuman ( 7 3 ) ha e n c o n t r a d o , usando d i f e r e n t e s a n t i m e t a b o l i t o s c e l u l a r e s , que e l paso de Ca'*"*' en uno y o t r o s e n t i d o , s o l o se m o d i f i c a con t r a s t o r n o s en e l m e ta b o l i s m o de l o s c a r b o h i d r a t o s , y p o s t u l a l a l i b e r a c i é n de m e t a b o l i t e s d e l t i p o d e l d c i d o c i t r i c o p a r a e x p l i c a r l a mo v i l i z a c i d n o r e t e n c i é n d e l Ca’*"*' o s e o . P o r u l t i m o . F r o s t , Rasmussen y B o r d i e r c o n s i d e r a n o t r o mécanisme de a c c i é n . Segün e l l e s , e l f l u j o d e l l i q u i d e e x t r a c e l u l a r s e p r o d u c e p o r movû m i e n t o s c e l u l a r e s p u l s ü t i l e s - c o n s e c u e n c i a de cambios en l a fo rm a c e l u l a r b a j o e s t i m u l o s m ec a n ic o s o e l é c t r i c o s - , l o que c o n c u e r d a con l o s h a l l a z g o s de Mathews a n t e s d e s c r i t o s . ( 4 5 , 6 4 - 6 6 ) 20 O s t e o c l a s t o s Aunque su e x i s t e n c i a y p o s i b l e f u n c i é n y a se c o n o c ia n p r e v i a m e n t e , - f u e K b l l i k e r en 1873 q u i é n l o s b a u t i z o como O s t o k l a s t d e s c r i b i e n d o , ademas, su b o r d e en c e p i l l o . En l a a c t u a l i d a d se u s a l a t e r m i n o l o g f a f r a n c e s a de - o s t e o c l a s t o . Son en g e n e r a l c é l u l a s g r a n d e s m u l t i n u c l e a d a s que s e e n c u e n t r a n d i _ r e c t a m e n t e en c o n t a c t e con e l h u e s o . Hoy e s t é f u e r a de t o d a duda que son - l a s e n c a r g a d a s de l a r e a b s o r c i d n d s e a . Son c é l u l a s m d v i l e s lo que d e t e r m i _ na s u fo rm a v a r i a b l e ; unas v e c e s son o v a l - e s f é r i c a s como a p a r e c e n en l a s - i n d e n t a c i o n e s que d e j a n en e l t e j i d o dseo c o n o c id a s como l a g u n a s J e Howship; o t r a s v e c e s e s t ü n a p l a n a d a s s o b r e e l h u e s o , en cuyo c a s o , i n c l u s e l o s n u c l e os pue de n t o m a r fo rma a p l a n a d a . Se o b s e r v a n en o c a s i o n e s , s egun Hancox, va r i a s masas c i t o p l a s m d t i c a s u n i d a s e n t r e s i p o r p u e n t e s p r o t o p l a s m â t i c o s , en e s p e c i a l , cuando l o s o s t e o c l a s t o s se a l e j a n de l a s l a g u n a s de Howship. (97) Hay que c o n s i d e r a r l a l a g u n a de Howship como una c a v i d a d l a b r a d a en l a s u s t a n c i a m i n e r a i d s e a p o r l a a c t i v i d a d d e l o s t e o c l a s t o , que se e ne uen - t r a en su i n t e r i o r p r e s e n t a n d o una fo rm a màs o menos r e d o n d e a d a , o t r a s ye - c e s pueden c o l o c a r s e d i r e c t a m e n t e s o b r e l a s t r a b é c u l a s . Siempre e s t d n c e r _ ca de l o s v a s o s ( L u c h t ) . Los e s t u d i o s de Hancox, Jo h n s o n ( 9 6 , 9 9 ) , e t c . , con m i c r o c i n e f o t o g r a f l a han d e m o s t ra d o que lo s o s t e o c l a s t o s e m i g r a n g i r a n d o s o b r e s i mismos, lo que e s p l i c a r i a su s a l i d a de l a s l a g u n a s de Howship y su d i f e r e n t e m o r f o l o g i a . Segün Luch t y D ud le y , se d e s c u b r e n fo rm as m u l t i n u c l e a d a s , a i e j a d a s de h u e s o , que no t i e n e n b o rd e en c e p i l l o y que s e r i a n o s t e o _ c l a s t o s i n a c t i v o s . ( 1 8 , 2 4 , 3 2 , 3 7 , 3 8 , 4 3 , 8 9 , 9 5 , 9 7 , 9 9 , 1 0 1 , 1 0 8 ) En r e l a c i d n a su tamano, vo lumen y numéro de n ü c l e o s hay g r a n d e s v a _ r i a c i o n e s . Desde l o s que miden de 85 a 100 m ic r a s de d i à m e t r o con un v o l u _ men d e , a p r o x im a d a m e n te , 2 0 .0 0 0 que a p a r e c e n en l o s p r o c e s o s p a t o l d g i - COS como e l P a g e t y l a s c o n v i e r t e en l a s c é l u l a s müs g r a n d e s de l a economia, h a s t a l a s fo rm a s m o n o n u c le a re s d e s c r i t a s p o r Tonna, W alke r , D uorak , e t c . - ( 87 , 98, 108 ) . 21 En g e n e r a l en e l hombre a d u l t o no rm a l p r e s e n t a n de 2 a 6 n ü c l e o s p o r c é l u l a , con un tamano de 20 m i c r a s ap ro x im ad a m en te . Los n ü c l e o s son en g e _ n e r a l o v a l e s , aunque pueden p r e s e n t a r m o d i f i c a c i o n e s de su fo rm a de a c u e r d o con l a s v a r i a c i o n e s d e l c i t o p l a s m a . Con f r e c u e n c i a p r e s e n t a n 1 o 2 n u c l e o _ l o s y s e o b s e r v a n fo rm as p i c n o t i c a s en l a s c é l u l a s que m u e s t r a n un a s p e c t o d e g e n e r a d o ( 97 ) E l c i t o p l a s m a con e l m i c r o s c o p i o o r d i n a r i o p r é s e n t a en un a s o c a s i o - n é s c a r a c t è r e s t i n t o r i a l e s b a s é f i l o s y en o t r a s a c i d é f i l o s , p e r o s i n un p r £ dom in io t i n t o r i a l e s p e c i a l que v a r i a con l a a c t i v i d a d f u n c i o n a l de l o s m is _ mos. Walker en 1972 d e m o s t r é l a e x i s t e n c i a de g r a n c a n t i d a d de f o s f a t a s a ü c i d a d e s h i d r o g e n a s a l à c t i c a , m ü l i c a y c i t r a t o en e l c i t o p l a s m a de l o s o s _ t e o c l a s t o s , h a c i e n d o d e t e r m i n a c i o n e s c u a n t i t a t i v a s de l a s mismas. Gay y - M ü e l l e r ( 93 ) h a n d e m o s t ra d o l a p r e s e n c i a de c a r b é n i c o a n h i d r a s a en - e l e v a d a c o n c e n t r a c i d n . Con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r é n i c o se puede o b s e r v a r que l o s os teoc la_s - t o s s o n l a s c é l u l a s é s e a s que p r e s e n t a n e l mayor nümero de m i t o c o n d r i a s , - t a n t o en v a l o r a b s o l u t o como r e l a t i v o . A pa re ce n d i s t r i b u i d a s en t o d o e l c_i t o p l a s m a s a l v o en l a zona i n m e d i a t a a l b o r d e en c e p i l l o . Las c r e s t a s de e ^ t a s m i t o c o n d r i a s son muy g r a n d e s y pueden o c u p a r todo e l c e n t r o d e l o r g a n i _ t o . Se ven con g r a n f r e c u e n c i a g r a n u l e s e l e c t r o n i c a m e n t e d e n s e s compues tos p o r f o s f a t o c ü l c i c o amorfo en su i n t e r i o r . El r e t i c u l o e n dop lü sm ic o müs o menos d e s a r r o l l a d o segün l a s c é l u l a s , nu n c a a l c a n z a l a s d i m e n s io n e s y c o m p l e j i d a d que p r é s e n t a en l o s o s t e o b l a s - t o s . Las membranas se c o l o c a n a p r e t a d a m e n t e , p e ro son e s c a s a s s u s d i l a t a - c i o n e s y l o s r i b o s o m a s pueden p r e s e n t a r s e s u e l t o s en e l c i t o p l a s m a . Apare cen t a m b i é n v e s i c u l a s a i s l a d a s d e l r e t i c u l o e n d o p lü s m ic o , p e ro no son dema_ s i a d o i d e n t i f i c a b l e s p o r l a g r a n c a n t i d a d de e s t r u c t u r a s que c o n t i e n e e l cj_ t o p l a s m a de e s t a s c é l u l a s . 22 El a p a r a t o de G o l g i muy b i e n d e s a r r o l l a d o a p a r e c e r e u n i d o en g ru p o s de membranas de 5 s a c o s cada uno , que se a g r u p a n en t o r n o a l o s n ü c l e o s o a c e n t r i o l o s como h a n dem os t rado l o s t r a b a j o s de Luch t ( 1 0 0 ) . En l a zona müs p rdx im a a l n ü c l e o se s e p a r a n e n t r e s i l a s membranas. En e l po lo opue_s t o de l a c é l u l a a p a r e c e n en r e l a c i o n con v e s i c u l a s que se e x t i e n d e n mas o menos l e j o s en e l c i t o p l a s m a y en l a s que Cameron ( 8 9 ) d e s c r i b e l a pre__ s e n c i a de e s t r u c t u r a s d e n s a s s i m i l a r e s a l a s de l o s c r i s t a l e s de a p a t i t a . Hay asimismo en e l c i t o p l a s m a una s e r i e de g r a n u l e s d e n s e s r o d e a d o s de una membrana s e p a r a d a p o r un e s p a c i o c l a r o de l a zona d e n s a . S c o t t i n _ d i c a que s o n mas a b u n d a n t e s cuando e l b o r d e en c e p i l l o e s t é mas d e s a r r o l L a do y D o t t y ha d e m o s t r a d o en muchos de e s t o s g r à n u l o s l a p r e s e n c i a de f o s f a t a s a à c i d a . Aunque en o c a s i o n e s se d i s p o n e n en h i l e r a s , no m u e s t r a n una - d i s t r i b u c i o n p a r t i c u l a r . A lgunas de e s t a s e s t r u c t u r a s r e d o n d e a d a s a modo de v e s i c u l a s , pueden c o n s i d e r a r s e como l i s o s o m a s . J u n t o a e l l a s a p a r e c e n t a m b ié n v a c u o l a s , que unas v e c e s se e n c u e n t r a n v a c i a s en t a n t o que o t r a s - a p a r e c e n p a r c i a l m e n t e r e l l e n a s de un m a t e r i a l d e n s o . Se d e m u e s t r a n tam - b i é n a u t o l i s o s o m a s . Una p a r t e de l o s g r é n u l o s y v a c u o l a s t i e n e una membrana de 10 ^ lo que e s c a r a c t e r i s t i c o p a r a l o s l i s o s o m a s y , t a n t o en l o s g r é n u l o s como en l a s v a c u o l a s . D o t t y y Luch t h a n dem os t rado l a p r e s e n c i a de f o s f a t a s a a c i d a . Como ya hemos s e h a l a d o , una p a r t e de l a s v a c u o l a s c i t o p l a s m é t i c a s d e r i v a n - de l a membrana d e l b o r d e en c e p i l l o , en t a n t o q u e , l o s g r é n u l o s p a r e c e n p r ^ d u c i r s e en e l a p a r a t o de G o l g i . Ambas e s t r u c t u r a s s e r i a n i n d i c e de p r o c e _ S O S de a b s o r c i o n y e x o c i t o s i s r e s p e c t i v a m e n t e . Lo que més d e b a t e s ha causado h a s t a l a a p a r i c i é n d e l m i c r o s c o p i o - e l e c t r é n i c o , ha s i d o l a e s t r u c t u r a d e l b o r d e en c e p i l l o y su f u n c i é n . ^ t e bo rde en c e p i l l o f u e y a d e s c r i t o p o r K b l l i k e r en 1873 q u i é n lo c o n s i d e _ r o como p e r t e n e c i e n t e a l a c é l u l a . Pommer en 1883 d e c i a q u e , en p a r t e , p e ^ t e n e c i a a l hueso y a l a c é l u l a . Haro en 1956 d e c i a , p o r e l c o n t r a r i o , que e r a deb id o a l a e x p o s i c i o n de f i b r a s c o l é g e n a s de l a m a t r i z o s e a t r a s l a - r e a b s o r c i d n de m a t e r i a l c à l c i c o . Hancox en 1956 a f i r m a b a que e r a p r o d u c i _ 23 do po r l a e x p o s i c i o n de l a s f i b r a s c o l a g e n a s , e n t r e l a s c u a l e s se i n t r o d u _ c f a n p r o l o n g a c i o n e s c i t o p l a s m d t i c a s d e l o s t e o c l a s t o , ( 9 5 , 105 , 2 7 6 ) El b o rd e en c e p i l l o s i e m p re e s t a o r i e n t a d o p e r p e n d i c u l a r m e n t e a l a s u p e r f i c i e o s e a , a s i como a l a c é l u l a . Con l a m i c r o s c o p i a o r d i n a r i a y en e s p e c i a l con l a m i c r o s c o p i a de c o n t r a s t e de f a s e s , se ve e n t r e e l b o rd e en c e p i l l o y e l r e s t o de l a c é l u l a una zona c l a r a d e s p r o v i s t a de e s t r u c t u r a s . La zona c l a r a de Cameron p r é s e n t a a l g u n a vez r ib o s o m a s y , segün L u c h t , — e s t a r e p l e t a de pe quenos f i l a m e n t o s de 50 -100 ^ de l o n g i t u d o r i e n t a d o s - a l a z a r . El m i c r o s c o p i o e l e c t r é n i c o ha a c l a r a d o p e r f e c t a m e n t e que e l b o rd e - d e l c e p i l l o es una p a r t e d i f e r e n c i a d a de l a membrana c e l u l a r e s p e c i a l i z a d a en l a r e a b s o r c i d n d s e a . E s t é formado p o r r e p l i e g u e s de l a membrana y p r q _ l o n g a c i o n e s d i g i t a l e s de l a misma, que t i e n e n de 100 a 150 m i c r a s de diame t r o y su ex tr em e puede a p a r e c e r e n s a n c h a d o . Unas v e c e s son a l a r g a d a s y - l o s c a n a l e s e n t r e e l l a s e s t r e c h o s , y o t r a s l a s p r o l o n g a c i o n e s son c o r t a s y l o s e s p a c i o s e x t r a c e l u l a r e s i m b r i c a d o s mas a n c h o s . El tamano segün Luk — ( 3 7 ) v a r i a con e l e s t a d o f u n c i o n a l de l a c é l u l a . E l fonde de l o s r e c e s o s t e r m i n a e n s a n c h a n d o s e en su f o n d e en v e s i c u l a s o en g r a n d e s v a c u o l a s , que en p a r t e son imagenes d e b i d a s a c e r t e s t a n g e n c i a l e s d e l b o r d e y no r e p r e _ s e n t a n müs que l a s p r o l o n g a c i o n e s de e s o s f o n d e s de s a c o . Po r o t r o l ado , hay d e n t r o d e l c i t o p l a s m a v a c u o l a s r e a l e s . A lo l a r g o d e l b o rd e en c e p i l l o y e n t r e sus p l i e g u e s , se d e s c r i b i d - de sde un p r i n c i p l e l a e x i s t e n c i a de c r i s t a l e s y de f i b r a s c o l a g e n a s que - no se e n c u e n t r a n n unc a en l a s v a c u o l a s c e l u l a r e s , en l a s c u a l e s s i a p a r ^ - cen g r a n u l e s de a p a t i t a y un m a t e r i a l amorfo de c a r a c t e r d e s c o n o c i d o . Luk d e s c r i b e l a e x i s t e n c i a de p r o l o n g a c i o n e s c i t o p l a s m a t i c a s l a t e r a l e s que c o n t a c t a n con l o s o s t e o b l a s t o s v e c i n o s . A n i v e l d e l h u e s o , donde se p r o d u c e e l p r o c e s o de r e a b s o r c i d n , hay una p é r d i d a de l a l a m in a l i m i t a n s d e s c r i t a p o r S c h e r f q u e , s egün e s t e a u t o r 24 I I - M A T R I Z O S E A S u s t a n c i a f u n d a m e n ta l M u c o p o l i s a c d r i d o s â c i d o s Las g l i c o p r o t e i n a s Colégeno C a l c i f i c a c i d n M in e r a i y Luk, r e p r é s e n t a una zona de a d s o r c i o n de m a t e r i a l o r g a n i c o s o b r e y e n t r e l o s c r i s t a l e s de a p a t i t a y a p a r e c e en l a s r e g i o n e s en r e p o s e f u n c i o n a l do^ de no se d e p o s i t a n i se r e a b s o r b e h u e s o . ( 3 7 , 3 8 ) Bajo e l bo rde en c e p i l l o ademas de d e s a p a r e c e r l a membrana l i m i t a n s , s u r g e una g r a n c a n t i d a d de f i b r a s c o l a g e n a s f r a g m e n t a d a s y d i s p e r s a s e n t r e l a s que se i n t r o d u c e n l a s m i c r o v e l l o s i d a d e s . E n t r e l a s f i b r a s c o l a g e n a s - hay c r i s t a l e s de a p a t i t a con un d i a m e t r o medio de 75 ^ y v a r i o s c i e n t o s - de l o n g i t u d . En e l l i m i t e de l a zona de r e a b s o r c i d n a p a r e c e n f i b r a s c o l a ­ genas mas d e nsam e n te a g r u p a d a s . ( 8 8 , 9 0 , 9 1 , 9 3 , 9 4 , 1 0 2 , 1 0 3 , 1 0 6 , 1 0 9 ) 2 - M A T R I Z O S E A Vamos a c o n s i d e r a r someramen te , ya q u e , no es e l tema p r o p i o de — n u e s t r a i n v e s t i g a c i d n , l a f u n c i d n de e s t a s c é l u l a s en r e l a c i d n a l a m a t r i z d s e a , e s d e c i r , a l m i n e r a i , c o ldgeno y s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l , su e s t r u c t u ­ r a y f o r m a c i d n , p a r a d e s p u é s c o n s i d e r a r l a s d i f e r e n t e s maneras de organJ_ - z a r s e en h u e s o . Comenzaremos po r l a s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l , lo que c o r r e s ­ ponde a l cemento de l o s t e j i d o s c o l a g e n o s no m i n e r a l i z a d o s . S u s t a n c i a f u n d a m e n t a l Al b u s c a r una d e f i n i c i d n de m a t r i z encon t ram os que E a s t o e ( 115 ) da dos p o s i b i l i d a d e s : 1 ) s u s t a n c i a o medio que i n c l u y e o t r o s c u e r p o s — 2) un medio en e l que se d e s a r r o l l a a l g o ( d e f i n i c i d n r e to m ad a po r H e r r i n g en 1 9 7 2 ) . S y l v e n c o n s i d é r a como s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l d e l t e j i d o c o n ju n t i v o a l m a t e r i a l amorfo i n t e r f i b r i l a r , s i t u a d o en e l c o m p a r t im e n te e x t r a c e l u l a r con r e l a c i o n e s f u n c i o n a l e s y de o r i g e n con l o s f i b r o c i t o s . ( 1 1 8 ,1 2 4 ) 25 E s t a s s u s t a n c i a s f u n d a m e n t a l e s son r e l a t i v a m e n t e poco c o n o c id a s . - Su e s t u d i o , comenzado p o r Hawk y G ie s a p r i n c i p i o de s i g l o , s d l o ha a l c a n z a do un g r a n d e s a r r o l l o r e c i e n t e m e n t e . Al a n a l i z a r l a com p o s i c id n de l a p a r t e no c e l u l a r d e l h u e s o , Z e r lo - t t f y Y aege r c o n s i d e r a n que l a m a t r i z de t o d o s l o s e s q u e l e t o s de l o s v e r t e _ b r a d o s se componen de una p o r c i d n p r o t e i c a p r i n c i p a l , en g e n e r a l f i b r o s a y u n a s e r i e de c a r b o h i d r a t o s y l i p i d o s . E a s t o e s e n a l a en l a s u s t a n c i a i n t e r _ c e l u l a r , l a p r e s e n c i a de c r i s t a l e s i n o r g d n i c o s que c o r r e s p o n d e n a l a h i d r o _ x i a p a t i t a , f i b r i l l a s que c o r r e s p o n d e n a l a c o ld g e n a y p o r f i n una s u s t a n c i a f u n d a m e n ta l que c o r r e s p o n d e a l o s r a u c o p o l i s a c à r i d o s , lo que en 1956 p o n i a - aün con i n t e r r o g a c i d n ( 1 1 8 , 1 1 9 , 1 2 7 ) Hoy p a r e c e f u e r a de duda que e s a s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l ce m e n ta n t e - e s t a fo rm ada p o r m u c o p o l i s a c a r i d o s , e s d e c i r , p o r p o l i s a c d r i d o s a s o c i a d o s a u n a p r o t e i n a p o r u n i o n e s c o v a l e n t e s . Hay dos t i p o s g é n é r a l e s , p o r un l a d o , u n a s p r o t e i n a s p o l i s a c d r i d a s c o n o c id a s como g l i c o s a m i n g l i c a n o s o p r o t e o g l i _ c a n o s y , p o r o t r o , l a s g l u c o p r o t e i n a s . En e l h u e s o , l a m a t r i z o r g d n i c a r e _ p r é s e n t a , segün H e r r i n g (119) , e n t r e e l 2 2 , 7 y e l 2 3 , 9 ^ de s u peso g l o b a l s e c o , de e l l o e l co lü g e n o r e p r é s e n t a e l 72% p a r a l a zona t r a b e c u l a r esponjo^ s a y e l 96% p a r a e l hueso c o r t i c a l . Los m u c o p o l i s a c ü r i d o s ü c i d o s son en e l h u e s o e s p o n j o s o e l 3,3% de d i c h o pe s o p a r a Carapo y e l 4 ,1% p a r a H e r r i n g - en t a n t o que l a s s i a l o p r o t e i n a s i n c l u y e n 0,4% p a r a Campo y e l 2,3% p a r a He r r i n g . (111 ,119 ) Su c o n o c im ie n t o ha o f r e c i d o g r a n d e s d i f i c u l t a d e s p o r l o s p ro b le m as - que t i e n e su e x t r a c c i o n a p a r t i r d e l h u e s o , y a q u e , l a p r i m e r a forma de ob_ t e n e r s e es d e s m i n e r a l i z a n d o e l hueso con m étodos ü c i d o s . A c o n t i n u a c i d n se s é p a r a e l c o lügeno p o r e b u l l i c i d n p a r a p o d e r a n a l i z a r l o s p r o d u c t o s r e s t a n _ t e s , que se d i f e r e n c i a n a su vez p o r d i s t i n t o s métodos como l a p r é c i p i t a — c i d n con e t a n o l , l a c r o m a t o g r a f l a , e t c . . Mâs t a r d e se pudo o b s e r v a r que a l d e s m i n e r a l i z a r con é c i d o s , se p e r d f a una p a r t e i m p o r t a n t e de l a s u s t a n c i a - f u n d a m e n t a l que s e p o d i a r e c u p e r a r s i se d e s m i n e r a l i z a b a con q u e l a n t e s t i p o EDTA, Los compues tos a s i i n d i v i d u a l i z a d o s s on l a s s i a l o p r o t e i n a s . 26 Una e x t e n s a r e v i s i o n de l o s p r o b le m a s de a i s l a m i e n t o y d e s c r i p c i o n de l o s m u c o p o l i s a c d r i d o s se e n c u e n t r a n en H e r r i n g , Z e r l o t t i y Y aege r ( 1 1 4 ,1 1 9 ,1 2 7 ) q u i e n e s se ocupan , en e s p e c i a l , en l a h i s t o q u i m i c a de e s _ t a s s u s t a n c i a s , y a q u e , d e s d e G ies se sabe que una p a r t e de e s t o s c ue rpos se t i n e con e l P a s , l a s g l u c o p r o t e i n a s , m i e n t r a s que l o s m u c o p o l i s a c d r i - dos é c i d o s p r e s e n t a n como c a r à c t e r h i s t o q u i m i c o f u n d a m e n ta l l a metacroma s i a . E l esquema de H e r r i n g nos p a r e c e muy d e m o s t r a t i v o p a r a c a t a l o g a r — l o s d i f e r e n t e s e l e m e n t o s e n c o n t r a d o s y l a s v i a s r e q u e r i d a s p a r a su e x t r a c c i d n a p a r t i r d e l hueso c o r t i c a l . E S Q U E M A 1 E x t r a c t o d e c a l c i f i c a d o (EDTA) d i d l i s i s pH 5 1 g l i c o p r o t e i n a 1 c r o m a t o g r a f i a m u c o s u s t a n c i a s d c i d a s d i d I l i s i s g l u c o p r o t e i n a s o l u b l e CP- 8 g l i c o p r o t e i n a I I c o l a g e n o s o l u b l e p r é c i p i t a s i a l o p r o t e i n a d s e a s o l u b l e c o n d r o i t i n s u l f a t o i n s o l u b l e c r o m a t o g r a f i a 1 “ 2 27 Ademas de l o s métodos b i o q u i m i c o s se p u e d e , como hemos s e n a l a d o , e s _ t u d i a r e s t o s c u e r p o s con métodos h i s t o q u i m i c o s , p o r un l ado e l P . A . S . de - H o t c h k i s s y Me Mannus y p o r o t r o l a m e t a c r o m a s i a o r i g i n a l m e n t e d e s c r i t a - p o r L i s s o n . En menos c u a n t i a se ha usado t a m b ié n e l a z u l de a l c i a n y e l m^ t o d o de H a l l e d e l h i e r r o c o l o i d a l . Nos vamos a r e f e r i r e x c l u s i v a m e n t e a — l o s dos p r i m e r o s . E l PAS p a r e c e s e r e s p e c i f i c o p a r a una s e r i e de c u e rp o s compues tos de g lu c o g e n o y p r o t e i n a s , l a s denominadas g l u c o p r o t e i n a s que p o s e e n g ru p o s — r e a c t i v o s l i b r e s en p o s i c i o n 1, 2 , g l u c o s i l . Segün Leblond (35 ) l a s g l u _ c o p r o t e i n a s que r e a c c i o n a n con e l PAS t i e n e n s i e m p re g a l a c t o s a , f u c o s a , h e _ xosam ina y , con f r e c u e n c i a , d c id o s i a l i c o , que como se na la m os p r e s e n t a n grji pos l i b r e s en e l a z ü c a r en p o s i c i é n 1 y 2 . Los e s t u d i o s d e l hueso s i n d e s _ c a l c i f i c a r , m u e s t r a n que e l t e j i d o r e c i é n m i n e r a l i z a d o se t i n e i n t e n s a m e n t e con e l PAS. E s t a r e a c c i é n , s egün lo s e s t u d i o s de Okamotto ( l l 9 ) , d i s m i n u _ ye a l a u m e n ta r e l g r ado de c a l c i f i c a c i o n . La m e t a c r o m a s i a es e l cambio de c o l o r que s u f r e n a l g u n a s s u s t a n c i a s a l u n i r s e a c i e r t o s s u b s t r a t e s . Los m e j o i e s r e s u l t a d o s se o b t i e n e n en l o s t e j i d o s m i n e r a l i z a d o s con e l a z u l de m e t i l e n o , e l a z u l de t o l u i d i n a y e l - a z u l de a l c i a n . L i s s o n d e m o s t r é que s é l o a p a r e c e en p r e s e n c i a de e s t e r e s - s u l f ü r i c o s de a l t o p e s o m o l e c u l a r y que l o s m u c o p o l i s a c a r i d o s s u l f a t a d o s ^ c i d o s , a p a r t é de o t r a s s u s t a n c i a s , m u e s t r a n t o d o s como b a s e comün l a g r a n - d e n s i d a d de c a r g a s n e g a t i v a s en su m o lé c u la y su e l e v a d o peso m o l e c u l a r . Todos l o s a u t o r e s e s t â n de a c u e rd o en que e l o s t e o i d e es m e ta c r o m é t i co y s i l a t i n c i é n se h ace con s o l u c i o n e s c o n c e n t r a d a s , e l é r e a de t r a n s ^ - c i o n e n t r e l a banda o s t e o i d e y l a m a t r i z c a l c i f i c a d a , e s müs i n t e n s a m e n t e næ t a c r o m é t i c a que e l r e s t o d e l o s t e o i d e y l a s zonas m i n e r a l i z a d a s q u e , segün Y a e g e r , no son m e t a c r o m a t i c a s s e a c u a l s e a e l p r o c e d i m i e n t o d e s m i n e r a l i z a n _ t e e m p le ado . Okamotto, e s t u d i a n d o l a r e p a r a c i o n é s e a , ha de m o s t ra d o que e l o s t e o i d e y e l hueso r e c i é n m i n e r a l i z a d o se t i n e n con g r a n i n t e n s i d a d y que a m ed ida que aumenta l a m i n e r a l i z a c i é n d i sm in u y e l a m e t a c r o m a s i a , h a s t a ha_ c e r s e l o s t e j i d o s o r t o c r o m é t i c o s . ( 4 5 , 127 ) 28 M u c o p o l i s a c a r i d o s à c i d o s El a n â l i s i s qu im ico de l o s m u c o p o l i s a c a r i d o s â c i d o s o p r o t e o g l i c a n o s fu e i n i c i a d o p o r Mayer en 1956 ( 1 2 0 ) , q u i é n d e m o s t r é que e l n ü c l e o p o l i s a - c a r i d o e s t a b a formado p o r ca dena s l i n e a l e s de a z ü c a r e s , l a s l l a m a d a s h e x o s a m in a s , y p o r a c i d o s u r o n i c o s , con o s i n e s t e r e s s u l f ü r i c o s , que se unen a - una p r o t e i n a . En e l h u e so , l a u n id a d b â s i c a que se r e p i t e p a r a f o r m a r e l - p o l i m e r o puede s e r de c u a t r o t i p o s : a ) e l c o n d r o i t i n 4 - s u l f a t o ; b) e l - c o n d r o i t i n 6 - s u l f a t o ; c ) e l a c i d o h i a l u r o n i c o ; d) e l q u e r a t à n s u l f a t o — (cuya f o r m u la r e p r é s e n t â m e s en e l esquema 2 ) . Las u n i o n e s e n t r e l o s monosa c a r i d o s ; g l u c o s a , g a l a c t o s a y sus aminas y e l a c i d o g l u c o r o n i c o , se hace en p o s i c i o n 1-3 p a r a e l ü c id o g l u c o r o n i c o y 1-4 p a r a l a s g l u c o s a m i n a s . E S Q U E M A CHoOH OH HAc CO2H HO 0 OH [HAc C o n d r o i t i n 4 - s u l f a t o C o n d r o i t i n 6- s u l f a t o CQ2 H CH2OH OH HO HAc CH2OH HO J 0 CH2OSO3H 0 \ 0 Acido h i a l u r o n i c o K e r a t â n s u l f a t o 29 o •H - PA\D A X"f Io — O — O I K I I 00 < D a ̂ de su p e s o , no e s t a a d s o r b i d a en - l a s u p e r f i c i e d e l c r i s t a l como en l a h i d r o x i a p a t i t a , s i n o que combinan - t r è s m o ld c u la s de ag u a po r cada u n i d a d de Ca^(PO^)^ . Por e l c o n t r a r i o , P o s n e r ( 193 ) a f i r m a que e l agua e s t d u n i d a f i s i c a m e n t e a l a s e s f é r u l a s de PTC e l i m i n a n d o s e a 5009 C, s i n m o d i f i c a r su e s t r u c t u r a . Si en un p r i n c i p i o no se p o d i a n compaginar ambas t e o r i a s po r f a l _ t a de d a t o s m o r f o l d g i c o s y a n a l i s i s c u a l i t a t i v o s mas f i n o s , a l d e m o s t r a r se p o r un l a d o , con e l m i s c r o s c o p i o e l é c t r o n i c o , una v a r i a c i d n en e l p e c t o de 1 d e p d s i t o m i n e r a i , y a l e s t u d i a r , po r o t r o , l a s v a r i a c i o n e s de l a r e l a c i d n Ca/P segun l a s d i f e r e n t e s zonas d e l h u e s o , que con l a m ic r o _ r a d i o g r a f i a m o s t r a b a n d i f e r e n t e s g r a d e s de m i n e r a l i z a c i d n , y l a obte_n - c i d n e x p e r i m e n t a l de f o s f a t o s c d l c i c o s con r e l a c i o n e s Ca/P v a r i a b l e s , — p e r m i t i d a f i r m a r que e l p r i m e r d e p d s i t o m i n e r a i se h a c e en forma de PTC de e s t r u c t u r a a m o r f a , que en c o n t a c t e con e l c o l a g e n o y a l cabo de un — t i e m p o se t r a n s f o r m a en h i d r o x i a p a t i t a , lo que no hace nunca t o t a l m e n t e , ya q u e , en e l e s q u e l e t o a d u l t e h a s t a un 30^ d e l m i n e r a l pe rm anece en fo_r ma a m o r fa . Si y a Engs t rbm , e t c . , h a b i a n d e m os t ra do m i c r o r a d i o g r a f i c a m e n t e — que h a b i a en l a c o r t i c a l a r e a s de m i n e r a l i z a c i d n d i f e r e n t e , l o s p r i rne ros e s t u d i o s con i s d t o p o s r a d i o a c t i v e s de Amprino, p a r e c i e r o n i n d i c a r que — ++l a s a r e a s de mener m i n e r a l i z a c i d n e r a n l a s mas à v i d a s p o r e l Ca ; p e ro l o s e s t u d i o s p o s t e r i o r e s de Rowland (200 ) , con Ca*^ y a n a l i s i s s e r i a d o s muy p r é c o c e s , d e m o s t r a r o n que e l i n t e r c a m b i o i d n i c o mds i n t e n s e sucjj d i a en l a s a r e a s de mayor m i n e r a l i z a c i d n , que p o r o t r o l ado son l a s mas p r d x im a s a l a s s u p e r f i c i e s de i n t e r c a m b i o , es d e c i r , e n d o s t a l , perio_s - t a l y c a n a l e s de H a v e r s . 87 H e n d r ic k y H endr ick e H i l l s e h a l a r o n que una p a r t e de l o s a tomos de Ca d e l m i n e r a l dseo no a p a r e c i a en forma c r i s t a l i n a , s i n o amorfa y que d s t a e r a , en su s e s t u d i o s i s o t d p i c o s , mas s u s c e p t i b l e de i n t e r c a m b i o i d n i ­ co que l a p o r c i d n c r i s t a l i n a . Los e s t u d i o s de l a r e l a c i d n Ca/P en e l h u e s o , de Da l lem agne y P^ - b r y (165 66) , m o s t r a b a n una v a r i a c i d n e n t r e 2 , 2 6 y 1 , 1 4 , s i e n d o l a mds fr_e c u e n te m e n te e n c o n t r a d a l a p r i m e r a . P o s n e r y D a l lem agne ( 193 ) o b t u v i e _ ro n de manera s i n t d t i c a una s e r i e de r e l a c i o n e s Ca/P v a r i a b l e en su s f o s _ f a t o s c d l c i c o s : 1. e l o c t o f o s f a t o c d l c i c o de A rno ld con una r e l a c i d n 1,72 2. un f o s f a t o t r i c d l c i c o con r e l a c i d n Ca/P de 1 , 9 4 , e s d e c i r , - 4+ —una m o lé c u la con 9 atomos de Ca y 6 r a d i c a l e s PO^ 3. una h i d r o x i a p a t i t a con 10 atomos de Ca** y 6 r a d i c a l e s f o s f o r i c o s , con una r e l a c i d n Ca/P 2 , 1 4 , que se puede h a c e r mds e_s t a b l e a d q u i r i e n d o una r e l a c i d n 2 ,2 6 p o r un aumento d e l Ca que s u s t i t u y e en p a r t e a un dtomo de h i d r d g e n o , quedando — 10,5 dtomos de Ca p a r a 6 de PO^ Hodge y E lement ( 168 ) c o n s i d e r a n que e l m i n e r a l dseo e s una h_i d r o x i a p a t i t a con Ca** o PO^ en e xceso u n i d o s a l a s u p e r f i c i e d e l cri_s t a l , l o que e x p l i c a r i a sus r e l a c i o n e s v a r i a b l e s . P a r a Dixon y P e r k i n s - ( 30Y ) l a h i d r o x i a p a t i t a t i e n e una r e l a c i d n Ca/P de 2 ,1 4 y ia d i l c r e n _ c i a h a s t a 1 ,9 4 t i p i c a de PTC h i d r a t o , s egun e l l o s se debe a l a p r e s e n c i a de r a d i c a l e s f o s f a t o a d s o r b i d o s en l a s u p e r f i c i e d e l c r i s t a l . Los a n d l i s i s de l a r e l a c i d n Ca/P , en d i f e r e n t e s e s p e c i e s a n im a le s de B i l t z y P e l l e g r i n o ( 155 ) m u e s t r a n que l a r e l a c i d n es c a m b ian te y - v a r i a e n t r e 1 ,6 7 y 1 ,89 con un v a l o r medio de 1 ,73 en a n a l i s i s g l o b a l e s d e l e s q u e l e t o . 88 R i c h e l l e ( 195) m e d ia n te metodos g r a v i m e t r i c o s a n a l i z a l a r e l a c i d n de l a m a t r i z o r g à n i c a y e l c o n t e n i d o m i n e r a l en d i f e r e n t e s é r e a s d s e a s , e î c o n t r a n d o que l a s à r e a s muy m i n e r a l i z a d a s t i e n e n una r e l a c i d n de 2 , 8 en - c o n t r a d e l v a l o r 2 ,1 1 que a p a r e c e normalmente t r a s c a l c i n a r e l m i n e r a l a - 9009 y en l a s zonas de b a j a m i n e r a l i z a c i d n l a r e l a c i d n d e s c i e n d e a 1 , 9 5 . - R i c h e l l e a f i r m a que e l m i n e r a l d e p o s i t a d o es un f o s f a t o t r i c é l c i c o que se une a t r a v d s de su s r a d i c a l e s f o s f d r i c o s a l c o l à g e n o . Los a n a l i s i s de U r i s t y Dowell ( 2 0 8 -9 ) d e l hueso en c r e c i m i e n t o — m u e s t r a n a n i v e l de l a d i à f i s i s una r e l a c i d n Ca/P de 1 , 6 - 0 , 1 . A n i v e l d e l c a r t i l a g e c a l c i f i c a d o l a r e l a c i d n es de 1,48 a 1 , 5 0 , en l a e s p o n j o s a p r im a _ r i a de 1 ,50 y l a s e c u n d a r i a o s c i l a e n t r e 1 ,57 y 1 , 6 0 . Los d i f e r e n t e s min^ r a i e s a s i o b t e n i d o s l i b e r a n p i r o f o s f c t o y agua a l c a l c i n a r s e , e l p r im e r o - en una c a n t i d a d h a s t a de 1 2,5% d e l m i n e r a l d e p o s i t a d o . A n i v e l de l a s d i ^ f i s i s e n c u e n t r a n un aumento de l a r e l a c i d n Ca/P h a s t a de 1 ,67 con e l paso d e l t i e m p o . La p o r c i d n m i n e r a i que p r é s e n t a es La r e l a c i d n t i e n e una c r i s _ t a l i n i d a d m e j o r , s egun m u e s t r a n l o s a n à l i s i s e s p e c t o g r d f i c o s , y l i b e r a n — con e l c a l o r una c a n t i d a d mucho menor de p i r o f o s f a t o . U r i s t , b a s à n d o s e t am b ié n en d a t o s e x p é r i m e n t a l e s de p r e c i p i t a c i d n - de f o s f a t o s c à . l c i c o s de p r o p o r c i o n a l i d a d d i f e r e n t e , d i c e que l a f a s e mine_ r a l e s t à formada p o r h i d r o x i a p a t i t a con una r e l a c i d n de 1 ,6 7 que se m ezc la con o t r o compuesto c a l c i c o d i f e r e n t e a l PTC, ya q u e , a n i v e l d e l c a r t i l a g o c a l c i f i c a d o l a r e l a c i d n e n c o n t r a d a es de 1 ,4 8 , i n f e r i o r a l 1 ,5 0 de l o s fo_s f a t o s t r i c é l c i c o s . Po r e l l o p o s t u l a l a p r e s e n c i a de un f o s f a t o d i c é l c i c o h i d r a t a d o , que se a d s o r b e s o b r e l a s u p e r f i c i e d e l c r i s t a l dé a p a t i t a en - una p r o p o r c i d n de h a s t a e l 50% y e x p l i c a r i a l a s v a r i a c i o n e s en l a r e l a c i d n Ca /P d e s c r i t a . E s t e f o s f a t o d i c d l c i c o con l a m a d u ra c id n d e l m i n e r a l se in c o r p o r a a l c r i s t a l de h i d r o x i a p a t i t a , que se a c e r c a a s i a l compuesto n a t u _ r a l . P a r a U r i s t l a a p a r i c i d n d e l f o s f a t o d i c à l c i c o e s t d en r e l a c i d n con - una m a t r i z o r g a n i c a a c i d a , en e s p e c i a l MPS a c i d o s , como l o s d e l c a r t i l a g o . F r e n t e a l a c o n c e p c i d n de U r i s t , E a n e s , P o s n e r y Termine ( 168 ,207 ) 89 a f i r m a n que e l m i n e r a l se d e p o s i t a en una p r i m e r a f a s e en form a de f o s f a t o t r i c a l c i c o , como e s f é r u l a s de 9 ,5 % de d i a m è t r e , con una r e l a c i o n Ca/P de 1 ,5 0 y de fo rm u la Cag(P0^)6 q u e , en c o n t a c t e con l a f i b r a c o l a g e n a y p e r - un p r o c e s o de m adura c ion se t r a n s f o r m a r i a en una h i d r o x i a p a t i t a de f o r m u la (Ca^(PO^) ^OH) 2, con c a r b o n a t e c a l c i c o a d s o r b i d o en l a s u p e r f i c i e d e l — c r i s t a l y con una r e l a c i o n Ca/P de 1 ,6 7 . I n c l u s e en l e s t e j i d o s d se os — a d u l t e s c o e x i s t e n ambos c om pues tos , ya q u e , l a r e l a c i d n mas f l e c u e n t e m e n t e e n c o n t r a d a es l a de 1 ,5 7 , que r e p r e s e n t a r i a l a suma de l a OH.A de r e l a c i o n 1 ,6 7 con e l PTC de r e l a c i o n 1 ,5 0 . El PTC puede c o n s t i t u i r en e l ad J t o — h a s t a e l 30% de to d o e l m i n e r a i . A su n i v e l , se e f c t u a r i a e l i n t e r c a m b i o i d n i c o de forma p r é p o n d é r a n t e a l s e r un compuesto m e t a b d l i c a m e n t e mas actj^ v o . La f a l t a de c r i s t a l i z a c i d n c om plé ta y e l c r e c i m i e n t o l i m i t a d o de — l e s c r i s t a l e s se debe a l a p r e s e n c i a en l a m a t r i z de una s e r i e de f a c t u r e s no b i e n c o n o c id o s , El " i n v i t r o " impide l a t r a n s f o r m a c i d n d e l PTC en OH.A, p e ro su c o n c e n t r a c i d n en l o s t e j i d o s es i n s u f i c i e n t e . Los p o l i a n i o _ n é s y e l r a d i c a l CO^ t i e n e n l a misma l u n c i d n y l o s p i r o f o s f a t o s , de a c u e ^ do con F l e i s c h y P o s n e r , son l o s e l e m e n t o s p r i n c i p a l e s en l a i n h i b i c i d n — d e l c r e c i m i e n t o c r i s t a l i n o , como y a d i j i m o s a l d a b l a r uc l a c a l c i f i c u c i d n . 90 E L C A L L O D E F R A C T U R A H em orrag ia I n f l a m a c i d n Hematoma El c a l l o p e r i o s t a l C a l l o m edu la r V a s c u l a r ! z a c i d n C a r t f l a g o F a c t o r e s m ecan icos EL CALLO DE FRACTURA Después de e s t u d i a r l o s d i f e r e n t e s componentes a i s l a d o s d e l h u e s o , vamos a v e r a h o r a como se m o d i f i c a n bras l a f r a c t u r a y e l p r o c e s o r e p a r a _ dor de l a misma: l o s fenomenos c e l u l a r e s y v a s c u l a r e s que lo d e t e r m i n a n y que nos l l e v a r a n a d i s c u t i r dos f a c t o r e s muy i m p o r t a n t e s , que s o n , po r un l ado e l o r i g e n de l a s c é l u l a s que dan lug . i r a l c a l l o , e s d e c i r , perio_s t i o e n d o s t i o , c a v id a d m e d u l a r , c a n a l e s de Havers y t e j i d o p e r i v a s c u l a r ; y por o t r o l ado l o s e s t i m u l o s que d e s e n c a d e n a n e s t a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r . Hay que a n a l i z a r po r u l t i m o l a s m o d i f i c a c i o n e s que t i e n e n l u g a r en l a eyo l u c i d n d e l c a l l o de f r a c t u r a t r a s cam b ia r l a s c o n d i c i o n e s m e c a n ic a s que - lo d e t e r m i n a n . Al margen de l o s e s t u d i o s y a h i s t d r i c o s cuya r c v i s i d n ha^ t a 1918 encon tr am os en K e i t h ( 297 ) , se han u sado una s e r i e de modelos ex p e r i m e n t a l e s p a r a e s t u d i a r l a r e s p u e s t a a l a f r a c t u r a y su p r o c e s o de cu_ r a c i d n . De un lado r o e d o r e s como e l c o n e jo y l a r a t a , en l o s c u a l e s l a - c o n s o l i d a c i d n os l a r é g l a y donde e l hueso c o r t i c a l a d u l t e no m u e s t r a un d e s a r r o l l o d e l s i s t e m a o s t e d n i c o t a n e l e v a d o como e l que a p a r e c e en e l e^ q u e l e t o humano. A e s t e se a c e r c a mds e l hueso l e l p e r r o , que es e l o t r o a n im a l de e x p e r i m e n t a c i d n empleado en e l e s t u d i o d e l c a l l o de f r a c t u r a . - Se han r e a l i z a d o t am b ié n e s t u d i o s en e l hombre m e d i a n t e r a d i o g r a f i a s , is_d to p o s y e s t u d i o h i s t o l d g i c o de l o s f r a g m e n t e s de c a l l o o b t e n i d o s de aii - t o p s i a s y d u r a n t e l o s a c t e s q u i r u r g i c o s de o s t o o s i n t e s i s , como r e c o g e — p r i n c i p a l m e n t e A e g e r t e r ( 1 4 ) . En una p r i m e r a f a s e vamos a c o n s i d e r a r e l c a l l o de f r a c t u r a segun - a p a r e c e en l a d i a f i s i s de l o s h u e s o s l a r g o s de a n i m a l e s de e x p e r i m e n t a c i d n en l o s que l a f r a c t u r a no se i n m o v i l i z a o se hace s o l o con y e s o . E x i s t e n g r a n c a n t i d a d de e s t u d i o s r e a l i z a d o s en c o s t i l l a s que tampoco e s t d n somet_i das a n ingun t i p o de c o n t e n c i d n r i g i d a , y cuya imagen h i s t o l d g i c a es ba_s - t a n t e s i m i l a r a l a s que se o b t i e n e n en l a s d i a f i s i s de l o s h u e s o s l a r g o s - en l a s c o n d i c i o n e s s e h a l a d a s . E l c a l l o e s p o n jo s o no nos i n t e r e s a p a r a e l e s t u d i o que hemos r e a l i z a d o . 91 El p r im e r problème con e l que nos e n c o n t r a m o s , como y a s e n a l a b a Ham - ( 277 ) en 1930 , es e l de l a n o m e n c l a t u r a de l o s e l e m e n t o s c e l u l a r e s que apar_e cen en e s t e p r o c e s o , po r su c o l o c a c i d n e s p a c i a l en e l c a l l o y e l o r i g e n que se l e s a t r i b u y e . Hem orrag ia . - Como c o n s e c u e n c ia de l a f r a c t u r a hay una p é r d i d a de c o n t i n u i d a d de to^ dos l o s e l e m e n to s o s e o s : e l p e r i o s t i o a p a r e c e r o t o y se s é p a r a en mayor o mê no r e x t e n s i o n de l a c o r t i c a l . P r a g m e n ta c id n de l a misma, que s o l o en l o s c^ SOS p r o d u c i d o s q u i r ü r g i c a m e n t e p r é s e n t a un t r a z o l i m p i o , en l o s demâs a p a r e ­ ce a s t i l l a d a con e s q u i r l a s s u e l t a s ; p o r t a n to en c u a l q u i e r t i p o de f r a c t u r a , i n c l u s e en l a s que m ac ro s cd p ic am e n te a p a r e c e n n i t i d a s , e x i s t e n s i e m p re peque nos f r a g m e n t e s dseos en e l e s p a c i o f r a c t u r a r i o que qu e d a n a i s l a d o s y , como - s e n a l a C o u t e l i e r ( 2 4 6 ) , t o d a f r a c t u r a a l menos d e s d e e l p u n to de v i s t a micrjos c d p i c o , es s iem pre m u l t i f r a g m e n t a r i a . Se p ro d u ce , adem as , una i n t e r r u p c i d n d e l c i l i n d r o m edu la r y en c o n s e ­ c u e n c i a una h e m o r r a g i a i n t e n s a p o r r o t u r a de l o s v a s o s , a s i como una n e c ro - s i s c e l u l a r mas o menos e x t e n d i d n . La h e m o r r a g i a a p a r e c e en l a s p a r t e s b l a n das que c i r c u n d a n a l hueso p o r l a a c c i d n m ec a n ic a que d i s l a c e r a l a s mismas y p o r l a l e s i d n que o r i g i n a e l d e s p l a z a m i e n t o de l o s f r a g m e n t o s d s e o s . La r o ­ t u r a d e l p e r i o s t i o p e r m i t e e l pa s o d e l hematoma m e d u la r a l a s zonas c i r c u n d a n t e s , a p a r e c i e n d o en a r e a s d e t e r m i n a d a s como se conoce en l a c l i n i c a desde l a e r a p r e r a d i o l d g i c a . El p e r i o s t i o en su capa e x t e r n a p r é s e n t a a b u n d a n t e s v a s o s que se rom- pe n y que c o n t r i b u y e n ademas a l a h e m o r r a g i a . La t e r c e r a f u e n t e de hemorr^ - g i a s on l o s c a p i l a r e s de l o s c a n a l e s de H a v e r s . Su r o t u r a d é t e r m i n a , a l ocluir^ se p o r l o s p r o c e s o s de c o a g u l a c i d n n o r m a l e s , e l c i e r r e de l o s c a p i l a r e s r o - t o s y l a a p a r i c i d n en l a c o r t i c a l de zonas e x e n t a s de t o d o a p o r t e n u t r i c i o , 92 con n e c r o s i s de l o s o s t e o c i t o s s u b s i d i a r i o s de l o s v a s o s r o t o s que t o p o g r ^ f i c a m e n t e c o r r e s p o n d e n a l o s e x t r e m os f r a c t u r a r i o s . La l e s i d n de l a c a v id a d m edu la r conduce a una h e m o r r a g i a mds abun - d a n t e po r l a l e s i d n de l o s l a g o s v e n o s o s y l a i n t e r r u p c i d n de l a a r t e r i a - n u t r i c i a , q u e c o n t r i b u y e g randem en te a l a i s q u e m ia de l a s c o r t i c a l e s , pues l o s dos t e r c i o s i n t e r n o s de l a s mismas e s t d n n u t r i d o s p o r e l l a , en t a n t o - que e l t e r c i o e x t e r n e lo hace a p a r t i r de l o s v a s o s p e r i o s t a l e s . La h e m o r r a g i a se c o a g u l a r d p id a m e n t e y e s t e c o a g u le se e x t i e n d e de_s de l a p e r i f e r i a d e l hematoma h a c i a e l c e n t r e , dando l u g a r a l a a p a r i c i d n - de una m a l l a de f i b r i n a en l a que quedan a t r a p a d o s l o s e l e m e n t o s formes - cuya m o r f o lo g f a comienza a a d t e r a r s e p r o n t o y cuyos cambios son c l a r a m e n t e v i s i b l e s a p a r t i r d e l t e r c e r d i a . El c o a g u le de f i b r i n a p e r d u r a h a s t a f ^ s e s muy avanzadas d e l p r o c e s o r e p a r a d o r . ( 1 4 , 3 4 , 2 1 6 , 2 5 8 , 3 2 5 , 3 9 3 ) Como c o n s e c u e n c ia de l a l e s i d n v a s c u l a r se p r o d u c e n : a ) un é s t ^ - s i s s a n g u in e o con v a s o d i l a t a c i d n , t r a n s u d a c i d n y t lema; b) una d i sm in u - c i d n d e l r i e g o con n e c r o s i s y aumento de l o s p r o d u c t o s de d e g r a d a c i d n c e l ^ l a r que c o n d i c i o n a e l aumento de l a p r e s i d n o s m d t i c a y de l a p r e s i d n oncd_ t i c a l o c a l ; se f a v o r e c e a s i l a a p a r i c i d n d e l edema y de un e s t a d o de a c i d o s i s l o c a l . La a c i d o s i s j u n t o a l acumulo de l o s p r o d u c t o s de d e g r a d a c i d n de l a g l u c o l i s i s a n a e r o b i a , en e s p e c i a l e l a c id o l a c t i c o , c o n d i c i o n a n una mayor r e a b s o r c i d n de l a s s a l e s c a l c i c a s de l o s ex t r em os f r a c t u r a r i o s . Habra , — p u e s , en t o d a f r a c t u r a una o s t e o l i s i s q u i m i c a p o r l a s c o n d i c i o n e s l o c a l e s , l o c u a l e x p l i c a por un lado l a r e a b s o r c i d n de l o s e x t r e m o s f r a c t u r a r i o s y , p o r o t r o , l a de l o s pequenos f r a g m en to s dseos m i c r o s c d p i c o s que habiamos - d e s c r i t o a p a r e c e n s ie m pre a n i v e l d e l t r a z o de f r a c t u r a . E s t a o s t e o l i s i s , s e g u n de 1 Tor to y C o u t e l i e r ( 3 9 3 ) , se p roduce a p a r e n t e m e n t e s i n l a i n t e ^ - v e n c i d n de e lem en tos c e l u l a r e s . A n i v e l de 1 foco de f r a c t u r a hay una s o b r e s a t u r a c i d n de f o s f a t o s y 93 de c a l c i o que se s o l u b i l i z a n p o r e l medio a c i d o en e l que se e n c u e n t r a n y que impide su p r e c i p i t a c i d n . Los t r a s t o r n o s v a s c u l a r e s l o c a l e s en l a s p r i m e r a s f a s e s no perm_i t e n su t o t a l r e a b s o r c i d n y a p a r e c e de e s t a manera l o que L e r i c h e y P o l i c a r d ( 3 1 5 ) en 1926 denominaron l a s o b r e c a r g a c d l c i c a l o c a l , que en l a - a c t u a l i d a d r e c i b e un s i g n i f i c a d o d i s t i n t o d e l que l e d i e r o n l o s a u t o r e s m e n c i o n a d o s , l o s c u a l e s a t r i b u i a n a e s t a s o b r e c a r g a l o c a l de c a l c i o l a - p r e s e n c i a de 1 m i n e r a i n e c e s a r i o p a r a l a o s i f i c a c i d n d e l c a l l o , como fend meno p u ram e n te l o c a l , ya que , e n to n c e s se c o n s i d e r a b a l a m i n e r a l i z a c i d n - como un p r o c e s o qu imico puro , s i n i n f l u j o a lg u n o de l a s c é l u l a s . Por o t r o l a d o , como ya s e n a l a r e m o s , hay una o s t e o p e n i a g l o b a l d e l hueso a f e ^ t o que a p a r e c e t a m b ié n , aunque en g r a d e minime, a n i v e l de l o s demds hu_e SOS de l a economia ( 2 3 0 ,2 4 2 ,4 0 7 ) . La a c i d o s i s segun d e l T o r to ( 393 ) se m a n t i e n e h a s t a e l déc im e - d i a , a p a r t i r d e l c u a l e l pH g i r a h a c i a l a n o r m a l i d a d e i n c l u s e h a c i a l a a l c a l i n i d a d , n i v e l en e l c u a l se m a n t i e n e d u r a n t e c i e r t o t i e m p o . Tienipo en e l que se p ro d u c e n 1 os fendmenos de o s i f i c a c i d n . A e s t e r e s p e c t e hay que s e h a l a r que Murray (278) a t r i b u y e , como d e l T o r t o , e t c . , l a a c i d o s i s a l c a t a b o l i s m o c e l u l a r , m i e n t r a s que K e l l y ( 313 ) l a e q u i p a r a a l a a c i d o s i s que a p a r e c e en l a s a n g re c o n s e r v a d a p a r a t r a n s f u s i o n e s a l h a c e r s e a n ^ e r o b i o e l m é ta b o l i s m e de sus h e m a t i e s . ¥ r a y ( 4 0 8 - 9 ) a s p i r a n d o e l hematuina en 1967 dem os t rd una a c i d o s i s l o c a l , p e r o K e l l y ( 313 ) en 1969 no oncuen t r a a l t e r a c i o n e s a p r e c i a b l e s d e l pH en l a s a n g r e c i r c u l a n t e d e l hue so — f r a c t u r a d o . La c o n t r a d i c c i d n se e x p l i c a a l s e r dos medidas d i f e r e n t e s . - Un a u t o r mide l o c a l y d i r e c t a m e n t e e l pH d e l hematoma, en t a n t o que e l - o t r o mide l a s a l t e r a c i o n e s d e l pH de l a s a n g r a que f l u y e h a c i a y d e s d e e l c a l l o de f r a c t u r a . El hematoma no es mas que una c o n s e c u e n c i a de l a f r a c t u r a . Lo que n o s i n t e r e s a c o n o c e r es l a r e s p u e s t a de l o s e l e m e n t o s c e l u l a r e s v i v e s — f r e n t e a l a l e s i d n p r o d u c i d a , a s i como l a s d i f e r e n t e s i n t e r p r e t a c i o n e s — 94 que se han dado de l a misma, P o r un l ado hay que c o n s i d e r a r l o s fendmenos que se p r o d u c e n en t o r n o a l hematoma y que l l e v a r â n a su d e s a p a r i c i d n , y - p o r o t r o lado l o s p r o c e s o s que d a r d n l u g a r a l c a l l o de f r a c t u r a p ro p ia m e n _ t e d i c h o . P r o c e s o s que en una p r i m e r a f a s e a l menos, s egun podemos c o l e _ g i r de l o s e s t u d i o s de l a l i t e r a t u r a , pueden a p a r e c e r d i f e r e n t e s , aunque - de s p u és ambos c o n f l u y a n en l a r e p a r a c i d n d s e a . E x i s t e l a p o s i b i l i d a d de c o n s i d e r a r e l c a l l o como un p r o c e s o i n f l a _ m a t o r i o mas, con l a p e c u l i a r i d a d de l o c a l i z a r s e a n i v e l d e l hueso y t e n e r un o r i g e n m ec à n ic o , a s i como t e r m i n a r e l p r o c e s o r e p a r a d o r con l a o s i f i c a _ c i d n de l a c i c a t r i z . ( 2 1 6 , 2 2 8 , 2 3 7 , 2 4 6 , 2 6 0 , 2 6 8 , 3 1 0 ) El hue so t i e n e una c a p a c i d a d de r e s p u e s t a l i m i t a d a f r e n t e a l m edio , que se r e s t r i n g e a l a f o r m a c i d n y a l a d e s t r u c c i d n d s e a , que pue de n d a r - r e s p u e s t a s a p a r e n t e m e n t e d i s p a r e s a l a l t e r a r su o r g a n i z a c i d n y s e c u e n c i a - en e l e s p a c i o y en e l t i e m p o . I n f l a m a c i d n . - La i d e a de c o n s i d e r a r e l c a l l o como un p r o c e s o i n f l a m a t o r i o no es - n u e v a . Ya D i e t e r i c h , en 1925, a l c o n t r a r i o que K r a f t , c o n s i d é r a a l c a l l o como un p r o c e s o i n f l a m a t o r i o i g u a l que A sada , K u e n t s c h e r , e t c . ( 2 1 1 , 2 5 8 ) . P a r a p o d e r t o m a r l o a s i , hemos de v e r a n t e s c u a l e s s o n ' l a s ca rac te^ - r i s t i c a s p a r t i c u l a r e s de un p r o c e s o i n f l a m a t o r i o y s i e s t a s c a r a c t e r i s t j _ - c a s pueden t r a s l a d a r s e a l o s fendmenos que e nc on t r am os en e l d e s a r r o l l o — d e l c a l l o , t e n i e n d o en c u e n t a que l a mayor p a r t e de l o s e s t u d i o s s o b r e l a i n f l a m a c i d n se h a n r e a l i z a d o en t e j i d o s b l a n d o s y usAndose como ba s e l a s - r e s p u e s t a s i n m u n i t a r i a s y a n t i b a c t e r i a n a s . L u b a r sc h ( 3 2 1 ) c o n s i d é r a l a e x i s t e n c i a de una r e g e n e r a c i d n i n f l a m a t o r i a e n t r e l o s p r o c e s o s p u r a m e n te r ^ g e n e r a t i v o s y l o s pu ram en te i n f l a m a t o r i o s , lo que s é r i a p a r a muchos a u t o r e s 95 e l c a l l o , es d e c i r , un fendmeno a c a b a l l o e n t r e l a i n f l a m a c i d n y l a r e g e n e r a c i d n t i s u l a r . Es de s e n a l a r que D e l a r u e , 1955, d i c e que l a i n f l a m a c i d n es l a ba s e de t o d a r e g e n e r a c i d n o c i c a t r i z a c i d n t i s u l a r y que s i en e l a n im a l i n f ^ - r i o r , como hace B ecke r (422 ) , e s p o s i b l e s e p a r a r c l a r a m e n t e l a régénéra^ - c i d n de l a c i c a t r i z a c i d n , e n e l an im a l s u p e r i o r , en e s p e c i a l en e l hombre, l a r e g e n e r a c i d n e s t a l i m i t a d a a n i v e l t i s u l a r y d a l u g a r a lo que se cono_ ce como c i c a t r i z a c i d n , cuya b a s e e s s i e m p re un p r o c e s o i n f l a m a t o r i o . Lie ga a a f i r m a r i n c l u s e que s i n r e a c c i d n i n f l a m a t o r i a no hay c i c a t r i z a c i d n , y que l o s fendmenos p r o l i f e r a t i v o s son muy p r é c o c e s y a p a r e c e n y a d u r a n t e l a f a s e e x u d a t i v a . (241) L u b a r sc h , e t c . , p o s t u l a que s d l o se debe h a b l a r de p r o c e s o i n f l a m a ­ t o r i o s i se combinan l a s t r è s c a r a c t e r i s t i c a s s i g u i e n t e s : 15 su n a t u r a l e z a a l t e r a t i v a 25 un p r o c e s o e x u d a t i v o - i n f i l t r a t i v o 3- un p r o c e s o p r o l i f e r a t i v e . La i n f l a m a c i d n ha de comenzar s i e m p re p o r l a f a s e a l t e r a t i v a , que - p o d r f a c o n s i d e r a r s e como su p r i m e r paso o b i e n s e r l a c a u s a d e s e n c a d e n a n t e de l o s dos p r o c e s o s s i g u i e n t e s , en e l s e n t i d o de que l a a l t e r a c i d n de lo s e l e m e n t o s t i s u l a r e s , p o r e l a g e n t e c a u s a l que s e a , d é t e r m i n a e l d e s e n c a d e _ n a m ie n to de t o d a l a r e a c c i d n . L u b a r sc h toma s i e m p r e l a i n f l a m a c i d n como - un p r o c e s o de d e f e n s a d e l o rgan i sm e e i n c l u y e en a l t e r a c i d n l o s p r o c e s o s - r é a c t i v é s que a p a r e c e n a n i v e l de l a s c é l u l a s d e l p a re n q u i m a y e s t r o m a s Ije s i o n a d o s , s e h a l a n d o q u e , cuando l a r e a c c i d n es i n t e n s a , se p r o d u c e n a s i — mismo a l t e r a c i o n e s en l a s u s t a n c i a f u n d a m e n t a l . P a r a Ham (29 ) hay en - l a i n f l a m a c i d n un p r o c e s o de l i s i s , un p r o c e s o de r e a c c i d n y un p r o c e s o de r e p a r a c i d n . Se i n c l u y e n p a r a L uba rsch en l a f a s e a l t e r a t i v a l a s m o d i f i c a c i o n e s t i n t o r i a l e s que a p a r e c e n en l a s c é l u l a s , t a n t o en s e n t i d o p r o d u c t i v o p a r a l a s i n t e s i s de l a s p r o t e i n a s , como e s una mayor b a s o f i l i a , un aumento d e l n u c l e o , e t c . , y l a s que a p a r e c e n p o r d e g e n e r a c i o n y n e c r o s i s c e l u l a r , a s i como l a s m o d i f i c a c i o n e s de l a s u s t a n c i a f u n d a m e n ta l p o r e l edema, e t c . El segundo fenomeno que t i e n e l u g a r , y p a r a muchos a u t o r e s e l p r i _ mer paso de l a i n f l a m a c i d n , es e l p r o c e s o e x u d a t i v o i n f i l t r a t i v o , que es r e a l m e n t e un fendmeno v a s c u l a r . Hay en p r i m e r l u g a r una h i p e r e m i a que a l comienzo es una h i p e r e m i a a c t i v a p o r d i l a t a c i d n v a s c u l a r con aumento de - l a v e l o c i d a d de l a c i r c u l a c i d n , como a f i r m a L u b a r s c h . R i c k e r p e n s a b a que e r a de b ido a un i n f l u j o n e r v i o s o . En l a a c t u a l i d a d se da mayor v a l o r a - l o s f a c t o r e s t d x i c o s l o c a l e s . Si en u n a p r i m e r a f a s e l a h i p e r e m i a es a_c t i v a , p o s t e r i o r m e n t e se produce un é s t a s i s con e n l e n t e c i m i e n t o de l a c i r _ c u l a c i d n . E s t e e n l e n t e c i m i e n t o d é t e r m i n a , segun Sanchez Lucas, p o r l a - p r e s e n c i a d e l em bar ram ien to de lo s h e m a t i e s , l a m a r g i n a c i d n de l o s leucoc_i t o s h a c i a l a p a r e d c a p i l a r que a t r a v i o s a n , como ya d e s c r i b i d Gonheim, — c o n s t i t u y e n d o l a d i a p e d e s i s . P a r a Ham e l que l o s l e u c o c i t o s queden und - dos a l a p a r e d c a p i l a r se d e b e r i a ademds a una a l t e r a c i d n de l a s u p e r f d - c i e e n d o t e l i a l p o r l a s s u s t a n c i a s t d x i c a s l o c a l e s , que e j e r c e n un e f e c t o de a t r a c c i d n so b re l o s l e u c o c i t o s , de te rm in a n d o a s i su d i a p e d e s i s . Los e le m en to s formes que em ig ran en p r i m e r l u g a r son l o s g r a n u l o c i t o s , s u s t i t u i d o s en f a s e s mds a va nza da s p o r m o n o c i to s q u e , como sabemos , son c é l u l a s c i r c u l a n t e s d e l s i s t e m a r e t i c u l o e n d o t e l i a l S .R .E . y que pue_ den m o s t r a r formas de t r a n s i c i d n con l o s g r a n d e s l i n f o c i t o s . A1 p a s a r — lo s m o noc i to s c i r c u l a n t e s a l o s t e j i d o s se t r a n s f o r m a n en m a c r d f a g o s . - Los l i n f o c i t o s emigran t am b ié n y t i e n e n mayor i n t e r é s en l a s i n f l a m a c i o n e s c r d n i c a s i n f e c c i o s a s y de o r i g e n inmune. No ha y s d lo d i a p e d e s i s , s i n o que c l é s t a s i s v a s c u l a r , l a s a l t e r a - c l o n e s de l a s p a r e d e s e n d o t e l i a l e s p o r l a s noxas t i s u l a r e s , l a a c i d o s i s y l a h i p o x i a r e l a t i v a , p roducen una p l a s m a f e r e s i s con p a s o de l i q u i d e s y — p r o t e i n a s a l o s t e j i d o s , e n t r e l a s p r o t e i n a s debemos c o n s i d e r a r e l f i b r i _ 97 ndgeno que se a c t i v a , d e p o s i t â n d o s e en m a l l a s de f i b r i n a . E s t a mayor p e r - m e a b i l i d a d se ha d e m os t ra do con e l empleo de c o l o r a n t e s que no a t r a v i e s a n l a s p a r e d e s c a p i l a r e s n o rm a le s y que a p a r e c e n e n l o s f o c o s de i n f l a m a c i d n . A n tes de c o n s i d e r a r e l t e r c e r fendmeno de l a i n f l a m a c i d n tenemos - que h a c e r una r e l a c i d n de l o s m e d ia d o re s q u i m i c o s de e s t a r e s p u e s t a , lo - que nos p o d r f a d a r a l g u n a luz s o b r e l a s t e o r f a s de l o s s u p u e s t o s mediadq - r e s q u im ic o s e s p e c i f i c o s d e l c a l l o , como l a o s t e o g e n i n a de L a c r o i x ( 3 1 l ) , y l o s p r o c e s o s de i n d u c c i d n d s e a . Segun A u s t e n (217) l a s a l t e r a c i o n e s m i c r o v a s c u l a r e s son l a cons^ - c u e n c i a de l a a c t i v a c i d n de unos s i s t e m a s m e d ia d o re s que a c t ü a n d i r e c ta m q n t e s o b r e l a p a r e d v a s c u l a r a t r a v é s de s u s t a n c i a s q u i m i c a s o p o r a t r a c c i o n y / o a l t e r a c i d n de d i f e r e n t e s e l e m e n t o s c e l u l a r e s . En e l p r i m e r grupo hay que c o n s i d e r a r como l o s mds i m p o r t a n t e s e l complemento, l a s q u i n i n a s y l a s a l t e r a c i o n e s en e l s i s t e m a de l a c o a g u l a c i d n . En e l segundo grupo se iri - c l u y e n l o s p r o d u c t o s que e s t a n en r e l a c i d n con l a a l e r g i a y l o s s e g re g a d o s po r l a s c é l u l a s c e b a d a s . El complemento es e l c o n j u n t o de nueve p r o t e i n a s s é r i c a s que se a_c t i v a n s e c u e n c i a l m e n t e e i n t e r v i e n e n en l o s p r o c e s o s de r e a c c i d n de a n t i g e - n o - a n t i c u e r p o . En e l s i s t e m a c o m p le te l a s e c u e n c i a es C-.-C -C -C -C -G j- 4 2 3 5 D—Y -C g - C ^ . Hemos de s e h a l a r que e l pa s o a l i b e r a una q u i n i n a C y que l a a c t i v a c i d n d e l l i b e r a una a n a f i l a x o t o x i n a que p ro d u ce una e s t i m u l a c i d n de l a f a g o c i t o s i s . El paso a l i b e r a f a c t o r e s q u i m i o t a x i c o s i g u a l — que e l . El f a c t o r Cg es e l p r i m e r o en p r o d u c i r a l t e r a c i o n e s de l a membra, na c e l u l a r , que se c o m p le ta n p o r l a s a c c i o n e s de C que d e t e r m i n a n l a apa r i c i d n de fendmenos de l i s i s c e l u l a r . Es de s e h a l a r que e :L e s i s t e m a se pu£ de i n i c i a r en e l c e n t r e de l a c a d e n a y que se puede d e s a r r o l l a r s a l t a n d o ^1 guna de su s f a s e s . Por u l t i m o e s t e s i s t e m a , cuya d e s c r i p c i d n c o m p lé ta se - s a l e de n u e s t r o campo, e s t a s o m e t id o a d i v e r s e s i n f l u j o s i n h i b i d o r e s y ex£Î t a d o r e s y p r é s e n t a un mécanisme de a u t o r r e g u l a c i d n i g u a l que o t r o s muchos s i s t e m a s b i o l d g i c o s . Los t r a b a j o s de P e r Imam (217) i n d i c a n que i n t e r v i e ^ - 98 ne a s i mismo en p r o c e s o s en l o s que l o s l i n f o c i t o s j u e g a n un p a p e l i m p o r t a n t e . Se han d e s c r i t o a l t e r a c i o n e s d e l s i s t e m a complemento en l a s a r t r i t i s - r e u m a t o i d e s . Mas i m p o r t a n c i a , en p r i n c i p l e , p a r e c e t e n e r p a r a n o s o t r o s e l s i s t e m a de l a s q u i n i n a s y su r e l a c i d n con l o s mécanismes de c o a g u l a c i d n . En 1930 K ra u t y c o l . p r o d u j e r o n c u a d ro s de h i p o t e n s i d n p o r l a i n o c u l a c i d n e xpe r im e n t a l de un e x t r a c t o p a n c r e a t i c o que l i b e r a r i a c a l i d i n a a p a r t i r de unaC^ gl_q b u l i n a p l a s m a t i c a . La c a l i d i n a es un d e c a d é p t i c o d e l c u a l Rocha y S i l v a o_b t u v i e r o n o t r o s d e r i v a d o no p e p t i d i c o denominado c a l i c r e i n a . Se han e n c o n t r e do p o s t e r i o r m e n t e una s e r i e de s u s t a n c i a s que se conocen g l o b a l m e n t e como - q u i n i n a s p l a s m à t i c a s . La a l f a g l o b u l i n a de l a c u a l d e r i v a n se conoce como - q u i n i n d g e n o . Se ha demos t rado una r e l a c i d n c a u s a l e n t r e e l f a c t o r Hageman o f a £ - t o r c o n t a c t o y l a s q u i n i n a s , de manera que e l f a c t o r Hageman, l a p l a s m i n a y un f a c t o r que se conoce como f a c t o r p e r m e a b i l i z a n t e d i l u i d o , a c t ü a n en f o r ­ ma s e c u e n c i a l p a r a t r a n s f o r m a r e l q u in in d g e n o en c a l i c r e i n a . De e s t o s f a c ­ t o r e s , segun Kaplan (217) e l müs i m p o r t a n t e es un f r a g m e n t e d e l f a c t o r Hage man que t i e n e un PM de aproximadamente 35 .000 . ' Al p a r e c e r , lo s f a c t o r e s que e s t i m u l a n a l f a c t o r c o n t a c t o , y po r ta j i t o l a c o a g u l a c i d n , a c t i v a r i a n t a m b ié n l a p r o d u c c i d n de c a l i c r e i n a . P a r a — que s u c e d a a s i t e n d r i a que i n t e r v e n i r , ademas, e l s i s t e m a f i b r i n o l i t i c o ac t i v a n d o l a p l a s m in a que a su vez e s t i m u l a e l complemento. Por o t r o l ado l a C l l i c r e i n a forma b r a d i q u i n i n a que e s un q u i m i o t a x i c o d i r e c t e de l o s n e u t r d - f i l o s . J u n t e a e s t o s s i s t e m a s hormona les e x i s t e n unos s i s t e m a s t i s u l a r e s eri t r e l o s c u a l e s hemos de c i t a r l a h i s t a m i n a , que como sabemos e s t a en rel_a - c i d n con l a p r e s e n c i a de c é l u l a s c e b a d a s , d e m o s t r a d a s p e r f a c t a m e n t e a n i v e l d e l c a l l o de f r a c t u r a po r P a r t s c h y B i l l i c h y Lindho lm y c o l s . ( 3 1 8 B ,3 4 9 ) . 99 La h i s t a m i n a t i e n e una a c c i d n p e r m e a b i l i z a d o r a d e l e n d o t e l i o p o r de_s c o n e x id n p a r c i a l de su s c é l u l a s s egun Majno. El enz ima d é g r a d a n t e de l a - h i s t a m i n a , l a h i s t a m i n a d e c a r b o x i l a s a , a p a r e c e e n c o n c e n t r a c i o n e s muy e l e y a das en l o s t e j i d o s de g r a n u l a c i d n j d v e n e s . Hay o t r a s e r i e de f a c t o r e s locra l e s como l a s e r o t o n i n a , e t c . , no b i e n d e f i n i d o s y en cuya d e s c r i p c i d n no - vamos a e n t r a r . Por u l t i m o , ba y que s e h a l a r que l o s l e u c o c i t o s l i b e r a n en s u s l i s i s enzimas l i s o s d m i c o s que c o n t r i b u y e n a l a d e s t r u c c i d n t i s u l a r . La t e r c e r a f a s e de l a i n f l a m a c i d n es l a p r o d u c t i v a . En e l l a encon. - t r a m e s ; 15 un acumulo c e l u l a r p o r e m i g r a c i d n de l a s fo rm as s a n g u i n e a s p o r - d i a p e d e s i s a t r a v é s de l a p a r e d c a p i l a r 25 una l i b e r a c i d n y p r o l i f e r a c i o n de l o s e l e m e n t o s m d v i l e s de l o s - t e j i d o s : h i s t i o c i t o s , m a c r d fa g o s , a s i como una n e o fo r m a c i d n con j u n t i v a . Segun L u b a r sc h l a f a s e p r o l i f e r a t i v a es t a n i m p o r t a n t e que h a c e en - o c a s i o n e s p a s a r d e s a p e r c i b i d a s l a s o t r a s f a s e s , p o r lo que a lg u n o s a u t o r e s n i e g a n su e x i s t e n c i a . Sdnchez Lucas c o n s i d é r a p o r un l ado l a s fo rm as p u r a _ mente c e l u l a r e s y p o r o t r o l a s fo rm as g r a n u l o m a t o s a s , c a r a c t e r i z a d a s p o r su r i c a v a s c u l a r i z a c i d n , que d e t e r m i n a r a n l a f a s e r e p a r a d o r a de l a i n f l a m a c i d n . L u b a r s c h d i s t i n g u e p o r f i n lo que é l l l ama l a n e o f o r m a c i d n i n f l a m a t o r i a de l o s t e j i d o s , es d e c i r , a q u e l l a s m a n i f e s t a c i o n e s c e l u l a r e s que a p a r e c e n en e l c u r s o de una i n f l a m a c i d n y que c o n d u c i r d n a l a s u s t i t u c i d n de l a s p a r t e s - d e s t r u i d a s y a l c i e r r e de l a s s o l u c i o n e s de c o n t i n u i d a d . E s t e p r o c e s o es r i a a c a b a l l o e n t r e l a s i n f i a m a c i o n e s p u r a s y l a r e g e n e r a c i d n t i s u l a r s i n - c u a d ro i n f l a m a t o r i o , lo que denomina l a c u r a c i d n p r i m a r i a . C o n s i d é r a como e je m p lo t i p i c o de n e o fo r m a c i d n i n f l a m a t o r i a l o s t e j i d o s de g r a n u l a c i d n an - t e s s e h a l a d o s , que e s t d n i n t e g r a d o s po r c a p i l a r e s , c é l u l a s mononucleadas r ^ d o n d a s , c é l u l a s p o l i m o r f a s y m a c r d fa g o s . Los v a s o s se fo rm an p o r gemacidn l a t e r a l de v a s o s p r é v i n s , yemas en t o r n o a l a s c u a l e s a p a r e c e n c é l u l a s r e - 100 donda s , p e q u e n a s , a s i m i l a b l e s a l i n f o c i t o s y a f i b r o b l a s t o s j d v e n e s . Apare ­ cen t am b ié n c é l u l a s m u l t i n u c l e a d a s e n c a r g a d a s de l a r e a b s o r c i d n de l o s de tr j_ t u s t i s u l a r e s . Todos e s t o s e l e m e n t o s se d i s p o n e n en t o r n o a l v a s o , cuyo t ira y e c t o d e t e r m i n a r é l a e s t r u c t u r a d e l t e j i d o . Los f i b r o b l a s t o s p ro d u ce n un armazdn c o la g e n o que c o n t r i b u y e a l su_s - t é n de d i c h a e s t r u c t u r a y que en un p r i n c i p l e toma una d i s p o s i c i d n l a x a . Tras e s t e b r e v e esquema de l a i n f l a m a c i d n volvamos a h o r a a a n a l i z a r - lo que t i e n e l u g a r a n i v e l d e l hueso p a r a d a r l u g a r a l a a p a r i c i d n d e l c a l l o de f r a c t u r a , s e h a l a n d o de antemano que l a p r o l i f e r a c i d n c e l u l a r , a s i como — l o s b r o t e s v a s c u l a r e s , dominan c l a r a m e n t e e l c u a d r o . Hematoma. - E s t e se e s p a r c e , como ya s e h a l d b a m o s , h a c i a l a s p a r t e s b l a n d a s vecj_ - n a s a l a s que i n f i l t r a mas o menos, ya q u e , l a capa l i m i t a n t ; de p o r i o s too - se ha r o t o ; p o r o t r o l a d o , e l hematoma i n v a d e en una e x t e n s i d n mayor o menor e l c a n a l m e d u l a r . A n i v e l de l a s p a r t e s b l a n d a s , y en o c a s i o n e s b i e n d i f e r e n c i a b l e de - l a r e a c c i d n p e r i o s t a l , se p r o d u c e un i n f i l t r a d o de g r a n u l o c i t o s que se t r a n s forma r a p i d a m e n t e en un i n f i l t r a d o formado po r dos t i p o s de c é l u l a s : unas pe q u e h a s , r e d o n d a s , de n u c l e o g ran d e y o t r a s m ay o re s , a l a r g a d a s , p o l i m o r f a s . - A pa re ce n a b u n d a n t e s c a p i l a r e s en t o r n o a l o s c u a l e s hay una mayor d e i i s ida d - c e l u l a r . P a ra Ham, y Ham y H a r r i s , e l hematoma es i n u t i l e i n c l u s e a su s o jo s e s p e r j u d i c i a l . Segun e l l e s e l hematoma es una b a r r e r a p a r a l a p r o l i f é r a - c i d n d e l c a l l o , i n t e r p r e t a n e l acumulo de c é l u l a s y v a s o s en su e n t o r n o co_ 101 mo una d i f i c u l t a d de e s t a s e s t r u c t u r a s p a r a l a i n v a s i o n d e l hematoma, que - d e s a p a r e c e po r compres idn no s i r v i e n d o de b a s e a l t e j i d o de g r a n u l a c i d n . - A n i v e l de l a m é d u l a r , p o r e l c o n t r a r i o , es i n v a d i d o p o r l a r e a c c i d n c e l u l a r a l s e r e l un ico camino que e n c u e n t r a e s t a p a r a e x t e n d e r s e . A e s t e pu n to de v i s t a se unen en c i e r t o modo P a r t s c h y B i l l i c h (278 ,349) que d i f e r e n c i a n e l compor tam ien to c e l u l a r a n i v e l de l a m e d u l a r , donde a f i r m a n que e s l a n e c r q s i s de l a medular en s i , y no e l hematoma, l a r e s p o n s a b l e de l a fo rm a c i d n - de una b a r r e r a c e l u l a r de m ac rd fa g o s y de c é l u l a s c e bada s h i p e r p l a s i c a s , — que i n t e r p r e t a n como e le m e n to s f a g o c i t a r i o s de l o s p r o d u c t o s de d e g r a d a c i d n d e l t e j i d o m edu la r . E s t a s c é l u l a s se o r i g i n a r i a n a p a r t i r d e l S .R .E . de l a médula d s e a s a n a , a s i como de c é l u l a s c i r c u l a n t e s . A n i v e l d e l p e r i o s t e o y de l a s p a r t e s b l a n d a s , c o n s i d e r a n que e l hemfi toma es t a m b ié n una b a r r e r a p a r a e l d e s a r r o l l o d e l c a l l o , y se é l i m i n a po r f a g o c i t o s m d v i l e s . Las c é l u l a s c e b a d a s j u g a r i a n a q u i un p a p e l muy i n f e r i o r a l que r e p r e s e n t a n a n i v e l de l a m e d u l a r . D i e t e r i c h (258 ) c o n s i d é r a que e l hematoma es r e a b s o r b i d o p o r un pr_o ceso i n f l a m a t o r i o s i n n in g u n c a r é c t e r e s p e c i a l , con i n f i l t r a c i d n c e l u l a r , - p r o l i f e r a c i d n de h i s t i o c i t o s y v a s o s . Segun d e l Tor to ( 393) a p a r t i r de l a s 72 h o r a s hay una mononucieo_ s i s en t o r n o a l hematoma cuya d e s t r u c c i d n se hace f r a n c a a p a r t i r de 1 c u a r _ t o d i a . J u n to a lo s e l e m en to s m a c r o f d g i c o s a p a r e c e n e le m en to s f i b r o b l d s t i _ COS p o l i m o r f o s que se con e x io n a n e n t r e s i e i n v a d e n e l hematoma a medida — que é s t e d é g é n é r a , h ac iendo l a i n v a s i d n de manera c o n c é n t r i c â . E s t e p r o c e _ so es l e n t o y , en e l an im a l de e x p e r i m e n t a c i d n , l a p e n e t r a c i d n d e l hematoma c o n t i n u a h a s t a e l 20 d i a p o s t f r a c t u r a ; fendmeno que L e r i c h e y P o l i c a r d deno m ina ron c o l o n i z a c i d n c o n e c t i v a d e l c a l l o , c o l o n i z a c i d n que se h a c e a p a r t i r de un t e j i d o de g r a n u l a c i d n que p r o c é d é de t o d o s l o s p u n t o s c i r c u n d a n t e s , - es d e c i r , de l a s p a r t e s b l a n d a s d e l p e r i o s t i o de l o s c a n a l e s de H a v e r s , y - de l a m e d u l a r . ( 3 1 5 ) . 102 Los e s t u d i o s con e l m i c r o s c o p i o e l e c t r o n i c o de P r a s a r d ( 3 5 6 - 7 ) i n d i c a n que l o s m o n onuc le a re s c o n t i e n e n una g r a n c a n t i d a d de l i s o s o m a s que se a b r e n en l a c é l u l a p r o d u c i e n d o una v a c o u l i z a c i o n d e l c i t o p l a s m a con r o t u r a ce lu - l a r y l i b e r a c i d n de l o s enz imas l i s o s d m i c o s a l e x t e r i o r , c o n t r i b u y e n d o a s i a l a d e g r a d a c i d n de l o s d e t r i t u s h e m d t i c o s . Rokanen (38 4 -8 5 ) e n c u e n t r a expe^ r i m e n t a l m e n t e , que l o s a n t i c o a g u l a n t e s p r o d u c e n un r e t a r d e de c o n s o l i d a c i d n de l o s c a l l o s que t i e n e n mds c a r t i l a g e y son mds vo lu m in o so s que l o s c o n t r ^ l e s , deb ido a un mayor d e s p r e n d i m i e n t o p e r i o s t a l p o r l a h e m o r r a g i a fomenta da p o r l o s a n t i c o a g u l a n t e s . Zuckman ( 4 1 1 - 1 3 ) e n 1966 t a m b ié n aboga en l a i d e a de l a c o l o n i z a c i d n c o n e c t i v a d e l hematoma y, aunque no se a p u n t a n i a f a v o r n i en c o n t r a d e l pa p e l a c t i v e d e l hematoma, s e n a l a que segun l a e x t e n s i d n de é s t e , a s i s e r a — d e s p u é s e l volumen d e l c a l l o . A e g e r t e r ( 14 ) da t a m b ié n un p a p e l muy i m p o r t a n t e a l hematoma seiia l a n d e que ya a l a s 6 h o r a s hay una p e n e t r a c i d n d e l mismo p o r f i b r o b l a s t o s y que e l t e j i d o de g r a n u l a c i d n i n v a s o r puede i n c l u s e h a c e r una o s i f i c a c i d n — desmoide l l r e c t a p o r su r i q u e Z a en v a s o s . A p e s a r de lo c u a l , l a r e a b s o r _ c id n complé ta d e l coAgulo es muy l e n t a . J u d e t y J u d e t (291 ) en lOoü s i g n e a L e r i c h e a l a c e p t a r que e l hem^ toma s u f r e una r e a b s o r c i d n i n f l a m a f o r i a , con i n v a s i d n p o r un t e j i d o de g r a _ n u l a c i d n o r i g i n a d o en l a s i n m e d i a c i o n e s . G e i s t , S p e n c e r , Herndon y Chase ( 2 72 ,280 ) a s p i r a n d b de fo rma in_ - t e r m i t e n t e e l hematoma en d e f e c t o s d i a f i s a r i o s c o r t i c a l e s d e l p e r r o , no en­ c u e n t r a n un e f e c t o p o s i t i v o o n e g a t i v e d e l mismo s o b r e l a é v o l u e i d n d e l ca_ l l o . En r e l a c i d n a l p a p e l de l a f i b r i n a en e s t e p r o c e s o , d e l T o r to d i c e - que su r e d se r e f u e r z a p o r una p r e c i p i t a c i d n p o s t e r i o r de a lb u m in a y s i r v e de base a l a i n v a s i d n v a s c u l a r y c e l u l a r , l o que n i e g a Ham. 103 K n o e f l e r ( 34 ) 1967, da a i a f i b r i n a un p a p e l muy i m p o r t a n t e s e h a l a n do que s u d e p d s i t o no se va a h a c e r a l a z a r s i n o que r e s p o n d e a l a e x i s t e r i - c i a de l i n e a s de f u e r z a en l a zona donde t i e n e l u g a r l a misma, s e g u n l o s de_s p l a z a m i e n t o s s u f r i d o s p o r l o s f r a g m e n t o s que d e t e r m i n a r d n l a s t e n s i o n e s l o c ^ l e s . Los t r a b a j o s " i n v i t r o " de e s t e a u t o r y de W eis s , d e m u e s t r a n que l a f i b r i n a se p o l i m e r i z a de a c u e r d o con l a s t e n s i o n e s a l a s que e s t é s o m e t i d a y se o r i e n t a con e l e j e mayor de su m o ld c u la pa ra l e l o a l a s l i n e a s de t e n s i d n , de forma que s i l o s f r a g m e n to s perm anecen a l i n e a d o s , l a f i b r i n a se d e p o s i t a en p a r a l e l o a su a l r e d e d o r y cuando se a n g u l a n , l a f i b r i n a se d e p o s i t a mds - en l a zona cdncava s i g u i e n d o l a s l i n e a s de f u e r z a , lo que se v i s u a l i z a b i e n con l a luz p o l a r i z a d a . P a r e c e que en e s t e p r o c e s o , a l menos " i n v i t r o " , i n _ t e r v i e n e n ademas l a s f u e r z a s de t e n s i d n s u p e r f i c i a l , y a q u e , e l d e p d s i t o de l a f i b r i n a es un fendmeno que se d e s a r r o l l a en s u p e r f i c i e . " I n v i t r o " , l a - o r i e n t a c i d n de l a f i b r i n a s é r i a mas c o m p l ic a d a p o r q u e l o s momentos mecàn icos son mds c o m p le jo s . En l a s zonas de c o n t a c t o e n t r e l o s f r a g m e n t o s , l a compr^ s i d n e j e r c i d a p o r l a s f u e r z a s m u s c u l a r e s hace tomar a l a f i b r i n a una disposJ_ c i d n p e r p e n d i c u l a r a l a s f u e r z a s l o c a l e s de compr; , . i d n . Se d e p o s i t a mas in_ t e n s a m e n t e en l a s zonas cdncavas en l o s c a s o s en e l que e x i s t e una a n g u l ^ - c i d n de l o s f r a g m e n t o s . K n o f l e r c o n s i d é r a que a l menos " i n v i v o " l a e x i s _ t e n c i a de un exceso de f i b r i n a puede s e r p e r j u d i c i a l p a r a e l d e s a r r o l l o cel_u l a r . Los f i b r o b l a s t o s que i n v a d e n l a s r e d e s de f i b r i n a " i n v i v o " lo h ^ - c e n s i g u i e n d o l a d i s p o s i c i d n de l a s m i c e l a s p r o t e i c a s . Al tom ar ag u a d e l mje d i e p a r a s u m é ta b o l i s m e , d e t e r m i n a n una r e t r a c c i d n aün mayor de l a r e d de fd b r i n a aumentando a s i l a s l i n e a s de f u e r z a o r i e n t a d o r a s de l a s c é l u l a s , q u e — m u e s t r a n en l a s zonas l i b r e s de t e n s i d n una fo rma e s t r e l l a d a p o l i m o r f a que - se t r a n s f o r m a en f u s i f o r m e en l a s zonas de t e n s i d n , y se hacen e s f é r i c a s en l a s zonas s o m e t id a s a co m p re s id n . ( 2 2 0 ) . Por u l t i m o , hay que s e h a l a r l o s d a t e s de Moscona, q u i é n i n d i c a que fo rm an v i a s de p e n e t r a c i d n c e l u l a r en e l hematoma, y a q u e , l a s p r i m e r a s cé l_u l a s que e n t r a n s e g r e g a n MPS que s i r v e n de i n f o r m a c i o n q u i m i c a a l a s c é l u l a s s i g u i e n t e s . 104 C o u t e l i e r (2 4 6 ) en 1969 t a m b ié n se a p u n t a a l a i d e a que e l hematoma es i n v a d i d o po r l a r e s p u e s t a p r o l i f e r a t i v a c e l u l a r , p e r o no s o l o l a de t i p o f i b r o b l d s t i c o , s i n o t a m b ié n p o r masas c a r t i l a g i n o s a s . Si e s t o s son l o s p u n t o s de v i s t a s o b r e hematoma como b a r r e r a o s u s _ t r a t o ana to m ico de l a i n v a s i o n c e l u l a r , no t e r m i n a n a h i l a s d i s c u s i o n e s en t o r n o a su f u n c i o n , ya que p a r a a lg u n o s a u t o r e s j u g a r i a un p a p e l i n d u c t o r - de l a o s t e o g e n e s i s . P a p e l p o s t u l a d o po r p r i m e r a vez p o r B i e r ( 228 ) en 1917, q u i é n a f i r m a l a p r o d u c c i o n en e l hematoma de una s u s t a n c i a de a c c i o n hormo­ n a l l o c a l , r e s p o n s a b l e d e l d e s e n c a d e n a m i e n t o de l a r e s p u e s t a c e l u l a r ; pe ro l o s i n t e n t o s r e p e t i d o s de i n y e c t a r e x t r a c t o s d e l hematoma en o t r o s p u n t o s - de l a economia p a r a p r o d u c i r una i n d u c c i d n d s e a , no han t e n i d o r e s u l t a d o p_o s i t i v o en n inguna o c a s i d n . (281) Pasamos a h o r a a l e s t u d i o de l a r e s p u e s t a p r o l i f e r a t i v a c e l u l a r que - da l u g a r a l c a l l o p r o p i a m e n t e d i c h o . Desde a n t i g u o se conoce que hay una - p o r c i d n e x t e r n a d e l mismo en r e l a c i d n con e l p e r i o s t i o y que desde l o s e s t i i d i o s de O i l i e r se c o n s i d é r a como l a p a r t e p r i n c i p a l d e l c a l l o . Por o t r o 1^ do hemos de c o n s i d e r a r e l c a l l o c e n t r a l o m e d u l a r . Ambos en l a s f r a c t u r a s con d e s p l a z a m i e n t o se r e u n e n p a r a d a r li. ; ar a l c a l l o d e f i n i t i v e y a l a con_ s o l i d a c i d n d s e a . La i n f l u e n c i a de l a s c o r t i c a l e s en e l p r o c e s o de repaira - c i d n se ha c o n s i d e r a d o c l a s i c a m e n t e como s e c u n d a r i o y su c o n t r i b u c i d n e r a - v a l o r a d a de manera d i s t i n t a s egun l o s a u t o r e s . El c a l l o p e r i o s t a l . - La v i t o l a c i r c u n f e r e n c i a l e x t e r n a de Duhamel se c o n s i d e r d como e l - f a c t o r p r i n c i p a l d e l c a l l o . ( 2 4 0 , 2 4 5 , 2 5 2 , 2 8 8 , 2 8 9 , 3 2 5 - 8 , 4 0 6 ) . El p e r i o s t i o , como ya hemos s e h a l a d o , a p a r e c e de manera d i f e r e n t e en 105 e l a n im a l en c r e c i m i e n t o y en e l a n im a l a d u l t o . M i e n t r a s p e r d u r a e l c r e c i _ m ien to se d i f e r e n c i a n c l a r a m e n t e dos z o n a s , una e x t e r n a f i b r o s a , d e n s a con c e l u l a r i d a d e s c a s a y f i b r o b l a s t o s a d u l t o s d i s p u e s t o s en p a r a l e l o a l a cortJ_ c a l . Es una capa r i c a en v a s o s . La capa i n t e r n a e s , p o r e l c o n t r a r i o , r ^ ca en c é l u l a s , e s c a s a en f i b r a s l a x a s y con una p r o p o r c i o n menor de v a s o s . Las c é l u l a s que e s t d n en c o n t a c t o d i r e c t o con e l hueso p r e s e n t a n l a m orfo lo g i a t i p i c a d e l o s t e o b l a s t o , y en e l l a han v i s t o l o s a u t o r e s , d e s d e O i l i e r , e l o r i g e n d e l c r e c i m i e n t o a p o s i c i o n a l d e l h u e s o . En e l a d u l t o cambia su a s p e c t o , l a capa e x t e r n a se m a n t i e n e i g u a l , - p e r o l a capa i n t e r n . t " e l cambium" como l a d e no ra ina ra B i l l r o t h , e s d i f i c i J L - mente d e f i n i b l e . La c a p a de c é l u l a s que c u b r e n l a s u p e r f i c i e o s e a han p e r _ d i d o su a s p e c t o o s t e o b l a s t i c o t i p i c o . E s t a s a d o p t a n una fo rma a p l a n a d a fji s i f o r m e y forman un e s t r a t o a p a r e n t e m e n t e d i s c o n t i n u e , s egun d e s c r i b i e r a n - B r u n s , D i e t e r i c h , A sa da , Ham ( 2 1 6 , 2 2 2 , 2 2 8 , 2 5 8 , 3 2 6 ) ̂ e t c . . En l o s e s t u d i o s c l d s i c o s , l a capa i n t e r n a c a m b ia l no ha s i d o a e e p t a d a p o r muchos a u t o r e s como p a r t e i n t é g r a n t e d e l p e r i o s t i o . B i e r (228) M a r t in (326) y t o d a e s a e s c u e l a no da ba n a l p e r i o s t i o un p a p e l o s t e o f o r m a d o r y con s i d e r a b a n que l a s c é l u l a s que a p a r e c f a n s o b r e l a s u p e r f i c i e o s e a se d e b i a a a r t e f a c t o s , l o c a l i z d n d o s e en l o s p u n t o s de p e n e t r a c i d n de l o s v a s o s en l a - c o r t i c a l , a l s e r e l e m e n t o s c e l u l a r e s a com pahan te s de l o s mismos. Las d i s c u s i o n e s c l d s i c a s s o b r e l a c o n t r i b u c i d n d e l p e r i o s t i o a l a o_s t e o g é n e s i s l a podemos d i v i d i r en a u t o r e s que e s t é n a f a v o r de s u p a p e l p r e _ p o n d é r a n t e o n o , y e n t r e l o s que no l e dan v a l o r e n a b s o l u t e -y l o s que l e - dan un p a p e l s e c u n d a r i o . Dichos a u t o r e s e m p le a ro n p a r a s u e s t u d i o l a s t é c _ n i c a s e x p é r i m e n t a l e s de I r a s p l a n t e p e r i o s t a l , o l a p r o d u c c i o n de d e f e c t o s c o r t i c a l e s , d e ja n d o e l p e r i o s t i o o l a m edu la r " i n s i t u " , a p a r t i r de l o s - c u a l e s d e b i a p r o d u c i r s e l a r e g e n e r a c i d n d s e a . Como hemos s e h a l a d o . O i l i e r , B r u n s , K r a f t , Axhausen , c o n s i d e r a b a n a l p e r i o s t i o f u n d a m e n ta l p a r a l a n e o f o r m a c i d n d s e a r e p a r a d o r a . Surge l a d i s eu s i d n a l c o n s i d e r a r su r e a c t i v i d a d en e l a n im a l a d u l t o ; B i l l r o t h d e s c r i b i d - 106 l a capa i n t e r n a c a m b ia l compues ta p o r c é l u l a s con c a p a c i d a d o s t e o b l a s l i c a en e l a n im a l j o v e n , p e r o en e l a d u l t o su e x i s t e n c i a es mas d i f i c i l m e n t e - d e m o s t r a b l e , y l a e s c u e l a de B i e r ( 2 2 8 ) , en e s p e c i a l M a r t i n ( 325-8) y R iess ( 3 7 0 ), c o n s i d e r a b a n que e l cambium no e x i s t e como p a r t e d e l p e r i o s t i o sj^ no que e s t a i n c l u i d o en e l hueso y s é r i a su zona de t r a n s i c i o n h a c i a l a - capa f i b r o s a p e r i o s t a l . Dan p o r e l c o n t r a r i o un g r a n v a l o r a l a m e d u la r , de l a que p a r t i r i a n l o s i n f l u j o s h o rm o n a le s r e s p o n s a b l e s de l a p r o l i f e r a _ c i o n c e l u l a r . P a r a e s t o s a u t o r e s lo mds i m p o r t a n t e es l a a p a r i c i d n de un t e j i d o c o n j u n t i v o j o v e n , que p o r a c c i d n de l o s i n f l u j o s h o r m o n a le s se — t r a n s f o r m a r i a p o r m e t a p l a s i a , en t e j i d o d s e o . Es d e c i r , l o s f i b r o b l a s t o s s o m e t id o s a l e s t i m u l o qu imico se t r a n s f o r m a r i a n en o s t e o b l a s t o s y l o s f a ^ t o r e s mecdnico y v a s c u l a r no t e n d r i a n g r a n v a l o r . La c é l u l a c o n j u n t i v a - j o v e n p r é c i s a c a l c i o y e l c o n t a c t o con e l hueso v i v o p a r a t r a n s f o r m a r s e - en o s t e o b l a s t o , segun M a r t i n . J e s s e n d i c e que l a i m p o r t a n c i a d e l p e r i o s t i o r e s i d e en su a p o r t e - v a s c u l a r . F r e n t e a B i e r , Lexer y su e s c u e l a y V .M i l l i e r ( 2 8 9 , 3 1 6 , 3 3 7 ) , e t c . , conceden un p a p e l p r é p o n d é r a n t e a l p e r i o s t i o con s u s c é l u l a s o s t e o b l a s t i _ cas de l a capa c a m b ia l , que p r o l i f e r a n dando l u g a r a l hueso n u e v o . Lexe r no a c e p t a b a l a e x i s t e n c i a de m e t a p l a s i a s i n o q u e , p a r a é l , l a s c é l u l a s - de e s t i r p e d s e a en r e p o s e s e r f a n l a s r e s p o n s a b l e s , t r a s su p r o l i f e r a c i d n , de l a o s t e o t o g é n e s i s . El p e r i o s t i o j u g a r f a ademds un p a p e l muy i m p o r t a n _ t e p o r e l a p o r t e n u t r i c i o v a s c u l a r , d e s c r i b i e n d o L e x e r l a h i p e r e m i a que - acompana a t o d o c a l l o . E l v a l o r de e s t a s c é l u l a s p a r a l a s f r a c t u r a s es - c l a r o segun Le xe r , ya q u e , e l e s t i m u l o l e s i o n a l d e s e n c a d e n a una r a p i d a — p r o l i f e r a c i d n c e l u l a r que no es nunca t a n i n t e n s a en l o s c a sô s de i n j e r t o d s e o . Los t r a b a j o s de Axhausen y B a s s e t t (218 ) s e h a l a n l a i m p o r t a n c i a de l a p e r s i s t e n c i a de l a s c é l u l a s c a m b i a l e s p a r a l a o s t e o g é n e s i s en e l - a u t o t r a s p l a n t e , cuya v i t a l i d a d c o n t r i b u y e n a m a n t e n e r . Axhausen en 1956, p o s t u l a b a l a e s t i m u l a c i d n de l a o s t e o g é n e s i s en e l h u é s p e d a p a r t i r de 1 - i n j e r t o , p o r c o n t a c t o e n t r e l a s p r o l o n g a c i o n e s de ! os o s t e o b l a s t o s d e l i n j e r t o con l a s c é l u l a s c o n j u n t i v a s j d v e n e s de su l e c h o r e c e p t o r . ( 2 1 9 , 2 8 8 ) . 107 Cohen y L a c r o i x ( 245 ) d i c e n que l a capa c a m b ia l r e s p o n d e en e l i n j e r t o i g u a l que en l a s f r a c t u r a s . B l a i s d e l l ( 2 2 9 ) d i c e que e l p e r i o s _ t i o t i e n e un p a p e l c l a r a m e n t e o s t e o g é n i c o . Laxer a c e p t a b a t a m b ié n un p a p e l o s t e o f o r m a d o r a p a r t i r de l a s o t ra s c é l u l a s de l a s s u p e r f i c i e s o s e a s , e s d e c i r , d e l e n d o s t i o p r i n c i p a l m e n t e , ya que l a f u n c i o n de l o s c a n a l e s de Havers f u e poco c o n o c id a p o r l o s au_ t o r e s c l a s i c o s . En l a c u r a c i o n de l o s d e f e c t o s o s e o s B i e r daba un p a p e l m£Cs i m p o r t a n t e a l a s c é l u l a s de l o s c a n a l e s de H a v e r s , c o n s i d e r a n d o que - s é l o l a o s t e o g é n e s i s de e s e o r i g e n e r a capaz de p r o d u c i r una " r e s t i t u t i o ad i n t e g r u m ". Lo mismo que M a r t i n , Lexe r a c e p t a que l a m edu la r es s iem _ p r e o s t e o f o r m a d o r a m i e n t r a s no se i n t e r r u u p a su c i r c u l a c i o n o se someta - a i n f l u j o s m ecén ic os n o c i v o s . (151B, 2 2 7 , 2 4 0 , 2 5 2 , 2 8 5 , 2 9 1 , 3 0 1 - 3 , 4 1 L - 1 4 ) . B a u e r , Konig ( 222 ,303 ) s e h a l a n un p a p e l p r é p o n d é r a n t e a l t e j i _ do m e d u la r a l que dan una f u n c i o n o r g a n i z a d o r a de 1 r e g e n e r a d o o s e o , en - e l s e n t i d o de que su a d i c i o n p ro d u c e s i e m p r e un r e g e n e r a d o de mayor c a l i _ d a d , como ya h a b i a s e h a l a d o B i e r . A p e s a r de l o s d a t o s de K a tzenhe im ( 292 ) l o s t r a b a j o s de B a u e r , Koch ( 301-2 ) , e t c . , i n d i c a n que en l a s f r a c t u r a s l a u n i o n d e l c a l l o pe r i o s t a l con e l m edu la r o r i g i n a e l c a l l o i n t e r m e d i a r i o , que a p a r e c e a n i _ v e l d e l t r a z o e n t r e l a s c o r t i c a l e s . M e lche r ( 3 3 1 - 2 ) s e h a l a en e s t e s e n t i _ do que e l r e l l e n o de l o s d e f e c t o s c o r t i c a l e s se h a c e a p a r t i r de l a medu_ l a r , p e r o que e l c a l l o p e r i o s t a l t a m b ié n i n t e r v i e n e , de form a que cu b re - a l o t r o y p e r m i t e l a r e a b s o r c i d n de sus p o r c i o n e s e x u b é r a n t e s . B a s s e t t - ahade l a p r o l i f e r a c i o n o r i g i n a d a en l o s c a n a l e s de Havers y s u g i e r e que - en e l cabo p r o x im a l l a r e a c c i d n es mas r d p i d a que en e l cabo d i s t a l . Zuckmann (412-14) y c o l s , c o n s i d e r a n t a n t o a l cambium p e r i o s t a l cjq mo a l a m edu la r f u n d a m e n t a l e s , y a f i r m a n que en l a s f r a c t u r a s e l p e r i q s - t i o t i e n e mds i m p o r t a n c i a d u r a n t e l a s f a s e s p r é c o c e s d e l c a l l o . No adqp t a n c o n c l u s i o n e s en lo que se r e f i e r e a l o s m e d i a d o re s q u i m i c o s de l a r e ^ p u e s t a . 108 En l a a c t u a l i d a d to d o s l o s a u t o r e s , como ya hemos r e f e r i d o , a c e p t a n l a e x i s t e n c i a en e l an im a l a d u l t o de una c a p a c a m b ia l de c é l u l a s q u e , s^ - gün P r i t c h a r d ( 4 3 ) , p o d r i a n c o n s i d e r a r s e como o s t e o b l a s t o s en r e p o s e , o — p r e o s t e o b l a s t o s s egun Rasmussen, que t r a s l a p r o d u c c i o n de l a f r a c t u r a , — t a n t o en e l a n im a l j o v e n como en e 1 a d u l t o p r o l i f e r a n . En l o s e s t u d i o s s ^ r i a d o s de D i e t e r i c h , Asada , Tonna ( 3 8 8 - 9 1 ) , e t c . , l a r e s p u e s t a c e l u J u r apa r e c e d e f i n i d a c l a r a m e n t e a l a s 16 h o r a s de l a f r a c t u r a , y en lo s d i a s sj^ - g u i e n t e s aumenta e l acumulo c e l u l a r que s e c o lo c : e n t r e l a c o r t i c a l y l a - capa f i b r o s a e x t e r n a d e l p e r i o s t i o . Algunos a u t o r e s c l a s i c o s han i n t e r p r e t a d o que l a s c é l u l a s r e l l e n a b a n e l e s p a c i o c r e a d o a l d e s g a r r a r s e y s e p a r a r se e l p e r i o s t i o , en t a n t o q u e , l a m ayor ia en l a a c t u a l i d a d c o n s i d e r a n que e s t a s c é l u l a s , p r o d u c t o de l a p r o l i f e r a c i o n p e r i o s t a l , s e p a r a n a c t i v a m e n t e e l p e r i o s t i o de l a c o r t i c a l . El o r i g e n de e s t a s c é l u l a s ha s i d o uno de l o s mas d e b a t i d o s en l a - l i t e r a t u r a , h a s t a que ha e x i s t i d o ] a p o s i b i l i d a d de i n t r o d u c i r m a r c a d o r e s c e l u l a r e s que p e r m i t a n t r a z a r e l d e v e n i r de una s e r i e de c é l u l a s en una pô b l a c i o n en c r e c i m i e n t o , como es e l c a l l o . Asada (216) en sus e s t u d i o s s e r i a d o s e n c u e n t r a que l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r es m a n i f i e s t a h a c i a l a s 15 h o r a s t r a s l a f r a c t u r a y s u r g e , segun é l , de l a s c é l u l a s de l a c a p a c a m b i a l , donde se a p r e c i a n a b u n d a n te s m i t o s i s . E_s t a capa va c r e c i e n d o en a l t u r a h a s t a que a l o s 2 o 3 d i a s se d i f e r e n c i a en una zona i n t e r n a y o t r a e x t e r n a fo rm ada p o r v a r i a s capas de c é l u l a s -3 o 4 - f u s i f o r m e s , p a r a l e l a s a l a c o r t i c a l , en l a s c u a l e s s i e m p re e s p o s i b l e a p r e - c i a r l a p r e s e n c i a de m i t o s i s , en e s p e c i a l h a s t a e l 65 d i a e n . e l que e l c_a - l l o e s t a muy d e s a r r o l l a d o . P a r a Asada , l a r e a c c i o n no a p a r e c e p o r i g u a l a - lo l a r g o d e l p e r i o s t i o , en l a s f r a c t u r a s c o m p l é t a s no se m a n i f i e s t a h a s t a - una c i e r t a d i s t a n c i a d e l t r a z o de f r a c t u r a porquu a su n i v e l e l p e r i o s t i o - e s t a d e s p r e n d i d o y no m u e s t r a a c t i v i d a d c e l u l a r , e s l a zona que c o r r e s p o n d e a l a r e a de n e c r o s i s c o r t i c a l . A p a r t i r de a h i y a e s c a s a d i s t a n c i a , a l c a n z a l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r un màximo, p a r a d i s m i n u i r en d e c l i v e a lo l a r g o de l a d i a f i s i s h a c i a sus e p i f i s i s . Se puede e n c o n t r a r m i t o s i s en e l p e r i o s t i o 109 engrosado a b a s t a n t e d i s t a n c i a d e l t r a z o de f r a c t u r a . Los e s t u d i o s de Ham ( 277 ) en 1930 i n d i c a b a n que l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r ademds de c r e c e r en e s p e s o r t e n d r a a d i r i g i r s e h a c i a e l hematoma, de forma que l o s acümulos c e l u l a r e s s u b p e r i o s t a l e s de ambos f r a g m e n t o s - f r a c t u r a r i o s t e n d i a n a r e u n i r s e . Segun Rokannen, D u r i e z , C o u t e l i e r , e t c . ( 260 ,384 ) , mds i m p o r t a n t e que l a c o l o n i z a c i d n d e l hematoma, e s l a pro l j_ f e r a c i d n c e l u l a r d e s c r i t a . T ras l a i n t r o d u c c i d n de l o s i s d t o p o s en l a c l i n i c a , s e h a n u t i l i z a do desde Bohr ( 230 ) l o s mismos en e l e s t u d i o de l a c i n e t i c a c e l u l a r d e l c a l l o . ( 2 2 3 ,2 3 0 ,3 3 6 ) P a r a e l e s t u d i o de l a r e s p u e s t a p e r i o s t a l , Tonna ( 388 ) , H i l d e - b r a n d , Manabe, e t c . , ( 2 9 6 , 3 2 4 , 3 9 0 ) emplean l a t i m i d i n a t r i t i a d a con l a que h a n po d id o o b s e r v a r que a p a r t i r de l a s 16 h o r a s t r a s l a f r a c t u r a . Ira b i a un aumento d e l marcado c e l u l a r p e r i o s t a l que m o s t r a b a su maximo a l a s 32 h o r a s , momento en e l c u a l se marca e l 25% de l a s c é l u l a s p e r i o s t a l e s . - E s t e m a r c a j e no se l i m i t a a l a zona p e r i f r a c t u r a r i a s i n o que se e x t i e n d e a l o l a r g o de t o d a l a d i d f i s i s , con menor i n t e n s i d a d , h a s t a e l 5- d i a . - A n i v e l de l a f r a c t u r a d i sm inuye e l marcado l e n t a m e n t e , d e form a que a l o s 14 d f a s s o l o quedan marcadas e l 6%o de l a s c é l u l a s . Es de s e h a l a r que en e l p e r i o s t i o idemne d e l an im a l j o v e n se marca l a c apa c a m b ia l h a s t a e l f_i n a l de 1 c r e c i m i e n t o , en t a n t o que l a capa e x t e r n a se marca muy r a r a m e n t e . En e l a n im a l a d u l t o se m a r c in en s i t u a c i o n e s n o r m a l e s s o l o e l 0 ,7% de l a s c é l u l a s de l a capa c a m b i a l . Después d e l t r a u m a t i s m e , en l o s a n i m a l e s — a d u l t o s Tonna (389) d i c e que se p r o d u c e l a misma r e s p u e s t a c e l u l a r que - en e l a n im a l j o v e n , pe ro de menor i n t e n s i d a d l l e g a n d o s o l o a l 18% e l nüme r o de c é l u l a s marcadas y en l u g a r de a l c a n z a r s e e l mdximo a l a s 32 h o r a s , s u c e d e a l 45 d i a . E s to s e s t u d i o s d e j a n , p u e s , f u e r a de t o d a duda que l a capa i n t e r n a d e l p e r i o s t i o es l a r e s p o n s a b l e de l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r o s t e o f o r m a d o _ r a . Los e s t u d i o s h i s t o l o g i c o s s e h a l a n que l a c é l u l a que se marca en l a s 110 p r i m e r a s f a s e s y capas müs e x t e r n a s , e s m o r f o l d g i c a m e n t e muy s i m i l a r a - l o s f i b r o b l a s t o s y p r é s e n t a una s e r i e de t r a n s i c i o n e s h a c i a e l o s t e o b l a s ­ t o t i p i c o de l a s capas mds i n t e r n a s . Se d i f e r e n c i a de l o s f i b r o b l a s t o s - de l a c apa p e r i o s t a l e x t e r n a , en que e s t o s no c a p t a n e l i s o t o p e en n in g u n momento después de l a f r a c t u r a . M o r f o l é g i c a m e n te l a c é l u l a en r e p o s e y - e l f i b r o b l a s t o no son c l a r a m e n t e d i f e r e n c i a b l e s . E s t a c é l u l a de cuyo oirâ gen v o lv e r e m o s a h a b l a r p o s t e r i o r m e n t e , se l a conoce con nombres d i v e r s e s , b i e n c é l u l a o s t e o p r o g e n i t o r a de Ham, p r e o s t e o b l a s t o , e t c . . La m a y o r i a - de l o s a u t o r e s c o i n c i d e n en que se t r a t a de una c é l u l a mesenquimal p l u r i _ p o t e n c i a l , que e n t r a en m i t o s i s d e s p u é s d e l t r a u m a t i s m e dando l u g a r a l o_s t e o b l a s t o en p a s o s s u c e s i v o s , e s d e c i r , l a c é l u l a o s t e o p r o g e n i t o r a d a r i a l u g a r a l p r e o s t e o b l a s t o y é s t e a l o s t e o b l a s t o , e l c u d l , como y a sabemos , a l q u e d a r i n c l u i d o en l a m a t r i z o s e a se t r a n s f o r m a en o o t e o c i t o . Tonna - (391 ) en e s t u d i o s de p e r f u s i o n c o n t i n u a con t i m i d i n a , e n c u e n t r a dos t_i - pos de p o b l a c i o n e s c e l u l a r e s en e l cambium, un g ru p o que se d i v i d e y o t r o que permanece e s t a t i c o a lo l a r g o de t o d o e l p r o c e s o de e v o l u c i o n d e l c^ l l o . E s t a c é l u l a no s o lo e s capaz de d a r l u g a r a l o s o s t e o b l a s t o s , s i n o que t a m b ié n p ro d u c e c o n d r o b l a s t o s , como ya se conoce de sde l o s e s t u d i o s - c l a s i c o s . Manabe, Shima y Yamanuchi ( 324 ) 1975, con a z u f r e marcado - y con p r o l i n a y t i m i d i n a t r i t i a d a , p a r e c e n d e m o s t r a r que l a c é l u l a mesen_ q u im a l se d i v i d e de una fo rm a mâs r d p i d a en l a s f a s e s mas p r é c o c e s t r a s - l a f r a c t u r a . A l a s 24 h o r a s e l 15% de l a s c é l u l a s e s t ü n m a r c a d a s , a l c a n _ zandb e l 90% a l a s 21 h o r a s p o s t f r a c t u r a , con lo que s o l o h a b r i a un 10% - de c é l u l a s de l a capa c a m b ia l que p e r m a n e c e r i a n en e s t a d o GO. E l a n é l i - s i s d e l c i c l o de r e p r o d u c c i o n c e l u l a r a l a s 24 h o r a s p o s t f r a c t u r a , mue^ - t r a , s e g u n Manabe y c o l s . , que e l t iempo de g e n e r a c i o n , G . T . , e s de 23 horas y e l de d u p l i c a c i o n d e l A .D .N . , l a f a s e S, e s de 2 h o r a s . La f a s e p o s t d u p l i c a c i o r i o G2, a b a r c a t a m b i é n 2 h o r a s y e l i n d i c e - de m i t o s i s e s 0 , 0 7 , s i e n d o e l t i em po de l a m i t o s i s 1 , 6 h o r a s . G} c o r r e s _ ponde a 17 ,4 h o r a s p a r a l a s c é l u l a s o s t e o p r o g e n i t o r a s . A l a s dos semanas 111 ha d i s m i n u id o e l t a n t o p o r c i e n t o de c é l u l a s m arcadas de fo rm a que a l a s 12 h o r a s , t r a s l a a d m i n i s t r a c i o n d e l i s o t o p e , e l p e r c e n t a g e es s é l o d e l - 25%. La f a s e G.T. ha d i s m i n u i d o a 15 h o r a s en t a n t o que l a f a s e S ha s u _ b i d e a 3 y l a f a s e G^ queda en 14 ,4 h o r a s . A s i , aunque e l t i e m p o de ge n e r a c i o n c e l u l a r h a d i s m i n u i d o , e l numéro de c é l u l a s que se d i v i d e n ha — d e s c e n d i d o c l a r a m e n t e , lo que e s t d en r e l a c i o n con l a s n e c e s i d a d e s d e l mn mento p a r a l a r e p a r a c i d n de l a f r a c t u r a , que de a l g u n a manera se a u t o c o n _ t r o l a y r i g e l a p o b l a c i d n c e l u l a r i n c o r p o r a d a a l a r e p a r a c i d n f r a c t u r a r i a . Segun Manabe l o s o s t o b l a s t o s son t a m b ié n c a p a c e s de d i v i d i r s e y - m u e s t r a n un c i c l o c e l u l a r de g e n e r a c i o n d i f e r e n t e a l de l a s c é l u l a s o s t e q p r o g e n i t o r a s , que e s t o s a u t o r e s l l am an m e s e n q u i m a l e s . E s to va en c o n t r a de l a o p i n i d n de l a m ayo r ia de l o s a u t o r e s . Manabe e n c u e n t r a a l a semana un t a n t o p o r c i e n t o de o s t e o b l a s t o s en d i v i s i d n , p e r o no e s t a b l e c e una — c l a r a d i f e r e n c i a e n t r e l o s p r e o s t e o b l a s t o s p r o p i a m e n t e d i c h o s y l o s o s t e o b l a s t o s en l a t e r m i n o l o g i a a c e p t a d a p o r l o s demas a u t o r e s . P a r a e s t a c é _ l u l a mds d i f e r e n c i a d a que aün se d i v i d e , l a f a s e Gq es de 20 h o r a s , l a f ^ se S c o r r e s p o n d e a dos h o r a s , s i e n d o l a f a s e G2 de s e i s h o r a s y e l t iempo de m i t o s i s 0 , 4 h o r a s , a s i como G% 1 , 6 . A l a s dos semanas , t r a s l a f r a c _ t u r a , e l p o r c e n t a j e de c é l u l a s m arcadas s d l o es d e l 31% a l a s 18 h o r a s — t r a s l a a d m i n i s t r a c i d n d e l i s d t o p o con una f a s e G.T . de 21 h o r a s y una f ^ se 8: de 3 h o r a s a s i como una G^ de 1 1 , 6 . En e s t e grupo c e l u l a r c a e , como en l a s c é l u l a s p r o g e n i t o r a s , e l nümero de c é l u l a s en d i v i s i d n , p e ro caen p r o p o r c i o n a l m e n t e menos. La d i f e r e n c i a en e l c i c l o c e l u l a r marca una s e _ p a r a r a c i d n c l a r a de l a s dos p o b l a c i o n e s c e l u l a r e s y e l paso p a u l a t i n o de l a s c é l u l a s en d i v i s i d n a l a s c é l u l a s f u n c i o n a n t e s . ( 2 4 , 4 0 , 4 1 , 4 5 , 4 9 , 5 3 ) Por ü l t i m o d i c e Shima que de l a s c é l u l a s c a r t i l a g i o n o s a s d e r i v a d a s de l a s c é l u l a s m esenqu im a les i n d i f e r e n c i a d a s , a l g u n a s a p a r e c e n m arcadas - en l a p r i m e r a semana t r a s l a f r a c t u r a , p e r o no m u e s t r a n m i t o s i s . C o r r o b o ra n e s t o s d a t o s l o s e s t u d i o s de Gudmunson y Semb ( 2 5 4 -5 5 ) - que d e m u e s t r a n que t r a s l a f r a c t u r a , en l a s p o b l a c i o n e s c e l u l a r e s d e l c^ 112 l l o , hay p r im e ro un aumento d e l A.D.N. s e g u id o d e s p u é s de un aumento d e l A.R.N. El aumento d e l A.D.N. se m a n t i e n e d u r a n t e l a s t r e s p r i m e r a s sema_ n a s , p a r a m o s t r a r a l o s 30 d f a s un v a l o r c e rc a n o a l n o r m a l . El mdximo se a l c a n z a e n t r e e l 65 y e l 14 d f a y es 2 a 3 v e c e s su v a l o r n o r m a l . D is m i_ nuye d e spués de manera p r o g r e s i v a , p e ro a l o s 60 d f a s aün se d e m u e s t r a — una a c t i v i d a d a u m en tada , s e n a l de que se m an t iene l a p r o l i f e r a c i o n c e l u - l a r d u r a n t e e l rem ode la do o s e o . El A.R.N. aumenta p o r 4 , y a l c a n z a su mdximo e n t r e 9 y e l 21 d f a s p o s t f r a c t u r a . E s t o s d a t o s c o n f i r m a n que en l a s f a s e s mds p r é c o c e s ha y una g r a n p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r que d i sm in u y e d e s p u é s p a r a s e r s u s t i t u i d a po r una f a s e de mayor a c t i v i d a d f u n c i o n a l , como i n d i c a r f a e l aumento d e l A.R.N y su c onoc ida r e l a c i o n con l a s f n t e s i s p r o t e i c a , q u e e s t a r f a p o r t a n t o tarn b i é n aumentada . Antes de c o n t i n u a r con e l e s t u d i o d e l c a l l o , vamos a r e f e r i r n o s a l a s t e o r f a s de D i e t e r i c h , J u d e t , T r u e t a , ( 2 5 8 , 2 9 1 , 3 9 5 - 9 9 ) , que s e h a l a n - como o r i g e n de l a c é l u l a o s t e o p r o g e n i t o r a a l e n d o t e l i o v a s c u l a r , d e l cud l se l i b e r a r f a n l a s c é l u l a s p r o d u c t o r a s d e l t e j i d o de g r a n u l a c i d n r e p a r a d o r . D i e t e r i c h (258 ) en 1926 en su e s t u d i o s o b r e e l c a l l o , de m os t rd - t a m b ié n en é s t e l a s e p a r a c i d n de l a capa f i b r o s a d e l p e r i o s t i o de l a c o r ­ t i c a l , po r un acumulo c e l u l a r que puso en r e l a c i d n d i r e c t a con l o s v a sos y s e h a l d que en l a capa mas i n t e r n a d e l p e r i o s t i o h a b f a un g r a n aumento - de l o s v a s o s , de c a p i l a r e s , l o que d i s c u t e Asada d i c i e n d o q u e , con l a s — t é c n i c a s e n to n c e s en u s o , d i c h o s v a s o s s d l o e r a p o s i b l e v i s u a l i z a r l o s a p a r t i r d e l 25 a l 45 d f a p o s t f r a c t u r a . D i e t e r i c h a f i r m a que hay una ne^ - f o r m a c i d n de v a s o s p o r b r o t e s de yemas c a p i l a r e s a p a r t i r de l o s p r e v r a - mente e x i s t e n t e s , que se r o d e a n de c é l u l a s que en l a v e c i n d a d de l o s capi_ l a r e s se a s em e ja n mucho a l a s c é l u l a s e n d o t e l i a l e s de l a s que d e r i v a n y a medida que se van s e p a r a n d o de l o s v a s o s se t r a n s f o r m a n , se h a c e n mas — g r a n d e s , o v o i d e a s y toman a s p e c t o de o s t e o b l a s t o r o d e ü n d o s e p o s t e r i o r m e n _ t e de l a m a t r i z d s e a c o r r e s p o n d i e n t e . D i e t e r i c h d e s c r i b e e l mismo p r o c e _ 113 so en l a s p a r t e s b l a n d a s p e r i f r a c t u r a r i a s , y s u g i e r e que en e l c a l l o , — i g u a l que en l e s p r o c e s o s i n f l a m a t o r i o s , como y a s e n a l a b a Marchand, hay - una p r o l i f e r a c i d n c a p i l a r cuyas c e l u l a s e n d o t e l i a l o s p e r m i t o s i s l i b e r a n c e l u l a s mesenquimales e m b r i o n a r i a s p l u r i p o t e n t e s de l a s que se o r i g i n a - r i a n p o r m adu rac idn l o s o s t e o b l a s t o s . A l lgdw er (211 A) en 1955, e s t u d i a n d o e l numéro de m i t o s i s en l a r_e g e n e r a c i d n de l a s h e r i d a s , p o s t u l a , s i g u i e n d o a Maximow, que h a s t a l a s 36 h o r a s e l i n f i l t r a d o c e l u l a r se p r o d u c e po r i n v a s i d n a p a r t i r de c é l u l a s - c i r c u l a n t e s , m o n o c i to s , que t r a s d i a p e d e s i s se t r a n s f o r m a r i a n " i n s i t u " en f i b r o b l a s t o s . So lo a p a r t i r de e s e momento c o m e n z a r i a l a p r o d u c c i d n - r e a l de c é l u l a s p o r e l t e j i d o . En 1973 A l lg o w e r d i c e que no se puede — a f i r m a r c l a r a m e n t e s i l a s m i t o s i s que se d e s c r i b e n en e l acumulo i n f l a m a _ t o r i o son de l a s c é l u l a s l o c a l e s o l a s de l o s m o n o c i to s e m i g r a d o s , como - h a b i a p o s t u l a d o p r i m i t i v a m e n t e . T r u e t a (253 ) s u s c r i b e e s t a i d e a y c o n s i d é r a que en e l c a l l o lo - mas i m p o r t a n t e es l a p r o l i f e r a c i d n a n g i o b l é s t i c a , que se gun Anderson en - l a v i d a p o s t e m b r i o n a r i a se hace po r gemacidn s d l i d a y p e rm e a c i d n postée — r i o r d e l b r o t e a s i fo rm ado . Los e s t u d i o s de T r u e t a con e l M.E. y de Ri - g a i con i s d t o p o s p a r e c e n d e m o s t r a r que hay m i t o s i s de l a s c é l u l a s e n d o t e _ l i a l e s , cuyos e l e m e n to s h i j o s e m ig ran en p a r t e a l t e j i d o v e c i n o , donde — p o r p a s e s i n t e r m e d i o s l l e g a n a l o s t e o b l a s t o . S e n a l a n que l a s c é l u l a s de e s t a cadena permanecen en c o n t a c t e a t r a v é s de l a s p r o l o n g a c i o n e s c e l u l a _ r e s . Hay que s e h a l a r p o r u l t i m o que T r u e t a (268 ) c o n s i d é r a que l a muer_ t e c e l u l a r y e l c a r t i l a g e h i p e r t r d f i c o d e g e n e r a d o , t i e n e n una a c c i d n q tû m i o t a x i c a soUre e l b r o t e v a s c u l a r . Con A l lg o w e r podemos p e n s a r que l a s - dos f u e n t e s c o n t r i b u y e n a l a r e s p u e s t a p r o l i f e r a t i v a c e l u l a r . (211 B) Hay que c i t a r , a dem as , e l t r a b a j o de Kahn y Simmons (292 B ) que — han a n a l i z a d o e l c om por tam ien to c e l u l a r en i n j e r t o s d s e o s h e t e r d l o g o s im p l a n t a d o s en a n i m a l e s cuyos fendmenos i n m u n i t a r i o s no e s t a n d e s a r r o l l a d o s , 114 y donde e l i n j e r t o puede v a s c u l a r i z a r s e p o r v a s o s d e l h u é s p e d . E s t e s a u t ^ r e s han e n c o n t r a d o que l a s c é l u l a s d e l p e r i o s t i o y d e l e n d o s t i o en e l iri - j e r t o a s i m i l a d o p r o v i e n e n d e l d a d o r , en t a n t e que l a s de l a c a v i d a d med_u - l a r y l a s m i e l o p o y e s i s p r o c e d e n d e l h u é s p e d . Las c é l u l a s c l a s t i c a s t i e n e n un o r i g e n d o b le e i n c l u s e s é r i a p o s i b l e l a f u s i o n de c é l u l a s de l o s dos — o r i g e n e s p a r a d a r l u g a r a l a s m u l t i n u c l e a d a s . En e l e s t u d i o de l a s c é l u l a s o s e a s i n d i f e r e n c i a d a s p e r i v a s c u l a r e s , Cameron ( 2 0 ) , s i g u i e n d o a S c o t t ( 49 ) , d i s t i n g u e dos t i p o s ; l a s c é l u l a s A é q u i v a l e n t e s a o s t e o p r o g e n i t o r a s de Young, que d e s d e l a s c é l u l a s fusj_ - fo rm es p e r i v a s c u l a r e s con g r a n n u c l e o y pocos g r a n i t o s , se t r a n s f o r m a n en c é l u l a s de mayor t a m a n o , con un r e t i c u l e e n d o p la s m ic o muy a b u n d a n te que - a s i e n t a s o b re l a t r a b e c u l a o s e a y c o r r e s p o n d e n a l o s o s t e o b l a s t o s . Vamos a e s t u d i a r a h o r a lo que s ucede con l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r - en l a s d i f e r e n t e s f a s e s p o r l a s que p a s a e l c a l l o . Asada d i s t i n g u e una f ^ se p r o l i f e r a t i v a , una de d i f e r e n c i a c i o n , una de rem o ldeado y una de r e g r e _ s i o n . D u r i e z (260 ) lo s i m p l i f i c a c o n s i d e r a n d o una f a s e de u r g e n c i a y una f a s e p o r t e r i o r de r e t o r n o a l a n o r m a l i d a d , s i e n d o e l c a l l o un p r o c e s o b i f a s i c e . En l a s p r i m e r a s 12 semanas hay un aumento de l a masa o s e a que en e l p r i m e r mes e s t a poco m i n e r a l i z a d a . H a s t a l a s 22 semana p o s t f r a c t u r a se - p r o d u c e n l o s fenomenos de r e m o d e l a m i e n t o . Desde e l p u n t o de v i s t a de l a - s o l i d e z d e l c a l l o . F a l k e n b e r ( 317) e n c u e n t r a que l a r e s i s t e n c i a a l a t e n s i o n c r e c e muy d e p r i s a , p e r o l a r e s i s t e n c i a e s p e c i f i c a o s e a aum enta mucho mas l e n t a m e n t e . Sabemos que l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r que comienza h a c i a l a s 16 im - r a s a l c a n z a su méximo a l a s 32 h o r a s , p e r o e l c a l l o s i g u e c r e c i e n d o h a s t a e l 65 a 7 - d i a s egun Asada , y p a r a Ennenkin a l c a n z a e l vo lumen maximo h ^ - c i a e l 10 6 12 d i a , aumentando h a s t a e l 20 d i a ap rox im adam en te s egun d e l - T o r t o . Ya a l o s 2 d i a s comienzan l o s p r o c e s o s de d i f e r e n c i a c i o n en e s a ma s a c e l u l a r , se s é p a r a una capa e x t e r n a , fo rm a dora de c é l u l a s , i n t e g r a d a - p o r e l e m e n t o s f u s i f o r m e s , c o l o c a d a s en p a r a l e l o a l a c o r t i c a l y una capa 115 i n t e r n a de c é l u l a s c l a r a s , r e d o n d e a d a s . La d i f e r e n c i a e s t é p l e n a m e n t e dm s a r r o l l a d a h a c i a e l c u a r t o d i a . No s o l o hay v a r i a c i o n e s en e l t i e m p o s ^ no t a m b ié n en e l e s p a c i o , a s i Bruns a f i r m a que l a s p a r t e s de l a r e a c c i o n p e r i o s t a l a l e j a d a s d e l f o c o , se t r a n s f o r m a n d i r e c t a m e n t e en hueso t r a b e c u l a r como c o n f i r m a Zuckman y d i c e que e s t a o s i f i c a c i o n c o n j u n t i v a se p ro d u ce s i e m p re en t o r n o a l o s v a s o s . Por o l c o n t r a r i o , en l a zona més p rox im a a l t r a z o de f r a c t u r a l a masa c e l u l a r se p r é s e n t a en un p r i n c i p l e am or fa y d e s p r o v i s t a de v a s o s q u e , segun Ham, quedan en l a s capas més e x t e r n a s o - en i n m e d ia t o c o n t a c t e con l a a n t i g u a c o r t i c a l donde t a m b ié n es p o s i b l e — v e r l a a p a r i c i o n de hueso de s m o id e . P a r a Ham l a o s i f i c a c i o n desmoide — t i e n e l u g a r p o rque l a s c é l u l a s e s t a n en c o n t a c t e con e l hueso a n t i g u o y - hay v a s o s . En l a masa c e n t r a l l a s c é l u l a s toman un a s p e c t o redondeado y se r o d e a n de una m a t r i z o r g é n i c a m e t a c r o m a t i c a que a c e p t a l a s t i n c i o n e s - p r o p i a s d e l c a r t i l a g e . P r im e ro t i e n e l u g a r l a a p a r i c i o n de un t e j i d o c o n d r o b l é s t i c o que - con e l paso de l o s d i a s se t r a n s f o r m a en c a r t i l a g e maduro seme j a n t e a l — c a r t i l a g e h i a l i n o y d e s p r o v i s t o de v a s o s ; su d e s a r r o l l o es c l a r o a l 45 - d i a p a r a B r i g h t o n (235 ) . E s t a masa c a r t i l a g i n o s a que c r e c e p o r aposj_ - c i o n desde e l p e r i o s t i o c o n f l u y e , s egun Ham y C o u t e l i e r , con e l m angu i to c a r t i l a g i n o s o d e l o t r o ex tr em e f r a c t u r a r i o p a r a d a r l u g a r a una s o l d a d u r a p r o v i s i o n a l de l a f r a c t u r a . E s t e s uc ede u n t e s de que se r e s t a b l e z c a l a - c o n t i n u i d a d d e l p e r i o s t i o p r o p ia m e n t e d i c h o , i n f i l t r a n d o e l hematoma. La i n v a s i o n d e l hematoma p o r e l t e j i d o de g r a n u l a c i o n de l a s p a r t e s b l a n d a s v e c i n a s , c o n t r i b u y e a l a d i f e r e n c i a c i o n c a r t i l a g i n o s a . E x te rn a m e n te a l c a r t i l a g e , t i e n e l u g a r una nu e v a f a s e de o s i f i c ^ - c i o n t r a b e c u l a r p o r t r a n s f o r m a c i o n d i r e c t a de l a s c é l u l a s en o s i o o b l a ^ - t e s , s i e m p re en c o n t a c t e con l o s v a s o s . E s t a capa toma a s p e c t o més den so y a p a r e c e r i a de sde e l p r i n c i p l e como hueso l a m i n a r . En c u a n t o a l o r i g e n de l a s c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s , s i b i e n han - e x i s t i d o d i s c u s i o n e s en t o r n o y se p e n s é po r a l g u n o s que p o d r i a n t e n e r - un o r i g e n d i f e r e n t e , D i e t e r i c h , Asada , e t c . , a f i r m a n que e l o r i g e n es — 116 s i e m p re l a c é l u l a o s t e o p r o g e n i t o r a y en e s t e s e n t i d o , reco rdam os l o s t r a b a 35j o s de Manabe ( 324 ) y de D u t h i e y B ake r ( 2 6 1 ,2 6 2 ) con S que se d e p o s i - t a en l a s zonas m e t a c r o m a t i c a s de a s p e c t o c a r t i l a g i n o s o , que acabamos de - d e s c r i b i r . Manabe ( 324) e n c u e n t r a que l o s o s t e o b l a s t o s c a p t a n més y l i b e r a n - mas d e p r i s a l a p r o l i n a a l t e j i d o c a r t i l a g i n o s o en e l c a l l o de 2 semanas . - 35P o r e l c o n t r a r i o l o s c o n d r o b l a s t o s c a p t a n y l i b e r a n e l S mas r é p i d a m e n t e que l a h i d r o x i p r o l i n a , en e s p e c i a l a l a s dos semanas p o s t f r a c t u r a . La elj_ m in a c io n y c a p t a c i o n son mas a c e n t u a d a s en l a s c é l u l a s h i p e r p l a s i c a s . T i ^ ne mayor i n t e r é s r e l a c i o n a r e s t o s v a l o r e s con l a c é l u l a mesenquimal p r o g e _ n i t o r a en l a c u a l Manabe d i f e r e n c i a dos s u b g r u p o s . Las c é l u l a s i n d i f e r e n _ c i a d a s que d a r é n l u g a r a l o s p r e c o n d o b l a s t o s y a l c a r t i l a g o , m u e s t r a n en - l a zona de t r a n s i c i o n un mayor m eta b o l i s m o p a r a e l S, m i e n t r a s que l a s que o r i g i n a r a n e l t e j i d o oseo t i e n e n un mayor m etabo l i sm o de h i d r o x i p r o l i n a . Las c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s que en l a p r i m e r a f a s e de 1 c a l l o mues tran zonas de t r a n s i c i o n g r a d u a i con l a s t r a b é c u l a s o s e a s a p u e s t a s d i r e c t a m e n t e s o b re l a c o r t i c a l , a l m adura r e l c a l l o t i e n d e n a a d o p t a r una e s t r u c t u r a s ^ m i l a r a l a s de l a s f i s i s , en e l s e n t i d o que toman a s p e c t o co lu m nar y apare^ ce una h i p e r t r o f i a de l a s c é l u l a s que se l o c a l i z e en l a p e r i f e r i a de l a - masa c a r t i l a g i n o s a donde se o b s e r v a su i n v a s i o n v a s c u l a r y su r e a b s o r c i o n . En e s t a f a s e , e l c a l l o c a r t i l a g i n o s o queda l i m i t a d o e x t e r n a m e n t e p o r una - capa o s e a muy f i n a y p o r su t r a n s f o r m a c i o n en hueso t r a b e c u l a r d e s d e l a s - zonas mas p e r i f é r i c a s , que a d o p t a una d i s p o s i c i o n en "V" de b a s e o p u e s t a - a l a c o r t i c a l . En e l a n im a l de e x p e r i m e n t a c i o n , p o r e jemplo en l o s roedo r e s , a p a r e c e e s t a d i s p o s i c i é n h a c i a e l 15 o 20 d i a de e v o l u c i o n , e s t a b l e - c i é n d o s e a s i una e s t r u c t u r a c o m p l e j a a n a l o g a a l c a r t i l a g o de c r e c i m i e n t o . Mas a l e j a d o d e l t r a z o de f r a c t u r a , t i e n e e l c a l l o una o s i f i c a c i o n - d i r e c t a y s u s t r a b é c u l a s p r e s e n t a n una d i s p o s i c i o n o b l i c u a a l a c o r t i c a l , fenomeno que segun T r u e t a se debe a que l o s v a s o s se d i r i g e n de sde l a s zô nas p e r i f é r i c a s s a n a s h a c i a e l p u n to de maxima l e s i o n , en t a n t o que Coûte 117 l i e r lo i n t e r p r é t a como s e c u n d a r i o a l a o r i e n t a c i o n de l a s f i b r a s colage^ nas que a n c l a n e l p e r i o s t i o a l hueso y d e t e r m i n a n , t r a s l a p r o l i f e r a c i o n c e l u l a r , que e s t a s e d i r i j a o b l i c u a m e n t e h a c i a l a e p i f i s i s . La masa c a r t i l a g i n o s a r e c i é n fo rm ada , e s i n v a d i d a en su s p o r c i o n e s p e r i f é r i c a s po r c o rdone s c e l u l a r e s que p r o v i e n e n de 1 p e r i o s t i o y que en - e l c e n t r e s iem pre l l e v a n un vaso que va ro d ea d o p o r v a r i a s ca p as c e l u l a - r e s . El avance de e s t a i n v a s i o n se p roduce a l comienzo p o r b r o t e s e n d o t^ l i a l e s . Segun D i e t e r i c h y Asada, l o s c o n d r o c l a s t o s no se m a n i f i e s t a n ha^ t a e l 65 d i a a p rox im ada m en te . Hac ia e l 45 d i a empiezan a f o rm a r s e l o s e ^ p a c i o s m ed u la re s p o r s e p a r a c i o n de l a p a r e d e n d o t e l i a l de l a capa de c é l u l a s i n d i f e r e n c i a d a s que le acompahan y que q u e d a n a d h e r i d a s a l a m a t r i z - c a r t i l a g i n o s a , so b re l a c u a l se p r o d u c e un d e p o s i t o de o s t e o i d e que se — c a l c i f i c a . La o p i n io n g e n e r a l de l o s a u t o r o s es que l a s c é l u l a s c a r t i l a g i n o - s a s mueren d u r a n t e l a i n v a s i o n d e l c a r t i l a g o p o r l o s b r o t e s c a p i l a r e s . Se p roduce d e s p u é s , poco a poco , e l rem ode lado de l a s t r a b é c u l a s y su d i s p o s i c i o n , que en un p r i n c i p i o e r a o b l i c u a o a b i g a r r a d a , se r e o r i e n _ t a c o lo c a n d o s e p a r a l e l a s a l a c o r t i c a l p a r a i r d e s a p a r e c i e n d o cuando l a - c o n t i n u i d a d de l a s c o r t i c a l e s se ha r e s t i t u i d o . Los o s t e o b l a s t o s que p r o d u c e n e s t e nuevo t i p o de hueso t i e n e n una m o r f o l o g i a d i f e r e n t e a l o s que han p r o d u c i d o e l hueso t r a b e c u l a r p r i m a r i o segun D u r i e z . Es de s e h a l a r que e s t e rem ode lado de l a s t r a b é c u l a s comienza de ma, n e r a muy p r e c o z y a f e c t a , no s o l o a l c a l l o e x t e r n o , s i n o ademas a l a s cor^ t i c a l e s que m u e s t r a n un e n s a n c h a m i e n to de ios c a n a l e s de Havers e x i s t e r ! - t e s , y una p e r f o r a c i o n p o r a b u n d a n te s va sos neo fo rm ados que l l e v a n a su - t r a n s f o r m a c i o n e s p o n j o s a , de forma que en l a s f a s e s t a r d i a s d e l c a l l o es d i f i c i l r e c o n o c e r l a e x t e n s i o n e x a c t a de l a s p r i m i t i v a s c o r t i c a l e s . 118 Antes de p a s a r a c o n s i d e r a r dos p u a t o s muy i m p o r t a n t e s , como son e l p o r que de l a p r o d u c c i d n c a r t i l a g i n o s a y l o s e s t u d i o s p a r t i c u l a r e s de l a - v a s c u l a r i z a c i d n , nos vamos a r e f e r i r a l a p r o d u c c i d n d e l c a l l o m o d u la r . C a l lo modula r Al t r a t a r d e l c a l l o m odu la r volvemos a e n c o n t r a r l a a n t i g u a p o l d m i - c a , y a d e s c r i t a p r e v i a m e n t e , e n t r e l o s p a r t i d a r i o s de l a f u n c i d n p r é p o n d é ­ r a n t e d e l p e r i o s t i o y l o s d e f e n s o r e s de l a p r i m a c i a e n d o s t a l . El o r i g e n - de sus c é l u l a s e s t a som e t ido a l a misma d i s c u s i d n que p a r a e l p e r i o s t i o , - p o r una p a r t e e s t a n l o s a u t o r e s que d e f i e n d e n su o r i g e n v a s c u l a r , y po r - o t r o l o s s e g u i d o r e s de su o r i g e n a p a r t i r de l a s c é l u l a s de l a s u p e r f i c i e e n d o s t a l . Desde B runs , t o d o s l o s a u t o r e s a c e p t a n l a e x i s t e n c i a d e l c a l l o m odu la r y su o s i f i c a c i d n d i r e c t a po r t r a n s f o r m a c i d n de l a s c é l u l a s p r o l i f e r a n t e s en o s t e o b l a s t o s , no s i e n d o f r e c u e n t e l a a p a r i c i d n de c a r t i l a g o , sad vo en l o s casos de g r a n d e s t r u c c i d n de l a c i r c u l a c i d n m o d u la r . H ac ia e l segundo o t e r c e r d i a , se a p r e c i a c l a r a m e n t e l a e x i s t e n c i a d e l c a l l o e n d o s t a l . E l t a p d n d e l hueso e s p o n j o s o a s i formado c r e c e h a c i a e l o t r o f r a g m e n t o , r e u n i é n d o s e con é l s i e m p re que no haya g r a n d e s d e s p l a z a m ie n to s y , segun Zuckman y R h i n e l a n d e r , a n t e s de que l o s b r o t e s p e r i o s t a - l e s se pongan en c o n t a c t e . En l a s formas muy d e s p l a z a d a s , p o r e l c o n t r ^ - r i o , e s e l c a l l o p e r i f é r i c o e l que p roduce l a p r i m e r a u n i d n . A p a r t i r d e l s e x t o d i a a p ro x i m a d a m e n t e , e l c a l l o e n d o s t a l toma c o n t a c t e en t o r n o a l o s - e x t r e m e s f r a c t u r a r i o s con e l c a l l o p e r i o s t a l y c o n t r i b u y e a l a r e a b s o r c i d n o s t e o c l é s t i c a y a l a r e v a s c u l a r i z a c i o n de l o s e x t r e m e s c o r t i c a l e s que ha ̂ - b i a n quedado muer tos p o r l a f a l t a de a p o r t e s a n g u i n e o . ( 3 6 9 , 4 1 1 ) . Por u l t i m e hay que s e h a l a r , que una vez r e a l i z a d o e l r em ode lado de l a c o r t i c a l y de l a s t r a b é c u l a s i n t e r p u e s t a s que se d i f e r e n c i a n d u r a n t e m_u cho t i em po por su o r i e n t a c i d n cambiada , no p a r a l e l a a l a c o r t i c a l y l a s 1^ 119 n e a s c é m e n ta n t e s que l a s s e p a r a n , e l c a l l o modula r d e s a p a r e c e r e s t a b l e c i é n dose l a c o n t i n u i d a d d e l c a n a l m odula r y de su c i r c u l a c i d n . P r e n t e a e s t a t e o r i a C o u t e l i e r ( 246 ) , a p oya ndose en su s e s t u d i o s y en l o s de H u l t h y Ole rud ( 286-87 ) , a f i r m a que e l c a l l o e n d o s t a l en e s t a s c o n d i c i o n e s m ecan icas no j u e g a un p a p e l p r é p o n d é r a n t e , e i n c l u s e no contr j^ buye a l a s o l d a d u r a d s e a . Ham ( 278) en 1973 d i s c u t e e l o r i g e n d e l c a l l o m odula r a p a r t i r , - p o r un l a d o , de l a s c é l u l a s de l a s u p e r f i c i e e n d o s t a l m odu la r y de l o s ca ­ n a l e s de H a v e r s , que no r e l a c i o n a con lo s v a s o s s i n o con l a capa c a m b ia l - d e l p e r i o s t i o que quedd i n c l u i d a en e l hueso d u r a n t e e l c r e c i m i e n t o . Po r o t r o l a d o , h a b l a de c é l u l a s c i r c u l a n t e s d e r i v a d a s de l a médula r o j a a pa_r t i r de cepas m o n o c l o n a l e s , que p o r i n d u c c i o n s e r i a n c a p a c e s de p r o d u c i r - h u e s o . C o n s i d é ra que e l c a l l o m odu la r se debe a l a p r e s e n c i a de c é l u l a s - con p o t e n c i a l o s t e o g é n i c o que h a n quedado i n c l u i d a s en l a m édu la . Quizas s e a més c o r r e c t a l a o p i n i o n de que l a c é l u l a m e s e n q u i m a l , i n d i f e r e n c i a d a del e s t r o m a de l a m odu la r p o r e l i n f l u j o de l a f r a c t u r a , r e s p o n d e i g u a l que a n i v e l d e l p e r i o s t i o y de l a s u p e r f i c i e e n d o s t a l dando l u g a r a una neoforma c i é n é s e a . (251 B, 2 6 0 ) . Hemos de c i t a r a q u i , s i n e n t r a r en p r o f u n d i d a d en e l l e s , l o s est_u - d i o s b i o q u i m i c o s , h i s t o q u i m i c o s e i s o t o p i c o s q u e , a l margen de l o s r e s e h a _ d o s , nos van a i n d i c a r l a s d i f e r e n t e s f a s e s po r l a s que p a s a e l c a l l o en - r e l a c i o n a l a s i n t e s i s de s u m a t r i z e x t r a c e l u l a r y su m i n e r a l i z a c i o n . Del T o r t o , Udupa y P r a s a r d , Gudmunson ( 2 7 4 ,3 5 6 - 5 7 ) e s t u d i a n l a s va r i a c i o n e s en e l t i em po de l a s i n t e s i s p r o t e i c a . E s t e u l t i m o d é t e r m i n a l o s n i v e l e s de LDH en e l c a l l o , e n c o n t r a n d o su c o n c e n t r a c i o n r^éxima a l noveno d i a p o s t f r a c t u r a . Bohr ( 230) i n i c i o e l e s t u d i o i s o t o p i c o de l a m i n e r a l i z a c i o n d e l c^ 32l l o y con e l P pudo o b s e r v a r que e l aumento d e l m e ta b o l i s m o m i n e r a i no - 120 se l i m i t a b a a l a zona d e l c a l l o s i n o que se e x t e n d i a a t o d o e l hueso afec^ t o , como hemos d e s c r i t o y a . El d e p o s i t o méximo de se p r o d u c e en t o r _ no a l 14 d i a t r a s l a f r a c t u r a , p e ro su m e ta bo l i sm o permanece e l e v a d o aün a l cabo de c u a t r o m eses . C a r t i e r y De B e r n a r d ( 242 ) 1956, e n c u e n t r a n que d u r a n t e l o s v e i n t e p r im e ro s d i a s t r a s l a f r a c t u r a hay una a v i d e z e_s c a s a p o r e l i s o t o p o , q u e aumenta r é p i d a m e n t e e n t r e l o s v e i n t e y v e i n t i c i n _ co d i a s p o s t f r a c t u r a , d e p o s i t é n d o s e e l 75% d e l m i n e r a l en d i e z d i a s . Al e s t u d i a r e l hueso f r a c t u r a d o p o r z o n a s , ven que a l p r i n c i p i o l e s ex tr emos f r a c t u r a r i o s aumentan su c o n te n i d o en P en un 10%; p a r a a l o s 25 d i a s per^ d e r un 30% de su c o n te n i d o m i n e r a i que aumenta de nuevo p a u l a t i n a m e n t e . - E l r e s t o de l a d i a f i s i s p r é s e n t a una o s t e o p o r o s i s g e n e r a l i z a d a que alcan__ za e l 30% d e l c o n te n id o m i n e r a i a l o s v e i n t i c i n c o d i a s de l a f r a c t u r a . Lemaire ( 314 ) 1966 no e n c u e n t r a , h a c i e n d o a n é l i s i s de l a c a lc e m i a , v a r i a c i o n e s de l a misma; pe ro d e m u e s t r a una m o ^ i l i z a c i o n g e n e r a l de Ca d e l e s q u e l e t o y de a c u e rd o con Bauer ( 223 ) h a l l a un aumento d e l d e p 6 s i _ t o m i n e r a l en e l hueso f r a c t u r a d o que s e hace maximo a l a s t r è s semanas - de su r o t u r a . Al a n a l i z a r e l hueso r e g i o n a l m e n t e o b s e r v a , i g u a l que - g r a n g e , una o s t e o p e n i a d e l mismo con un acumulo p r o p o r c i o n a l m e n t e mayor - en l a s zonas poco m i n e r a l i z a d a s , lo que s i g n i f i c a una m i n e r a l i z a c i o n p r q _ g r e s i v a de 1 c a l l o . M a te i n i y J o h a n s e n han a p l i c a d o e s t o s d a t o s a l a c l i n i c a , p a r a a n a l i z a r e l d e s a r r o l l o de l a s p s e u d o a r t r o s i s d u r a n t e e l t r a t a _ m ie n to de l a s f r a c t u r a s d i a f i s a r i a s hum anas . Lindholm y c o l s . ( 318B,319,320) 1967, 69 y 70 , han e s t u d i a d o e x t e n s amen te e l compor tamien to de l a s c é l u l a s c e b a d a s , r e s u c i t a n d o a s i l o s t r ^ b a j o s de P a r t s c h y B i l l i c h , y de M a k l in , q u i e n e s d a n a l a s c é l u l a s c e b a _ das un s i g n i f i c a d o m a c r o fé g i c o e l i m i n a d o r a s de d e t r i u s p r o t e i c o s . E s t a s a p a r e c e n ya a l a s 24 h o r a s de l a f r a c t u r a , a l c a n z a n su maximo a l o s 6 — d i a s y a l a s 3 semanas ha n d e s a p a r e c i d o . Se l o c a l i z a n de p r e f e r e n c i a a n_i v e l de l o s c a n a l e s m e d u l a r e s . Segun e s t o s a u t o r e s no i n f l u y e n en e l d e s ^ r r o l l o d e l c a l l o p ro p ia m en te d i c h o . Lindholm d e s c r i b e g r é n u l o s c i t o p l a s _ m a t i c o s m e t a c r o m a t i c o s en e l i n t e r i o r de l a s c é l u l a s c e b a d a s , y l o s cons_i 121 d e r a como MPS. E s t a s c é l u l a s se u b i c a n de forma p r e f e r e n t e en t o r n o a l a s zonas c a r t i l a g i n o s a s , p o r lo que l a s r e l a c i o n a con e l p r o c e s o de c a l c i f i c a . c i o n y , p a r a é l , su p r e s e n c i a en e l c a l l o t i e n e e l mismo s i g n i f i c a d o que - l a m a s t o c a l c i f i l a x i s d e s c r i t a p o r S e y l e . Hoy, como sabemos , p a r e c e mas — p r o b a b l e que s e a n l o s o s t e o b l a s t o s l o s r e s p o n s a b l e s d i r e c t e s de l a ca lc i f_ i c a c i o n , con lo c u a l l a s c é l u l a s c e bada s deben t e n e r a l g u n o t r o s i g n i f i c a d o y p o r su p r o d u c c i d n de h i s t a m i n a p o d r i a n e s t a r en r e l a c i o n con e l d e s e n c a _ denam ien to de l a r e s p u e s t a i n f l a m a t o r i a o su p e r s i s t e n c i a , ya q u e , Lindholm ha dem os t rado su p e rm a n e n c i a en l o s ca sos de p s e u d o a r t r o s i s y de i n e s t a b i _ l i d a d d e l foco f r a c t u r a r i o . (318 A) M o n t i c e l l i ( 335 ) hace una r e v i s i o n muy e x t e n s a de l o s p r o c e s o s — b i o q u im ic o s a n i v e l d e l c a l l o h a s t a 1955. P a n k o v ic h y c o l s . ( 350 ) , — H u l th y Ole rud ( 287 ) e s t u d i a n e l i n f l u j o de l a s o b r e c a r g a de c o r t i c o i _ des en e l d e v e n i r d e l c a l l o . Z i e g l e r y C e l l i n g ( 350 ) e l de l a c a l c i t j o n i n a . Rothman ( 374 ) a n a l i z a l a i n f l u e n c i a de l a d e f i c i e n c i a de h i e r r o y Gudmunson ( 276 ) l o s e f e c t o s de l a d i f e n i I h i d a n t o i n a s o b re e l c a l l o . Hê r o l d (283 ) c o n s i d é r a l a a c c i o n de l a hormona d e l c r e c i m i e n t o y e l f a c t o r s u l f a t a n t e de Daughaday, Sobe l ( 238) d e l c o n d r o i t i n s u l f a t o y Koskinen ( 304) l a i n f l u e n c i a de l a p r e s e n c i a o a u s e n c i a de l o s d i f e r e n t e s o r g a n e s e n d o c r i n e s en e l d e s a r r o l l o d e l c a l l o . Lindholm ( 317) y VT. M u e l l e r e s t u _ d i a n e l e f e c t o de l a s d i e t a s p o b r e s en c a l c i o y v i t a m i n a D. Rokanen (385) e l de l a h e p a r i n i z a c i é n s o b r e e l volumen y r e s i s t e n c i a d e l c a l l o . J a r r y y U t h o f f ( 401 ) h a l l a n una e s t i m u l a c i o n d e l c a l l o t r a s l a p e t a l i z a c i o n — d i a f i s a r i a en t o r n o a l a f r a c t u r a , de a c u e r d o con W i l l i c h ( 4 0 6 ) , J u d e t - ( 2 9 1 ) y P r a s a r d (356 ) . P e n t t i n e n (279 ) d e m u e s t r a , p o r o t r o l a d o , que e l e j e r c i c i o p r e v i o f a v o r e c e e l d e s a r r o l l o y r e s i s t e n c i a d e l c a l l o . Vascularizacidn .- Después de haber hecho constantemente referencia a los vasos, vamos 122 a e s t u d i a r a h o r a someramente l o s h a l l a z g o s o b t e n i d o s m e d i a n t e l a s t é c n i c a s de i n y e c c i d n v a s c u l a r . K'sta no e s l a u n i c a manera de a p r o x i m a r s e a l pro^ - b lem a, l a o t r a es e s t u d i a r e l f l u j o v a s c u l a r en e l hueso a f e c t o , e n e s p e c i a l m e d ia n te e l a c l a r a m i e n t o de i s d t o p o s como h a c e l a e s c u e l a de l a c l i n i c a yo e ncabezada p o r K e l l y ( 383 ) . La d i s t r i b u c i d n v a s c u l a r no rm a l p a r a e l - h ueso se n u t r e de una s e r i e de v i a s de a p o r t e d i s t i n t o , como s o n , s egun — T r u e t a : 1. La a r t e r i a n u t r i c i a que da més d e l 50% d e l f l u j o dseo y es e l a p o r t e h e m é t i c o p r i n c i p a l de l a d i é f i s i s . 2 . Las a r t e r i a s p e r f o r a n t e s e p i y m e t a f i s a r i a s que se e n c u e n t r a n s e p a r a d a s d u r a n t e e l c r e c i m i e n t o , formando d e s p u é s un s i s t e m a - u n i c o que a p o r t a e n t r e e l 20 y 40% de l a c i r c u l a c i d n que va d i _ r i g i d a a l o s e x t r e m os d s e o s . 3. Los v a s o s p e r i o s t a l e s son mas d i f i c i l e s de e v a l u a r , s e gun True t a , q u i é n con F o r s t e r y K e l l y ( 396 ) l l e g a a l a c o n c l u s i d n que lo s dos t e r c i o s i n t e r n o s de l a c o r t i c a l se n u t r e n a p a r t i r de l a m e d u l a r , en t a n t o que e l t e r c i o e x t e r n o lo hace a p a r t i r de l o s v a s o s p e r i o s t a l e s . La c i r c u l a c i d n , aunque es p r i n c i p a l mente c e n t r i f u g a , puede p a s a r a t r a v é s de l a s c o m u n ic a n te s de^ de e l p e r i o s t i o h a c i a e l i n t e r i o r , es d e c i r , i n v e r t i r su sentj_ do h a s t a t r a n s f o r m a r s e en una c i r c u l a c i d n c e n t r i p e t a . La a r t e r i a n u t r i c i a , cuyos e s t u d i o s comenzd Lexe r en 1901, a l p e n e _ t r a r en l a c a v id a d m e d u la r se d i v i d e en dos r a m a s , dando l u g a r a una s_e - r i e de a r t e r i a s r a d i a l e s segun K e l l y . A lo l a r g o de su t r a y e c t o a l d i r j_ - g i r s e h a c i a los e x t r e m o s donde c o n t r i b u y e n , d u r a n t e e l c r e c i m i e n t o , a f o r _ mar l o s v a s o s m e t a f i s a r i o s ; l o s v a s o s r a d i a l e s son l o s que s u p l e n l o s s i s _ tem as h a v e r s i a n o s . E x i s t e una g r a n d i s c u s i d n en t o r n o a l a d i r e c c i d n de - l a c i r c u l a c i d n ; e nc on t r am os una r e v i s i d n en K e l l y ( 3 83 ) . P a r a Brookes — (237 ) y Me Naab (409 ) l a c i r c u l a c i d n es t o t a l m e n t e c e n t r i f u g a de sde l a 123 m ed u la r h a s t a l a c o r t i c a l s a l i e n d o p o r e l p e r i o s t i o , en t a n t o que B r â n e r - mark (248 ) c o n s i d é r a que l a s a n g r e s u p l i d a p o r l a a r t e r i a n u t r i c i a a l a c o r t i c a l , v u e lv e p o s t e r i o r m e n t e a l a s v e n a s s i n u s o ï d a l e s y cen tromeduha - r e s . La p a r t e e x t e r n a de l a c o r t i c a l , que T r u e t a a f i r m a se n u t r e a pai^ - t i r de s i s t e m a p e r i o s t a l , d r e n a , s e g u n B r a n e rm a r k , a l e x t e r i o r . Danck — w a r d t - L i l l i e s t r b m s e h a l a que e l f l u j o venoso v u e l v e a l a m edu la r o s a l e a l a s venas p e r i o s t a l e s de a c u e r d o con l a s d i f e r e n c i a s de p r e s i d n e x i s t e j i - t e s e n t r e l a m edu la r y e l e x t e r i o r . ( 2 5 3 , 2 9 4 , 3 0 0 , 3 0 7 , 3 3 , 3 4 8 , 3 6 4 - 6 5 , 4 0 8 ) . Brookes ( 237) d i c e que l a c o r t i c a l se s u p l e p o r t r è s s i s t e m a s — que son i n d e p e n d i e n t e s e n t r e s i . La a r t e r i a n u t r i c i a d é t e r m i n a una circ_u l a c i d n c e n t r i f u g a s i e n d o l a f u e n t e p r i n c i p a l ; l a s o t r a s dos s e r i a n l o s c^ p i l a r e s p r o c e d e n t e s de l a s i n s e r c i o n e s m u s c u l a r e s y d e l p e r i o s t i o que t i ^ nen , s egun B ro o k e s , un v a l o r muy e s c a s o a l e s t a r t o d a l a c o r t i c a l s u p l i d a p o r l a c i r c u l a c i d n m e d u l a r . Gbthman d e s c r i b e l a e x i s t e n c i a de c a p i l a r e s , que ponen en c o n t a c t e d i r e c t e l a c i r c u l a c i d n m ed u la r y l a p e r i o s t a l a t r a vds de l a c o r t i c a l . De M arnef fe a f i r m a que l a p a r t e c e n t r a l de l a c o r t i c a l d i a f i s a r i a se n u t r e a p a r t i r d e l p e r i o s t i o y s d l o l a s c o r t i c a l e s m e t a f i s a r i a s lo h ^ cen a p a r t i r de l o s v a s o s m e d u l a r e s . Ray a n a l i z a e l f l u j o y s u g i e r e que e l 5,4% d e l volumen de e y e c c i d n c a r d i a c o c o r r e s p o n d e a l e s q u e l e t o y , en e 1 p e r r o a n i v e l d e l f ém ur , e l — 88,4% de 1 volumen c i r c u l a n t e se d i r i g e a l a c o r t i c a l d i a f i s a r i a y e l 1J,5% a l a m e d u la r . ( 2 9 2 , 3 6 3 - 6 5 ) . R h i n e l a n d e r , de a c u e r d o con Ham, c o n s i d é r a que l o s s i s t e m a s h a v e r ­ s i a n o s e s t é n r e p l e t o s de c a p i l a r e s l o n g i t u d i n a l e s d e r i v a d o s de l o s v a s o s p e r i o s t a l e s , que q u e d a r o n i n c l u i d o s en l a c o r t i c a l d u r a n t e e l c r e c i m i e n t o y se c o n e c t a n a t r a v é s de l o s c a n a l e s de Volkmann con l a s c i r c u l a c i o n e s - m edu la r y p e r i o s t a l . Las i n s e r c i o n e s m u s c u l a r e s t i e n e n g r a n v a l o r a l — a p o r t a r una v a s c u l a r i z a c i d n s u p l e m e n t a r i a a s u n i v e l . Ham i n d i c a que e l 124 e s t a d o f u n c i o n a l t i e n e g r a n i m p o r t a n c i a , ya que p . e . , t r a s l a f r a c t u r a l a d i é f i s i s homonima c o n t r o l a t e r a l p r é s e n t a un aumento d e l f l u j o de h a s t a 2 /3 su v a l o r n o r m a l , po r a p e r t u r a de c a n a l e s v a s c u l a r e s h a b i t u a l m e n t e c e r r a d o s . Los e s t u d i o s de Shim (408 ) i n d i c a n que l a a r t e r i a n u t r i c i a a p o r t a e n t r e e l 30 y e l 70% de l a c i r c u l a c i d n de l a d i a f i s i s . Vemos , p u e s , que e l a f l u j o p r i n c i p a l de l o s h u e s o s a d u l t o s se h a c e p o r l a a r t e r i a n u t r i c i a , con un a p o r t e c o n t r o v e r t i d o po r p a r t e de l a c i r c u l a c i d n p e r i o s t a l y con un f l u j o p r i n c i p a l m e n t e c e n t r i f u g o ; p e r o que de a c u e r d o con B r â n e rm a r k , e s t a som e t ido a l a s d i f e r e n c i a s de p r e s i d n e x i s t e n t e s e n t r e l a c a v id a d m ed u la r y e l e x t e r i o r , de forma que con l a c o n t r a c c i d n m u s c u l a r puede h a b e r un d r ^ n a j e p a r c i a l de l a s a ng re c o r t i c a l h a c i a l a s ve na s s i i u i i s i d a l e s m e d u l a r e s . E x i s t e n v a r i a c i o n e s l o c a l e s de a c u e r d o a l a s c o n d i c i o n e s a n a t d m i c a s p a r t i _ c u l a r e s de cada p o r c i d n d sea y con l a s i n s e r c i o n e s m u s c u l a r e s de cada pun_ t o . Shim hace una r e v i s idn de l o s f a c t o r e s m e t a b d l i c o s , ho rm ona le s y n e r _ v i o s o s que i n f l u y e n sob re l a c i r c u l a c i d n d s e a . Vamos a v e r a ho ra l a s a l t e r a c i o n e s que puede s u f r i r l a c i r c u l a c i d n como c o n s e c u e n c i a de l a s f r a c t u r a s , r e f i r i d n d o n o s como h a s t a a h o r a a l a s - fo rm as e x p é r i m e n t a l e s cuyo c a l l o hemos d e s c r i t o , e s d e c i r , l a s fo rm as s i n i n m o v i l i z a c i d n o a lo sumo con i n m o v i l i z a c i d n p o r y e s o . Lexer en 1904 y - en 1922 y W. M u l l e r f u e r o n l o s p r i m e r o s en o c u p a r s e de l a s a l t e r a c i o n e s - v a s c u l a r e s que o c u r r i a n como c o n s e c u e n c i a d e l t r a u m a t i s m e , e n c o n t r a n d o que l a f r a c t u r a de senc a de naba una h i p e r e m i a . (3 1 6 ,3 3 7 ) Los e s t u d i o s de J u d e t en I960 y de Roy C a m i l l e en 1966, i n d i c a n que hay c u a t r o f a s e s en e l p r o c e s o v a s c u l a r : 1^ f a s e D u ra n te l a p r i m e r a semana p o s t f r a c t u r a , l a l l a m a d a f a s e i n e r t e , s d l o hay un aumento de l a c i r c u l a c i d n d e l f r a g m e n t o en e l que p e r ­ s i s t e l a a r t e r i a n u t r i c i a . 2 ^ f a s e . - En l a s egunda semana a p a r e c e una g r a n a c t i v i d a d v a s c u - 125 l a r con fo rm a c idn de v a s o s en t o r n o a l t r a z o de f r a c t u r a y a p o s i c i d n dsea en su v e c in d a d . 35 f a s e Aparece e n t r e l a 3- y 6^ semana, m u e s t r a que l a a c t i v i ­ dad v a s c u l a r va d i sm inuyendo a l t i em po que e l c a l l o s e o s i f i c a y se ha ce - més e s t a b l e . 4^ f a s e . - Se c a r a c t e r i z a p o r una v u e l t a a l a n o r m a l i d a d . De ac ue rdo con l a s f a s e s d e s c r i t a s , J u d e t e s t a b l e c e una c l a s i f i c a - c id n de l a s p s e u d o a r t r o s i s en: l ) a v a s c u l a r e s ; cuando se i n s t a u r a n a n t e s de l a f a s e de p r o l i f e r a c i d n c a p i l a r y son p e c u l i a r e s de p u n t o s a n a td m ic o s c o n c r e t e s , como l a s f r a c t u r a s s u b c a p i t a l e s d e l f ém ur . 2) p s e u d o a r t r o s i s - h i p e r v a s c u l a r e s ; que se m a n i f i e s t a n en l o s demas p u n t o s d e l e s q u e l e t o y se c a r a c t e r i z a n porque l a f a s e de h i p e r v a s c u l a r i z a c i d n no r e g r e s a . ( 2 6 8 , 2 9 1 ) . Vray ( 408 ) demost rd que in m e d ia t a m e n te d e s p u é s de l a f r a c t u r a se i n c r e m e n t a e l f l u j o v a s c u l a r d e l miembro a f e c t o , l o que en una p r i m e r a 1' ̂ se se debe a un acumulo v e n o s o . E s t a r e s p u e s t a v a s c u l a r depende de l a — e da d , de forma que en a n i m a l e s v i e j o s l a r e s p u e s t a e s mener . K e l l y ( 3 1 3 ) 1969, usando e l a c l a r a m i e n t o de S r^^ e n c u e n t r a un a u_ mento d e l f l u j o v a s c u l a r a l d i a s i g u i e n t e de p r o d u c i d a l a f r a c t u r a . Aumen t o que es p r o g r e s i v o y a l c a n z a su maximo a l a s dos s e m a na s . A l o s d i e z — d i a s es 0 ,1061 m l /cc h u e s o / s g , h a b i é n d o s e m u l t i p l i c a d o p o r 6 e l f l u j o , que d i sm inuye a c o n t i n u a c i d n h a s t a una a c t i v i d a d de 3 ,7 v e c e s s u v a l o r normal y se m ant iene en m ese ta e n t r e e l 30 y e l 70 d i a , a l o s 21 d i a s es 0 ,0 5 3 1 - r a l / c c / s g . A l c a n z a su v a l o r normal h a c i a e l 90 d i a p o s t f r a c t u r a ap rox im ada m e n t e . Al comparar P a r a d i s y K e l l y e s t o s d a t o s con e l d e p o s i t o m i n e r a i en e l c a l l o , e n c u e n t r a n un p a r a l e l i s m o e n t r e ambos fenomenos . Sus d a t o s i g u a l que lo s de R h i n e l a n d e r i n d i c a n que con e s t e aumento d e l f l u j o , e l t i empo - 126 de pe rm a nenc ia de l o s i s d t o p o s a n i v e l d seo es menor y p o r t a n t o , e x i s t e 0 un aumento en e l numéro o en l a p e r m e a b i l i d a d de l o s v a s o s , s i e n d o l a p r i m e r a a l t e r n a t i v a l a mas p r o b a b l e . ( 3 4 8 , 3 6 8 ) . Bosch ( 237 ) s e h a l a que l a p e r f u s i d n no e s u n i fo r m e a t o d o s l o s - n i v e l e s . K e l l e r o v a ( 3 5 9 ) y c o l . e s t u d i a n e l r e t o r n o venoso en p e r s o n a s - t r a s f r a c t u r a s de l a t i b i a , y h a l l a n un aumento d e l mismo e n t r e l a 1^ y l a 12^ semana p a r a v o l v e r d e s p u é s a l a n o r m a l i d a d de forma q u e , l o s c^ - S O S que m a n t i e n e n un aumento d e l f l u j o venoso mas a l l é de l a 12 semana , e v o l u c i o n a n h a c i a l a p s e u d o a r t r o s i s . Ray ( 364 ) a f i r m a que e l aumento de c i r c u l a c i d n que se e n c u e n t r a a n i v e l de l o s huesos f r a c t u r a d o s no se debe a un aumento de l a v e l o c i d a d - de c i r c u l a c i d n como a f i r m a K e l l y , s i n o a un aumento d e l volumen g l o b a l de s a n g r e que se m an t i e n e h a s t a l a 8^ semana p o s t f r a c t u r a y e s t é , s egun é l , en r e l a c i d n d i r e c t a con l a masa d e l c a l l o . P r e n t e a e s t o s d a t o s de a n é l i s i s g l o b a l , hay que c o n s i d e r a r l o s - a n é l i s i s m i c r o r a d i o g r é f i c o s he c hos p o r R h i n e l a n d e r , O le ru d y H u l t h , Mau_ r e r y Zuckman, e c t . ( 2 6 8 , 3 2 9 , 3 3 0 , 3 6 7 - 9 ) , que e s t u d i a n l o s cambios l o c a l e s de l a v a s c u l a r i z a c i d n . O le rud y H u l t h ( 2 8 6 ) e s t u d i a n d o l o s muhones de a m pu ta c idn en c^ n e j o s e n c o n t r a r o n , que a n i v e l d e l e x t r e m e dseo de a m p u ta c id n se p r o d u c i a una r e a c c i d n que , h i s t o I d g i c a m e n t e , e r a s i m i l a r a l c a l l o de f r a c t u r a . Los v a s o s a p a r e c e n a n i v e l de 1 p e r i o s t i o con una i n c l i n a c i d n o b l i c u a h a c i a l a c o r t i c a l . A n i v e l de l a m edu la r hay una p r o l i f e r a c i d n de l o s mismos que i r r a d i a n en forma de penacho de sde l a c a v id a d h a c i a e l e x t e r i o r . Zuckman y c o l . ( 3 2 9 - 3 0 ) en f r a c t u r a s c e r r a d a s e n c u e n t r a n una p r o l i _ f e r a c i d n v a s c u l a r que no se m a n i f i e s t a c l a r a m e n t e h a s t a e l 75 d i a , se Im ce f r a n c a h a c i a l a 2^ semana y m u e s t r a un p r e d o m i n i o p e r i o s t a l con un d^ 127 s a r r o l l o maximo h a c i a e l 21 d i a . Los v a s o s se d i s p o n e n de manera a n a r q u l ca en t o r n o a l c a l l o de f r a c t u r a . A f i rm an que l o s v a s o s t i e n e n una r e l a ­ c i o n d i r e c t a con l a o s t e o g e n e s i s . En 1965 ( 330 ) s e n a l a n que l a v a s c u l a r i z a c i o n m edula r e s t a b l e c e c o n e x i o n , a t r a v é s d e l c a l l o , con l a m edu la r o p u e s t a en t o r n o a l 145 d i a , y a l a s 3 semana se ha e s t a b l e c i d o de manera c o m p l é t a l a conex ion c a p i l a r e n t r e l a c i r c u l a c i d n p e r i o s t a l y l a m e d u la r en cada f ragm en to y e n t r e e l l e s . Segun Zuckman e l f r a g m e n to d i s t a l recu. p e r a su v a s c u l a r i z a c i d n a p a r t i r de l o s v a s o s m e t a f i s a r i o s en t o r n o a l 14 d i a . E s tu d ia n d o s e l e c t i v a m e n t e l a v a s c u l a r i z a c i d n p e r i o s t a l d e m u e s t r a n - su i n d e p e n d e n c i a de l a c i r c u l a c i d n m e d u la r h a s t a e l 15 d i a , c o n s i d e r d n d o l a f u n d a m e n ta l p a r a l a c o n s o l i d a c i d n d s e a . Los t r a b a j o s mds e x h a u s t i v e s s o b re l a v a s c u l a r i z a c i d n d e l c a l l o — son l o s de R h i n e l a n d e r ( 367-369 ) en 1 9 6 2 / 6 7 / 7 1 , y l o s de Brookes — ( 237 )• R h i n e l a n d e r a n a l i z a l a s v a r i a c i o n e s en l a v a s c u l a r i z a c i d n de — a c u e r d o a l d e s p l a z a m i e n t o s u f r i d o po r l o s f r a g m e n t e s . En l a s f r a c t u r a s - s i n d e s p l a z a m i e n t o queda l a c i r c u l a c i d n m edu la r I n t a c t a . Se d i l a t a n su s v a s o s lo c u a l p e r m i t e que l a s d i f e r e n t e s d r e a s c o r t i c l e s s u r t i d a s p o r l a c i r c u l a c i d n m edu la r no p i e r d a n su a p o r t e s a n g u i n e o . Con e l paso d e l t i e m po h a y una p r o l i f e r a c i d n v a s c u l a r a n i v e l d e l c a n a l m edu la r y d e l p e r i o s _ t i e , que a l c a n z a su maximo a l a s dos semanas . La n u t r i c i d n c o r t i c a l se - ha c e a e x pe nsa s de l a c i r c u l a c i d n m edu la r , que pe rm anece aum en tada a un - d e s p u é s de r e s t a b l e c i d a l a c o n t i n u i d a d d s e a . A n i v e l d e l c a l l o , l o s p r im e r o s v a s o s que p e n e t r a n son t a m b ié n de o r i g e n m edula r , y con e l t i e m po e s t a b l e c e n c one x idn con l a n e o fo r m a c i d n v a s c u l a r p e r i o s t a l en una p r i m e r a f_a se a t r a v é s d e l c a l l o , p a r a h a c e r l o d e s p u é s a t r a v é s de l a c o r t i c a l mi_s - ma, y l l e g a n d o a n u t r i r los v a s o s p e r i o s t a l e s de e s t a fo rm a . Cuando se d e s p l a z a n l o s f r a g m e n t o s cambia t o t a l m e n t e e l c u a d r o . - Como c o n s e c u e n c i a d e l d e s p l a z a m i e n t o se l e s i o n a l a a r t e r i a n u t r i c i a , que p i e r d e a s i d u r a n t e una tem porada su p a p e l r e c t o r . E l r e s t a b l e c i m i e n t o de l a c i r c u l a c i d n depende de l a r e d u c c i d n y buena c o n t e n c i d n de l o s f r a gm en_ t o s . En una p r i m e r a f a s e p rédom ina e l c a l l o p e r i o s t a l que como sabemos - es v o lu m in o s o . Los v a s o s que lo n u t r e n se d i r i g e n s d l o de manera a i s l a d a 128 h a c i a e l t r a z o de f r a c t u r a . A p a r t i r de l a p r i m e r a semana e l c a l l o nied_u l a r invade e l hematoma y a p a r t i r de l a t e r c e r a semana , e s d e c i r , una s_e mana mas t a r d e que en l a s f r a c t u r a s s i n d e s p l a z a m i e n t o , se e s t a b l e c e l a c o ne x ion e n t r e ambos s i s t e m a s c a p i l a r e s m e d u l a r e s h i p e r t r d f i c o s . Surge a s i mismo l a t e n d e n c i a a l a a n a s t o m o s i s con e l s i s t e m a p e r i o s t a l a t r ^ - vds de l a s c o r t i c a l e s , l o que e n e l p e r r o es b i e n v i s i b l e a l a s e x t a s e _ mana, momento en e l que l a v a s c u l a r i z a c i d n m ed u la r asume e l p a p e l pr incj_ p a l . En l a s f a s e s t a r d i a s R h i n e l a n d e r e n c u e n t r a una v u e l t a a l a n o rm a l^ dad de l a c i r c u l a c i d n p e r i o s t a l , m a n t e n i é n d o s e l a v a s c u l a r i z a c i d n d e l c^ l l o e x t e r n o a e xpensas de l a c i r c u l a c i d n m edu la r a t r a v é s de l a s conexi_o nés c o r t i c a l e s . Puranen (359 ) p a r a comprobar e l r e s t a b l e c i m i e n t o de l a c i r c u l ^ - c id n medular y l a buena marcha d e l c a l l o , emplea e l e s t u d i o de l a venogra f i a m edula r en l a s f r a c t u r a s de t i b i a en e l h o m b re , que m u e s t r a un r e a t a b l e c i m i e n t o de l a c o n t i n u i d a d v a s c u l a r h a c i a l a déc im a semana, y en lo s c a s o s en lo s que no se ha r e s t a b l e c i d o e s t a c i r c u l a c i d n a l t e r c e r mes tjj ma una d e t e r m i n a c i d n q u i r u r g i c a . Basandose en l o s d a t o s a n t e s e x p u e s t o s m a n t i e n e R h i n e l a n d e r que l a c i c a t r i z a c i d n dsea no se p ro d u ce nunca de manera p r i m a r i a a t r a v é s d e l - c a l l o p e r i o s t a l , s i n o que se h ace s ie m pre a t r a v é s de 1 m e d u l a r , y s d l o - en l o s c a sos con g r a n d e s p l a z a m i e n t o o g r a n c onm inuc idn de l o s f ragmen - t o s , p e r d u r a l a p r e v a l e n c i a de l a c i r c u l a c i d n p e r i o s t a l d u r a n t e mas tieni p o . En l a s f a s e s t a r d i a s , e l r em ode lado d e l c a l l o t i e n e e l mismo p a t r o n m o r f o l d g i c o que l a s c u r a c i o n e s " p e r pr imam" que lu e g o d e s c r i b i r e m o s . Tiene i n t e r é s c o n s i d e r a r como p e n e t r a n l o s c a p i l a r e s en l o s d i f ^ - r e n t e s t e j i d o s . Como ya hemos s e h a l a d o p r e v i a m e n t e , A nde r son , Al lgoewer, T r u e t a , D i e t e r i c h , Asada , e t c . ( 2 1 1 ,2 1 5 ,3 9 7 ) s e n a l a n que lo s c a p i l ^ - r e s b r o t a n p o r gemacidn a p a r t i r de m i t o s i s de l a s c é l u l a s e n d o t e l i a l e s , que dan l u g a r a c o rdones s d l i d o s que se c a n a l i z a n p o s t e r i o r m e n t e p o r l i _ b e r a c i d n de l a s c é l u l a s c e n t r a l e s . 129 A n i v e l d e l t e j i d o c a r t i l a g i n o s o d e l c a l l o , segun Asada y D i e t e r i c h , no se d e m u e s t r a l a p r e s e n c i a de c o n d r o c l a s t o s h a s t a e l s e x t o d i a , lo que con c u e rd a con l a o p i n i o n de L e r i c h e , C o u t e l i e r ( 2 1 6 ,258 ) e t c . , q u i ^ - ne s a f i r m a n que l a s c e l u l a s m u l t i n u c l e a d a s a p a r e c e n t a r d i a m e n t e a n i v e l - d e l c a l l o , lo mismo que su c ed e en e l hueso no rm a l t r a s l a a d m i n i s t r a c i d n de PTH ( 1 9 ,4 5 ,9 8 ) . En l a r e v i s i o n de l a l i t e r a t u r a no hemos e n c o n t r a d o e s t u d i o s d e t a l l a d o s de l a p e n e t r a c i o n v a s c u l a r en e l a r e a c a r t i l a g i n o s a - d e l c a l l o ; p e ro suponemos p o r a n a l o g i a , q u e s u c e d e de l a misma fo rma que en e l c a r t i l a g o de c o n j u n c i d n , ya q u e , e l c a l l o en muchas zonas toma d i s _ p o s i c i o n f i s a r i a . Desde lo s t r a b a j o s c l a s i c o s de R a n v i e r y L a n g e r , e x i s t e una disc_u - s i d n en t o r n o a s i l a i n v a s i d n d e l c a r t i l a g o se h a c e p o r un c a p i l a r p a r a cada columna i s o g d n i c a de c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s , como q u e r i a R a n v i e r , o p o r e l c o n t r a r i o , como a f i r m a b a L a n g e r , p o r una s e r i e de c a p i l a r e s que e_n t r a n en r e l a c i d n con v a r i a s columnas i s o g é n i c a s . Todos los a u t o r e s p a r e c e n e s t a r de a c u e r d o en que e l c a p i l a r es de m o r f o l o g i a s i n u s o ï d e . Segun Brookes ( 2 3 7 ) , a l l l e g a r a l a zona mds di_s - t a l hace un b u c l e que da l u g a r a l a p o r c i d n v e n o s a que desem bocard en lo s l a g o s venosos m e d u l a r e s . T r u e t a 1960 ( 397) es p a r t i d a r i o de l a t e o r i a - de R a n v i e r , en t a n t o que Brookes y Anderson se i n c l i n a n mas h a c i a l a sje - gunda fo rm a , aunque Brookes i n d i c a que segun e l momento de l a v i d a en que se e s t u d i a n e s t o s v a s o s pueden p r e s e n t a r una u o t r a d i s p o s i c i d n . Cuanto mds j o v e s s e a e l an im a l mas a n d r q u i c a es l a e s t r u c t u r a , y l o s ramos c a p i l a r e s que se an a s to m o sa n e n t r e s i e n t r a n en r e l a c i d n con v a r i o s g ru p o s — i s d g e n i c o s de c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s . Por e l c o n t r a r i o , en l o s a n i m a l e s a d u l t o s l a d i s p o s i c i d n s é r i a de un c a p i l a r p o r c a d a grupo i s o g é n i c o . En e l c a l l o de f r a c t u r a , aunque no e x i s t a n d a t o s a l r e s p e c t o , es - p r o b a b l e que p o r su d i s p o s i c i d n mds a n a r q u i c a y p o r l a mayor r a p i d e z de - su d e s a r r o l l o , l a e s t r u c t u r a p r i m e r a , es d e c i r , un c a p i l a r p a r a v a r i o s gr_u pos i s d g e n i c o s , s e a l a d i s p o s i c i d n v a s c u l a r e x i s t a n t e . 130 El ex tremo d e l c a p i l a r , s egun T r u e t a , e s t a a b i e r t o , segun Brookes y Landon y Brookes ( 237 ) en e l f e t o p o r e l c o n t r a r i o p e r m a n e c e r i a s iem p r e c e r r a d o , l i m i t a d o en su p o r c i d n mas d i s t a l p o r l a membrana e n d o t e l i a l . Tan to Brookes como Anderson ( 215 ) s e n a l a n que e s t o s v a s o s e s t d n d e ^ - p r o v i s t o s de membrana b a s a i . Ande rson ( 215) , en e s t u d i o s con a n i m a l e s m^ y o r e s , i n d i c a que es p o s i b l e a p r e c i a r l a e x i s t e n c i a de c a p i l a r e s a b i e r t o s , ya que , su ext remo se fo rm a po r l a r e u n i d n de v a r i a s a s a s y l a s c é l u l a s eri d o t e l i a l e s c r e c e n h a c i a a d e l a n t e p u d i e n d o , en a l g u n o s p u n t o s , pe rm a n e c e r - s i n r e u n i r s e como i n d i c a r i a l a p r e s e n c i a de h e m a t i e s po r d e l a n t e de l a s c^ l u l a s e n d o t e l i a l e s , en c o n t a c t e con l a s l a m in a s t r a n s v e r s a l e s de l a s caps_u l a s de l a s c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s . E s t a p a r e d , segun T r u e t a en 1960 y An - d e r s o n , no a p a r e c e nunca c a l c i f i c a d a . J u n to a e s t e t i e n e i n t e r é s c o n o c e r como se r e a l i z a l a c o n d r o l i s i s , - Brooke , Anderson , Schenk , ( 308B,376 ) a f i r m a n que no se hace nunca po r cé ­ l u l a s m u l t i n u c l e a d a s de t i p o c l a s t i c u , s i n o p o r c é l u l a s m o n o n u c l e a d a s . r a Anderson , l a c é l u l a que l i m i t a d i r e c t a m e n t e con l a c é p s u l a c a r t i l a g ino_ s a y que en o c a s i o n e s h a c e de v e r d a d e r a t a p a d e r a p a r a e l c a p i l a r , t i e n e a^ p e c t o de m ac ro fa g o , como e l de l o s s i n u s o ï d e s e s p l é n i c o s . f?on e l M.E. apa r e c e con m i t o c o n d r i a s , a b u n d a n te s l i s o s o m a s y v a c u o l a s d i g e s t i v a s , a s i cp mo una membrana de a s p e c t o ondu lado y con p r o y e c c i o n e s c i t o p l a s m é t i c a s . - En o c a s i o n e s se ve en su i n t e r i o r d e p o s i t o s m i n é r a l e s . Po r f u e r a de l a c_é l u l a e n d o t e l i a l y muy s e m e j a n t e s a e l i a s , s e gun B r o o k e s , a p a r e c e n c é l u l a s mesenquimale s poco d i f e r e n c i a d a s que m u e s t r a n fo rm as de t r a n s i c i o n h a s t a - e l o s t e o b l a s t o a p l i c a d o s o b r e l a m a t r i z c a r t i l a g i n o s a donde d e p o s i t a e l m_i n e r a l , dando l u g a r a l a e s p o n j o s a p r i m a r i a como d e s c r i b e S c o t t ( 49 ) . - A nde rson d i c e que l a s c é l u l a s e n d o t e l i a l e s no son c a p a c e s de una f a g o c i t o _ s i s r e a l . Los o s t e o c l a s t o s a p a r e c e n mas d i s t a l m e n t e y e s t é n e n c a r g a d o s de l a r e a b s o r c i o n de l a e s p o n j o s a p r i m a r i a . Sckenk c o n s i d é r a que l a l a m in a t r a n s v e r s a l se l i s a p o r c é l u l a s p e r i - e n d o t e l i a l e s y que e l d e p o s i t o de m i n e r a i s o b r e e l c a r t i l a g o se r e a b s o r b e p o r e l c o n t r a r i o po r l o s c o n d r o c l a s t o s . 13 Kember ( 296 ) en 1960 e s t u d i a n d o con t i m i d i n a e s t a zona , e n c u e n t r a que l a s c e l u l a s m esenqu im a les p e r i v a s c u l a r e s que c a p t a n m^s t i m i d i n a , — son l a s que van a d a r l u g a r a l o s o s t e o b l a s t o s y acompahan c o n s t a n t e m e n _ t e a lo s c a p i l a r e s h a c i a l a s c e l d a s c a r t i l a g i n o s a s h i p e r t r o f i a d a s . C a r t i l a g o Hemos d e s c r i t o que en e l p r o c e s o de c u r a c i d n de l a s f r a c t u r a s , c I p s i c a m e n te se c o n s i d é r a normal l a p r e s e n c i a de c a r t i l a g o en t o d a s a q u e l l a s que se d e j a n e v o l u c i o n a r s i n n in g u n t i p o de s u j e c i d n , como en l a s c o s t p — l i a s , 0 en l a s que s d l o se r e c u r r e a una i n m o v i l i z a c i d n r e l a t i v a como es l a que puede d a r e l y e s o . A e g e r t e r t r a b a j a n d o s o b r e m a t e r i a l humane, — n i e g a que se p r o d u z c a c o r r i e n t e m e n t e en e l hombre c a r t i l a g o , R h i n e l a n d e r a l h a b l a r de l a v a s c u l a r i z a c i d n s e h a l a que s d l o a p a r e c e e l c a r t i l a g o en - l o s ca so s con l e s i d n de l a a r t e r i a m e d u l a r . ( 2 1 4 , 2 1 5 , 2 2 5 , 2 9 5 ) . Desde e l c o m i e n z o ,h a e x i s t i d o l a d i s c u s i d n en t o r n o a c u d l s e a l a c a u sa de l a d i f e r e n c i a c i d n c a r t i l a g i n o s a . P o r un lado e s t d n l o s a u t o r e s que a c e p t a n e l o r i g e n m ecén ico d e l mismo, y p o r o t r o l o s que a t r i b u y e n su cauaa a l a f a l t a de a p o r t e v a s c u l a r , es d e c i r , l a i s q u e m i a . Los t r a b a j o s c o n c l u s ivos de Krompecher y B a s s e t t han i n t e r r e l a c i o n a d o ambos fendmenos . Sa lvo a l g u n a s e x c e p c i o n e s , l a m a y o r i a de l o s a u t o r e s dan una e x p l i _ c a c i d n c a u s a l a l a p r o d u c c i d n de c a r t i l a g o . A sada , P u j in a m i y l a e s c u e l a de Kaufmann, d i c e n que su a p a r i c i d n e s t a en r e l a c i d n con l a e s p e c i e a n i - mal que se e s t u d i a ; lo que en c i e r t o s e n t i d o c o r r o b o r a d e l T o r t o , segun - e l c u a l l a a p a r i c i d n d e l c a r t i l a g o depende d e l l u g a r en e l que se p ro d u ce l a f r a c t u r a y l a edad d e l a n i m a l . Brookes a f i r m a que e l c a r t i l a g o a p a r e _ ce con mayor f r e c u e n c i a en e l a d u l t e , donde e l b l a s t e m a v a s c u l a r t i e n e - una menor c a p a c i d a d p r o l i f e r a t i v a que en e l n i h o , en e l c u d l y segun d e l 132 Torto , por e l c o n t r a r io e s més f r e c u e n t e e l c a r t i l a g o . P ara Lexer ( 316 ) 1922, M i t t e l s t i e l e r ( 334 ) 1923, Ham ( 277 ) 1930, e t c . , t i e n e un o r i g e n v a s c u l a r , y l a p r e s e n c i a de c a r t i l a g o en e l c a l l o se debe a l a e x i s t e n c i a de m ov im ien tos a n o r m a l e s , a n i v e l d e l f o co de f r a c t u _ r a , q u e rompen l o s b r o t e s v a s c u l a r e s o r i g i n a n d o una i s q u e m ia r e g i o n a l que l l e v a a l a p r o d u c c i d n de c a r t i l a g o . G i r g i s y P r i t c h a r d ( 273 ) en 1958, a l e l i m i n a r l o s f a c t o r e s mec^ n i c o s que i n c i d e n sob re l a e v o l u c i d n d e l c a l l o empleando l a c a l o t a c r a n e a l como s i t i o de f r a c t u r a , e n c u e n t r a n que l a i s q u e m ia es e l f a c t o r p r e p o n d e _ r a n t e en l a a p a r i c i d n d e l c a r t i l a g o , aunque con su modelo no pueden dep - c a r t a r e l p a p e l de l o s i r i f l u j o s mecdnicos en s u o r i g e n . Segun P r i t c h a r d y Brookes , e x i s t e una r e l a c i d n e n t r e l a v e l o c i d a d de p r o l i f e r a c i d n ceiu_ - l a r y l a de p e n e t r a c i d n de l o s v a s o s . Yamagishi y Yoshimura ( 410 ) h a l l a n un e x c e s o de c a r t i l a g o en - l o s c a l l o s s o m e t id o s a una p r e s i d n e x a g e r a d a , l o que s i g u i e n d o a P a r t s c h y B i l l i c h i n t e r p r e t a n como c o n s e c u e n c i a de l a i s q u e m i a , q u e se o r i g i n a en e l t e j i d o de g r a n u l a c i d n p o r l a h i p e r p r e s i d n . Pauwels (4 7 5 -7 7 ) que c o n s id p r a e l c a r t i l a g o de causa m e c à n ic a , a f i r m a que l a g r a n p r o l i f e r a c i d n c e l u _ l a r d e l c a l l o ahoga l o s v a s o s n e o fo r m a d o s , d e t e r m i n a n d o a s i una i sq u e m ia s e c u n d a r i a que c o n t r i b u y e a l a d i f e r e n c i a c i d n c a r t i l a g i n o s a . Krompecher y Hadhazy, y K n o f l e r ( 34 ,305 ) c o n s i d e r a n en sus e s l u - d i o s e x p é r i m e n t a l e s , que l a c om pre s idn es e l f a c t o r p r i n c i p a l en l a p rodup c i d n de c a r t i l a g o y d i c e n q u e , b a j o c o m p r e s id n , su a p a r i c i d n es mas r a p i _ da a l l i donde e l a p o r t e n u t r i c i o es p e e r . Por ultimo resehamos los trabajos de Bassett y su escuela (219-21)- quienes sometiendo células osteoprogenitoras a diferentes condiciones ex­ périmentales, indican que tanto los factores mecanicos como las variacio_ nes en la saturacidn de oxigeno, influyen en la diferenciacidn celular. - 133 La compres idn s o b r e e l c u l t i v e u n i d a a una a t m o s f e r a p o b r e en o x i g e n o , dp t e r m i n a l a a p a r i c i d n " i n v i t r o " de c o n d r o b l a s t o s . E s t o s a u t o r e s o b s e r v a _ ro n ademds , que l a forma d e l e x p i a n t e d é t e r m i n a l a m o r f o l o g i a de sus c é l u l a s . Los d a t o s que hemos d e s c r i t o nos l l e v a n a l p ro b le m a de l a d i f e r e n - c i a c i d n y sus d é t e r m i n a n t e s , como l a m o v i l i d a d c e l u l a r y l a s i n t e r a c c i o n e s e n t r e c é l u l a s v e c i n a s , t o d o s e s t o s p r o c e s o s son e s t u d i a d o s hoy p o r l a em_ b r i o l o g i a y en l o s que no e n t r a m o s ( 2 9 4 ,429 ) Cuando l a s a t u r a c i d n de ox igeno es d e l 20%, s d l o se p r o d u c e segun - B a s s e t un t e j i d o c a r t i l a g i n o s o con g r a n m e t a c r o m a s i a y d i s m i n u c i d n de — l a s f i b r a s c o lé g e n a s ( 221 ) . Si l a s a t u r a c i d n de ox igeno d i sm in u y e a l 5% se p roduce s d lo una p r o l i f e r a c i d n de f i b r o b l a s t o s . Con una s a t u r a c i d n d e l 30% se o b t i e n e una o s t e o g é n e s i s i d e a l , s i e n d o l a c o n d r o g é n e s i s maxima con una s a t u r a c i d n e n t r e e l 20 y e l 65% , a p a r t i r de l a c u é l se p roduce una c o n d r o l i s i s que se a s o c i a a una o s t e o c l a s i a f r a n c a a l l l e g a r a l 95% - de s a t u r a c i d n de o x ig e n o . Sea c u a l s e a l a p r e s i d n p a r c i a l de o x i g e n o . Show a f i r m a que en e l - c e n t r e d e l c u l t i v e s iempre a p a r e c e c a r t i l a g o p o r l a poca d i f u s i b i l i d a d de a q u é l en l o s t e j i d o s . S t e r n , G o ldhabe r y G l im c he r ( 380 ,3 86 ) e s t u d i a n d o e l m etabo l i sm o de l a h i d r o x i p r o l i n a en c u l t i v e s de t e j i d o d s e o , c o n s i d e r a n que con una - s a t u r a c i d n d e l 50% de o x i g e n o , ha y un e q u i l i b r i o e n t r e l a f o rm a c i d n y l a d e s t r u c c i d n d s e a , en t a n t o que con una s a t u r a c i d n menor, p r e v a l e c e l a f o p mac idn so b re l a d e s t r u c c i d n . P r a s a r d y Reynolds ( 356 ) s e n a l a n que ademés d e l o x i g e n o , e l — a p o r t e n u t r i c i o es i m p o r t a n t e , y a q u e , es n e c e s a r i a una c o n c e n t r a c i d n mi_ nima de g l u c o s a , p o r d e b a jo de l a c u a l no s e p r o d u c e n i s i q u i e r a l a d i f e _ r e n c i a c i d n c e l u l a r . Mark ley ha o b s e rv a d o que en a n o x i a hay un acumulo Ip 134 c a l de a c i d o l a c t i c o y una d i s m i n u c i d n de l a s i n t e s i s p r o t e i c a de l a ma­ t r i z d s e a d e l c a l l o q u e , ademas , es mas d é b i l y p r é s e n t a una mayor p r p - p o r c i d n de hueso t r a b e c u l a r y t e j i d o m edu la r que en p a r t e puede s e r una r e s p u e s t a a l a a n o x i a . (323) Los t r a b a j o s de S i l v e r , B r i g h t o n , P e n t i n e n . y N i i n i k o s k i ( 3 3 5 ,3 5 1 , 3 4 2 - 4 3 ) s o b r e l a s a t u r a c i d n de ox igeno en l o s t e j i d o s de r e p a r a c i d n , han m os t r ado que l a c i c a t r i z a c i d n se hace de forma a n a e r o b i a p r i n c i p a l m e n t e y que l a PPO cae b r u s c a m e n t e d e s d e e l c a p i l a r h a c i a l a masa de c é l u l a s - p r o l i f é r a n t e s que se e n c u e n t r a n mas a l l a . El t e j i d o de r e p a r a c i d n t i e n e un g r a n d é b i t e de o x i g e n o , que e s mas marcado en l a s zonas donde e l p roce so r e p a r a t i v e es mds i n t e n s e . Cuando f i n a l i z a l a c i c a t r i z a c i d n v u e l v e n l a s t e n s i o n e s de o x ig e n o a s u s v a l o r e s n o r m a l e s . Si e l a n im a l de e s p e r p m e n t a c i d n r e s p i r a ox igeno h i p e r b é r i c o , s e p r o d u c e una a c e l e r a c i d n de l a r e g e n e r a c i d n t i s u l a r , en t a n t o que l a h i p o x i a f r e n a l a c i c a t r i z a c i d n — ( 2 3 4 - 3 5 , 2 9 9 , 3 1 3 , 3 2 3 , 3 5 0 - 5 1 ) Segun P e n t t i n e n y N i i n i k o s k i e l 02 es i m p r e s c i n d i b l e p a r a l a d i f e _ r e n c i a c i d n c e l u l a r y l a s i n t e s i s d e l c o l é g e n o , como t a m b ié n a f i r m a n Krom p e c h e r y Hadhazy, y Herndon y Chase (2 8 0 ,3 0 5 ) . Pe ro y a hemos s e h a l a d o que l a s a t u r a c i d n d p t im a p a r a l a o s t e o g é n e s i s s e e n c u e n t r a p o r d e b a j o - d e l 50%, lo que nos i n d i c a que e l hueso es un t e j i d o b r a d i t r d f i c o . " I n v ivo" l a s medidas de l a PPO se han hecho p a r a e l c a r t i l a g o , sô b r e todo en e l de c o n j u n c i d n p o r B r i g h t o n ( 234) q u i é n e n c u e n t r a su n i v e l mds b a j o en l a zona d e l c a r t i l a g o h i p e r t r d f i c o y en l a m e t a f i s i s , s i e n d o e l d r e a de l a s c é l u l a s en columna l a de mayor s a t u r a c i d n de o x i g e n o . P^ r a B r i g h t o n , l a PPO es e l mecanismo de c o n t r o l d e l c r e c i m i e n t o y c a lc i f _ i c a c i d n de l a f i s i s . Segun é l , l a r o t u r a de l o s s e p t o s t r a s v e r s a l e s de - l a s c e l d a s c a r t i l a g i n o s a s p a r a p e r m i t i r e l avance c a p i l a r , se hace a l H b e r a r de enz imas l i s o s d m i c o s l a s c é l u l a s de l a v e r t i e n t e m e t a f i s a r i a , en r e s p u e s t a a un aumento de l a PPO en l a zona p o r l a p e n e t r a c i d n c a p i l a r . 135 La m i n e r a l i z a c i o n d e l c a r t i l a g o en l a zona de l a s c é l u l a s h i p e r t r o f i c a s s é r i a p a r a Hunt una r e s p u e s t a a l a h i p o x i a l o c a l , y a que l a s m i t o _ c o n d r i a s no m a n t i e n e n en a n o x i a e l g r a d i e n t e m e t a b o l i c o n e c e s a r i o p a r a - a cum ula r e l Ca en su i n t e r i o r , que p a s a r i a a s i a l e x t e r i o r c a l c i f i c a n d o e l t e j i d o . C a l c i f i c a c i o n q u e , s e gun B e n t l e y , d é t e r m i n a l a m uer te de l a s c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s a l q u e d a r a i s l a d a s p o r e l c a l c i o . Los t r a b a j o s - de H o l t r o p ( 225 ) y Me Namee (308B ) i n d i c a n , p o r e l c o n t r a r i o , que l a s c é l u l a s c a r t i l a g i n o s a s h i p e r t r é f i c a s son c é l u l a s muy a c t i v a s , que con un aumento de l a s a t u r a c i d n de o x igeno pueden t r a n s f o r m a r s e en o s t e o b l a s t o s , como p a r e c e n c o r r o b o r a r , en p a r t e , l o s t r a b a j o s de U r i s t ( 4 0 2 ) 1965. B r i g h t o n y Krebs ( 235 ) 1972, a l e s t u d i a r l a PPO en e l c a l l o , - e n c u e n t r a n una menor s a t u r a c i d n que en l a d i a f i s i s n o r m a l , t a n t o en l a - zona de c a r t i l a g o como en l a z ona de hueso t r a b e c u l a r , lo que c o n c u e r d a con l o s d a t o s de Gudmunson y Semb ( 274 ) de un p r e d o m i n io de enz imas d e l m etabo l i sm o a n a e r o b i c a n i v e l d e l c a l l o . P a r a S i l v e r hay en e l c a l l o un d e s e q u i l i b r i o e n t r e e l numéro de c^ p i l a r e s y e l numéro de c é l u l a s , que i n c r e m e n t a e l d é b i t e de 0^ d e l tej_i do . Segun K rebs , l o s v a l o r e s de s a t u r a c i d n de o x ig e n o no v u e l v e n a sus v a l o r e s n o rm a les en e l hueso f r a c t u r a d o h a s t a que se r e p e r m e a b i l i z a e l c a n a l m e d u la r , de forma q u e , en e l c a l l o , l a PPO pe rm anece e s t a c i o n a r i a h a s t a e l 30 d i a aumentando d e s d e e s e momento r a p i d a m e n t e h a s t a e l 35, a p a r t i r d e l c u a l v u e l v e n s u s v a l o r e s a l a n o r m a l i d a d . N i i n i k o s k i y c o l s . ( 343 ) e n c u e n t r a n en f r a c t u r a s una dismin_u - c i d n , e n t r e e l 30 y e l 57 d i a , de l a PPO que v u e l v e l e n t a m e n t e a l a n o r _ m a l id a d a l c a n z é n d o l a a l 90 d i a . Los a n im a le s de e x p e r i m e n t a c i d n que fue^ ro n s o m e t idos a un rég im en de ox igeno h i p e r b a r i c o , m o s t r a r o n un aumento de l a PPO a n i v e l d e l c a l l o , que se d e s a r r o l l d y c a l c i f i e d a n t e s que en l o s a n im a le s c o n t r o l . Po r o t r o l a d o , l a p r e s i d n p a r c i a l de CO ̂ t i e n e - una e v o l u c i d n i n v e r s a de 1 f o co de f r a c t u r a . 136 P e i i i t i n e n d i c e que l a s zonas c a r t i l a g i n o s a s d e l c a l l o son mas a n a e _ r o b i a s que e l hueso t r a b e c u l a r , y c o n s i d é r a que l a h i p o x i a i n f l u y e mds sô b r e l a s i n t e s i s de l a m a t r i z que s o b r e l a d i f e r e n c i a c i d n c e l u l a r . En c o n c l u s i o n podemos c o n s i d e r a r que e l c a l l o , como c u a l q u i e r o t r a c i c a t r i z , m u e s t r a un d é b i t e de ox igeno por l a d e s p r o p o r c i o n e x i s t a n t e eri t r e e l numéro de c é l u l a s en r e l a c i o n a l de c a p i l a r e s . H ip o x ia que se m^ n i f i e s t a t am b ié n a n i v e l d e l hueso t r a b e c u l a r , cuya a p a r i c i o n d i r e c t a s a _ bemos que t i e n e l u g a r s é l o en t o r n o a lo s c a p i l a r e s . En l o s p u n t o s de - a n o x i a f r a n c a a p a r e c e c a r t i l a g o , su d i f e r e n c i a c i d n e s t é , ademds , favorecJ_ da p o r l o s f a c t o r e s mecdnicos q u e , po r un l ado d e s t r u y e n l o s v a s o s n e o f q r mados y , p o r o t r o , s e gun Krompecher , j u n t o a l a a n o x i a h a c en que e l meta_ b o l i sm o de l o s c a r b o h i d r a t o s en a n a e r o b i o s i s quede i n t e r r u m p i d o a n i v e l de l o s m e t a b o l i t o s p r o p i o s d e l c a r t i l a g o , y l a c é l u l a no s e a capaz de sin. t e t i z a r c o lageno en l a s p r o p o r c i o n e s n e c e s a r i a s p a r a l a o s t e o g é n e s i s . F a c t o r e s mecdn icos . - Pasamos a h o r a a e s t u d i a r l o s f a c t o r e s m ecdn icos que i n f l u y e n so b re l a e v o l u c i d n d e l c a l l o y d e t e r m i n a n l a a p a r i c i d n d e l c a r t i l a g o . Desde — l o s t r a b a j o ^ de K o l f f y Roux a f i n a l e s de s i g l o p a s a d o , se han d e b a t i d o - l o s a u t o r e s en t o r n o a l a i n f l u e n c i a de l o s f a c t o r e s m ecén icos s o b r e l a - e s t r u c t u r a d s e a , q u e e l l o s p o s t u l a r o n e r a d e p e n d i e n t e de l o s e s f u e r z o s a - que se v e i a som e t ido e l e s q u e l e t o . Si K o l f f y Roux a f i r m a b a n que l a p r e s i d n c o n t i n u a e r a l a r e s p o n s a b l e de l a o s t e o g é n e s i s , y l a p r e s i d n i n t e r m i t e n t e o l a a s o c i a c i d n de p r e s i d n y f u e r z a t a n g e n c i a l l a c a u s a de l a a p a r i c i d n de c a r t i l a g o . La t e n s i d n — e r a p a r a e s t o s a u t o r e s e l o r i g e n de l a d i f e r e n c i a c i d n c o n j u n t i v a . Pero - V. M ü l l e r en 1924, s i g u i e n d o a Bruns y , més f i r m e m e n te L e r i c h e y P o l i c a r d 137 en 1934 y 1936, l l e g a r o n a l a c o n c l u s i o n que s d l o en l a s zonas en r e p o s e f u n c i o n a l se p r o d u c i a una o s t e o g e n e s i s a n g id g e n a d i r e c t a o p r i m a r i a como d i c e Krompecher . Por e l c o n t r a r i o , l a p r e s i d n c o n t i n u a o i n t e r m i t e n t e - l l e v a r i a a l a a p a r i c i d n de c a r t i l a g o . La t e n s i o n , como a f i r m a b a n ya lo s a u t o r e s c l a s i c o s , o r i g i n a r i a p r im e ro un t e j i d o c o n j u n t i v o , s u s c e p t i b l e - p o s t e r i o r m e n t e a o s i f i c a r s e . A e s t a o s t e o g e n e s i s l a denomind Krompecher s e c u n d a r i a a l p r e c i s a r un t e j i d o p r e v i o , c a r t i l a g o o c o n j u n t i v o , que se o s i f i c a r i a p o s t e r i o r m e n t e . P a r a n o s o t r o s t i e n e i n t e r é s c o n o c e r l a a c c i d n de l o s e s t i m u l o s irm c a n i c o s s o b re e l d e v e n i r de 1 c a l l o . Dannis en 1948/49 (250 ) fue e l — p r im e ro en h a b l a r de c u r a c i d n " p e r primam o s o u d u re a u t o g e n e " de l a s - f r a c t u r a s , comparéndola a l c i e r r e po r p r i m e r a i n t e n c i d n de l a s h e r i d a s - c u t é n e a s , lo que c o r r e s p o n d e a l a o s t e o g é n e s i s p r i m a r i a de Krompecher . - E s t e t i p o de c i c a t r i z a c i d n d s e a f u e o b s e rv a d o p o r D a nn i s en a q u e l l a s — f r a c t u r a s t r a t a d a s p o r métodos q u i r ü r g i c o s , con una r e d u c c i d n e inm ovi_ l i z a c i d n p e r f e c t a que d e t e r m i n a b a n l a a u s e n c i a de c a l l o p e r i d s t i c o en e l p r o c e s o de c u r a c i d n de l a f r a c t u r a a s i t r a t a d a . Las p l a ç a s de o s t e o s i n t e s i s p o r é l d e s a r r o l l a d a s y la i n t r o d u c c i d n en 1939 d e l c l a v o endomedular p o r K ün tc h e r han v a r i a d o e l c o n c e p t o d e l - c a l l o dseo y han d e te r m in a d o e l e s t u d i o d e l mismo en e s t a s c o n d i c i o n e s - p a r t i c u l a r e s . Eggers (263-4 ) demos t rd que p a r a l o g r a r una o s t e o g é n e s i s p r i m a r i a d e l c a l l o l o s ex tremos f r a c t u r a r i o s d e b i a n p e rm a n e c e r i n m d v i l e s y en — c o n t a c t e , h a s t a e l p u n to que Key y Reynolds ( 366 ) e n c o n t r a b a n que - l a f i j a c i d n r i g i d a e r a e l f a c t o r mds i m p o r t a n t e , p u d ie n d o d e m o s t r a r exp_e r i m e n t a l m e n t e que s i se m an t ie ne a lo l a r g o de to d o e l p r o c e s o r e p a r a d o r l a e s t a b i l i d a d de l a f r a c t u r a , l o s e x t r e m o s n e c r d t i c o s de l o s f r a g m e n t o s no se r e a b s o r b e n , como m a n t e n ia c l a s i c a m e n t e B b h l e r , s i n o que s i r v e n de g u i a y se r e p e r m e a b i l i z a n con g r a n r a p i d e z p o r v a s o s p r o c e d e n t e s de l a - m e d u l a r . O le ru d ( 344 ) ha d e m o s t ra d o en e l p e r r o , que un c a p i l a r dseo 138 se r e g e n e r a a una v e l o c i d a d de 50 a 100 m i c r a s / d i a . Key y R eyno lds p u d i e r o n o b s e r v a r en sus e s t u d i o s , que e 1 t r a z o de f r a c t u r a se r e l l e n a b a de sde l a c a v id a d m edula r y r e g i o n p e r i o s t a l , p o r un t e j i d o de g r a n u l a c i d n que - se o s i f i c a b a p r i m a r i a m e n t e . Cuando e l t e j i d o m e d u la r no e s t a b a muy les i_q n a d o , a sum ia e l p a p e l p r i n c i p a l en e l d e s a r r o l l o d e l c a l l o . P r i e d e n b e r g ( 269) en 1952 s o m e t ie n d o l o s t r a z o s de f r a c t u r a a una c o m pre s idn a x i a l , s u p e r i o r a l a c o n t r a c t e r a m u s c u l a r t d n i c a que se p r o d u _ ce en t o r n o a una f r a c t u r a , o b t e n i a una s o l d a d u r a mds r d p i d a con muy p o _ co c a l l o e x t e r n o y un c a l l o e n d o s t a l e x u b é r a n t e de c a r d c t e r fundamental^ - mente a n g id g e n o . C l a r k y Hopes ( 244 ) a l i g u a l que E g g e r s , p e r o en m a n d i b u l a s , o_b t e n i a n con l a f i j a c i d n r i g i d a de l o s f r a g m e n t o s , una s o l d a d u r a a n g i d g e n a , que e r a s u s t i t u i d a p o r una o s i f i c a c i d n s e c u n d a r i a cuando l a e s t a b i l i d a d - de l o s f r a g m en to s no e r a a b s o l u t a o e x i s t i a un e s p a c i o e n t r e l o s mismos. P a ra M o n t i c e l l i , Matzen, Lindho lm, J u d e t , e t c . ( 291 , 335, 318 A ) l a m o v i l i d a d de l o s ex tr emos f r a c t u r a r i o s e s p e r j u d i c i a l a l romper l o s — c a p i l a r e s neoformados en t o r n o a l c a l l o y d e t e r m i n a r a s i l a a p a r i c i d n de c a r t i l a g e . Los t r a b a j o s de Yamagish i y Yoshimura ( 4 1 0 ) , de P i z z e t t i y c o l s . - (354 ) y de P a l a c i o s a i m i t a c i d n , i n t e n t a n d i f e r e n c i a r c l a r a m e n t e cada - une de l o s f a c t o r e s mecanicos que i n t e r v i e n e n en l a o s t e o g d n e s i s r e p a r a d o r a , som e t ie n d o e l t r a z o de f r a c t u r a a d i s t r a c c i d n , co m p re s id n t d n i c a , corn p r e s i d n i n t e r m i t e n t e , e t c . , e n c o n t r a n d o s i e m p r e que l a d i a s t a s i s , como ya habiai iios s e n a l a d o , l l e v a a l a a p a r i c i d n de un t e j i d o f i b r o s o . Yamagishi y Yosh imura e n c u e n t r a n que en c o n d i c i o n e s b i o m e c a n i c a s n e u t r a s , se p r o d u _ ce una o s i f i c a c i d n a n g id g e n a p r i m a r i a , cuyo r e m o d e la m ie n t o es t a m b i é n muy p r e c o z . Por e l c o n t r a r i o , l o s c a so s en que l a f r a c t u r a e s t d s p m e t i d a a - c o m p r e s id n , t i e n e l u g a r l a f o r m a c i d n de c a r t i l a g e que s u f r e una o s i f i c a - c i d n e n c o n d r a l p o s t e r i o r , y d é t e r m i n a una e v o l u c i d n mds d i l a t a d a d e l c a l l o 139 P i z z e t t i , S i l i n q u i n i , P a v e t t o y d e l P o l i , en un t r a b a j o muy e x ha us_ t i v o , i n d i c a n que e l mero c o n t a c t e e n t r e l o s f r a g m e n t o s f r a c t u r a r i o s o r i _ g i n a un c a l l o m ix t e que se hace e n d o s t a l p u r e en l o s c a s o s s o m e t id o s a — compres idn t d n i c a . P a r a e l l e s , a l i g u a l que p a r a Key y P r i e d e n b e r g , j u e _ ga e l c a l l o m edu la r un p a p e l f u n d a m e n ta l en l a c o n s o l i d a c i d n d s e a . (213) Schenk, V i l l e n e g e r , M ü e l l e r ( 3 3 8 , 3 5 2 , 3 6 1 ) d e s a r r o l l a r o n un s i s t e m a de o s t e o s i n t e s i s de c o m p r e s id n , e l AO, con e l f i n de o b t e n e r l a c u r a c i d n " p e r primam” p r e c o n i z a d a p o r B a n n i s y L a m b o t t e . Con s u s i s t e m a se d e s a _ r r o l l a una p r e s i d n de 8 a 10 Kg/cm^ a n i v e l d e l t r a z o de f r a c t u r a , que es s u f i c i e n t e p a r a o b t e n e r un c o n t a c t e p e r f e c t o con un e s p a c i o mener a 7 mj_ e r a s e n t r e l o s f r a g m e n t o s , a l menos en l a z ona i n m e d ia t a m e n te po r d e b a jo de l a p l a ç a . En e s t a s c o n d i c i o n e s i d é a l e s de s i n t e s i s d i f i c i l m e n t e repro^ d u c i b l e s en l a c l i n i c a , o b s e r v a n un fendmeno que s d l o se h a b i a d e s c r i t o - en e l remodelado de 1 hueso c o r t i c a l a d u l t e idemne . A p a r t i r de l o s v a s e s de l o s c a n a l e s de Havers que quedan v i a b l e s t r a s l a f r a c t u r a y que rec_i - ben su f l u j o de sde l a m e d u l a r , poco dahada en l o s e s t u d i o s de e s t e s a u t o _ r e s , se p roduce una n e o fo r m a c i d n c a p i l a r q u e , p r e c e d i d a p o r un grupo de - o s t e o c l a s t o s , p e r f o r a n e l hueso c o r t i c a l l a b r a n d o t u n e l e s que c r u z a n l a - l i n e a de o s t e o t o m i a y en l o s c u a l e s se d e s a r r o l l a n , a p a r t i r de l a s cél_u - l a s mesenquimales p e r i v a s c u l a r e s , nuevas o s t e o n a s p a r a l e l a s a l a c o r t i c a l . Segün M u e l l e r ( 338) s e c o m p lé ta de e s t a forma l a s o l d a d u r a d s e a en s e i s semanas , aunque es p o s i b l e a p r e c i a r en l o s e s t u d i o s r a d i o g r d f i c o s l a H - n e a de f r a c t u r a mucho t iempo d e s p u é s , p o r l e que r e c o m ie n d a m an te ne r e l - m a t e r i a l de o s t e o s i n t e s i s en l a c l i n i c a humana, a l menos d u r a n t e 18 m eses . O le rud y B a n c k w a r d t - L i l l e s t r b m ( 3 4 4 , 3 4 6 ) 1968, a f i r m a n que e l d r e a de hueso a v a s c u l a r n e c r d t i c o d i sm in u y e con e l p a s o d e l t i e m p o p o r l a rap_i da p r o l i f e r a c i d n v a s c u l a r a n t e s s e n a l a d a . Las a r e a s de c o n t a c t e p e r f e c t o e n t r e lo s f r a g m e n t o s , s e g u n O l e r u d , no son t a n f r e c u e n t e s como a f i r m a n — l o s a u t o r e s s u i z o s , y e x i s t e n zonas d e s v a s c u l a r i z a d a s que b a j o l a p r e s i d n de l a o s t e o s i n t e s i s se r e a b s o r b e n , p e r d i e n d o a s i e l c o n t a c t e e n t r e e l l a s l e c u a l c o n d i c i o n a una d i s m i n u c i d n de l a p r e s i d n a p l i c a d a y de l a e s t a b i _ 140 l i d a d de l a o s t e o s i n t e s i s . Reynolds ( 3 6 6 ) c o n c u e r d a con e s t o s d a t o s y c o n s i d é r a e s t a , l a c a u s a d e l f r a c a s o de a l g u n a s o s t e o s i n t e s i s AO. M ü e l l e r ( 338 ) , e t c . , s e n a l a que l a a p l i c a c i d n de una p r e s i d n excje s i v a d é t e r m i n a una i s q u e m ia c o r t i c a l con d e s a p a r i c i d n de l a o s t e o g e n e s i s i n t r a c o r t i c a l d e s c r i t a , que e s s u s t i t u i d a p o r un c a l l o m e d u l a r . En e l pun to o p u e s to a l a p l a ç a , e l c o n t a c t e e n t r e l o s f r a g m e n t o s - no es t a n p e r f e c t o , hay un mayor e s p a c i o e n t r e l a s c o r t i c a l e s que es iji v a d id o po r c a p i l a r e s de o r i g e n m e d u la r y p e r i o s t a l . Aunque Anderson y - R h i n e l a n d e r a f i r m a n que hay un p r e d o m in io m e d u l a r , O le ru d s e n a l a que es i n d i f e r e n t e y que ambas zonas c o n t r i b u y e n de l a misma forma a l a p é n é t r a c i d n c a p i l a r , que se a n a s to m o sa n e n t r e s i y t a r d i a m e n t e con l o s c a p i l ^ - r e s c o r t i c a l e s dando l u g a r a una o s t e o g d n e s i s a n g i d g e n a . Las o s t e o n a s - a s i fo rmadas toman una o r i e n t a c i d n p e r p e n d i c u l a r a l e j e d e l hueso y t i e - n e n , segun O l e ru d , un a n c l a j e d é b i l en l a s c o r t i c a l e s v e c i n a s , con lo — c u a l no son s u s c e p t i b l e s de r e s i s t i r l a s s o l i c i t a c i o n e s m ecdn icas nornia_ l e s . O le ru d s e n a l a que p a r a que l a " r e s t i t u t i o ad i n te g r u m " s e a comple_ t a , es p r e c i s e que e l c o ldgeno d e p o s i t a d o t e n g a u n a o r i e n t a c i d n p a r a l e l a a l a c o r t i c a l y p a r a e l l e es p r e c i s e que se p r o d u z c a un rem odelado d e l - c a l l o , p r o c e s o que e x ig e mucho t iempo p a r a c o m p l e t a r s e . ( 2 1 4 ,3 4 4 ,3 4 6 ) Cuando d i sm inuye c l a r a m e n t e l a e s t a b i l i d a d de l a o s t e o s i n t e s i s c^ mo sucede con f r e c u e n c i a en l a c l i n i c a y q u e , D a n k w a r d t - L i l l e s t r o m y 01_e r u d han r e p r o d u c i d o e x p e r i m e n t a l m e n t e i n t r o d u c i e n d o un t e r c e r f r a g m e n te en e l m o n ta je , t i e n e l u g a r l a a p a r i c i d n de c a l l o p e r i o s t a l y de c a r t i l a _ go , cuya p r e s e n c i a e s t a en r e l a c i d n i n v e r s a a l a e s t a b i l i d a d de l a f r a c _ t u r a . Schenk ( 352 ) y p o s t e r i o r m e n t e o t r o s a u t o r e s , o b s e r v a r o n que l a zô na c o r t i c a l s u b y a c e n t e a l a p l a ç a de o s t e o s i n t e s i s p r é s e n t a un r em o d e la _ do que a l c a n z a e l 60% de sus o s t e o n a s y que e x p l i c a r i a e l fendmeno d e ^ - c r i t o p o r M ü l l e r , O l e r u d , L o r e n z i , K ü n t s c h e r , e t c , , de l a mener r e s i s t e n 141 c i a de e s a c o r t i c a l a l a s s o l i c i t u d e s m e c d n i c a s , con r e f r a c t u r a de l a s mi^ mas t r a s l a e x t i r p a c i d n d e l m a t e r i a l de o s t e o s i n t e s i s . U t h o f f , Coûts y Ha r r i s , Tonino y c o l s . , M i t t e l m e i e r ( 2 4 7 ,2 5 7 ,3 9 2 ,4 0 1 ) se han ocupado de e^ t e p r o c e s o que r a d i o l d g i c a m e n t e se c a r a c t e r i z a p o r una zona de o s t e o p o r o _ s i s c i r c u n s c r i t a b a j o l a p l a ç a . En l o s e s t u d i o s h i s t o l d g i c o s a p a r e c e como zona de mayor r em o d e la d o . Los t u n e l e s v a s c u l a r e s l a b r a d o s se r e l l e n a n s_o lo p a r c i l a m e n t e de hueso d e te r m in a n d o a s i una t r a n s f o r m a c i d n e s p o n j o s a de l a c o r t i c a l . J u n t o a e l l o se ha d e s c r i t o p o r S t rom berg y M i t t e l m e i r un eji s a ncha m ie n to d e l c a n a l m e d u l a r . Todos l o s a u t o r e s s e h a l a d o s c o n s i d e r a n l a d i f e r e n c i a en e l modulo de e l a s t i c i d a d d e l hueso y de l a p l a ç a como e l or_i gen de e s t o s fendm enos. ( 2 5 7 ,3 8 7 ,3 9 2 ) Hemos de c o n s i d e r a r a h o r a l a s c o n d i c i o n e s m ec d n ica s y e l modo de cu_ r a c i d n de l a s f r a c t u r a s en l o s c a s o s de e n c l a v a m i e n t o e ndom e du la r . Kiints_ ch e r a f i r m a que a l o c u p a r e l c l a v o a j u s t a d a m e n t e l a c a v i d a d m e d u l a r , a b s q r be t o d a s l a s f u e r z a s que a c t ü a n s o b r e e l h u e s o , lo que l e p e r m i t e a l c a l l o d e s a r r o l l a r s e en c o n d i c i o n e s de r e p o s e f u n c i o n a l c o m p l e t e . El c a l l o a s i - l o g ra d o p r e s e n t a r i a una o s i f i c a c i d n a n g id g e n a p r i m a r i a , y p a r a K ü n t s c h e r - e l c a l l o p e r i o s t a l e x u b é r a n t e , que a p a r e c e e n s u s t r a b a j o s e x p é r i m e n t a l e s ( 310 ) , s é r i a d e b id o a l a f u e r t e e s t i m u l a c i d n q u i m i c a p r o d u c i d a po r l a pre^ s e n c i a d e l c l a v o en l a c a v id a d m e d u l a r . Los t r a b a j o s de T r u e t a y Cavad ias ( 396 ) m o s t r a r o n qtie t r a s l a in_ t r o d u c c i d n d e l c l a v o , l o s 2 / 3 i n t e r n e s de l a c o r t i c a l q uedaban s i n a p o r t e n u t r i c i o po r d e s t r u c c i d n de l a c i r c u l a c i d n m e d u l a r , y s d l o s i e l c l a v o e r a capaz de m an te n e r l a e s t a b i l i d a d de l a f r a c t u r a , se d e s a r r o l l a b a normalmen t e e l p r o c e s o de c u r a c i d n . En s u s e s t u d i o s e l l / 3 e x t e r n o de l a c o r t i c a l , quedaba p e r f e c t a m e n t e v a s c u l a r i z a d o a c o s t a d e l p e r i o s t i o . P o s t e r i o r m e n t e a T r u e t a , M aure r , e t c . , ( 2 9 ,3 3 0 ,4 1 2 ), e s t a n de a c u e r d o que t r a s e l f r e _ sado de l a c a v id a d m ed u la r una o s t e o s i n t e s i s e s t a b l e con un c l a v o a j u s t a d o , p ro d u c e como r é g l a un c a l l o ang idgeno p r i m a r i o . En lo que no e s t d n t o d o s l o s a u t o r e s de a c u e r d o , es en l a r e s p u e s t a 142 v a s c u l a r a l e n c l a v a m i e n t o . Zuckman y Maurer ( 330 ) f u e r o n l o s p r i m e r o s en d e m o s t r a r e l paso de f r a g m e n t o s de t e j i d o m edu la r a t r a v é s de l o s v a s o s c o r t i c a l e s a l a r e g i o n s u b p e r i o s t a l , o r i g i n a n d o e l l lamado medulohematoma. D a n c k v a r d t - L i l l e s t r b m ( 249 ) 1969, de m os t rd e x p e r i m e n t a l m e n t e que e l paso de c o n te n i d o medular a l o s v a s o s c o r t i c a l e s y a l a r e g i o n s u b p e r i o s t a l , — d i s m i n u i a mucho s i se a s p i r a b a p r e v i a m e n t e l a c a v i d a d m e d u l a r . Por e l cori t r a r i o , s i se d e s a r r o l l a una h i p e r p r e s i d n en e l memento de i n t r o d u c i r e l - c l a v o , hay una e m b o l i z a c i d n de t e j i d o m e d u l a r , que o r i g i n a zonas de n e c r o _ s i s c o r t i c a l muy e x t e n d i d a s como c o n s e c u e n c i a de l a o b s t r u c c i d n de l o s cori d u c t o s de H a v e r s , y una r e a c c i d n p e r i o s t a l e x u b é r a n t e . En lo s c a so s en - que se a s p i r a p r e v i a m e n t e l a m e d u la r , D a n c k v a r d t - L i l l e s t r b m d e m u e s t r a que l a c i r c u l a c i d n c o r t i c a l se s u p l e a p a r t i r d e l p e r i o s t i o y l a s m e t d f i s i s . - En e s t a s c o n d i c i o n e s t i e n e e l c a l l o l a misma e v o l u c i d n que en l a s o s t e o s i n t e s i s e s t a b l e s con p l a ç a de c o m pre s idn , como hemos d e s c r i t o mds a r r i b a . R h i n e l a n d e r ( 3 6 9 ) 1975, a f i r m a que en e l p e r r o s d l o a p a r e c e n v a s o s p e r i o s t a l e s p e rm e a b le s en l a s zonas de i n s e r c i d n m u s c u l a r , como l a c r e s t a d s p e r a d e l fdmur. Vasos que son c a p a c e s de s u p l i r e l a p o r t e v a s c u l a r de - l a c o r t i c a l a l d e s t r u i r s e l a c i r c u l a c i d n m e d u l a r ; en c o n s e c u e n c i a , t o d a s - l a s d r e a s c o r t i c a l e s e x e n t a s de i n s e r c i o n e s m u s c u l c r e s , se n e c r o s a n t r a s - l a i n t r o d u c c i d n d e l c l a v o , no r e a p a r e c i e n d o su v a s c n l a r i z a c i d n h a s t a que - se ha r e g e n e r a d o l a c i r c u l a c i d n m e d u l a r . ( 3 6 6 ,3 7 1 ,4 0 5 ) T r a s e s t a s d e s c r i p c i o n e s t i e n e i n t e r d s c o n s i d e r a r e l p r o c e s o de renm d e l a d o dseo c o r t i c a l . Dhem en 1965 y L a c r o i x en 1 9 7 1 ( 2 46 ,256 ) s e h a l a n que e l mismo e s t d p r o d u c i d o po r un f r e n t e de o s t e o c l a s t o s que p e r f o r a n e l h u e s o c o r t i c a l . E s t e f r e n t e de o s t e o c l a s t o s se a p r e c i a m e j o r , s e g u n d i c h o s a u t o r e s , en l o s c o r t e s l o n g i t u d i n a l e s , y su v é r t i c e fo rm a en l o s c o r t e s — t r a n s v e r s a l e s lo que se conoce como l a g u n a s de Howship. En e l hueso cortJ_ c a l a d u l t e l o s t u n e l e s a s i l a b r a d o s s ig u e n h a b i t u a l m e n t e e l e j e mayor de - l a c o r t i c a l s egun Dhem. Inm ed ia tam en te p o r d e t r d s d e l f r e n t e de o s t e o c l a s t o s a v a n z a un b r o t e 143 c a p i l a r rodeado p o r c d l u l a s m esenqu im a les i n d i f e r e n c i a d a s que van o r i g i n a n do o s t e o b l a s t o s d i s p u e s t o s en capas s u c e s i v a s s o b r e l a s p a r e d e s d e l t u n e l , a l c u d l c i e r r a n , dando l u g a r a l a a p a r i c i d n de una nueva o s t e o n a . Las l i - n e a s c é m e n ta n t e s marcan e l c o n to r n o e x t e r n o d e l t u n e l h o r a d a d o . Segün - - Dhem, e l t u n e l a s i formado t a r d a 16 v e c e s mas en r e l l e n a r s e que en p e r f o - r a r s e . L a c r o i x , a f i r m a que se d e p o s i t a n de 0 , 5 a 1 ,5 m ic r a s a l d i a a lo - l a r g o d e l c a n a l d u r a n t e l a s p r i m e r a s f a s e s d e l c i e r r e q u e , p o s t e r i o r m e n t e , se hace de forma mucho mas l e n t a . F r o s t ( 6 3 , 6 6 ) a f i r m a que en p r i m e r l u g a r s e a c t i v a n l o s o s t e o c l a s t o s que p o s t e r i o r m e n t e dan l u g a r a una p a r t e de l o s o s t e o b l a s t o s , l o s c u a l e s - p r e s e n t a n ondas de a c t i v i d a d de unos 14 d i a s de d u r a c i d n . En cada f a s e - t i e n e l u g a r l a s i n t e s i s de l a m a t r i z o r g a n i c a , que e n v u e lv e a e s t a s cdlju - l a s , y su m i n e r a l i z a c i d n . Rasmussen y B o r d i e r ( 45 ) , b a s a n d o s e en d a t o s p r e v i o s de F r o s t , - - Young, Owen, e t c . , ( 3 2 , 4 0 , 5 3 , 6 3 ) a f i r m a n que en e l hueso c o r t i c a l a d u l t o - idem ne , e l r em ode lado po r e s t i m u l o de l a PTH o de l a v i t a m i n a D, se i n i c i a s i e m p re p o r una f a s e de d e s t r u c c i d n o s t e o c l a s t i c a que va s e g u i d a de un c i - c lo o s t e o f o r m a d o r . A n i v e l de l a s u p e r f i c i e p e r i o s t a l l a p r i m e r a r e s p u e ^ t a es p o r e l c o n t r a r i o l a a p o s i c i d n d s e a . Como h i p d t e s i s se puede s u p o n e r , c o n s i d e r a n d o como p r o b a d o s l o s d^ - t o s p r e v i o s , que l a f r a c t u r a es t a m b ié n un e s t i m u l o p a r a l a r e s p u e s t a c e l u l a r que toma l a misma forma que e l rem ode la do c o r t i c a l p o r e s t i m u l o s m e ta - b d l i c o s cuando , j>or métodos q u i r ü r g i c o s , s e m a n t i e n e l a e s t a b i l i d a d mecdnj_ ca d e l h u e s o . Si e s t a no se ob b ien e en g r a d e s u f i c i e n t e , se d e s e n c a d e n a - una p r o l i f e r a c i d n c e l u l a r p e r i o s t a l que c o n t r i b u y e a l o g r a r l a e s t a b i l i d a d de l a f r a c t u r a y , una vez a l c a n z a d a , comienza e l p r o c e s o de r em ode lado que l l e v a r a a l a " r e s t i t u t i o ad i n t e g r u m " de l a c o r t i c a l . J u n t o a l a s c o n d i c i o n e s m e c a n i c i s , hemos de r e s e h a r l o s e s t u d i o s que se ocupan de l o s m e d ia d o re s q u i m i c o s d é t e r m i n a n t e s de l a t r a n s f o r m a c i d n - 144 de l a c é l u l a mesenquimal en o s t e o b l a s t o . E s t a s s u s t a n c i a s q u i m i c a s f u e ­ r o n p o s t u l a d a s po r B ie r , y L a c r o i x l a s denomind o s t e o g e n i n a s . Su e x i s t e n c i a es a c e p t a d a p o r J u d e t , T r u e t a , K u e n t s c h e r , Tonna , e t c . U r i s t y su e s c u e l a y F r i e d e n s t e i n y l a suya ( 2 7 0 ,4 0 4 ) a f i r m a n — que l a o s t e o g e n i n a l i b e r a d a de l a m a t r i z , es f a g o c i t a d a p o r unas c é l u l a s que in d u c e n , a t r a v é s de c o n t a c t e s i n t e r c e l u l a r e s , l a t r a n f o r m a c i o n e s p ^ c f f i c a de l a s c é l u l a s v e c i n a s , en e s t e caso en o s t e o b l a s t o s . Segün lo s t r a b a j o s de U r i s t y BÜhring ( 239 ) p a r e c e que se t r a t a de una macromo l é c u l a de t i p o MPS. H e y p l e , Herndon y Chase ( 280, 281 ) f u e r o n c a p a c e s de i n d u c i r , a - p a r t i r de o s t e o s a r c o m a s , hueso a t r a v é s de membranas de m i l i p o r e en c u l _ t i v o s de f i b r o b l a s t o s , lo que se d e b i a a l paso de p r o l o n g a c i o n e s c e l u l a _ r e s a t r a v é s de d i c h a s membranas. Chalmers y Rush ( 243 ) d i c e n que j u n t o a e s t e s i s t e m a s u s t a n c i a i n d u c t o r a - c é l u l a i n d u c t o r a - c é l u l a i n d u c i d a , e x i s t e n i n h i b i d o r e s con lo s que hay que c o n t a r . Por t a n t o , l a i n d u c c i o n r e s u l t a r i a d e l e q u i l i b r i o - e n t r e i n h i b i d o r e s e i n d u c t o r e s . Los t r a b a j o s de V a r t h i o w a r a y Saxen ( 85) 1974, con e p i t e l i o s r ^ n a l e s , i n d i c a n que l a i n d u c c i é n se hace c l a r a m e n t e a t r a v é s de l o s con t o s c e l u l a r e s que hemos d e s c r i t o a n t e r i o r m e n t e . F r i e d e n s t e i n ( 212) 1972 e s t u d i a n d o s i s t e m a s de i n d u c c i o n " i n v i t r o " d e s c r i b e l a e x i s t e n c i a de va c u o l a s en l a s c é l u l a s i n d u c t o r a s , que s e r i a n l a b a s e m o r f o l o g i c a d e l f a c ­ t o r i n d u c t o r . Todos e s t o s d a t o s t i e n e n mds a p l i c a c i o n en e l e s t u d i o de - l o s i n j e r t o s o se os cuyas r e v i s i o n e s e ncon t ram os en E l v e s , B o n f i g l i o , — Toung, S i f f e r t , Boyne , Ray, e t c . ( 2 2 2 , 2 3 2 - 3 , 2 6 5 - 6 , 3 2 2 , 3 3 9 , 3 5 5 , 3 6 0 , 362B ,372, 3 8 1 -2 ,4 1 1 ) . c o n c e p to de i n d u c c i o n i n i c i a d o p o r Speeman, ha s u f r i d o en e l t i e m po v a r i e s a v a t a r e s . El e s t a d o a c t u a l de l a c u e s t i é n a p a r e c e en l o s t r a b a j o s de B e l l a i r s , W olpe r t (429 ,497 ) Young c o n s i d é r a como i n d u c c i o n una - 145 e s p e c i a l i z a c i o n c e l u l a r en r e s p u e s t a a un cambio en e l m ic rom ed io , y p a r a que s u c e d a , e x ig e l a p r e s e n c i a de un c o n t a c t e i n t i m e e n t r e l a s c é l u l a s y e l m a n te n im ie n to de l a s e s p e c i a l i z a c i o n e s i n d u c i d a s . ( 5 3 , 2 1 2 , 2 3 9 , 2 5 9 , 2 7 0 , 2 8 5 , 3 4 7 , 4 0 2 - 4 ) . La e s p e c i a l i z a c i o n c e l u l a r e s un fendmeno d i s c r e t e , que comprende - l a s i n t e s i s s e l e c t i v a de un g rupo de p r o t e i n a s . La e s p e c i a l i z a c i o n es — c o n t r o l a d a po r su i n t e r a c c i d n con e l m ic ro m e d io . Hay que c o n s i d e r a r , po r t a n t o , t o d o e l complejo de f a c t o r e s f i s i c o s y q u i m i c o s que a c t ü a n sob re - l a c é l u l a . Tomado a s i , l a s u p u e s t a o s t e o g e n i n a no s é r i a mas que o t r o fajc t e r , aün de c a r â c t e r p r é p o n d é r a n t e , que a c t u a r i a como s e n a l p a r a l a e s p e - c i a l i z a c i d n c e l u l a r en un medio a p r o p i a d o . ( 4 2 9 ) . Hemos v i s t o h a s t a a q u i , que l a r e s p u e s t a c e l u l a r es d e s e n c a d e n a d a - p o r e l i n s u l t o t r a u m a t i c o , y se modula de a c u e r d o con l a s i t u a c i d n mecanâ ca en l a que se d e s a r r o l l a , po r t a n t o , nos i n t e r e s a a h o r a b u s c a r como - - e s o s f a c t o r e s f i s i c o s g rad ü a n y o r i e n t a n l a r e s p u e s t a c e l u l a r . 146 P E N O M E N O S E L E C T R I C O S PENOMENOS ELECTRICOS En lo s c a p i t u l o s p r e c e d e n t e s hemos v i s t o que en e l hueso t i e n e n l u ­ g a r una s e r i e de p r o c e s o s de p r o l i f e r a c i d n , e m i g r a c i d n y d i f e r e n c i a c i d n - c e l u l a r . S i n t e s i s de una m a t r i z o r g a n i c a d i f e r e n t e s egün l a s c o n d i c i o n e s d e l medio , es d e c i r , c a r t i l a g e o h u e s o , y su p o s t e r i o r rem ode lado con - - a d a p t a c i d n a c o n d ic i o n e s m ec a n ic a s d i f e r e n t e s , t o d o b a j o e l e s t r i c t o coji t r o l c e l u l a r . Los mécanismes que r e g u l a n e s t o s p r o c e s o s c e l u l a r e s no son c la r am en t e c o n o c i d o s . Como es s a b id o desde a n t i g u o , e l t e j i d o dseo es pobre en - t e r m i n a c i o n e s n e r v i o s a s t a n t o s e n s i t i v a s como m o to ra s ( 436 , 472 ) que - p u d i e r a n e x p l i c a r un c o n t r o l n e u r o l d g i c o d i r e c t o do los p r o c e s o s c o l u l a - r e s , como t i e n e l u g a r a n i v e l de müscu lo . ( 422 ) Los fendmenos de i n d u c c i d n , cuya e x i s t e n c i a d e s c r i b i e r a Speeman - ( 497 ) son s u s c e p t i b l e s , como mucho, de e x p l i c a r e l de senc a de narn ion to - de l a r e s p u e s t a c e l u l a r a n t e un e s t i m u l o y su m o d u la c id n h a c i a l a o s t e o g e n e s i s , pe ro no su r e g u l a c i d n , y desde luego no s i r v e p a r a e x p l i c a r l a s nm d u l a c i o n e s t i s u l a r e s p o s t e r i o r e s . Aunque de sde G a lvan i en 1972 se conoce l a e x i s t e n c i a de e l e c t r i c _ i - dad en e l o rg an i s m e , su e s t u d i o s i s t e m a t i c o es p o s t e r i o r . P r e n t e a l o s - fendmenos e l e c t r i c o s t i p i c o s d e l s i s t e m a n e r v i o s o , cuyo p a rad igm a es e l - p o t e n c i a l de a c c i d n , exp o n e n te de l a r e a c c i d n t r a n s m i s i b l e de un t e j i d o - e s p e c i a l i z a d o en l a r e s p u e s t a a e s t i m u l o s , es d e c i r , e x c i t a b l e , y cuyo e^ t u d i o se s a l e t o t a l m e n t e de n u e s t r o campo, se han d e s c r i t o en: e l o r g a n i s mo p l u r i c e l u l a r , c é l u l a s , m ac ro m o lé cu la s o r g a n i c a s y compues tos i n o r g a n i - cos o t r a s e r i e de a c t i v i d a d e s e l é c t r i c a s , que p a r a e l o r g a n i s m e v i v o se - conocen como p o t e n c i a l e s b i o e l é c t r i c o s , d i f e r e n t e s a l o s p o t e n c i a l e s de - a c c i d n a n t e s mencionados . 147 Fueron l o s t r a b a j o s de B u r r , Vent y Lund l o s que i n i c i a r o n e l e s t u ­ d i o de e s t o s fendmenos , en e s p e c i a l en l a s p l a n t a s , y p o s t u l a r o n que l a - o r i e n t a c i d n en e l e s p a c i o de l a s c é l u l a s v e g e t a l e s y a n i m a l e s d u r a n t e e l c r e c i m i e n t o e s t a b a s o m e t id a a p r o c e s o s e l é c t r i c o s . En e l r e i n o vege a l - e x i s t e n una s e r i e de t r a b a j o s como l o s de S h a t i l o v , P a n i c h k i n , N e s t e r o v , e t c . , ( 294, 420, 456 ) que d e m u e s t r a n un cambio d e l p o d e r g e r m i n a t i v o - de d i f e r e n t e s s e m i l l a s cuando se l a s somete a p o t e n c i a l e s e l e c t r i c o s . En e l r e i n o an im a l B e n t r u p y Lund ( 4 21 ,494 ) m o d i f i c a r o n e l c r e c i _ m ie n to de d i v e r s e s a n im a le s i n f e r i o r e s s o m e t i e n d o l o s a campos e l e c t r i c o s . Humphrey en 1959 (420 ) pudo h a c e r r e g r e s a r en l a r a t a d i v e r s e s tum ores - m a l ig n e s a p l i c a n d o c o r r i e n t e s de poca i n t e n s i d a d , y Ambrose ha dem os t rado que e l p o t e n c i a l s u p e r f i c i a l de l a s c é l u l a s t u m o r a l e s de h fgado y r i n d n - es s u p e r i o r en c a s i e l d o b le a l de l a s c é l u l a s n o r m a l e s d e l mismo o r i g e n , lo que e s t d p o s i b l e m e n t e en r e l a c i é n con l o s p r o c e s o s de com un icac ion iri t e r c e l u l a r d e s c r i t o s po r L oew e n s t e in ( 7 0 , 7 1 ) , que se a l t e r a n en l a s c é l u _ l a s t u m o r a l e s . Por medio de m i c r o c o r r i e n t e s ha s i d o p o s i b l e t a m b ié n p r ^ d u c i r t r o m b o s i s v e n o s a s , e t c . . Al margen de t o d o s e s o s d a t o s que pueden t e n e r i n t e r é s en m o s t r a r - que l o s p o t e n c i a l e s b i o e l é c t r i c o s e s t d n am p l ia m e n te r e p a r t i d o s en e l r e i _ no a n im a l y su p o s i b l e i m p o r t a n c i a , nos i n t e r e s a a q u i e s t u d i a r su i n f l u j o en l o s fenomenos de r e g e n e r a c i o n t i s u l a r en e l e s q u e l e t o y su e x i s t e n c i a a n i v e l o s e o . B ecker en 1961 ( 422 ) f u e e l p r im e ro en d e m o s t r a r l a e x i s t e n c i a de un campo e l é c t r i c o g l o b a l en e l o r g a n i s m e , a l menos en l a s a l a m a n d r a , y - su v a l o r p a r a l a r e g e n e r a c i o n de l o s miembros amputados a l a p l i c a r una c^ r r i e n t e c o n t i n u a s o b re e l muhon. Becker dem os t ro unas l i n e a s e q u i p o t e n c i a l e s que l e p e r m i t i e r o n e s t ^ b l e c e r un mapa d e l campo e l é c t r i c o . E n c o n t r e unos p u n t o s p o s i t i v e s s o b re e l n e u r o e j e con un maxime en l a s zonas de mayor acumulo c e l u l a r , y unos - 148 p u n t o s n e g a t i v e s maximos en l o s e x t r e m os de l o s miembros y l a c o l a , es de; c i r , a l f i n a l de l o s g r a n d e s t r o n c o s n e r v i o s o s . Observé que e s t o s p o t e n _ c i a l e s d e s a p a r e c i a n a l s e c c i o n a r l o s n e r v i o s y p o s t u l é l a e x i s t e n c i a de - un f l u j o de p o t e n c i a l e s b i o e l é c t r i c o s de o r i g e n n e u r o n a l c e n t r a l , s i n e s _ t a b l e c e r n ingün t i p o de c o r r e s p o n d e n c i a u n a t é m ic a o f i s i o l é g i c a mayor . - Af i rm a que se t r a t a de un s i s t e m a de t r a n s m i s i é n p e r f e c t a m e n t e o r g a n i z a d o como mecanismo de i n f o r m a c i é n y c o n t r o l p r i m i t i v o , y s i g u i e n d o l o s p r im e _ r o s d a t o s de S i n g e r , q u i é n i n d i c é que e l p r o c e s o de r e g e n e r a c i é n t i s u l a r g u a r d a r e l a c i é n con l a masa de t e j i d o n e r v i o s o p r é s e n t e en l a zona a reg_e n e r a r , a n a l i z a l a r e l a c i é n e n t r e l a r e g e n e r a c i é n de miembros en l a s a l ^ - mandra , l o s fenémenos e l é c t r i c o s y l a s m o d i f i c a c i o n e s d e l s i s t e m a n e r v i o _ s o . Inm ed ia tam en te t r a s l a a m p u ta c i é n se p r o d u c e a n i v e l de l a zona una i n v e r s i é n de l a p o l a r i d a d , que B ecke r r e l a c i o n a con e l p o t e n c i a l de le ̂ — s i é n ; d i sm inuye o i n c l u s e d e s a p a r e c e e l p o t e n c i a l r e g i s t r a d o t r a s l a s e c _ c i é n de l o s t r o n c o s n e r v i o s o s y m u e s t r a r e l a c i é n con l a a n e s t e s i a . Duran t e e l p r o c e s o de r e g e n e r a c i é n de 1 miembro e l p o t e n c i a l p o s i t i v e va d i s m i _ nuyendo de manera mas o menos c o n s t a n t e , p r e s e n t a n d o un nuevo mdximo de - mener i n t e n s i d a d que e l a n t e r i o r , en t o r n o a l 5- d i a t r a s l a a m p u ta c i é n , p a r a h a c e r s e después r é p i d a m e n t e n e g a t i v e , con un mdximo e n t r e e l 8 y e l 15 d i a . El v a l o r n e g a t i v e r e g i s t r a d o es muy s u p e r i o r a l f i s i o l é g i c o . Al e s t a b l e c e r una r e l a c i é n e n t r e l o s fenémenos e l é c t r i c o s y l o s h i s t o l é g i c o s , e l p o t e n c i a l p o s i t i v e a p a r e c e d u r a n t e l a f a s e de p r o l i f e r a c i é n c e l u l a r y l a f o r m a c i é n de b l a s t e m a , en t a n t o que l a f a s e n e g a t i v a a p a r e c e con l o s - p r o c e s o s de d i f e r e n c i a c i é n c e l u l a r . Segün Becke r 1961 ( 422 ) , i n m e d ia t a m e n te d e s p u é s de una f r a c t u r a se p r o d u c e , i g u a l que t r a s l a a m p u t a c i é n , una i n v e r s i o n de l a p o l a r i d a d , que se n e g a t i v i z a de nuevo en t o r n o a l décimo d i a , con un mdximo h a c i a l o s — q u i n c e d i a s . En to d o s l o s c a s o s l o s p o t e n c i a l e s r e g i s t r a d o s son de menor i n t e n s i d a d que t r a s l a a m p u t a c i é n . El p o t e n c i a l de l e s i é n s é r i a e l ori_ - gen de l o s p o t e n c i a l e s d e t e c t a d o s a n i v e l de l a f r a c t u r a , segün B e c ke r . P r i d e n b e r g y B r i g h t o n 1966 ( 450 ) r e g i s t r a r o n en c one j o s y p e r - 149 s o n a s , s o b re l a p i e l , p e r i o s t i o y h u e s o , l a e x i s t e n c i a de d i f e r e n c i a s de p o t e n c i a l y e n c u e n t r a n que t a n t o en e l a n i m a l en c r e c i m i e n t o como en e l Oj^ul to , l a e p i f i s i s de l o s h u e s o s l a r g o s es p o s i t i v a en r e l a c i é n a l a rrie t a f i s i s . E l p un to de n e g a t i v i d a d maxima se l o c a l i & a b a a unos 3 cm. de - l a l i n e a e p i f i s a r i a , y a l d e s p l a z a r e l e l e c t r o d o de medida d i s t a l m e n t e - s o b r e l a d i a f i s i s , e l p o t e n c i a l t i e n d e a h a c e r s e p o s i t i v e , p a r a en e l — a d u l t o , en o c a s i o n e s , n e g a t i v i z a r s e de nuevo a n i v e l d e l comple jo e p i f i _ s o - m e t a f i s a r i o d i s t a l . E s t o s p o t e n c i a l e s s on s i m i l a r e s s o b r e e l p e r i o s _ t i o y s o b re e l hueso c o r t i c a l e x p u e s t o , p e r o l o s r e g i s t r e s p e r i o s t a l e s - son de menor m a g n i tu d . Al p r o v o c a r una f r a c t u r a a n i v e l de l a t i b i a o - d e l f ém ur , o b s e r v a r o n que se h a c i a n e g a t i v a t o d a l a d i d f i s i s con un 29 - v é r t i c e n e g a t i v e a n i v e l d e l foco de f r a c t u r a , con un v a l o r méximo de — - 2 4 , 2 mV, y un v a l o r medio de -8 mV, en m e d i c i o n e s s o b r e l a p i e l . La n e g a t i v i d a d p e r m a n e c i a h a s t a l a c u r a c i é n h i s t o l é g i c a de l a fra_c t u r a y s o lo c i e r t o t i e m p o d e s p u é s se p r o d u c i a una v u e l t a a l p a t r é n e l é c _ t r i c o n o rm a l . El huseo c o n t r o l a t e r a l usado como c o n t r o l , mantuvo cens - t a n t e s sus m e d ic io n e s a lo l a r g o d e l e x p e r i m e n t o . E s to s d a t o s c o n f i r m a n que l a s zonas de r e g e n e r a c i é n y c r e c i m i e n t o t i s u l a r son n e g a t i v a s . Al c o n t r a r i o que B e c k e r , P r i e d e n b e r g y B r i g h t o n c o n s i d e r a n que lo s p o t e n c i a l e s r e g i s t r a d o s pueden s e r d e b id o s a d i f e r e n _ c i a s e n l a s c o n c e n t r a c i o n e s i é n i c a s en los d i v e r s o s p u n t o s medidos y dan menor i m p o r t a n c i a a l s i s t e m a n e r v i o s o en su g é n e s i s . P o r u l t i m o c o n s i d e _ r a n que e l hueso l a r g o en s i , puede to m a r s e como un c o n d u c t o r a l e s t a r - fo rmado p o r un c i l i n d r o hueco en cuyo i n t e r i o r se d e s p l a z a n c a r g a s , que en e s t e caso son l o s c o r p u s c u l o s s a n g u i n e o s . En apoyo d e l f a c t o r v a s c u l a r como g é n e s i s de l o s p o t e n c i a l e s r e g i s t r a d o s e s t a e l hecho de que — l o s p u n t o s de mayor n e g a t i v i d a d , l a m e t à f i s i s y e l a r e a f r a c t u r a r i a , s o n a s i mismo l a s zonas més r i c a m e n t e v a s c u l a r i z a d a s . E s to hace n e c e s a r i o c o n s i d e r a r l a e x i s t e n c i a de p o t e n c i a l e s de f l u j o , de l o s que nos ocupa_ remos mas a d e l a n t e . P r i e d e n b e r g c o n s i d é r a que e s t o s p o t e n c i a l e s no t i ^ ne n nada que v e r con l o s p o t e n c i a l e s p i e z o e l é c t r i c o s y demas fenémenos 150 e l é c t r i c o s r e l a c i o n a d o s con l a s s o l i c i t u d e s m ec dn ica s d e l h u e s o . B ecke r y Murray ( 426 ) 1970 t r a b a j a n d o en l a r a n a , como a n f i b i o s_u p e r i o r que e l l e s e q u i p a r a n en su c a p a c i d a d r e g e n e r a t i v a a l hom bre , midi_e - r o n en l a t i b i a l o s p o t e n c i a l e s b i o e l é c t r i c o s que a p a r e c e n en r e p o s e s o b r e e l p e r i o s t i o , e n c o n t r a n d o un g r a d i e n t e de v o l t a j e a lo l a r g o d e l hueso con un p u n to n e g a t i v e màximo l o c a l i z a d o e n t r e ambas m e t à f i s i s . Al p r o v o c a r — una f r a c t u r a l o s p o t e n c i a l e s , medidos s iem pre s o b r e e l p e r i o s t i o , m o s t r a - ban una m o d i f i c a c i o n que v a r i a b a en e 1 t i e m p o . Inm e d ia t a m e n te t r a s l a — f r a c t u r a l o s ex tr em os de é s t a se h a c e n n e g a t i v e s a p a r e c i e n d o en l a s d i à f i _ s i s , a ambos l ados y a 1 cm. aprox imadamente de l a l i n e a de f r a c t u r a , p o t e n c i a l e s p o s i t i v e s c r e à n d o s e a s i un d i p o l o que d e s a p a r e c e en l o s d i a s sucesj^ vos en l o s q u e , h a s t a e l s é p t i m o , se m e n t i e n e l a n e g a t i v i d a d de l a zona de f r a c t u r a , con un màximo en t o r n o a l d i a c u a r t o , con i n t e n s i d a d en t o r n o a l a m i t a d de l o s v a l o r e s r e g i s t r a d o s en l o s mementos i n m e d ia t a m e n te p o s t e - r i o r e s a l a l e s i é n . Cuando h a c e n l a s m e d i c io n e s d i r e c t a m e n t e s o b r e e l h u e s o , t r a s ret j_ - r a r e l p e r i o s t i o , medidas que h ace s o l o de fo rm a a g u d a , e n c u e n t r a n que lo s e x t r e m o s f r a c t u r a r i o s se h a c e n p o s i t i v e s en r e l a c i é n con l a s d i à f i s i s vecj^ n a s , a l c o n t r a r i o que l o s d a t o s de P r i e d e n b e r g a n t e s s e h a l a d o s , y ademàs - B e c k e r y Murray e n c u e n t r a n v a l o r e s de i n t e n s i d a d menor cuando l a s medidas s e h a c e n d i r e c t a m e n t e s o b re e l hueso que s i s e h a c en s o b r e e l p e r i o s t i o . La i n t e r p r e t a c i é n d e l o r i g e n de e s t o s p o t e n c i a l e s s egun Be c ke r y Mja r r a y no es u n i t a r i a , ya q u e , l o s p o t e n c i a l e s e n c o n t r a d o s a n i v e l d e l p_e - r i o s t i o l o s c o n s i d e r a n de o r i g e n n e r v i o s o y l o s r e l a c i o n a n con l a i n e r y a - c i d n p e r i o s t a l , pues l a s e c c i é n de l o s t r o n c o s n e r v i o s o s a l t e r a l o s p o t e n - c i a l e s r e g i s t r a d o s . Segun e s t o s a u t o r e s lo s p o t e n c i a l e s g e n e ra d o s p o r e l t e j i d o n e r v i o s o a e se n i v e l t e n d r i a n un p a p e l de c o n t r o l en l a d i f e r e n c i a _ c i é n y r e g e n e r a c i é n c e l u l a r . J u n t o a e s t a f u e n t e de p o t e n c i a l e s b i o e l é c t r i c o s , s e h a l a n que l a apa 151 r i c i o n d e l d i p o l o e s t d r e l a c i o n a d a con l a e n e r g i a que a b s o r b e e l hueso en e l memento de l a f r a c t u r a . El e xceso de f u e r z a a p l i c a d a , que c o n d ic i o n o l a l e s i o n , queda a b s o r b i d a p o r e l t e j i d o que l a l i b e r a d e s p u é s y , segün - B e c k e r , a t r a v é s de e se d i p o l o , que d é t e r m i n a un p a s o de c o r r i e n t e a t r a _ vés d e l hematoma con una i n t e n s i d a d e n t r e 2 y 2000 m i c r o - m i c r o - A . , que - s é r i a e l e s t i m u l o r e s p o n s a b l e de l a p r o l i f e r a t i o n c e l u l a r que va a p r o d u _ c i r e l c a l l o de f r a c t u r a . (479) A th e n s t a e d 1970 ( 418 -19 ) y Digby ( 4 4 2 - 43 ) d e m u e s t r a n en e l - hueso en r e p o s e l a e x i s t e n c i a de p o t e n c i a l e s b i o e l é c t r i c o s , y en e s p e c i a l e l p r im e ro s e n a l a que a n i v e l d e l c a r t i l a g e de c r e c i m i e n t o se p ro d u ce una p o l a r i d a d que d u r a n t e e l c r e c i m i e n t o es d i v e r g e n t e h a c i a l a e p i f i s i s y l a d i à f i s i s , cambiando e l s e n t i d o de l a p o l a r i d a d en e l memento que c e s a e l c r e c i m i e n t o , y d e m u e s t r a un g r a d i e n t e s i m i l a r a l d e s c r i t o por P r i e d e n b e r g . A t h e n s t a e d (418 ) a t r i b u y e e s t e g r a d i e n t e a l a e x i s t e n c i a de p o t e n c i a l e s p i r o e l é c t r i c o s , es d e c i r , p o t e n c i a l e s p e rm a n e n te s de c a r a c t e r m a c r o s c 6 p i _ co o r i e n t a d o s en e 1 s e n t i d o d e l e j e de l a e s t r u c t u r a en c u e s t i o n , que se m o d i f i c a n con l a t e m p e r a t u r a y l a p r e s i o n h i d r o s t à t i c a . El o r i g e n de e s _ t o s p o t e n c i a l e s r a d i c a en l a p r e s e n c i a de c a r g a s p o l a r e s en e l h u e s o , e l c o l à g e n o p r é s e n t a d i c h a s c a r g a s y no l a h i d r o x i a p a t i t a que t i e n e un cen - t r o de s i m e t r i a . Una e s t r u c t u r a p o l a r es a q u e l l a que p r é s e n t a una s e p a r ^ c i o n de c a r g a s cuyo c e n t r o de g r a v e d a d no c o i n c i d e , d e te r m i n a n d o a s i una p o l a r i z a c i o n pe rm anen te de l a m o lé c u la en e l s e n t i d o de su e j e l o n g i t u d i _ n a l . En e l c o l à g e n o , l a s ca dena s l a t é r a l e s de a n im o à c id o s y a z ü c a r e s de i o n i z a c i o n a l t e r n a n t e , son l a s r e s p o n s a b l e s de l a e s t r u c t u r a c i o n p o l a r del mismo. En e l hueso e s t e fendmeno p i r o e l é c t r i c o e s t a r i a a t e n u a d o p o r l a - c a p a m i n e r a i que cubre l a f i b r a c o l à g e n a . A t h e n s t a e d no s d l o d e s c r i b e l a p o l a r i z a c i o n de l o s h u e s o s l a r g o s y de l o s c a r t i l a g o s de c o n j u n c i d n , s i n o que ademàs d e m u e s t r a l a e x i s t e n c i a de una p o l a r i z a c i o n en e l e s q u e l e t o a x i a l , en l a s meninges que se p o l a r i _ zan en s e n t i d o ü n i c o desde e l a g u j e r o o c c i p i t a l h a s t a e l oono m e d u l a r , — m a n t e n i é n d o s e d i c h a p o l a r i d a d en l a s c u b i e r t a s de l o s n e r v i o s p e r i f é r i c o s 152 y con una p o l a r i d a d i n v e r s a de l o s axones y l a m éd u la . La p o l a r i z a c i d n de l a s e n v o l t u r a s n e r v i o s a s l a a t r i b u y e a l a d i s p o s i c i o n e s p a c i a l d e l c o l à g e _ n o . A t h e n s t a e d a f i r m a que e l c o n t r o l de l o s p r o c e s o s de c r e c i m i e n t o e s t à n en r e l a c i d n con e s t o s fendmenos e l é c t r i c o s y con l a p o l a r i z a c i d n de l a s e_s t r u c t u r a s p o r é l d e s c r i t o s . ( 4 2 8 ,4 8 3 ) Vemos, p u e s , que es p o s i b l e a n i v e l d e l h u e s o , a l margen de l o s p_o - t e n c i a l e s o r i g i n a d o s po r l a s s o l i c i t u d e s m e c à n i c a s , unos p o t e n c i a l e s b i ^ e l é c t r i c o s que d e m u e s t r a n en lo s h u e s o s l a r g o s una d i r e c c i d n y una o s c i l a _ c i d n en sus v a l o r e s segün l a edad d e l an im al y l a zona d e l h u e s o , de forma que s i g u i e n d o a A t h e n s t a e d ( 4 1 9 ) , V e i g e r t ( 4 9 2 ) , P r i e d e n b e r g (452 ) , - D igby ( 4 4 2 ) , e t c . , se puede e s t a b l e c e r e l s i g u i e n t e esquema: + — + + — + D ura n te e l c r e c i m i e n t o l o s v a l o r e s r e g i s t r a d o s son mas a l t o s , p e r o - s u c o n f i g u r a c i d n se m an t iene en e 1 i n d i v i d u o a d u l t o . Segün V e i g e r t , en e l c o n e jo o s c i l a n e n t r e -5 mV. P a r a P r i e d e n b e r g en e l a n i m a l en c r e c i m i e n t o e n l a t i b i a , l a s medidas s o b re e l p e r i o s t i o m u e s t r a n un v a l o r medio de — - 3 , 1 mV p a r a l a m e t à f i s i s y f 2 mV p a r a l a p o r c i d n c e n t r a l de l a d i à f i s i s . Con o s c i l a c i o n e s e n t r e -1 y - 6 , 3 mV e l p r im e ro y + 0 , 3 y +4 ,5 mV e l segun do p u n t o . S i en l o s v a l o r e s num ér icos e s t à n de a c u e r d o l o s a u t o r e s , no sucede lo mismo con l a i n t e r p r e t a c i d n de su o r i g e n . P o r un l ado Becker ( 423) — c o n s i d é r a l o s t r o n c o s n e r v i o s o s como r e s p o n s a b l e s de e s t o s p o t e n c i a l e s , ya que e s t o s d i s m i n u y e r o n c l a r a m e n t e , segün d i c h o a u t o r , t r a s l a s e c c i é n de - l o s n e r v i o s y lo r e l a c i o n a con e l l la m ado f l u j o e l e c t r é n i c o de l o s a x o n e s , fenomeno e l é c t r i c o d i f e r e n t e a l de l o s p o t e n c i a l e s t r a n s m i t i d o s , es d e c i r , de a c c i o n . Po r o t r o lado d i c h o a u t o r c o n s i d é r a que e s t o s p o t e n c i a l e s s e _ r i a n , en c i e r t o s e n t i d o , lo s r e s p o n s a b l e s d e l c o n t r o l de l a p r o l i f e r a c i o n 153 y d i f e r e n c i a c i é n c e l u l a r , s i g u i e n d o a S i n g e r q u i e n f u e e l p r im e r o en asi^g n a r a l s i s t e m a n e r v i o s o un p a p e l r e c t o r en e s t o s p r o c e s o s . D a to s màs re ̂ c i e n t e s de é s t e . Globus y L i v e r s a g e , e t c . (427 , 458-59 ) , i n d i c a n que - e l e f e c t o t r é f i c o d e l s i s t e m a n e r v i o s o s o b r e l o s t e j i d o s en v f a s de r e g e _ n e r a c i é n se debe màs a l a e x i s t e n c i a de un t r a n s m i s o r q u i m i c o , que a po - t e n c i a l e s de n in g ü n o t r o t i p o y que es p r e c i s e un c o n t a c t e r e l a t i v e d e l - t e j i d o n e r v i o s o con e l b l a s t e m a en v f a s de r e g e n e r a c i é n . Los d a t o s de se y Rose ( 485 ) 1974, en r e g e n e r a c i é n de miembros en a n f i b i o s , demue^ - t r a n e l mismo esquema e l é c t r i c o que e 1 ya s e n a l a d o p o r B e c k e r , y a f i r m a n que es n e c e s a r i o p a r a p e r m i t i r l a r e g e n e r a c i é n y d i f e r e n c i a c i é n d e l miem_ b r o , p e ro p a r a que e s t e campo e l é c t r i c o se p r o d u z c a , e s p r e c i s e que se e^ t a b l e z c a n u n i o n e s d e r m o e p i d é r m i c a s . F r e n t e a e l l o A t h e n s t a e d (419 ) , como ya s e n a l à b a m o s , a f i r m a que lo s p o t e n c i a l e s r e g i s t r a d o s p r o v i e n e n de l a e s t r u c t u r a p i r o e l é c t r i c a d e l c o l à _ geno o s e o , que po r su e s t r u c t u r a p o l a r m u e s t r a l a e x i s t e n c i a de un d i p o l o p e r m a n e n te , o r i e n t a d o en e l e j e l o n g i t u d i n a l de l a f i b r a c o l à g e n a . P a r a - que é s t a f u e r a l a f u e n t e r e a l de l o s p o t e n c i a l e s d e r i v a d o s , e l c o là ge no de l o s h u e s o s l a r g o s en l o s que se ha r e a l i z a d o l a s m ed idas a n t e s s e n a l a d a s , t i e n e que m o s t r a r una d i r e c c i é n l o n g i t u d i n a l p r é p o n d é r a n t e , o r i e n t a c i é n en t o r n o a l a c u a l e x i s t e n a b u n d a n te s c o n t r o v e r s i a s como d e s p u é s s e n a l a r e m o s , y p o r o t r o l ado p o d r f a e x p l i c a r e l p o t e n c i a l r e g i s t r a d o en l o s h u e s o s iji - t a c t o s , p e r o no a l a s m o d i f i c a c i o n e s que a p a r e c e n en e l momento de l a fra_c t u r a y su e v o l u c i é n . ( 1 5 0 ,2 9 0 ,4 1 5 ,4 4 5 ) B r i g h to n y P r i e d e n b e r g ( 4 3 2 , 450-54)no e n c u e n t r a n una e x p l i c a c i é n un i t a r i a p a r a e l o r i g e n de l o s p o t e n c i a l e s y c o n s i d e r a n que a l e f e c t u a r s e l a s medidas so b re e s t r u c t u r a s m a c r o s c é p i c a s , i n f l u y e n una s e r i e de f a c t o r e s , - como l a s d i f e r e n c i a s en l a c o n c e n t r a c i é n i é n i c a l o c a l e n e l pH, y dan un p a p e l p r é p o n d é r a n t e a l f l u j o v a s c u l a r cuyas v a r i a c i o n e s l o c a l e s pueden e x_ p l i c a r l a s d i f e r e n c i a s de s i g n e , ya q u e , l a s zonas màs v a s c u l a r i z a d a s son l a m e t à f i s i s y e l f oco f r a c t u r a r i o , ambos pu n to s de p o l a r i d a d n e g a t i v a en t o d a s l a s m e d id a s . Digby ( 442 ) , en una o r i e n t a c i é n c e r c a n a , c o n s i d é r a - 154 que e l o r i g e n de l a s c o r r i e n t e s se debe a l a e x i s t e n c i a de f l u j o s i o n i c o s en l o s t e j i d o s . Af irma que l a s zonas en v f a s de c a l c i f i c a c i o n son p o s i t j ^ vas en r e l a c i d n a l a s a r e a s v e c i n a s no c a l c i f i c a d a s , lo que d e m u s t r a no - s d l o en e l h u e s o , s i n o ademàs en d i e n t e s y en l a s p a r e d e s a r t e r i a l e s , en e s p e c i a l en a q u e l l a s que m u e s t r a n l e s i o n e s a r t e r i o e s c l e r d t i c a s . P a r a que e s t o s p r o c e s o s t e n g a n l u g a r , e l t e j i d o en c u e s t i o n debe p r e s e n t a r c a r a c t e r e s de s e m i c o n d u c t o r , es d e c i r , e s t a r formado por c o m p le jo s m o l e c u l a r e s - que p e r m i t a n un f l u j o de p r o t o n e s o e l e c t r o n e s a su t r a v é s , en e s p e c i a l - en p r e s e n c i a de agua . Segün Digby a n i v e l d e l h u e s o . El f l u j o c a p i l a r - a r r a s t r a i o n e s , en e s p e c i a l y OH , e n un s e n t i d o , p r o d u c i e n d o u n a cô - r r i e n t e o p u e s t a a n i v e l d e l t e j i d o , a t r a v é s d e l c u a l p a s a , p o r l a p r e s o n _ c i a en é s t e de g r a n d e s m o lé c u la s con e n l a c e s de c a rb o n e s im p l e s y d o b l e s a l t e r n a n t e s . Aparecen a s f d i f e r e n c i a s en e l pH e n t r e e l comienzo y e l fd n a l d e l a s a c a p i l a r , y l a a l c a l i n i d a d de su e x t rem e d i s t a l p o d r f a e x p l i _ c a r e l d e p o s i t o de Ca^* a d i c h o n i v e l . (443) Pero j u n t o a l o s p o t e n c i a l e s de f l u j o s e h a l a d o s , P r i e d e n b e r g , lo — mismo que B e c k e r , a c e p t a n l a e x i s t e n c i a de c o r r i e n t e s de l e s i é n que se - p ro d u c e n en e l foco de f r a c t u r a y pueden e x p l i c a r una p a r t e de l o s p o t e n _ c i a l e s r e g i s t r a d o s . Becker d i c e , ademàs, que una p a r t e de l o s mismos que se l i b e r a a t r a v é s d e l d i p o l o po r é l d e s c r i t o , t e n d r f a su o r i g e n en e l ejç ce so de e n e r g f a m ecàn ica b s o r b i d a p o r e l hueso en e l momento de l a f r a c _ t u r a . La e x i s t e n c i a de l o s b i o p o t e n c i a l e s , a s f como su e v o l u c i é n en e l - t i e m p o t r a s l a s f r a c t u r a s , con una i n v e r s i é n d e l s i g n o de l o s mismos y su s u p u e s t o p a p e l r e c t o r d e l c a l l o , ha hecho c o n c e b i r a una s e r i e de a u t o r e s l a i d e a de que l a a p l i c a c i é n de p o t e n c i a l e s de e s c a s a i n t e n s i d a d , a n i v e l d e l foco de f r a c t u r a , p o d r f a a c e l e r a r e l p r o c e s o de c u r a c i é n , a s f como e^ t i m u l a r e l c r e c i m i e n t o . Al margen de a lg ü n e x p e r im e n to c l à s i c o a i s l a d o , l o s p r i m e r o s i n t e n _ t o s r e a l i z a d o s f u e r o n l o s de Becker 1961, a l a p l i c a r p o t e n c i a l e s e n t r e - 2 y 3y^A a l esbozo de r e g e n e r a c i é n de miembros en l a s a l a m a n d r a . De a c u e r 155 do con e l momento y l a d i r e c c i o n de l a c o r r i e n t e a p l i c a d a , o b t e n i a un au- mento d e l c r e c i m i e n t o o de l a d i f e r e n c i a c i é n d e l b l a s t e m a . P o s t e r i o r m e n t e Be c ke r ( 427 ) 1972, o b t i e n e l a r e g e n e r a c i é n p a r c i a l de miembros en r a t a s j é v e n e s a p l i c a n d o c o r r i e n t e s de mayor i n t e n s i d a d , - con lo que o b s e r v a e l d e s a r r o l l o de un hümero c o m p l e te y de l o s muscu los c o r r e s p o n d i e n t e s . E s t o s p r o c e s o s r e g e n e r a t i v o s s e acompanaban de fenérrm nos de n e c r o s i s en l a zona de l o s e l e c t r o d e s . Los i n t e n t e s de e s t i m u l a r e l c r e c i m i e n t o m e d i a n t e p o t e n c i a l e s elé_c t r i c o s en e l mam ife ro , comenzados p o r Haas (492 ) en 1963, han dado en - g e n e r a l r e s u l t a d o s b a s t a n t e p o b r e s . M ink in , P o u l t o n y Hoover 1968 ( 420 473 ) , a p l i c a n d o una d i f e r e n c i a de p o t e n c i a l con u n a i n t e n s i d a d de — 70^ A a ambos l ad o s d e l c a r t i l a g o de c o n j u n c i é n , i g u a l que B a s s e t t , en_ c u e n t r a n un ica m en te una a n g u l a c i é n a n i v e l de l a f i s i s , p o r r e t r a s o d e l c r e c i m i e n t o en e l l ado de a p l i c a c i é n de l a c o r r i e n t e , y l a a p a r i c i é n de una e x é s t o s i s a n i v e l de 1 c à t o d o , en e s p e c i a l cuando é s t e se l o c a l i z a en l a m e t à f i s i s . P r i e d e n b e r g y Kohanin 1968 ( 451 ) c a l c u l a n que l a r e s i s t e n c i a p a r a e l hueso c o r t i c a l s u b p e r i o s t a l v a r i a e n t r e 2 5 .0 0 0 y 200 .000 Ohm, - de p e n d ie n d o d e l g r ad e de humedad, y por t a n t o l o s p o t e n c i a l e s f i s i o l é g i _ cos o s c i l a r à n e n t r e 3 y 10 A, i n t e n s i d a d que a p l i c a n a l h u e s o , con lo que no o b t i e n e n en n in g u n caso un e s t i m u l o de c r e c i m i e n t o , p e ro o b s e r v a n en t o r n o a l c à todo una l i s i s é s e a màs o menos e x t e n d i d a p o r n e c r o s i s p o r c o a g u l a c i é n , y en t o r n o a l ànodo à r e a s de f o r m a c i é n é s e a que nunca e r a n muy m a r c a d a s . S e h a l a n , a l i g u a l que B a s s e t t , que l a c o r r i e n t e s u m i n i ^ - t r a d a a l t e j i d o d e c a i a r à p i d a m e n t e en i n t e n s i d a d d e b id o a l i n c r e m e n t o en r e s i s t e n c i a que a p a r e c i a en t o r n o a ambos e l e c t r o d o s . Wil son 1970 (496 ) e n c u e n t r a que l a c o l o c a c i é n de e l e c t r o d o s de me t a i e s d i f e r e n t e s , que dan l u g a r a un p o t e n c i a l e l e c t r o q u i m i c o , en l a r_e g i é n d i a f i s o - m e t a f i s a r i a d e l fémur o t i b i a de c o n e j o s , p ro d u c e n un e s t i _ 1 56 mulo de c r e c i m i e n t o màs e f e c t i v o que l a a p l i c a c i o n de e l e c t r o d o s c o n e c t a - dos a una b a t e r i a y s u m i n i s t r a d o s con una i n t e n s i d a d de h a s t a 100 k , - l o que en p a r t e e r a deb id o a l a s g r a n d e s i n f e c c i o n e s que se p r o d u c f a n en e s t a s s e r i e s . V e i g e r t ( 492 - 95) 197 2 /7 3 , no pudo e s t i m u l a r e l c r e c i m i e n t o con c o r r i e n t e c o n t i n u a o a l t e r n a a p l i c a d a a t r a v é s de l a f i s i s con i n t e n s i d a des e n t r e 3 ,6 y 15 yW A, co locando e l cà todo o e l ànodo en l a e p i f i s i s , lo que se d e b e r i a a l a l é s i o n p r o d u c i d a en l a e p i f i s i s a l i m p l a n t a r en e l l a e l e l e c t r o d o , l é s i o n que s é r i a s i e m p re mayor que e l e s t i m u l o de c r e c i m i e n t o l o g r a d o con l a c o r r i e n t e . En o t r a s e r i e de e x p e r i m e n t o s s i t u a ambos - e l e c t r o d o s en l a s d i à f i s i s de a n i m a l e s en c r e c i m i e n t o , co loc a ndo unas ye c e s e l ànodo y o t r a s e l cà to do en l a p r o x im id a d d e l c a r t i l a g o de c o n ju ^ - c i o n . En to d o s l o s c a s o s , t r a s a p l i c a r 35 yWA de c o r r i e n t e c o n t i n u a a lo l a r g o de dos m eses , un p l a z o de t i empo muy l a r g o , o b tuvo un aumento e s t a _ d i s t i c a m e n t e s i g n i f i c a t i v o de l a l o n g i t u d y e l g r o s o r d e l hueso e s t u d i a d o , ( t i b i a s de c o n e j o s ) . Es e l ü n i c o t r a b a j o con r e s u l t a d o s p o s i t i v o s que he ̂ mos e n c o n t r a d o en l a l i t e r a t u r e , en l o que se r e f i e r e a e s t i m u l o s de c r e _ c i m i e n t o p o r p o t e n c i a l e s e l é c t r i c o s . Màs f r e c u e n t e m e n t e han s i d o lo s i n t e n t o s de e s t i m u l a c i o n de l a o s t e o g e n e s i s p o r ' a p l i c a c i o n de m i c r o c o r r i e n t e s . Yasuda en 1955 a p l i c o d i f e r e n t e s i n t e n s i d a d e s de c o r r i e n t e a l hueso ( 455 ) e n c o n t r an d o f o r m a c i é n é s e a e n t r e 1-100 j A k , p o r enc ima de 100 - a p a r e c e p r e p o n d e r a n te m e n t e c a r t i l a g o , y màs a l l à de 1000 ^ k s é l o hay de_s t r u c c i é n é s e a . B a s s e t t ( 423) y c o l . e n c o n t r a r o n en 1964 un r à p i d o aumen_ t o de l a s r e s i s t e n c i a s en t o r n o a l o s e l e c t r o d o s , l o que h a c e que l a i n - t e n s i d a d r e a l s u m i n i s t r a d a o s c i l a r a e n t r e 0 , 7 y 3 JAk. La r e a c c i é n o^ - t e o g é n i c a màxima a p a r e c i a a n t e s de l a s dos semanas. P r i e d e n b e r g , Smolenski y B r i g h t o n ( 4 52, 454 ) 1968 , a p l i c a n d i f e _ r e n t e s i n t e n s i d a d e s a huesos i n t a c t o s p o r i n t r o d u c c i é n de e l e c t r o d o s en la 157 m e d u la r , con un s i s t e m a que p e r m i t e m an te ne r l a i n t e n s i d a d c o n s t a n t e a p_e s a r d e l aumento de r e s i s t e n c i a de l o s t e j i d o s , l o s c u a l e s p ro d u ce n c o r r i e n . t e s de r e t o r n o h a c i a l o s e l e c t r o d o s . Con e s t e s i s t e m a l o g r a r o n m in i m i z a r l a p é r d i d a de i n t e n s i d a d a un 9%. Por d e b a j o de 5 j 4 k no o b t u v i e r o n r e s u l t a d o s p o s i t i v o s ; e n t r e 5 y 20 Jj/i k a p a r e c i a l a r e s p u e s t a o s t e o g é n i c a m^ xima , que comenzaba a d i s m i n u i r d e s p u é s , p a r a a p a r t i r de l o s 50 J A k apa r e c e r una d e s t r u c c i o n t i s u l a r que con 100 ^ k e r a s i m i l a r en ambos e l e c _ t r o d o s . En t o d o s l o s c a s o s l a o s t e o g é n e s i s se p r o d u j o en t o r n o a l p o l o - n e g a t i v o , que con l a i n t e n s i d a d op t im a , e n t r e 5 y 20 j/^k, a p a r e c i a r o d e a _ do de una zona de c a r t i l a g o de t i p o h i a l i n o , que a su vez e s t a b a rodeado de una zona de o s i f i c a c i d n d i r e c t a cuyo volumen p o d i a o s c i l a r e n t r e una - l i g e r a capa o s e a y un t a p o n que ocupaba t o d a l a m e d u l a r . H a s t a l o s 2 0 ^ k en t o r n o a l po lo p o s i t i v o o b s e r v a r o n l a p r e s e n c i a de t e j i d o f i b r o s o , que a medida que i b a aumentando l a i n t e n s i d a d e r a s u s t i t u i d o p o r una d e s t r u c _ c io n t i s u l a r po r n e c r o s i s po r c o a g u l a c i é n . P r i e d e n b e r g , Zemsky, P o l l i s y B r i g h t o n ( 4 3 3 ,4 5 1 ,4 5 2 ) en 1974, — a p l i c a n d o t a m b ié n p o t e n c i a l e s c o n t i n u e s a h u e s o s i n t a c t o s , t r a s l a i n t r o _ d u c c i é n d e l c à todo en l a c a v i d a d m edula r y , como en s u s t r a b a j o s p r e v i o s , o b t i e n e n l a r e s p u e s t a o s t e o g é n i c a màxima e n t r e 20 y 30 ^ A . La neo fo rm a_ c i é n é s e a es de t i p o t r a b e c u l a r . Hay un aumento de l a v a s c u l a r i z a c i é n nm d u l a r a e xpensas de l o s c a p i l a r e s , y h a s t a 2 0 / ^ A l a c a v id a d m edu la r mo_s t r a b a una c e l u l a r i d a d màs r i c a . En t o rn o a l ànodo e n c u e n t r a n l o s mismos p r o c e s o s de n e c r o s i s ya s e h a l a d o s . A lo l a r g o d e l e x p e r i m e n t o , que du ré 21 d i a s , se d e s a r r o l l é un aumento de l a r e s i s t e n c i a t i s u l a r , cuyo o r i g e n d e s c o n o c e n , con un v a l o r medio d e l 33%, aunque en a l g u n o s a n i m a l e s a p a r e _ c i e r o n r e s i s t e n c i a s mucho m ayore s . Como c o n s e c u e n c i a de e s e aumento de - l a r e s i s t e n c i a d e b i e r o n a u m e n ta r e l v o l t a j e s u m i n i s t r a d o p a r a m a n t e n e r l a i n t e n s i d a d . P a r a 20 k e l v o l t a j e p r e c i s e e r a 0 , 9 9 V a l p r i n c i p l e y 1,32 V a l f i n a l d e l e x p e r i m e n t o . R i c h e z , Chamay y B i e l e r , y Chamay, R ichez y B i e l e r ( 4 3 8 , 4 3 9 , 484 ) 1972, a p l i c a n a s i mismo l o s p o t e n c i a l e s en e l i n t e r i o r de l a c a v i d a d med_u 158 l a r d e l hümero de c o n e j o s , p e r o a d i f e r e n c i a de l o s a u t o r e s c i t a d o s sum i_ n i s t r a n una c o r r i e n t e p u l s a t i l c o r t o c i r c u i t a n d o l o s e l e c t r o d o s e n t r e cada a p l i c a c i o n de c o r r i e n t e , lo que ha c en basdndose en que l a c a v id a d m edu la r a c t ü a como un s i s t e m a c a p a c i t a n t e y p a r a e v i t a r un acümulo e x c e s i v o de - e l e c t r i c i d a d en su i n t e r i o r debe p o d e r d e s c a r g a r l a misma. Chamay y c o l . u s a n dos modelos e x p é r i m e n t a l e s , en e l p r im e r o a p l i - can 250 y i A d u r a n t e un seg u n d o , c o r t o c i r c u i t a n d o d u r a n t e 9 s g . , con lo - c u a l e l t e j i d o l i b e r a l a mayor p a r t e de l a e n e r g i a e l e c t r i c a acum ulada . - A lo s 9 segundos queda aün una c a r g a de 40 / ^ A , que no se ha l i b e r a d o to ̂ t a l m e n t e a l cabo de 4 m i n u t e s . En e l segundo modelo l a i n t e n s i d a d es de 50 yf A, y e l p e r i o d o de i n t e r v a l e l i b r e es de 2 s g . M edian te e s t e s i s t e m a o b t i e n e n una r e a c c i o n o s t e o g é n i c a que a l c a n z a su màximo en t o r n o a l a s 3 semanas , y lo que es màs i m p o r t a n t e , a p a r e c e - en t o r n o a ambos e lo c t ro d o s , aunque de i n t e n s i d a d l i g e r a m e n t e menor en e l à nodo . La o s t e o g é n e s i s a p a r e c e a p a r t i r de l a s c é l u l a s e n d o s t a l e s po r — o s i f i c a c i d n c o n j u n t i v a y e n c o n d r a l . En o c a s i o n e s , y màs en l a zona d e l - c à t o d o , se p roduce en p é r i o d e s a va nza dos una c a v i t a c i o n p o r r e a b s o r c i o n - d e l hueso neoformado. V e i g e r t ( 492-95 ) 197 0 /7 3 , t r a s l o g r a r l a o s t e o g é n e s i s i n t r a m e d u _ l a r con c o r r i e n t e a l t e r n a , de i n t e n s i d a d h a s t a 5 y / A , a p l i c a t a m b ié n iri - t r a m e d u l a r m e n te una c o r r i e n t e c o n t i n u a con d i f e r e n t e s i n t e n s i d a d e s . La - r e s i s t e n c i a de l o s t e j i d o s d i c e que v a r i a de a c u e r d o a l v o l t a j e a p l i c a d o , de forma que p a r a 1 ,5 V l a r e s i s t e n c i a es aprox im adam ente de 300 KOhm y - cae a 30 KOhm con un v o l t a j e de 2 , 5 V. La r e s i s t e n c i a depende a s f mismo de l a f r e c u e n c i a de l a c o r r i e n t e a p l i c a d a , d e forma que con f r e c u e n c i a s — e l e v a d a s , a p a r t i r de l o s 50 Hz, se m an t i e n e c o n s t a n t e en 2 KOhm. En cori s e c u e n c i a con e s t o , d i s e h a un s i s t e m a que l e p e r m i t e l i b e r a r una c o r r i e n _ t e a l h u e s o , i n d e p e n d i e n t e m e n t e de l a s v a r i a c i o n e s de r e s i s t e n c i a d e l mi_s mo, y con una f r e c u e n c i a de 0 , 5 s g . de paso y 0 , 5 s g . de p a u s a . De e s t a m ane ra , c o n f i r m a l o s d a t o s a n t e s s e h a l a d o s de que a l a s 3 semanas l a o^ - 59 t e o g é n e s i s es màxima, con un mayor d e s a r r o l l o en t o r n o a l c à t o d o . En t o ^ no a l c à todo hay o s t e o g é n e s i s e n t r e 25 y 50 A con un acmé a l o s 35 A En l a r e g i o n a n o d i c a l a o s t e o g é n e s i s es màxima con 40 j A A. Al e s t u d i a r de manera s e r i a d a en e l t iempo l a o s t e o g é n e s i s con 35 - A e n c u e n t r a que en p r im e r l u g a r a p a r e c e un acümulo c e l u l a r en t o r n o a ambos e l e c t r o d o s . En l a zona d e l cà todo e s t a s c é l u l a s d e p o s i t a n c o l à g e n o , en t a n t o que a n i v e l d e l ànodo hay un acümulo de f i b r i n a . T iene l u g a r - d e s p u é s l a a p a r i c i é n de l a s t r a b é c u l a s , que a l c a n z a n su màximo e s p l e n d o r a l o s 21 d i a s . Su c r e c i m i e n t o es mas l e n t o a n i v e l d e l ànodo . P a r a e l c l i n i c o t i e n e màs i m p o r t a n c i a c o n o c e r l a p o s i b i l i d a d de ace^ l e r a r l a c u r a c i é n de f r a c t u r a s y demàs s o l u c i o n e s de c o n t i n u i d a d é s e a por medio de c o r r i e n t e s e l é c t r i c a s , que l a r e s p u e s t a é s e a a i s l a d a como hemos d e s c r i t o . B a s s e t t , Pawluk y B ecke r , en 1964, f u e r o n l o s p r i m e r o s en v e r i f i c a r e x p e r i m e n t a l m e n t e d i c h o s u p u e s t o . Becker y Murray ( 426 ) en 1970, t r a s c a l c u l e r l o s p o t e n c i a l e s que a p a r e c e n como c o n s e c u e n c i a de l a f r a c t u r a en l a r a n a , a p l i c a r o n su é q u i v a l e n t e a c u l t i v e s de h e m a t i e s de r a n a en l o s - que p u d i e r o n d e s c r i b i r l a t r a n s f o r m a c i é n de e s t a s c é l u l a s en o t r a s s i m i l a r e s a l a s e n c o n t r a d a s en e l c a l l o de f r a c t u r a en d i c h o s a n i m a l e s . Demo^ t r a r o n que p a r a que t u v i e r a e f e c t o , l a d i f e r e n c i a de p o t e n c i a l d e b i a a p l i c a r s e en un campo no u n i f o r m e , y s u s medidas d e m o s t r a r o n que l a i n t e n s j^ - dad màs e f e c t i v a e r a n 50 yfA/mm con una c a i d a de v o l t a j e de 0 , 3 mV a lo l a r g o d e l c u l t i v e . La a p l i c a c i é n de l a s mismas i n t e n s i d a d e s en campos u n i f o r m e s es i n c a p a z de p r o d u c i r l a d e s d i f e r e n c i a c i é n c e l u l a r , a n t e s d e s _ c r i t a , que e s t à t o t a l m e n t e d e s a r r o l l a d a a l a s 72 h o r a s . P r i e d e n b e r g , R o b e r t s , D i d i z i a n y B r i g h t o n ( 452 , 453 ) 1971, y Br igh t o n , P r i e d e n b e r g y Blak ( 4 3 2 , 4 3 3 ) 1972 han a p l i c a d o c o r r i e n t e s galvànj_ cas a o s t e o t o m i a s e x p é r i m e n t a l e s de pé ro n é en e l c o n e j o , e n c o n t r a n d o que l a i n t e n s i d a d màs e f e c t i v a o s c i l a b a e n t r e 10 y 20 y f A. P a r a que e s t a s cjo 160 r r i e n t e s c o n t i n u a s a c e l e r a n e l c a l l o , d e b i a e s t a r c o lo c a d o e l cà to d o en e l t r a z o de f r a c t u r a , en t a n t o que en e l ànodo e r a i g u a l que se l o c a l i z a r a en l a s p a r t e s b l a n d a s v e c i n a s o a una c i e r t a d i s t a n c i a en e l hueso a f e c t o . No s o l o o b s e r v a r o n a s i una mayor r a p i d e z en l a c u r a c i o n , s i n o que ademàs e l - hueso neoformado e r a màs r e s i s t e n t e a l o s e s t i m u l o s m ecàn icos de f l e x i o n . En l o s ca sos p o s i t i v o s h a b i a un mayor d e s a r r o l l o d e l c a l l o e n d o s t a l f r e n t e a l p e r i o s t a l , pe ro s i n cambios c u a l i t a t i v o s a p r e c i a b l e s . L a v in e , L u s t r i n , Shames y Moss ( 4 6 7 - 6 8 , 4 8 9 ) 1971, a p l i c a n a ambos - l a d o s de d e f e c t o s c o r t i c a l e s en c o n e j o s , una c o r r i e n t e c o n t i n u a e n t r e 2 ,5 y 3 ,5 y f A , con lo que o b t i e n e n una a c e l e r a c i o n d e l p r o c e s o de c u r a c i o n , q u e e s t à t o t a l m e n t e d e s a r r o l l a d o a l a s t r è s semanas . V e i g e r t y c o l s . ( 494 -95 ) 1970 /74 , a p l i c a n a n i v e l de o s t e o t o m i a s de t i b i a en e l co n e jo f i j a d a s m e d ia n te p l a ç a s de com pres idn A .G . , d i f e r e n t e s t i p o s de c o r r i e n t e c o n t i n u a o p u l s a t i l , con l a i n t e n s i d a d e n t r e 5 y 40 y /A E s t u d i a n a s i mismo l a c o l o c a c i d n màs c o n v e n ie n t e de l o s e l e c t r o d o s ; a a_m - dos l ados de l a l i n e a de o s t e o t o m i a , cà todo en e l t r a z o de l a misma, c à l o _ do i n t r a m e d u l a r , ànodo en l a p l a ç a de o s t e o s i n t e s i s , a l e j a d o , o en l a s ])a_r t e s b l a n d a s . De t o d a e s t a s e r i e de e x p e r im e n to s l l e g a a l a c o n c l u s i o n de que l a i n t e n s i d a d màs ade cua da es e n t r e 1 y lO^XA a p l i c a d a con una i\rj) - c u e n c i a de 1 Hz, con e l ànodo en l a p l a ç a de o s t e o s i n t e s i s y e l c à to d o en l a l i n e a de o s t e o t o m i a . Se p roduce t am b ié n un e s t i m u l o c l a r o de l a o s t e o _ g e n e s i s con i n t e n s i d a d e s e n t r e 1 y 20 k s i e l c à to d o e s t à en l a c a v ida d m e d u l a r , y se a p l i c a l a d i f e r e n c i a de p o t e n c i a l de manera c o n t i n u a . Con e 1 p r i m e r d i s p o s i t i v e po r enc ima de 10 yf A, y de 20 j A k p a r a e l segundo , no - se e s t i m u l a l a f o rm a c i é n d e l c a l l o , que po r enc im a de 25 k es i n h i b i d o - c l a r a m e n t e . Los e s t u d i o s h i s t o l é g i c o s de l o s c a l l o s p r o d u c i d o s con una in tens j_ - dad de 5 y^ A, y un v o l t a j e de 12 mV, con lo s e l e c t r o d o s a ambos l a d o s de - l a l i n e a de o s t e o t o m i a y e l cà to d o en e l lado c o n t r a r i o a l de l a p l a ç a pa r a no d i s t o r s i o n a r l a imagen h i s t o l é g i c a , d e m u e s t r a n V e i g e r t y Verhahn — ( 495 ) que e l c a l l o a p a r e c e màs d e p r i s a , y que j u n t o a l a forma normal de c a l l o que hemos d e s c r i t o a l h a b l a r de las o s t e o s i n t e s i s e s t a b l e s , aparjo ce una mayor c a n t i d a d de c a l l o p e r i o s t a l y m e d u l a r , l o que ha v e n id o en - l l a m a r s e e l e l e c t r o c a l l o ( 4 5 5 ) . Pe ro a l margen de é s t e , V e i g e r t a f i r m a que l a v a s c u l a r i z a c i é n m edula r d e l segmente d i s t a l b a jo e l e s t i m u l o e l é c _ t r i c o es màs a b u n d a n te y e s t à màs d e s a r r o l l a d a que en l o s c o n t r ô l e s , a un_ q ue s iem pre s e a menor que en e l f r a gm en te p r o x i m a l . Como c o n s e c u e n c i a de e s t a v a s c u l a r i z a c i é n màs r i c a , l a s l ag u n a s o s t e o c i b a r i a s v a c i a s p o r muer_ t e c e l u l a r a p a r e c e n con menos f r e c u e n c i a en l o s h u e s o s s o m e t id o s a e s t fm u lo e l é c t r i c o . El numéro de o s t e o n a s que c r u z a n d i r e c t a m e n t e l a l i n e a de o s t e o t o m i a en e l punto o p u e s to a l a p l a ç a es màs a b u n d a n te en e l l ado e^ t i m u l a d o , en t a n t o que l a a n c h u ra de l a l i n e a de o s t e o t o m i a es mayor en - e l l ado c o n t r o l p o r un mayor r em ode lam ien to o s t e o c l à s t i c o d e l t r a z o , que ademàs e s t à r e l l e n o po r o s t e o n a s p e r p e n d i c u l a r e s a l a c o r t i c a l , de o r i g e n m edu la r y p e r i o s t a l . Por t a n t o l a s d i f e r e n c i a s de p o t e n c i a l a p l i c a d a s e_s t i m u l a r i a n l a c u r a c i é n " p e r primam" de l a s c o r t i c a l e s en l o s p u n t o s opue_s t o s a l a p l a ç a de o s t e o t o m i a , con un aumento de l a v a s c u l a r i z a c i é n medular y en c o n s e c u e n c i a una menor muer te c e l u l a r . En f a s e s màs t a r d i a s , Vej; - hahn y V e i g e r t dem u e s t ra n que e l remodelado a v a n z a màs r à p i d a m e n t e a n_i_ v e l de l a s t i b i a s b a j o i n f l u j o e l é c t r i c o . B a s s e t t , Pawluk y P i l l a ( 421 ,437 ) 1974, p r e c o n i z a n p a r a e l u se en p e r s o n a s e l d e s a r r o l l o de o t r o s métodos de a p l i c a c i é n de c o r r i e n t e s , po_r que l e s p a r e c e un r i e s g o e x c e s i v o e l i n t r o d u c i r e l e l e c t r o d o en e l h u e s o , y l a o s t e o l i s i s en t o r n o a l ànodo. D e s a r r o l l a n un s i s t e m a que p e r m i t e — a p l i c a r e x t e r n a m e n te un campo e l e c t r o m a g n é t i c o que p r e v i a m e n t e h a b i a n de_ m o s t r ad o t é n i a un e f e c t o e s t i m u l a d o r so b re l a s i n t e s i s d e l ADN, y l a — o r i e n t a c i é n de 1 c o l à g e n o . Pa ra e l l o a p l i c a n en p e r r o s 2 t i p o s de campo , uno de 1 msg de d u r a c i é n , a 1 Hz de f r e c u e n c i a , y un v o l t a j e màximo de 2 mv/cm. con e l que no o b t i e n e n r e s u l t a d o s c l a r a m e n t e p o s i t i v o s en l a acePe r a c i é n de l a c u r a c i é n de f r a c t u r a s d e l p é r o n é . En o t r o s s u m i n i s t r a n un - màximo de 20 mv/cm. con una d u r a c i é n de 150 sg y una f r e c u e n c i a de 65 Hz, con lo c u a l hay una a c e l e r a c i é n en e l p r o c e s o de c u r a c i é n , e l c a l l o e s — màs r e s i s t e n t e a l a s s o l i c i t u d e s m ecàn icas e , h i s t o l é g i c a m e n t e , se a p r e - c i a un c a l l o p r e p o n d e r a n te m e n t e o s e o , p o r o s i f i c a c i d n d i r e c t a , con una - o r i e n t a c i d n de l a s t r a b é c u l a s en e l e j e d e l hueso y l a p r e s e n c i a de muy - e s c a s o c a r t i l a g e . Las a p l i c a c i o n e s en l a c l i n i c a han s i d e e s c a s a s , p e r o con buenos re^ s u l t a d o s . El p r im e ro en h a c e r l o fue C ie s zy n s k y en 1963, p o s t e r i o r m e u L e - J o r g e n s e n , q u i é n e n c u e n t r a una a c e l e r a c i d n d e l 30% en l a c u r a c i d n de sus c a s e s . (461) Unes a u t o r e s emplean campes e l e c t r e m a g n é t i c e s cerne e l d e s c r i b e p e r B a s s e t t , en t a n t e que W e ig e r t y P r i e d e n b e r g y B r i g h t e n p r e f i e r e n e l u s e - de e l e c t r o d e s d i r e c t a m e n t e im p l a n t a d e s en e l h u e s e . B r i g h t e n ( 4 3 3 ) en_ c u e n t r a que p a r a l e s h u e s e s p e q u e n e s , cerne l a c l a v i c u l a , es s u f i c i e n t e — cen un s o l e e l e c t r o d e y una i n t e n s i d a d de 10 A, en t a n t e que p a r a l e s - h u e s e s l a r g e s de l a s e x t r e m i d a d e s es p r e c i s e a p l i c a r has t a 4 e l e c t r o d e s e i n t e n s i d a d e s de 20 A. La e s t i m u l a c i d n en unes y e t r e s c a s e s d u r a 12 s ^ m a n a s , cen e l miembre enyesade y s ie m pre en p s e u d e a r t r e s i s e s t a b l e c i d a . - F e r e l c o n t r a r i e W eige r t ( 4 9 4 ) , a l i g u a l que en s u s e s t u d i e s e x p é r i m e n t a l e s , a p l i c a l e s e l e c t r o d e s a ambes l a d e s de l a I f n e a de e s t e e t e m f a e psejj d e a r t r e s i s , t r a s f i j a r l a misma cen una p l a ç a de c e m p r e s i o n . Si son r e l a t i v a m e n t e a b u n d a n te s l e s e s t u d i e s de a p l i c a c i o n de p e t e n c i a l e s e l é c t r i c e s en e l a n im a l de e x p e r i m e n t a c i o n y e n e l hembre , son muy e s c a s e s l e s que se ecupan de l e s b i e p e t e n c i a l e s , ceme ya hemes s e n a l a d e , y l e s que i n t e n t a n d e s e n t r a h a r e l mécanisme de a c c i o n de l a s c e r r i e n t e s - a p l i c a d a s a n i v e l d e l h u e s e . Pero a n t e s de e n t r a r en su c e n s i d e r a c i o n , debemes r e v i s a r e l e t r e - t i p e de fenomenes e l é c t r i c e s que t i e n e l u g a r a n i v e l d e l huese y que e s td n en r e l a c i o n cen l a s d e f e r m i d a d e s que s u f r e e l misme b a j e l e s e s t i m u l e s rrm c J n i c e s que dan l u g a r a l a a p a r i c i o n de l e s p e t e n c i a l e s p i e z e e l é c t r i c e s y fo rm a s a f i n e s , que es p r e f e r i b l e deneminar p e t e n c i a l e s de e r i g e n mecdnice P t . M . , p e r l a d i s c u s i o n que e x i s t e en t e r n e a l a n a t u r a l e z a e l é c t r i c a de 61 l o s mismos . Pendmenos que desde su d e s c r i p c i o n i n i c i a l po r Yasuda se han r e l a c i o n a d o con l a l e y de Wolff y l a s t r a n s f o r m a c i o n e s que s u f r e l a e s t r u c t u r a o sea en r e l a c i o n con l a s s o l i c i t u d e s m e c a n ic a s , y a q u e , d u r a n t e mucho t iempo e l nexo e n t r e ambos fenomenos ha s i d e t o t a l m e n t e d e s c o n o c i d o . En 1957 Pukada y Yasuda o b s e r v a r o n l a a p a r i c i o n de p e t e n c i a l e s e l é c _ t r i c e s s e m e t i e n d e f r a g m e n t e s de h u e s e a c a r g a s c i c l i c a s . P e t e n c i a l e s que r e l a c i e n a r e n cen l a p r e s e n c i a d e l c e l a g e n e y ne cen e l c r i s t a l de a p a t i t a . En 1963 Shames y Lavine d e s c r i b i e r e n e l misme fenomene a l c a r g a r hu^ SOS c o m p le te s d e s e c a d e s . Aparece una d i f e r e n c i a de p e t e n c i a l en e l memen­ t o de a p l i c a r l a c a r g a cen una l i g e r a c a i d a d e l p e t e n c i a l e b t e n i d e , que se m an t ie ne en ferma de m es e t a m i e n t r a s d u r a l a c a r g a . Al r e t i r a r e l e s t i m u _ l e mecan ice s u r g e un p e t e n c i a l en s e n t i d e i n v e r s e a l p r i m e r o . En 1964, — a f i r m a n q u e , p i e z e e l e c t r i c e , ne es s o l e a q u e l c r i s t a l que c a r e c e de c e n t r e de s i m e t r i a y , en c e n s e c u e n c i a , a l s e r so m e t id e a un e s f u e r z e se p e l a r i z a p e r s e p a r a c i o n de l e s c e n t r e s de g r a v e d a d de su s c a r g a s cen a p a r i c i o n de - un d i p e l e , s i n e que son t e d e s a q u e l l e s c r i s t a l e s que b a j e un e s t i m u l e mec^ n i c e p r e d u c e n un d i p e l e p e r s e p a r a c i o n de sus c a r g a s de manera a s i m é t r i c a . La a p a r i c i o n de l a d i f e r e n c i a de p e t e n c i a l depende de l a v e l e c i d a d a l a — que se comprima e l c r i s t a l y e l s e n t i d e d e l e j e en que se ha g a , s e h a l a n d e que m i e n t r a s permanezca a p l i c a d a l a f u e r z a se m an te nd rd l a s e p a r a c i o n de - c a r g a s , p r e d u c i é n d e s e un p e t e n c i a l en s e n t i d e i n v e r s e en e l memento de cê s a r e l e s t i m u l e m ecdn ice . El p e t e n c i a l e s p r e p e r c i e n a l a l e s f u e r z e a p l i c a d o . ( 4 5 5 ,4 8 9 ) El h u e s e , t a n t e s i se c o n s i d é r a ceme f r a g m e n te e se tema ceme hue se c o m p l e t e , e s una e s t r u c t u r a p e l i c r i s t a l i n a y p a r a que en l a misma s e a e f ee t i v e e l p e t e n c i a l p i e z e e l é c t r i c e , debe m e s t r a r una e r g a n i z a c i o n e s t r u c t u - r a l que p e r m i t a que l a suma de l e s d i p e l e s de l e s d i f e r e n t e s c r i s t a l e s ne se cempensen e n t r e s i . ( 4 1 5 , 4 2 0 , 4 2 4 , 4 3 0 , 4 5 6 - 5 7 , 4 7 8 , 4 8 3 , 4 9 1 ) . Shames y Lav ine hacen una med ida de l a s r e s i s t e n c i a s e l é c t r i c a s d e l 13 11hueso y e n c u e n t r a n v a l o r e s que o s c i l a n e n t r e 10 y 1 ,7 x 10 Ohm/cm r a a p a t i t a y hueso co m p lè te , d e s c e n d i e n d e p a r a e l cel^Cgene é s e e a 8 , 0 x 10^ Ohm. Pero Becker ( 483 ) ha d e m e s t r a d e que en e l h u e s e h i d r a t a d e l a r e s i s t e n c i a cae a 10 Ohm/cm. Se c o n s i d é r a a una s u s t a n c i a ceme a i s l a n t e , en t a n t .-2 cuande p r é s e n t a una r e s i s t e n c i a p e r enc ima de 10^^ Ohm/cm, en t a n t e que cjo me s e m ic o n d u c to r a q u e l l a s cuya r e s i s t e n c i a e s c i l a e n t r e 10 y 10 OHm/cm, de fe rma que en e l husee s e c e y a t e m p e r a t u r a a m b i e n te se e n c u e n t r a en una s i t u a c i o n i n t e r m e d i a , en t a n t e que e l huese h i d r a t a d e e n t r a de l l e n e en e l d!rea de l e s s e m i c e n d u c t e r e s . McElhaney - 1 9 6 7 - ( 471 ) a f i r m a que ceme l e s c r i s t a l e s son es truc t_u r a s t r i d i m e n s i e n a l e s , a p a r e c e r d campe e l é c t r i c e en c a d a s e n t i d e de a p l i c a _ c i o n de l a f u e r z a . Mide e n f o n c e s l e s p e t e n c i a l e s que s u r g e n a l s e m e t e r a cem p res io n un fémur humane c o m p l e t e , y d i f e r e n t e s f r a g m e n t e s d e l misme y - de e t r e s f ém ures , s iem pre h a c i e n d e l a s medidas s o b r e h u e s e d e s e c a d e . Sus medidas d e m e s t r a r e n p e r un l a d e , que l a r e p r e s e n t a c i o n g r d f i c a - de l e s p e t e n c i a l e s d e r i v a d e s e r a b i f J s i c a y s i m é t r i c a , a p a r e c i e n d e cen l a c a r g a y d e s a p a r e c i e n d e a l r e t i r a r l a c e m p r e s io n . M id iende una s é r i a de — a r e a s d e l fémur i n t a c t e , o b s e rv e una d i s t r i b u c i o n muy v a r i a b l e de l a s d reas n e g a t i v a s y de l a s p o s i t i v a s , que se r e p e t i a n a l s e c c i e n a r e l h u e s e en r e _ ba n a d a s y s e m e t e r cada una de e l l a s a una c e m p r e s i o n p u r a , y aun se man te_ n i a l a p e l a r i d a d a l med i r a i s l a d a m e n t e , ceme f r a g m e n t e en fe rm a de cube , - c ada una de l a s é,reas p r e v i a s . Al e s t u d i a r h i s t e l o g i c a m e n t e cada una de - e s a s z o n a s , o b s e rv e que l a s que h a b f a n a p a r e c i d e ceme n e g a t i v a s t e n f a n un mener numéro de s i s t e m a s h a v e r s i a n e s , cen mas h u e s e l a m i n a r c i r c u n f e r e n c i a l s u b p e r i o s t a l y a b u n d a n te s l a m i n i l l a s i n t e r e s t e o n i c a s de e r i e n t a c i o n muy va r i a d a , en t a n t e que l a s zonas p o s i t i v a s e r a n muche mé̂ s r i cas en s i s t e m a s - h a v e r s i a n e s , en e s p e c i a l en s i s t e m a s e s t e o n i c e s en d e s a r r e l l e . McElhavey r e l a c i e n a , p u e s , l a a p a r i c i o n de l e s p e t e n c i a l e s PZ cen l a e r d e n a c i o n d e l c e l J g e n e y su s medidas ne a p e r t a n un g r a n apeye a l a t e e r f a r e g u l a d e r a de l a e s t r u c t u r a ose a a p a r t i r de l e s p e t e n c i a l e s g e n e r a d e s p e r l e s e s t i m u l e s m e c à n i c e s . 16^ Anderson y E r i k s s o n ( 415 ) 1 9 6 8 /7 0 , d e m u e s t r a n que l o s p o t e n c i a l e s d e r i v a d o s v a r i a n con e l g r a d e de h i d r a t a c i o n de l e s e s p e c f m e n e s , de - ferma que e l c e l a g e n e se ce e s PZ en t a n t e que e l hümede, d e b id e a l a p r e ­ s e n c i a d e l agua e s t r u c t u r a l , p i e r d e s u s p r e p i e d a d e s PZ y l e s p e t e n c i a l e s g e n e r a d e s en é l son d e l t i p e de p e t e n c i a l e s de f l u j e . Al m ed i r l e s p e t e n c i a l e s que a p a r e c e n en e l hue se s e c e , c o n s i d é r a que su e r i g e n es e l celcC_ g e n e . Al h i d r a t a r e l h u e s e , l e s d a t e s o b t e n i d e s v a r i a n y dependen d e l — g r a d e de humedad cen l e q u e , l a b a s e de l e s p e t e n c i a l e s r e g i s t r a d e s , s_e - r i a e l f l u j e d e l agua en e l t e j i d e . Ceme e l c e l à g e n e o s e e ne se puede hj_ d r a t a r t e t a l m e n t e p e r l a p r e s e n c i a de l a h i d r e x i a p a t i t a , c o n s e r v a una pa^ t e de su a s i m e t r i a y , en p a r t e , su s p r e p i e d a d e s PZ a l s e r e s t i m u l a d a s nm c à n i c a m e n t e . Pukada ( 4 5 6 ) 1968, d i c e que en l a s m a c re m e lé c u la s ceme e l c e ld g e n e y l e s MPS s e m e t id e s a e s f u e r z e s m e c J n i c e s , l o s r e s p o n s a b l e s de l a r e s p u e s - t a e l é c t r i c a son lo s d e s p l a z a m i e n t e s de l e s e n l a c e s de h i d r é g e n e , de l e s r a d i c a l e s OH , y l a d i s t o r s i o n de l e s e n l a c e s p e p t i d i c e s , a s i ceme de l e s g r u p e s p e l a r e s ( - C 0 - 0 - ) en l a s c a d e n a s l a t é r a l e s . Pukada ( 4 5 6 ) 1968, hace un d e s a r r e l l e m a te m à t i c e comple te de l a s - r e l a c i e n e s m ec a n ic a s y e l é c t r i c a s en l e s t r è s e j e s d e l e s p a c i e , e n c e n t r a n de que en l a madera e l p e t e n c i a l e l é c t r i c e se g e n e r a en un p l a n e p e r p ndj^ c u l a r a l e j e de l a f u e r z a a p l i c a d a , cuande se hace en e l s e n t i d e de l a s - f i b r a s y v i e n e dada p e r e l v a l e r d ^ ^ , p e r e l c o n t r a r i e s u s medidas en e l t e n d é n de a q u i l e s , d e m u e s t ra n que l a p e l a r i z a c i o n p o s i t i v a màxima se e_b - t i e n e a p l i c a n d e l a f u e r z a cen una i n c l i n a c i o n de 45- en r e l a c i o n a l e j e - d e l t e n d o n . Sem et iende a c e m p r e s io n cubes o s e e s en e l e j e d e l h u e s e , e_b t i e n e una p e l a r i z a c i o n p o s i t i v a en l a c a r a d i s t a l a l a a p l i c a c i o n de l a - f u e r z a y n e g a t i v a en l a p r o x i m a l , en t a n t e que s i se s e m e ten l a s c a r a s 1^ t e r a l e s a c a r g a , se p roduce una p e l a r i z a c i o n en e l s e n t i d e d e l e j e z d e l h u e s e . P e p e s c u , S g a r b e r a , D e n i s c h i ( 478 ) 1972, b a s d n d e s e en e s t u d i e s 166 de f r a g m e n t e s f e m e r a l e s d e s e c a d e s , e n c u e n t r a n u n a r e l a c i o n c l a r a e n t r e l a f u e r z a a p l i c a d a y l e s v e l t a j e s o b t e n i d e s d e n t r e de l e s l i m i t e s e l â s t i c e s d e l h u e s e , p e s t u l a n que e s t e se compor ta e l é c t r i c a m e n t e p e r l a r e u n i o n de des s i s t e m a s , une s o l i d e , p e r e s e , d i e l é c t r i c e , que h a r i a de a i s l a n t e y — que s é r i a r e s p o n s a b l e de l a r e s p u e s t a PZ, y p e r e t r e l a d e impregnande e_s t e s i s t e m a una s e l u c i o n e l e c t r e l i t i c a que h a r i a de c o n d u c t o r y s é r i a r e ^ p e n s a b l e de l e s p e t e n c i a l e s de f l u j e . Vemes, p u e s , que t a n t e e s t e s a u t e - r e s ceme A nder sen , ne c e n s i d e r a n ya un e r i g e n u n i c e p a r a l e s Pt .M. S t e i n b e r g , B u s e n k e l l , Wert , Cohen, B l a c k , K e r e s t e f f , (482) B la c k y K e r e s t e f f (430) y S t e i n b e r g , B u s e n k e l l , B la c k y K e r e s t e f f (491) 1972-1974 , ha c en en una p r i m e r a f a s e medidas en h u e s e s c o m p l e t e s p a r a d e s p u é s h a c e r - l a s s o l e en espec im enes c o r t i c a l e s s iem pre m a n t e n id e s a t e m p e r a t u r a y hu­ medad c o n s t a n t e , e n c e n t r a n d e que l a s a r e a s b a j e c e m p r e s io n a p a r e c e n nega­ t i v a s en r e l a c i o n a l a s a r e a s en t e n s i o n . El v e l t a j e m ed ide , cen un mâx_i_ me de 7 , 6 mV, m u e s t r a una r e l a c i o n d i r e c t a cen l a c a r g a a p l i c a d a , s iempre d e n t r e de l e s l i m i t e s f i s i e l o g i c e s , y una r e l a c i o n ne l i n e a l cen l a fre^ - c u e n c i a a l a que se a p l i c a d i c h a f u e r z a p e rque p e r enc im a de una f r e c u e n - c i a e l i n c r e m e n t e en v e l t a j e e s minime. Af i rm an que m i e n t r a s se m an t iene a p l i c a d a l a f u e r z a hay una c a i d a d i s c r e t a d e l p e t e n c i a l que d e s p u é s se — m a n t i e n e en ferma de m ese ta t e d e e l t i e m p e que d u r a e l e s t i m u l e , y que la a l t u r a de e s a m ese ta es p r e p e r c i e n a l a l a f u e r z a a p l i c a d a . Pe r e t r e l a d e , a l c o n t r a r i e que B a s s e t t y B ecke r (423) y que Shames y L a v in e , i n t e r p r £ - t a n l a c a i d a i n i c i a l d e l v e l t a j e ceme d e b i d a a l a n a t u r a l e z a v i s c e e l â s t i - c a de 1 m a t e r i a l , ceme p r e p u s i e r a S e d l i n ( 4 8 8 ) . Ne d i s c u t e n e s t e s a u t o r e s e l e r i g e n f i s i c e de e s t e s p e t e n c i a l e s n i su n a t u r a l e z a e x a c t a . R e i n i s h y Nerdwick (483) 1975, ha c en un e s t u d i e de l a s p r e p i e d a d e s e l é c t r i c a s de 1 huese de a c u e r d e a l e s e s t i m u l e s m e c a n ic e s y a l a humedad d e l e s p e c i m e n , y a que , e l c e l a g e n e cen 45^ de h i d r a t a c i o n p i e r d e sus peteri c i a l e s PZ. E n c u e n t r a n una r e l a c i o n p e r f e c t a e n t r e e l c e n t e n i d e en agua - d e l hue se y l e s p e t e n c i a l e s d e r i v a d e s , e b s e r v a n d e que p a r a e l 100^ de h_u 167 medad, e l c o la g e n o dseo s o lo p r é s e n t a un c o n t e n i d o en agua d e l 12^, p o r su r e l a c i o n con e l m i n e r a l , y no o b s e rv a n cambios con l a d e s e c a c i o n d e l e s p e _ cimen, p o r e l c u a l c o n s i d e r a n que p a r a t o d o s l o s g r a d e s de humedad, a l ceri t r a r i e que Andersen y E r i k s e n , e l huese se compor ta cemo un m a t e r i a l pei^ - f e c t a m e n t e PZ, s i n e x i s t i r p e t e n c i a l e s de f l u j e . Marine y Becker ( 498 ) 1975, conge la n d e l e s e s p e c im e n e s p a r a h e l a r e l ag u a a -2 5 -C , d e m ue s t ra n l a pe rm a n e n c ia de l e s p e t e n c i a l e s PZ p e r f e c t a _ mente y a f i r m a n que e l agua no es impedimente p a r a e l d e s a r r e l l e de d i c h e s p e t e n c i a l e s . Si e s t e s a u t o r e s , cen c i e r t a s v a r i a n t e s , a c e p t a n que l e s P t .M . d e r i _ v a d e s s en de t i p e PZ, e x i s t e n e t r a s e r i e de e l l e s que c e n s i d e r a n un e r i g e n d i f e r e n t e . B a s s e t t , B e c k e r , B a s s e t t , Becke r y Bachman ( 4 2 0 , 4 2 3 - 2 4 , 4 2 6 ) , Becker y Bachman ( 425 ) y B a s s e t t ( 220) o b s e r v a r o n en 1962 y 1964, l e s d a ­ t e s que hemes s e n a l a d e a n t e r i e r m e n t e , es d e c i r , d e r i v a c i o n de p e t e n c i a l e s a l s e m e t e r un hue se comple te e f r a g m e n t e s d e l misme a una f u e r z a , cen apa r i c i d n de c a r g a s de s ig n e n e g a t i v e en l a s a r e a s de c e m p r e s i o n . A p a r i c i o n de u n a zona en m ese ta s de i n t e n s i d a d l i g e r a m e n t e i n f e r i o r a l apex de l a - c u r v a a l m a n t e n e r a p l i c a d a l a f u e r z a , cen una i n v e r s i o n , s i e m p re de mener m a g n i tu d , d e l p e t e n c i a l r e g i s t r a d e , a l r e t i r a r l a c a r g a a p l i c a d a . E s t e s d a t e s p a r a B a s s e t t y c o l . c e n t r a d i c e n l a n a t u r a l e z a PZ d e l h u e s e a l que - a t r i b u y e n un c a r a c t e r s e m i c o n d u c t o r . Se c o n s i d é r a ceme t a l , aque] c u e rp e a medie camine e n t r e c e n d u c t e r e s y a i s l a n t e s que puede s e r de des t i p e s ; N cuande t i e n e un c i e r t e numéro de e l e c t r e n e s que pueden e x c i t a r s e a l a - capa de c e n d u c c i o n , y P cuande p r e s e n t a n una s e r i e de h u e c e s p a r a e le c t ro ^ nés en su V a l e n c i a de c e n d u c c i o n . Si se r e u n e n des m a t e r i a l e s , une de - t i p e P y e t r e de t i p e N, f e rm an un s i s t e m a PN que a l s e m e t e r s e a e s t i m u _ l e s m e c â n ic e s g e n e r a n una d i f e r e n c i a de p e t e n c i a l que f l u y e en un s o l e — s e n t i d e , e l de l a f u e r z a a p l i c a d a , e s d e c i r , que r e c t i f i c a n l a c e r r i e n t e , ceme l e s d i o d e s . E s t a s p r e p i e d a d e s v a r i a n cen l a t e m p e r a t u r a . 168 Las medidas de e s t e s a u t e r e s p a r a e l hue se han d e m e s t r a d e que l a - c e n d u c t i v i d a d ne depende s o l e de l a t e m p e r a t u r a s i n e ademas d e l g r a d e de humedad, y t a n t e e l c e l a g e n e ceme l a h i d r e x i a p a t i t a t i e n e p r e p i e d a d e s se ̂ m i c e n d u c t e r a s , s i e n d e e l p r i m e r e de t i p e N y e l s e g u n d e de t i p e P, cen l e que fe rm an un c ue rpe PN. P e re e s t e s ne s e n l e s u n i c e s e r i g e n e s p e s i b l e s de l e s P t . M . ; ceme - ya d i j i m e s a n t e r i e r m e n t e , A t h e n s t a e d t y Lang c e n s i d e r a n que l e s p o t e n c i a - l e s t i e n e n una base p i r e e l e c t r i c a . P e r e t r e l a d e s e n a l a m e s t a m b ié n l a ini p e r t a n c i a d e l f l u j e de i e n e s de d i v e r s e s t a m a n e s , ceme b a s e de l a s c e r r i e j e t e s d e t e c t a d a s , y ne s o l e l a que se p roduce ceme c e n s e c u e n c i a d e l f l u j e — s a n g u i n e e , s i n e ademas p e r e l d e s p l a z a m i e n t e de i e n e s en un s o l i d e , semetj_ de a d e f e r m a c ie n e s ceme s e n a l a n Digby, Andersen y E r i k s e n , a s i ceme P e p e s ­ cu y c e l . B e h a r i , Guja y Agarwal (428) 1974, s u g i e r e n que mas que a un f l u j e i o n i c e l a c a p a c i d a d de s e m ic o n d u c to r se debe a un f l u j e e l e c t r o n i c e y pro^ t o n i c e , ceme dem u e s t ra n l e s cambies en l a r e s i s t e n c i a e l é c t r i c a c e n l a — t e m p e r a t u r a . E l f l u j e p r e t o n i c e e s t a en r e l a c i o n c e n l a p r e s e n c i a de e n ­ l a c e s de h i d r o g e n e . A n i v e l d e l c a r t i l a g e a r t i c u l a r se han d e s c r i t e a s i misme l a p r e s e n c i a de P t .M. Asi Mareudas (470) 1968, hace un d e s a r r e l l e t e o r i c e comple te de l a r e l a c i o n e n t r e l e s p e t e n c i a l e s de f l u j e que s e p r e d u c e n en e l c a r t ^ - 4l a g e s e m e t id e a p r e s i o n - p e t e n c i a l e s d e l e r d e n de 4 , 8 a 6 , 0 x 10 V, a 1 a tm de p r e s i o n - cen e l f l u j e de i e n e s , c e n s i d e r a n d e a l c a r t i l a g e ceme una e s t r u c t u r a b i f a s i c a fermada p e r un p e l i a n i e n cen c a r g a s f i j a s u n i d a s - a una e s t r u c t u r a p e r e s a y agua cen e l e c t r e l i t e s en s e l u c i o n . No e n t r â m e s en su d i s c u s i o n p e r a l e j a r s e d e l tarn que nos e c u p a . L e t k e , B la c k , R ic h a rd s o n ( 469 ) 1974, e n c u e n t r a una s e r i e de — p e t e n c i a l e s a l s e m e t e r e l c a r t i l a g e a d e f e r m a c i o n , p e t e n c i a l e s que s e n d_i f e r e n t e s en l a s u p e r f i c i e y en e l i n t e r i o r d e l c a r t i l a g e , y a su vez en - 169 l a s zonas p e r i c e l u l a r e s y en e l i n t e r i o r de l a s l a g u n a s . De a c u e r d o con - e s t e s d a t e s , l e s a u t e r e s c e n s i d e r a n que e l e r i g e n de l e s p e t e n c i a l e s d e t e c t a d e s es m u l t i p l e , p e r un l a d e l e s p e t e n c i a l e s de f l u j e , p e r e t r e l a s a l t ^ r a c i e n e s en e l e q u i l i b r i e de Dennan de l e s i e n e s en s e l u c i o n , y p e r e t r e - l a s m e d i f i c a c i e n e s en l a s c a r g a s p e l a r e s d e l c e l a g e n e y l e s MPS de l a m^ - t r i z s d l i d a de 1 c a r t i l a g e . Pasa rem es a h e r a a c e n s i d e r a r que i n f l u e n c i a t i e n e n l e s fenom enes elé_c t r i c e s r e g i s t r a d e s s o b re e l c e m pe r ta m ie n te o s e e . P e r un l a d e hemes e b s e r - vade l a e x i s t e n c i a de unes p e t e n c i a l e s en r e p o s e , que se a l t e r a n t r a s l a - r e t u r a d e l huese y que v u e l v e n a l a n e r m a l i d a d a l r e s t i t u i r s e l a i n t e g r j_ - dad a n a t d m i c a . P e r e t r e , hemes v i s t e que e s t e p r e c e s e de c i c a t r i z a c i o n — puede a c e l e r a r s e cen l a a p l i c a c i o n de c e r r i e n t e s e l é c t r i c a s a su n i v e l , y p e r u l t i m e hemes d e s c r i t e l a p r e s e n c i a de p e t e n c i a l e s e l é c t r i c e s r e l a c i e n a des cen l e s e s f u e r z e s m ecan ices a l e s que se semete e l h u e s e , y que se i n - t e r p r e t a n ceme e l mécanisme r e c t o r , e a l menes ceme l a s e n a l que t r a d u c e - e l e s t i m u l e mecanice a l a c é l u l a que r e s p e n d e r a en c e n s e c u e n c i a , m o d i f i e r a do l a e s t r u c t u r a o s e a . ( 4 1 6 , 4 3 1 , 4 3 4 - 3 6 , 4 4 0 - 4 1 , 4 4 5 - 4 9 , 4 6 2 —6 6 , 4 7 5 - 7 7 , 4 8 6 ) . E x i s t e una s e r i e de t e e r i a s en t e r n e a l p u n t e dende a c t u a n l e s p e t e n c i a l e s ; s i a n i v e l de l a s c é l u l a s , de s u s e r g a n i t e s e de s u s p r e d u c t e s . A n i v e l c e l u l a r , l e s e s t u d i e s de Becker y B e c k e r y Murray ( 4 2 2 ,4 2 6 ) 1970, d e m e s t r a r e n que l e s h e m a t i e s de r a n a , s e m e t i d e s a d i f e r e n c i a s de p e ­ t e n c i a l , s u f r e n una s e r i e de t r a n s f e r m a c i e n e s s i m i l a r e s a l a s que se e b s e r van d u r a n t e e l d e s a r r e l l e d e l c a l l e , de f e rm a que en un p r i m e r memento — p i e r d e n l a h e m e g l e b i n a , p a r a a c e n t i n u a c i o n c e n c e n t r a r s e e l n u c l e e que se hace c l a r a m e n t e v i s i b l e y se r e d e a de un c i t e p l a s m a c l a r e . E s t a d e s d i f ^ - r e n c i a c i o n c e l u l a r se m an t iene " i n v i t r e " d u r a n t e un l a p s e de t i e m p e r e l a _ t i v a m e n t e l a r g e . En e c a s i e n e s p u d i e r e n e b s e r v a r , aunque ne de una manera c o n s i s t a n t e , que d i c h a s c é l u l a s se r e d e a b a n de una m a t r i z . Cen m étedes i s e t é p i c e s e h i s t e q u i m i c e s h a l l a r e n que t r a s l a a p l i c ^ - 17(; c io n d e l p o t e n c i a l y l a e x t r u s i o n de l a h e m o g lo b in a , p a s a b a e l n u c l e o p o r una f a s e muy i n t e n s a de s i n t e s i s de ARN, que e m ig rab a a l c i t o p l a s m a donde se acumulaba y en e l c u a l se dem os t raba l a e x i s t e n c i a de g r a n numéro de - r i b o s o m a s . E s t e s h a l l a z g e s h i c i e r e n p e s t u l a r a B e c k e r y M urray que l e s - b i e p e t e n c i a l e s p r e d u c e n un e s t i m u l e c e l u l a r , cen aumente c l a r e de su meta b e l i s m e y de l a s i n t e s i s p r e t e i c a , l e que l e s c a p a c i t a p a r a i n i c i a r un — p r e c e s e de r e g e n e r a c i o n t i s u l a r . Les d a t e s de Pepescu y c o l . ( 478 ) , c e n s i d e r a n d e a l h u e s e v i v e co_ - 1 9me un c e n d e n s a d e r p l a n e , e n c u e n t r a n una f u e r z a de 10 Newton de magn_i - t u d p a r a una l a g u n a e s t e e c i t a r i a c e l e c a d a p e r p e n d i c u l a r a l campe e l é c t r i _ ce a l e s t u d i a r su a p l i c a c i o n a l h u e s e , y que l a i n t e n s i d a d depende d e l — cesene de 1 a n g u le de i n c i d e n c i a d e l campe so b re l a p a r e d e s t e e c i t a r i a . E_s t e é q u i v a l e a un f l u j e i o n i c e de 10 ̂ cm/sg. P a ra Pe p e s cu y c o l . es mas i m p o r t a n t e e l b lo q u é e de i e n e s a n i v e l de l a l a g u n a e s t e e c i t a r i a en e l — s e n t i d e que l a p e l a r i z a c i o n impide l a e m i g r a c i o n e l e c t r e f e r é t i c a l i b r e de l e s i e n e s , cen l e c u a l se p r e d u c e n d e s e q u i l i b r i e s i o n i c e s r é g i o n a l e s que a c t u a r i a n so b re l a membrana c e l u l a r de l a misma fe rm a que l e s p r e c e s e s — que d e s e n c a d e n a n un p e t e n c i a l de a c c i o n . Y p e s t u l a n que s i e s t e se p r e d u ce de una manera r i t m i c a p e r l a s s o l i c i t u d e s m e c a n ic a s a l t e r n a n t e s , puede m odula r l a a c t i v i d a d c e l u l a r e s t e e c i t a r i a . S e c e l a r y P e l i t e f f ( 70 ,8 1 ) 1970 a l a p l i c a r " i n v i t r e " c e r r i e n t e s - d e p e l a r i z a n t e s a c é l u l a s de g l a n d u l a s a l i v a r , d e m u e s t r a n una a l t e r a c i o n - en l a c e n d u c t a n c i a de l a s u n i e n e s e u t r e l a s c é l u l a s , de f e r m a que t a n t e - cen una c e r r i e n t e d e p e l a r i z a n t e c o n t i n u a ceme cen una p u l s a t i l , s e p r e d u _ ce una i n h i b i c i o n de e s t a s zonas de c e m unicac ion i n t e r c e l u l a r , l e que se m a n t i e n e s o l e d u r a n t e e l t i em pe en que se a p l i c a n l e s p e t e n c i a l e s . E s t e s a u t e r e s a f i r m a n que e l e f e c t e se debe a una a l t e r a c i o n en e l r e s t e de l a membrana c e l u l a r , que a d q u i e r e una mayor c e n d u c t a n c i a . Segun P e l i t e f f - l e s cambies en l a membrana se de b e n a una a l t e r a c i o n en su p e r m e a b i l i d a d , e l e que es nas p r o b a b l e , una l i b e r a c i o n a l c i t e p l a s m a de i e n e s p rev i a m e n t e u n i d e s a l a membrana. 171 E s t e s d a t e s e s t a n en r e l a c i o n cen l e s t r a b a j e s de L e e w e n s t e i n ( 7 0 -1 ) 1967-1972 , que se r e f i e r e s ie m pre a t e j i d e s e p i t e l i a l e s , aunque O'Lague y c o l . ( 74 ) 1970, han d e m e s t r a d e l a s mismas u n i e n e s en f i b r e b l a s t e s " i n v i t r e " y su m a n te n im ie n te d u r a n t e l a s m i t o s i s c e l u l a r e s . F r i e n d y G i l u l a - ( 62 ) ha c en una r e v i s i o n m e r f e l o g i c a g e n e r a l d e e s t a s u n i e n e s , a s i ceme S em ienescu y P a l a d e ( 80 ) 1974, p a r a l e s e n d e t e l i e s v a s c u l a r e s . Le^ - w e n s t e i n d e m u e s t r a que l a s u n i e n e s c e l u l a r e s son muy s e n s i b l e s a l a concern t r a c i o n de Ca^^ i n t r a c e l u l a r , de f e rm a que cuande l a misma sube p e r encima _ 5 de 4 - 8 X 10 M, d e s a p a r e c e l a r é g i o n de p e r m e a b i l i d a d p r e f e r e n c i a l , se rem pe e l c o n t a c t e c e l u l a r y l a c é l u l a se i n d e p e n d i z a de l a s v e c i n a s , l e c u a l puede e s t a r en r e l a c i o n cen l e s d a t e s a n t e s s e h a l a d e s de P e l i t e f f de un — cambie en l a c e n c e n t r a c i o n de i e n e s a l s e m e t e r l a s c é l u l a s a e s t i m u l e s — e l é c t r i c e s . T ienen t am bién i n t e r é s l o s d a t e s de L e e w e n s t e i n a l s e h a l a r - que l a r e g e n e r a c i o n de l e s t e j i d e s s o l i d e s y l a c i c a t r i z a c i o n se p roduce - p e r u n a l i b e r a c i o n t e m p o r a l de l a s c é l u l a s de s u s u n i e n e s cen l a s v e c i n a s , l e que l e s p e r m i t e e m i g r a r y t e n e r un mayor numéro de m i t o s i s , aunque 0 ' L_a gue d e m e s t r a r a que l a s u n i e n e s se m a n t i e n e n a l e l a r g e de l a m i t o s i s ; e s a l i b e r a c i o n y e m i g r a c i o n c e l u l a r , segiin L e e w e n s t e i n , c e s a cuande se han u n i de l e s 2 b l a s t e m a s p r o l i f é r a n t e s de cada une de l e s b o r d e s de l a h e r i d a . - P e d r i a p e s t u l a r s e e n t e n c e s que una d i f e r e n c i a de p e t e n c i a l a p l i c a d a a n i v e l d e l t r a z e de f r a c t u r a p e d r i a d e t e r m i n a r una mayor m e v i l i z a c i o n c e l u l a r , - cen u n a p r e l i f e r a c i é n mas i n t e n s a d e l b l a s t e m a que l l e v a r i a a una s e l d a d u r a màs p r e c e z de l a f r a c t u r a . B a s s e t t , Pawluck y P i l l a ( 421 ) , ne e n c u e n t r a n un aumente de l a s - m i t o s i s en l e s c a se s s e m e t id e s a campes e l e c t r e m a g n é t i c e s . En e l s e n t i d e de l a e m i g r a c i o n de i e n e s hay que c e n s i d e r a r l a s te_o - r i a s de J a h n ( 184 ) 1968, p a r a q u i e n l a a c c i o n de l e s p e t e n c i a l e s puede - t e n e r d e s e f e c t e s ; une s o b re l a s c é l u l a s , l a d e n e m in ad a g a l v a n e t a x i s , que d é t e r m i n a l a e m i g r a c i o n de l a s c é l u l a s m esenqu im a les j o v e n e s y de l e s e_s - t e o b l a s t e s h a c i a e l c é t e d e , e m i g r a c i o n que e s un c a r a c t e r g e n e r a l de t e d a s l a s c é l u l a s am ebo ides y que t i e n e l u g a r p e r c e n t r a c c i o n d e l c i t e p l a s m a en su ex tr eme a n e d a l p e r acuimile de Ca a d i c h e n i v e l , e n t a n t e que e n l a r e ­ g io n c a t o d i c a hay una i n v e r s i o n de l a s r e l a c i e n e s K/Ca, que d é t e r m i n a una i n h i b i c i o n de l a c o n v e r s i o n s e l - g e l . Ambes fenomenos u n i d e s d e t e r r a i n a n - una e r i e n t a c i o n de l a c é l u l a en e l campe e l é c t r i c e . E l segunde p u n te de a c c i o n de l a s c e r r i e n t e s es so b re l e s i e n e s mismes, que se g u n su PM emj_ - g r a n cen v e l e c i d a d d i f e r e n t e en un campe e l é c t r i c e , de f e r m a que se p r e d u ce un acumule de Ca y PO^ a n i v e l d e l c é t e d e . B a s s e t t 1971 ( 420 ) a p l i c a p e t e n c i a l e s a c u l t i v e s de f i b r e b l a s t e s - cen una i n t e n s i d a d de 1000 v/cm de fe rm a c o n t i n u a , e n c e n t r a n d e un aumente d e l 20^ en l a s i n t e s i s de ADN cen un aumente de l a s e c r e c i é n de h id rexj_ - p r o l i n a a l medie que aumenta h a s t a e l 300% s i l a d i f e r e n c i a de p e t e n c i a l se a p l i c a de f e r m a i n t e r m i t e n t e . Segun B a s s e t t y B ezeky , e s t e se debe a una p e l a r i z a c i o n de l e s e l e c t r e n e s d e l ADN, que d é t e r m i n a un aumente de su s i n t e s i s , y p e r t a n t e de l a s m i t o s i s c e l u l a r e s . Al margen de e s t e s f enom tnes a n i v e l de 1 n u c l e e , l e s f i b r e b l a s t e s m e s t r a r e n un aumente de — s us m i t e c e n d r i a s y de su s r i b e s o m a s . S e h a la B a s s e t t , que a n i v e l d e l cd - t e d e hay un pH a l c a l i n e que f a v e r e c e r i a e l d e p o s i t e m i n e r a i y c e l a g e n e , - ya que a e s t e pH, ambes cen menes s o l u b l e s , en t a n t e que a n i v e l d e l ano­ de , dende se acumulan l e s e s t e e c l a s t e s , e l pH e n c e n t r a d e e s d c i d e . E s t e s d a t e s nos l l e v a n a l a i d e a de P r i e d e n b e r g y B r i g h t e n ( 450 ) de que es e l pH p r e d u c i d e p e r l e s e l e c t r o d e s e l que d é t e r m i n a l a depes_i - c i o n y r e a b s e r c i o n o s e a , de f e rm a que a n i v e l d e l c d t e d e j u n t e a un pH — mas a l c a l i n e que f a v e r e c e l a m i n e r a l i z a c i o n , hay una mener s a t u r a c i o n de e x i g e n e , que ceme ya hemes s e n a l a d e mas a r r i b a f a v e r e c e , d e n t r e de c i e r t e s l i m i t e s , l a e s t e e e c e n d r e g e n e s i s . C e n t ra e l l e pedemes a r g u m e n t a r que — l e s cambies d e l pH son mds un i n d i c e de l a a c t i v i d a d c e l u l a r que l e s r e c - t e r e s de l a misma. Weigert afirma que la accion principal radica en e 1 estimule a la proliferacion de las células mesenquimales indiferenciadas, ceme demues - tran sus estudies merfelogices. Le que ne es clare, segun él, es si la - 173 a c c i o n de lo s e s t i m u l e s e l é c t r i c e s a c t u a d i r e c t a m e n t e s o b r e l e s cremesemas ceme a f i r m a Bezeky, e b i e n l e hace m e d i f i c a n d e e l m ic rem e d ie c e l u l a r , b i e n s e a a l t e r a n d e l a c e n c e n t r a c i é n i é n i c a y e l pH, b i e n a c t u a n d e s o b r e l a mem_ b r a n a c e l u l a r . La p e s i b i l i d a d de a c c i o n de l e s p e t e n c i a l e s ne s e l i m i t a a l a s c é l u _ l a s s i n e que se e j e r c e a s i misme s o b r e l a m a t r i z o r g à n i c a y e l m i n e r a i . - Une de l e s p u n t e s c l a r e s de a c c i o n es s o b re l a e r i e n t a c i o n de l a s f i b r j ^ - l i a s c e l a g e n a s , que K n e e f l e r y B a s s e t t han d e m e s t r a d e que se e r i e n t a n " i n v i t r e " en e l campe de f u e r z a s que a c t u a n s o b r e e l c u l t i v e . B e c k e r , B a s s e t t y Bachman ( 4 2 0 ,4 2 3 ) 1964, a p l i c a n c e r r i e n t e s e n t r e 0 , 2 y 2 A a c e l a g e n e en s e l u c i o n , e n c e n t r a n d e que a l cabe de muy pe ce — t i e m p e é s t e p r e c i p i t a b a fermande una banda p e r p e n d i c u l a r a l campe, adep ta j i de una fe rm a l i g e r a m e n t e c u rv a en cuya c e n c a v i d a d l a s f i b r a s se e r i e n t a n - p a r a l e l a s a l a b a n d a . E s t e d e p o s i t e d e s a p a r e c e a l c é s a r e l e s t i m u l e e l é c _ t r i c e , y se hace e s t a b l e s i en l u g a r de u s a r c e l a g e n e p u r e se ahaden s a l e s a l a s e l u c i o n . P e s t e r i e r m e n t e B ecke r y B a s s e t t ( 421 ) s u g i e r e n que una p a r t e i m p o r t a n t e de e s t e e f e c t e se debe a cambies en e l pH p r e d u c i d e s p e r e l p a s e de l a c e r r i e n t e y l e s m ev im ien te s e l e c t r e f o r é t i c e s de l e s i e n e s en s e l u c i o n . Segun B a s s e t t , l e s fenomenes e l é c t r i c e s j u e g a n un p a p e l muy im p o r t a n t e en l a e r i e n t a c i é n r e g u l a r de l a s f i b r a s c e l a g e n a s en e l h u e s e e^ t e é n i c e a d u l t e . Hemes de c e n s i d e r a r a s i misme l e s MPS, que ceme sabemes son p e l i a n i o nés que p r e s e n t a n un g r a n numéro de c a r g a s en su m e l é c u l a , h a s t a 2000 s ^ gun W e i g e r t , y de a c u e r d e cen e s t e a u t e r l e s campes e l é c t r i c e s pueden ya - r i a r l a c e n f e r m a c io n de l a s m e l é c u l a s i e l MPS y l l e v a r a l a p r e c i p i t a c i o n de l o s mismes, cen e l c e n s i g u i e n t e e f e c t e so b re l a e r i e n t a c i o n de l a s f_i - b r a s c e l a g e n a s y l o s p r e c e s e s de m i n e r a l i z a c i o n . B a s s e t t a f i r m a que l a c a r g a p r e v a l e n t e de e s t a s m a c r e m e l é c u l a s e s ne g a t i v a , y p e r t a n t e e l e c t r e f e r é t i c a m e n t e e m i g r a r â n h a c i a e l c à t e d e . E s t e 174 a u t o r ha dem os t rado que l a p r e c i p i t a c i o n " i n v i t r o " de l a s f i b r i l l a s c o l ^ genas b a j o un campo e l e c t r i c o se e s t a b i l i z a t a m b ié n en p r e s e n c i a de MPS , como s u c e d e r i a en p r e s e n c i a de i o n e s . Es de s e h a l a r que p a r a H a l l ( 459 ) 1971, a l c o n t r a r i o que l o s a u t ^ r e s r e s e h a d o s , l o s p e t e n c i a l e s e l é c t r i c e s ne t i e n e n r e l a c i é n cen l a r e ^ - p u e s t a o s e a a l e s e s t i m u l e s m ec à n ic e s , y que p e r e l c o n t r a r i o e s t e s - t ü a n d i r e c t a m e n t e s o b re l a s i n t e s i s de l e s MPS, l e s c u a l e s p e r e t r e l a d e a l t e r a n l e s p e t e n c i a l e s de membrana de l e s c e n d r e c i t e s , l e que a su vez - i n f l u y e en e 1 t i p e y l a c a d e n c i a de s i n t e s i s de e s t a s m a c r e m e l é c u l a s . P e r u l t i m e cementaremes l a p e s i b l e i n f l u e n c i a de l e s fenomenes eléjc t r i c e s s o b r e l a f a s e m i n e r a i o s e a . As i Jahn ( 184) 1968, d i c e que l e s — i e n e s t i e n e n en un campe e l é c t r i c e una v e l e c i d a d de e m i g r a c i o n d i f e r e n t e , d e t e r m i n a n d e a n i v e l d e l c à t e d o un acumule de Ca y de i e n e s PO^ que p r e _ c i p i t a n Becker postula que en el momento de producir la rotura queda al exc_e so de energia aplicado al hueso absorbido, liberândose a continuacidn en — forma de dipolo. Nosotros no hemos podido observar la dispocicidn de car; - gas descritas por él con aparicidn de un dipolo en que las cargas positivas se localizan en los extremos fracturarios y las negativas en las didfisis - a ambos lados; pero consideramos que la energia absorbida por el hueso en - el momento de la rotura es la responsable de los cambios eléctricos que he­ mos sehalado. Otro dato no resehado en la literatura es que en este momento la prê sencia o no de 1 periostio carece de valor, y los registres efectuados sobre huesos fracturados previamente desperiostizados, mostraron solo un ligero au mento del voltaje, y una diferencia del punto II. Esto parece indicar la — existencia real de un potencial de lesion tras la apertura y rechazo del pê riostio. La interpretacion de estos datos queda por tanto abierta al deber anjx lizarse mas profundamente la relacion entre los potenciales registrados y la solicitacion mecanica a la que habia sido sometido el hueso previamente. En los hallazgos vimos que en los dias siguientes a la fractura aparê Clan una serie de oscilaciones en las diferencias de potencial registradas - GRAFICAS IX y X. Oscilaciones que son mas marcadas para los puntos dialL- sarios y que, al margen de la distinta magnitud condicionada por la presencia de 1 periostio, este modifica su morfologia . La fractura incide poco sobre el valor del registre metafisario, que tras desperiostizar no muestra variaciones significativas a todo lo largo - de 1 experimento. La presencia de 1 periostio détermina que el registre alcan ce su valor minime entre el 29 y 69 dia postfractura, de forma que los rc'gijs très de 1 39 y 39 son estadisticamente diferentes a los de 1 hueso idemne. A partir de las 24 lioras, la diferencia entre el punto II y el IV se hace menos ostensible y vuelve a manifestarse la separacion de los valores - :b3 metafisarios y diafisarios proximales de los valores perifracturarios y dij, fisarios distales cuyas oscilaciones son mas marcadas. Vemos,pues,que tras la fractura, en la primera semana se producen una serie de oscilaciones que desaparecen después. Estas oscilaciones son esta­ disticamente significativas en sus diferencias entre los puntos mâximos y — los minimes -GRAPICA XXI- y mas marcadas para el fragmente fracturario di^ - tal. Con el periostio la vuelta de las médias a la normalidad se alcanza - realmente a los 90 dias, aunque por la dispersion de los valores esta norma- lizacion sucede antes en torno al 109 dia. Los valores del punto V son totalmente contradictories si comparâmes los registres obtenidos cambiando los electrodes de postura y midiendo dire_c tamente a través del foco de fractura, que si obtenemos su magnitud por di rencia entre los puntos II y III, en este case los valores son en su mayor - parte negatives, mientras que de la otra forma los registres son en su may o- ria positives. La interpretacion de estes datos es dificil a la luz de nuestros con_o cimientos y de los hallazgos histologicos relatados mas arriba, que nos mos­ traron que el callo en su evolucion es un proceso continue desde su comieii/o, en el que es posible descubrir una serie de fenomenos diferentes que se suce den y se superponen en el tiempo de forma que no encontramos una explicacion de las oscilaciones registradas en las manifestaciones histoldgicas. La caida de los potenciales derivados por debajo de los valores noriim les a partir de las 24 horas de evolucion y su lenta recuperacion, puede qî p za explicarse, por un lado, porque la pérdida de continuidad dsea interium - pe de alguna manera el mecanismo que sustenta la aparicidn de los potencia­ les; como por otro lado hemos visto que al final del experimento los huesos estudiados no han vuelto a la normalidad, sino que se hallan en plena faso - 2bd de remodelamiento, este explicaria que los registros se aproximaran a la noi; malidad sin alcanzarla de forma absoluta. En relacion con los mecanismos de origen del potencial derivado que - se interrompe como consecuencia de la fractura, hemos de considerar en prj_ - per lugar la lésion de la vascularizacion modular con rotura de la arteria - nutricia con una repercusidn escasa sobre la circulacion metafisaria que a lo sumo aparecera incrementada para permitir la neoformacidn de una circulacion centromedular que pueda nutrir al callo. Podria entenderse asi las escasas variaciones en el punto "0", que solo entre el 39 y 39 dia se acercan a o1 , momentos en que el apote y el drenaje medular estân alterados y la proliféra cion celular comienza a alcanzar gran volumen. El acercamiento a "0" de los valores registrados podria interpretarse como predominio del drenaje metafi­ sario sobre el aporte o al menos un equilibrio entre ambos flujos. Al t e r c e r d i a se c i e r r a l a c o m u n i c a c i d n de 1 foco f r a c t u r a r i o con e l - e x t e r i o r y se c o m p lé ta a l 39 d i a en que e l c o à g u lo es muy e s c a s o y e l c a l l o p e r i o s t a l b i e n d e s a r r o l l a d o . Como ya hemos dicho, la vascularizacion comienza a hacerse manifiesta en la medular y en las partes blandas circundantes a las 48 horas, pero en - las areas perifracturarias hasta el sexto dia no es franco el avance capilar, que llega al trazo de fractura en las tibias entre el 10 y el 14 dia, para - establecerse una vascularizacion compléta del callo en las tibias hacia el - 21 dia. Ya antes, pero claramente desde esta fecha, predominan los procesos de remodelado dseo. Estos datos recogidos por nosotros con las técnicas histoldgicas ordJ_ narias,coinciden con los estudios de la vascularizacidn especializados que - révisâmes previamente. La depresidn maxima al 49 dia postfractura observada en los registros con periostio, podria explicarse por un flujo masivo centripeto a través de los vasos periostales, aunque los estudios especificos afirman que la proli- 293 f e r a c i o n c a p i l a r es a lg o mas t a r d i a . En los registres sin periostio podriamos interpretar las depresiones al tercer dia correspondiente al cierre del coagule mas arriba describe, y la del sexto dia al aumento franco de la vascularizacion a todos los ni ye - les. La recuperacion de unos valores mas proximos a la normalidad al decĵ mo dia, se podria interpretar quiza como reflejo de la union de ambos c a — lies medulares. Todas estas interpretaciones deben someterse a una ulterior correla- cidn entre los fendmenos eléctricos y los vasculares. Al margen de los factores vasculares hemos de considerar los ce lu la­ res, pero ya hemos dicho que estos aparecen como un continuo y la forma de poder actuar de alguna manera sobre los fendmenos eléctricos séria a través de las variaciones en el pH local y en la concentracidn idnica, pero carec^ mos de datos propios al respecto. Las influencias que pueda tener el sistema nervioso en este proceso son desconocidas. Por un lado gilbert, Becker, Rose, etc., consid eran la - presencia del tejido nervioso, de una u otra forma, noce sario para el rege- nerado celular y motor del mismo a través de estos potenciales. De otro l_a do Navarro, etc., han demostrado que la curacidn de las fracturas tiene lu­ gar igual en ausencia de la inervacidn motora. Pensamos que es igualmente un terrene apto para mas investigaciones. Llegamos asi a la cuestidn inicial — existe un potencial electrj_ CO en el hueso que se modifique con la fractura y sea capaz de guiar su desa rrollo? — . Podemos contestar al cabo de este trabajo solo de forma parcial esta pregunta. 2b6 1.- Existe una diferencia de potencial en el hueso intacte parcia_l mente dependiente de la inervacidn del miembro y sdlo demostrable "in vj_ vo" . 2.- Este esquema eléctrico se modifica con la fractura de forma — que se produce un aumento momentanée de su valor, con alteracidn de su - distribucidn a ambos lados de la fractura. 3.- A partir de las 24 horas ese valor cae y présenta unas oscila­ ciones durante la primera semana de evolucidn de 1 callo a partir de la - cual vuelve con ligeras oscilaciones lentamente a la normalidad. Podriamos sugerir entonces que el aumento momentanée de 1 voltaje in- mediatamente después de la fractura junte a los otros factores locales, co­ mo es la muerte celular y la hemorragia, son los responsables de 1 desencaRe namiento de la respuesta celular. El descenso posterior de las diferencias de potencial derivadas y su len_ ta vuelta a la normalidad con la consolidacion del callo, séria la contr_a - partida de los datos recogidos de la literatura donde la aplicacion de una corriente a través de 1 trazo fracturario, acelera el proceso de curacion al mantener el estimulo celular en el nivel inicial por encima del valor nor; - malmente registrado. 297 B I B L I O G R A P I A NTRODUCCION 1. ANQUIN G.E.: Supervivencia después de traumatismes graves. SICOT XI - Congreso Imprim. des Sciences. Bruxelles 1976, pag. 62 2. ARTIGAS V.: Politraumatizados. See. Intern. Cir. XXV Congreso. Socié­ té Internationale de Chirurgie. Bruxelles, 1973, 35. 3. DOSSA J. , CESANO M. , KARCENTY L. : Les fractures metastatiques des ni_e mebres. Ann.Chirurgie. 29-2, 103. 1975. 4. DUHAMEL H.L.: Observations sur la reunion des fractures des os. Men.- Acad. Roy. Cs. 54, 97. 1741. 5. EDWARDS P., NILSSON E.: The time of disability following fractures of the shaft of the shaft of the tibia. Acta Orthop. Scand. 40,501. — 1969. 6. KATZNER M. : Traitement chirurgical des métastasés et des fractures m_e tastatiques des os longs. Rev. Chir.Orthop. 60-5, 387. 1974. 7. KUENTSCHER G. ; El enclavamiento intramedular. Edit. Cientifico-médica Madrid 1965. 8. DE MAR9EPPE R. , BURNY P., KINNAERT P., GEENS M. , WAGNER J. , BLAIMONT P.: Hiérarchie des associations lesionnelles, réanimation et traite - ment des lesions en un temps. SICOT. XI Congreso. Imprim. des — Sciences, Bruxelles, 50. 1970. 9. MONTICELLI G., DI LEO P.: Ricercho cliniche e bioumorali nel politrau matizzato délia strada. SICOT XI Congreso. Imprim. des Sciences, - Bruxelles, 45. 1970. 10. OLERUD S., KARLSTROEM G.: Tibial fractures treated by A.O. compression osteosynthesis. Acta Orthop. Scand. suppl. 140. 1972. 11. PALACIOS J. de: Polifracturados. VIII Congreso SECOT-SPOT. Estoril - 1971. 12. SILVA J.F.: Survival of multiple injury patients in developing coun. - tries. SICOT XI Congreso. Imprim. des Sciences Bruxelles, 84. 1970 13. STRYKER W.S., PUSSELL M.E., WEST H.D.: Comparison of the results of - operative and non operative Ireatement of diaphyseal fractures of - the femur at the naval hospital San Diego over a 5 years period. -- Journ. Bone Joint. Siirg. 52 A, 815. 1970. Il c E L u L A s A.-OSTEOBLASTO 14. AEGERTER E . , KIRfvPATRICK J . A . : Orthopedic diseases. Saunders, 1968 15. ASCENZI A., RENEDETTI E.L.: An electron microscopy study of the foe­ tal membranous ossification. Acta Anat. 37, 370-385. 1959. 16. BINDERMAN .: Tissue culture of isolated bone cells. Journ. Cell — Biol. 61, 428. 1974. 17. CAMERON D.A.: Pine structure of the osteoblast. Journ. Biophys. Byo chem. Cytol. 9, 583-593. 1961. 18. CAMERON D.A., PASCHALL H.A., ROBINSON R.A.: The ultraestructure of - bone cells rn Prost edit. Bone Byodinamics, Little Brown, Boston , 91. 1964. 19. CAMERON D.A., PASCHALL H.A., ROBINSON R.A.: Changes in bone cells af[ t e r P .T .H . a d m i n i s t r a t i o n . J o u r n . C e l l . B i o l . 33, 1. 1967. 20. CAMERON D.A.: The Ultraestructure of bone. En G.if. Bourne edit. The biochemistry and physiology of bone. 191, Academic Press, London - 1972. 21. CARNEIRO J, LEBLOND O.P.: Secretion of collagen by osteoblast. Exper. C e l l . Res. 18, 291 -299 . 1959. 22. DAVIS V.L., MATTHEWS J.L., MARTIN J.H., KENNEDY J.W., TALMAGE R.V. : The endosteum as a functional membrane. En Talmage, Owen, Parson - edit. Calcium regulating hormones. Excerpta medica, Amsterdam 1975, 275. 23. DOTTY S.B., SCHOPIELD B.H.: Metabolic and structural changes within osteocytes of rat bone. En Talmage y Munson edit. Calcium, Parathy roid hormone and calcitonin pag. 353-364. Excerpta medica. Amster­ dam, 1972. 24. DUDLEY H.R., SPIRO D .: Pine Structure of bone cells, Journ. Biophys. Biochem. Cytol. 11, 627-648. 1961. 25. EHRLICH H.P., ROSS R., BORNSTEIN P.: Journ. Cell Biol. 62-2, 390. — 1974. 26. FELL H.B.: J. Morphol. 40, 417, 1925. 27. PITTON-JACKSON S., RANDALL J.T.: Fibrogenesis and the formation of - matrix in developing bone, en CIBA Symposium, Bone Structure and - metabolism, 47-63, Churchill, London, 1956. 28. GAILLARD P.J.: Parathyroid gland and bone in vivo. Schweiz. Klin. WA chenschr. 14, 447. 1957. 29. HAM A.V.: Tratado de histologia. Interamericana, Mexico, 1970. 30. HELLER-STEINBERG M.: Ground substance, bone salts and cellular acti­ vity in bone formation and destruction. Amer. Journ. Anat, 89-3, - 347-376. 1951. 31. JAPPE H.L.: Metabolic, inflamatory and degenerative bone diseases .- Urban und Scwartzeiiberg, Wien, 1972. 32. JOHNSON L.C.: Morphologic analysis in pathology : The kinetics of d_i sease and general biology of bone. En Prost edit. Little Borown , Boston 1964, 543. 33. KAHN A.J., SIMMONS D.J.: Investigation of cell lineage in ione using a chimera of chick and quail embryonic tissue. Nature, 258 , 325, - 1975. 34. KNOEPLER E.W.: Die biomechanischen inducktionen bei der knochenbruch. heilung. Enke, Stuttgart, 1967. 35. LEBLOND O.P., GREULICH R.C.; Autoradiographic studies of bone forma­ tion and growth. En Bourne, edit. Biochemistry and physiology of - bone. 325. Academic Press, London 1956. 36. LEBLOND O.P., WEINSTOCK M.: Radioautographic studies of bone forma - tion. En Bourne edit. The biochemistry and physiology of bone III, 181, Academic Press, London 1971. 37. LUK, NOPAJAROONSRI, SIMON: Ultrastructure of endosteum. Journ. UJ_ - trast. Res. 46,184. 1974. 38. LUK, NAPAJAROONSRI, SIMON: Ultraestructure of cortical bone. Journ.- Ultrast Res. 46, 174. 1974. 39. MATTHEWS J.L., MARTIN J.H., KENNEDY J.W., COLLINS E.J.: An ultras - tructural studj, of calcium and phosphate deposition and exchange - in tissues. CIBA Sym])osium. 187. Excerpta medica, Amsterdam, 1973 40. OWEN M.: Cell population kinetics of an osteogenic tissue I. Journ . Cell Biol. 19, 19. 1963. 41. OWEN M.: Cellular dynamics of bone. En Bourne edit. The biochemistry and p h y s i o l o g y o f bone. III, 271, Academic Press, London, 1971. 42. PRITCHARD J.J.: The osteoblast. En Bourne edit., 179, Academic Press 1956. 43 . PRITCHARD J.J.: General histology of bone. En Bourne edit. The bi^ - chemistry and physiology of bone. 1, Academic Press, London 1972 I. 44. PRITCHARD J.J.: The Osteoblast, pag. 21 Bourne edit. The biochemis­ try and physiology of bone. 1, Academic Press, London 1972. I. 45. RASMUSSEN H., BORDIER P.: The physiological and cellular basis of nie tabolic bone disease. Williams & Wilkins, Baltimore, 1974. 46. REMAGEN W.: The bone cell System: Form and function. Beitr. Path.150 1. 1973. 47. ROBINSON R.A.: An electron microscopio study of bone. Journ.Bone — Joint Surg. 34 A, 389. 1952. 48. ROBINSON R.A., CAMERON D.A.: Electron microscopy of primary spongio- sa of meta physisat distal end of femur in newborn infant. Journ. Bone Joint, Surg. 40 A, 687. 1959. 49. SCOTT B.L.: Thymidine H^ electron microscope radioautography of o_s - teogenic cells in the fetal rat. Journ. Cell Biol. 35-1, 115. 1967 50. TALMAGE R.V., MATTHWS J.L., MARTIN J.H., KENNEDY J.W., DAVIS W.L. , ROYCROFT J.H.: (Calcitonin, phosphate and the o steocyte-os too bias t b_o ne cell unit. En Talmage, Oven y Parsons edit. Calcium regul^ - ting hormones. 284, Excerpta medica, Amsterdam. 1975. 51. WEIDENREICH, F.: on V. Moellendorf edit. Handbuch der mikroskopische anatomie des Merischens II, 391, Springer, 1928. 52. WEINGER J.M., HOLTROP M.E.: An uItrastructural study of bone cells . Calc. tiss. res. 14, 15. 1974. 53. YOUNG R.W.: Specialization of bone cells. En Frost. Edit. Rone Biodjy namics. 117. Little Brown, Boston 1964. B - O S T E O C I T O S 54. ARNOLD J.S., PROST H.M., BUSS R.C.: The osteocyte as a Donc pump. - Clin. Orthop. 78, 47-56. 1971. 55. BAUD C.A.: Morphologie et structure inframicroscopique des osteocy - tes. Acta Anat. 51, 209-225. 1962. 56. BAUD C.A., MORGENTIIALER P.¥.: Structure submicroscopique du rebord - lacuno-canaliculaire o s s e u x . Morph. Jb. 104, 476-486. 1963. 57. BAUD C.A. , MORGENTHALER P.W.: Etude quantitative des espaces subm_i - croscopiques interfibrillaires dans la substance osseuse. Morph.Jb. 105, 333-342 . 1964. 58. BAUD C.A.: Submicroscopic structure and functional aspects of (le o_s teocyte.Clin. Orthop. 56, 227-237. 1968. 59. BELANGER L.F., BELANGER C. , SEMBA T.: Technic.i] aproaches leading to the concept of osteocytic osteolysis. Clin. Orthop. 54, 187-197 . 1967. 60. BELANGER L.F.: Osteocytic résorption. En Bourne edit. The biocliomis- try and physiology of bone. Ill, 240-271. Academic Press, London - 1971. 61. ENLOW D.H.: Functions of the haversian system: Amer. Journ. Anat.110, 269 , 305. 1962. 62. FRIEND D.S., GILULA N.B.: Variation in tight and gap junctions in ma. mmalian tissues. Journ. Cell Biol. 53, 758-776. 1972. 63. FROST H.M.: Osteocyte death in vivo. Journ. Bone Joint Surg. 42 A, - 138. 1960. 64. FROST H.M.: Micropetrosis. Journ. Bone. Joint Surg. 42A, 144. 1960. 65. FROST H.M.: A new bone affection: Feathering. Journ. Bone Joint. — Surg. 42A, 447. I960 . 66. FROST H.M.: Dynamics of bone remodeling. En Frost edit. Bone Bi odynji mics. 315-333. Little Brown, Boston. 1964. 67. JANDE S.S., BELANGER L.F.: The life cycle of the osteocyte. Clin. 0_r t h o p . 94, 281 -3 0 6 . 1973. 68. JEE W.S.S.: The influence of reducted local vascularity on the ; ,A,e of internal reconstruction in adult long bone cortex. Ei Pros!. — edit. Bone Biodynamics. 259-278, Little Brown, Boston. 1964. 85. VARTIOVAARA J., NORD LING S., LEHTONEN E., SAXEN L.: Cell contacts and induction. Journ. embryo 1.exp.morph. 31, 667. 1974. 86. VASSERMAN P., YAEGER J.A.: Fine structure of the osteocyte capsule - and of the wall of ti.e lacunae in bone. Z. Zellforsch. Mikrosk.Anat, 6 7 , 636. 1965. 69. JOVSEY J.: Variations in bone mineralization with age and disease. En Prost edit. Bone Biodynamics. 461-481, Little Brown, Boston 1964. 70. LOEVENSTEIN V.R., KANNO Y. ; Intercellular communication and tissue - growth I. Journ, Cell Biol. 33, 225-234. 1967. 71. LOEVENSTEIN V.R., PENN R.D.: Intercellular comunication and tissue - growth. II. Journ. Cell Biol. 33, 235-242. 1967. 72. Cellular communication through membrane junctions. Arch. Intern. Med. 129, 2 9 9 -3 0 5 . 1972. 73. NEUMANN W.P.: The presence of a soluble regulator phase in bone. En Talmage, Owen y Parsons edit. Calcium rogulatin hormones, 297-305. Excerpta Medica. Amsterdam 1975. 74. O'LAGUE P., DALEN H., RUBIN H.: Electrical coupling: low resistance junctions between mitotic and interphase fibroblast in tissue cul­ ture. Science 170, 465-467. 1970. 75. OSCHMAN J.L., BERRIDGE M.J.: Fed. Proc. 30, 49. 1971. 76. OVEN M.E., TRIFFITT J.T., MELICK R.A. : Albumin in bone. Eu Hard t_i - ssue growth repair and remineralization. Cina sympos i tiai. 2S7-295 . Excerpta medica. Amsterdam. 1973. 77. RECKLINGHAUSEN F.V. : Unteruschungen ueber Rachitis und Osteomalacic. Fischer Jena. 1910. 78. REMAGEN V.: Calciumkinetik und Knochenmorphologie. Thieme 1970. Stut^ gart. 79. SCHULZ A., DONATH K., DELLIN G.: Ultrastruktur des Corticalisosteocy^ ten. Virchows Arch. path. Anat. 364, 347. 1974. 80. SIMIONESCU M., SIMIONESCU N ., PALADE G.E.: Segmental differentia — tions of cell junctions in the vascular endothelium. Journ. Cell - B i o l . 67 , 8 6 3 - 8 8 5 . 1975. 81. SOCOLAR S.J., POLITOFF A.L.: Uncoupling cell junctions in a glandu - lar epithelium by depolarizing current. Science 172, 492-494. 1970. 82. TATI 'AGE R.V. : A study of the effect of parathyroid hormone on bone - remodeling and on calcium homeostasis. Clin. Orthop. 54, 163-'75 . 1967. 83. VITTALI H.P.: Phasenkontrast und fluoreszenzoptische Uutersuchungen zur funktion der Osteocyten. Virch.Arch.path.Anat. 34, 124. 1966. 84. VITTALI P.H.: Osteocyte activity. Clin. Orthop. 56, 213. 1968. c - O S T E O C L A S T O S 87. BARNICOT N.A., DATTA S.P.: Vitamin A and bone. En Bourne edit. The - biochemistry and physiology of bone. II, 197. Academic Press. 1972, London. 88. BONUCCI E . : The organic-inorganic relationships in bone matrix under going osteoclastic resorption. Calc.tiss.res. 16,13. 1974. 89. CAMERON D.A., ROBINSON R.A.; The presence of crystals in the cyto_ - plasm of large cells adjacent to the sites of bone absorption. - - Journ. Bone Joint Surg. 40 A, 414. 1958. 90 COOPER R.R., MILGRAM J.V., ROBINSON R.A.: Morphology of the osteon - an electron microscopy study. J. Bone Joint.Surg. 48A, 1239. 1966, 91. DINGLE J.T.: Lysosomal enzymes in skeletal tissues. En Hard tissue - growth repair and remineralization. CIBA symposium, 295. Excerpta médica. Amsterdam 1973. 92. DINGLE J.T.: The role of lisosomal enzymes in skeletal tissues. J. - Bone Joint Surg. 55 B , 87. 1973. 93. GAY C.V., MUELLER V .J.: Carbonic anhidrase and osteoclasts. Science 183, 432. 1973. 94. HAMMARSTROEM L.E., HANKER J.S., TOVERUD S.U : Cellular differences - in acid phosphatase isoenzymes in bone and theets. Clin. Or loop. - 78, 151. 1971. 95. HANCOX N .: The osteoclast. En Bourne edit. 213, Academic Press, 1956 London. 96. HANCOX N.M., BOOTHROYD B .: Motion picture and electron microscope — studies on the embryonic avian osteoclast. J. biophys. biochem. - cytol. 11, 651. 1961. 97. HANCOX N.M.: The Osteoclast. En Bourne edit. The biochemistry and - physiology of bone I, 45. 1972. 98. HORN V., DVORAK M ., SZARKA P.: Neu ansichten ueber die morphologic - und funktion der osteoklastischen zellen. Z. f. Orthop. 113, 12, - 1975. 99. LUCHT U . : Osteoclasts and their relationship to bone as studied by - electron microscopy. Z .Zellforsch. 135, 211. 1972. 100. LUCHT U. : Cytoplasmic vacuoles and bodies in osteoclasts. Z.Zel_l - - f o r s c h . 135, 229 . 1972. 101. LUCHT U . : Centrioles in osteoclasts. Z. Zellforsch. 136, 140. 1972. 102. MC LEAN P.: The parathyroid glands and hone. En Bourne edit. Bioche mistry and physiology of bone. 705. Academid Press London 1956. 103. NEUMAN V.P., MULRYAN B .J . , MARTIN G.R.: A chemical view of osteocla sis based on studies with yttrium. Clin. Orthop. 17,124. I960. 104. NORMAN A .V.: Recent studies on Vitamin D and parathyroid rmone rê gulation of calcium and phosphorus metabolism. Clin.Orthop. 52, - 249. 1967. 105. POMMER G . : Die Arthritis deformans. Vien 1913. 106. RAISZ L.G., TRUMMEL C.L., MUNDY G.R., LUBEN R.A. : Inmunologic fa_c - tors influencing bone resorption. En Talmage, Owen, Parsons edit. Calcium regulating hormones, 149. Excerpta Medica Amsterdam 1975. 107. TALMAGE R.V., VIMER L.T., TOPT R.J.: Additional evidence in support of Me Leans feedback mechanism of parathyroid action on hue . — Clin Orthop 17, 195. 1960. 108. VAES G .: On the mechanisms of bone resorption. J. Cell. Biol. 39, - 676 . 1968. 109. VAES G ., VREVEN J . : Acid pyrophosphatasse, phosphoproteinphosphata- se and phosphomonoesterase activities in bone tissue. Israel J. - Med.Sci. 7,401. 1971. I I MATRIZ OS E A A. SUSTANCIA FUNDAMENTAL 110. BELANGER L.P.: Autoradiographic studies of the formation of the org^ nic matrix of cartilage, bone and the tissues of the teeth. En Bo­ ne structure and metabolism. Ciba symposium. 75, 1956. Churchill- London. 111. CAMPO R.D., TOURTELLOTE C.D.: The composition of bovine cartilage - and bone. Biochim. Biophys. Acta 141, 614. 1967. 112. CHRISMAN O.D.: The ground substance of connective tissue. En Clin. - Orthop. 36, 184. 1964. 113. DISCHE Z . : (Citado en Herring). 114. DZIEVIATKOVSKI B.C.: The role of suIdatod protein-polysacharides in calcification. Clin. Orthop. 35, 199. 1964. 115. EASTOE J.E.: The organic matrix of bone, en Bourne edit. Biochemis - try and physiology of bone, 81, Academic Press, London 1956. 116. ENGPELDT B . , STRANDH J . : Microchemical and biophysical studies of — normal human compact bone tissue. Clin. Orthop. 17, 63. I960. 117. HERNANDEZ-RICHTER H.J., STRUCK H . : Die Vundheiliing. Thieme, Stuttgart 1970. 118. HERRING G.M.: Chemistry of the bone matrix. Clin. Orthop. 36, 169. — 1964. 119. HERRING G.M.: The organic matrix of bone. En Bourne Edit. The bioche­ mistry and physiology of bone I, London Academic Press, 1972. 120. MEYER K . ; The mucopolysacharides of bone. En Bone structure and meta­ bolism. Ciba symposium, 65. Churchill, London. 1956. 121. SABET T.Y., HAWLEY C.E.: Biological role of heterologous antibodies - against cartilage protein-polysacdiaride complex light fraction. - - Clin.Orthop. 78, 195. 1971. 122. SILBERT J.E . : Biosynthesis of mucopolysaccharides and protein-polysa_c charides. En Ruy Pérez-Tamayo, M.Rojkind: Molecular pathology of — connective tissues. 323, Dekker. 1973. 123. SILBERT J.E.: Catabolism of mucopolysaccharides and protein-polysaccha rides. En Ruy Pérez-Tamayo, M.Rojkind: Molecular pathology of con­ nective tissues. 355, Dekker. 1973. 124. SYLVEN B . : The ground substance of connective tissue and ca;bilage. En Bourne Edit. Biochemistry and physiology of bone. London Acade mic press. 1956. 12 5. WEINSTOCK: Elaboration of enamel and dentin matrix glycoproteins.En Bourne edit. The biochemistry and physiology of bone II, 121, Ac^ dc'iiiLc Press. 1972. 126. WOODWARD H.O.: The composition of human cortical bone. Clin.Orthop. 37, 187. 1964. 127. ZERLOTTI E . , YAEGER J.A.: Histochemistry and biophysical histology - of the matrices of some mineralized tissues. Clin.Orthop. 51, 223, 1967. B- COLAGENO 128. Ba r n e s M.J.: Biochemistry of collagens from mineralized tissues. En: Hard tissues growth, repair and remineralization. Ciba symposium . 247. Excerpta medica. Amsterdam, 1973. 129. EYRE D.R., GLIMCHER M .J.: The lability of aldimine crosslinks on di^ solution on chiken bone collagen by proteins dénaturants. En: — Kuhlencordt, Kruse edit. Calcium metabolism bone, and metabolic bo ne diseases. 176. Springer. 1975. 130. FERNANDEZ MADRID P . J . : Journ. Cell Biol. 33, 27 . 1967. 131. GALLOP P.M.: Nature, 209 , 73 . 1966. 132. GLIMCHER M.J., KRANE S.M.: The organization and structure of bone. - En Gould y Ramachandran edit. A treatise on collagen II, Academic P i ess, London. 1968. 133. GRANT M.E., PROCKOP .: Biosynth sis of collagen. N.Engl.J.Med. 286, 194, 242, 291 . 1972. 134. IGARASHl M . , HAYASHI Y . , MATSDURA M . , YOSHUNO S.: The role of lysyl residue in collagen structure with calcification and aging. En Kjj hlencordt, Kruse, edit. Calcium metabolism, bone and metabolic Tm ne diseases. 184, Springer, Berlin. 1975. 135. KUEHN K . : Kollagenstoffwechsel. Arzneim. Porsch. 24, 225. 1974. 136. MECHANIC G.L.: Collagen structure and calcification. En Kuhlencordt, Kruse edit. Calcium metabolism, bone and metabolic bone diseases , 157. Springer 1975. Berlin. 137. MILLS B.G., BAVETTA L.A. : Bone collagen dyn,,m ics. Clin.0' 'hop. 57, - 267. 1968. 138. PEREZ-TAMAYO R . : Collagen degradation and resoption. En Molecular — patholofy of connective tissues. 229, Dekker, New York, 1973. 139. PETRUSKA J.A.,; HODGE A.J.: A .cJ unit model for the tropocollagen ma cromolecule. En Proc. Nat. Ac.iJ.Sci. 51, 871. 1964. 140. PIEZ K.A.: Soluble collagen and dénaturation components. En Ramachan dran edit. Treatise on collagen I, 207, Academic P:ess, London, — 1967. 141. PRIEST R.E.: Biosynthesis of collagen and elastin. En Molecular pa - thology of connective tissues. Pérez-Tamayo y Rojkind edi ! , Dekker, 105, New York, 1973. 142. RAMACHANDRAN G . N . : Structure of collagen at the molecular level. En Ramachandran edit. Treatise on collagen I, 103, London Academic - press, 1967. 143. RAUTENBERG J . : The c-terminal non-helical portion of the collagen - molecule. Clin.Orthop. 97, 196. 1973. 144. ROJKIND M . : Molecular structure of the fibrous components of the - connective tissue. En Pérez-Tamayo y Rojkind edit. Molecular pa - thology of connective tissues, 1, Dekker, New York, 1973. 145. ROUILLER C . : Collagen fibers of connective tissue. En Bourne edit.- Biochemistry and physiology of bone. 107, Academic Press. London 1956. 146. SCHOPIELD J.D., PROCKOP D.J.: Precollagen: A precursor i'orm o C co_ - llagen, Clin.Orthop. 97,175. 1973. 147. SPEAKMAN P.T.: Proposed mechanism for the biological assembly of c_o llagen triple helix. Nature 229, 241. 1971. c - MINERAL Y CALCIFICACION 148. ANDERSON H.C.: Vesicles associated with calcification in the matrix of epiphyseal cartilage. J.Cell Biol. 41, 59. 1969. 149. ARMSTRONG V.D., SINGER L . : In vitro uptake and exchange of bone ci_ trate. En bone structure and metabolism. Ciba symposium, 103, — Churchill, London 1956. 150. ASCENZI A., BONUCCI E . : Further i n v e s t i 'ions on the function of - the osteonic lamellae acc rding to collagen and crystallite orien tation. En Kuhlencordt Kruse. Calcium metabolism, bone and me Lab_o lie bone diseases. 172, Springer 1975. 151. BACHRA li.N.: Some molecular aspects of tissue calcification. Clin.- Orthop. 51, 199. 1967. 152. BACHRA B.N.: Calcification of collagenous material in vitro as model system for biological calcification. En Khlencordt, Kruse edit. — Calcium metabolism, bone and metabolic bone diseases. 164. Spriji - ger, 1975. 153. BAUD C.A., POUEZAT J.A.: Morphological and crystallographic analysis of bone mineral. En Kuhlencordt, Kruse edit. Calcium metabolism, - bone and metabolic bone diseases, 3. Springer, 1975. 153 b. BAUD C.A., POUEZAT J.A., BADONNEL : Electron microscope and electron diffraction study of experimental cutaneos calcinosis. Clin.Orthop 69, 55. 1970. 154. BEALE R.J., SCHUBERT M . : Speeding the precipitation of calcium phos­ phate at low values of its ion product by a particular protein-po_ lysaccharide of cartilage. Clin. Orthop. 80, 202. 1971. 155. BILTZ R.M., PELLEGRINO E.D.: Journ. Bone Joint Surg. 51 A, 456. 1969. 156. BONUCCI E . , MATRAJT H . , TUN-CHOT S., HIOCO D . : Bone structure in os­ teomalacia with special reference to ultrastructure. J. Bone Joint Surg. 51 B, 511. 1969. 157. BONUCCI E . : The locus of initial calcification in cartilage and bone Clin. Orthop. 78, 108. 1971. 158. BONUCCI E . , PERUGIA L., SANDUN R. : Calcificacion del musculo estria- do inducidas experimentalmente. Rev. Ortop.Traum. 19 IB, 695. 1975 159. BORLE A.B.: Membrane transfer of calcium. Cim.Orthop. 52, 267. 1967 160. BORLE A .B . : R e g u l a t i o n o f t h e m i t o c h o n d r i a l c o n t r o l o f c e l l u l a r caJL cium homeostasis. En Talmagt.-, Owen, Parsons edit. Calcium régula - t i n g ho rmones , 217 . E x c e r p t a m éd ic a . Amsterdam 1975. 161. BOURNE G .H . ; P h o s p h a t a s e and bone . En Bourne e d i t . B i o c h e m i s t r y and p h y s i o l o g y o f bone , 251 . Academic P r e s s , London 1956. 162. boURNE G . H . : P h o s p h a t a s e and c a l c i f i c a t i o n . En Bourne e d i t . The b i o ­ c h e m i s t r y and p h y s i o l o g y o f bone 11, 79, Academic p r e s s . 1972. 163. BRONNER P . : Q u a n t i t a t i v e a s p e c t s o f c a l c iu m m e ta b o l i s m and h om eos ta ­ s i s . En K u g l e n c o r d t y Kruse e d i t . Calcium m e t a b o l i s m , bone and dd_ s e a s e s , 14, S p r i n g e r . 1975. 164. CARLSTRON D, ENGSTROM, A . : U l t r a s t r u c t u r e and d i s t r i b u t i o n o f m i n e r a l s a l t s i n bone t i s s u e . En Bourne e d i t . B i o c h e m i s t r y and p h y s i o l o g y o f bone . 149. Academic p r e s s . 1956. 165. DALLAMAGNE M . J . , FABRY C . : S t r u c t u r e o f bone s a l t s . En Bone s t r u c t u ­ r e and m e t a b o l i s m . Ciba symposium. 14, C h u r c h i l l . 1956. 166. DALLEMAGNE M .J . 167. DIXON T.F., PERKINS H.R.: The chemistry of calcification. En Bourne edit. Biochemistry and physiology of bone. 287, 309. Academic Press. 1956. 168. EANES E.D., TERMINE J.D., POSNER A.S.: Amorphous calcium phosphate in skeletal tissues. Clin.Orthop. 53, 223. 1967. 169. ENGSTRON A.rStructure of bone from the anatomical to the molecular 1^ vel. En Bone Structure and metabolism. 3, Churchill, London 1956. 170. ENGSTRON A.:The structure of bone. Clin. Orthop. 17, 34. I960. 171. ENGSTRON A.:Aspects of the molecular structure of bone. En Bourne — edit. Biochemistry and physiology of bone I. Academic Press. 1971. 172. FLEISCH H . : Role of nucléation and inhibition in calcification. Clin. Orthop. 32, 170. 1964. 173. FLEISCH H . , RUSSELL R.G.G., BISAZ S., BONJOUR J.P.: The affects of — pyrophosphate and diphosphonates on calcium metabolism. En Hard tj_ ssues growth, repair and remineralization. 348, Excerpta Medica, - 1973. 174. FRANCIS M.D., BRINER W.W., GRAY J.A.: Chemical agents in the control of calcification processes in biological systems. En Har tissue — growth, repair and remineralization. 57, Excerpta Medica. 1973. 175. G ERLACH U . , HOHLINGER J.H., THEMANN H . : Metabolism and structure of connective tissue during extraosseous calcification. Clin. Orthop. 69, 118. 1970. 176. HALL B . K . : Calcification of the cartilage formed on avian membrane - bones. Clin.Orthop. 78, 182. 1971. 177. HOWELL D.S.: Review article the mechanisme of calcification. J.Bone Joint Surg. 53 A, 250. 1971. 178. HOWELL D.S., PITA J.C., KUET'fNER K . : Evidence for a role of lysozyme in enchondral calcification. En Kuhlencordt y Kruse. Calcium met_a holism, bone and metabolic bone diseases. 189, Springer. 1975. 179. KASHIWA H.K., MUKAl C.D.: Lipid-calcium-phosphate spherules in choji drocytes of developing long bones. Clin. Orthop. 78, 223. 1971. 180. KNESE K.H. : Knochenstruktur a Is verb und bau. Tliieme. 1958. Stuttgai't. 181. IRVING J.T.: Histochemical changes in the early stages of calcifica­ tion. Clin. Orthop. 17, 92. I960. 182. IRVING J.T., WUTHIER R.E.: Histochemistry and biochemistry of calci­ fication. Clin. Orthop. 56, 237. 1968. 183. IRVING J.T.: Theories of minerali / ill on of bone. Clin.Orlhop. 97,225, 1973. 184. JAHN T.L.: A possible mechanism for the effect of electrical poten - tials on apatite formation in bone. Clin.Orthop. 56, 261. 1968. 185. LEONARD P . , WADE C.W.R., HEGHYELI A.P . : Mechanism of calcification . Clin. Orthop. 78, 168. 1971. 186. MARTIN J.H., MATTHEWS J.L.: Mitochondrial granules in Chondrocytes.- Cal. tiss. res. 3, 184. 1969. 187. MILLS B.G., HOLST P., HAROUTINIAN A.M., BAVETTA L.A.: Bone cells re^ ponse to serum calcium altering drugs. Clin. Orthop. 78, 56. 1971. 188. MOLNAR Z .: Additional observations on bone crystal dimensions. Clin. Orthop. 17, 38. I960. 189. NEUMAN W.F.: Blood-bone exchange. En Frost edit. Bone Byodinamics. - 393. Little Brown, Boston 1964. 190. OSTROWSKI K . , DZIEZIG-GOCLAWSKA A., STACHOWICZ V., MICHALIK J . : Appli cation of electron spin resonance in research on mineralized tissues Clin.Orthop. 97, 213. 1973. 191. PANFILI E . , SANDRI G., SOTTOCASA G .L.: Some properties of an isolated glycoprotein possibly related to calcium transport in mitochonuria. Acta vitamin.enzymol. 28, 323. 1974. 192. POSNER A.S., BLUMENTHAL N .C., BOSKEY A.L., TANNENBAUM: The formation of bone mineral. En Kuhlencordt y Kruse edit. Calcium metabolism, - bone and metabolic bone diseases. 190. Springer 1975. 193. POSNER A.S., BEEBE R.A.: The surface chemistry of bone mineral and re_ lated calcium phosphates. Seminars in arthritis and rheumatism. 4,- 267. 1975. 194. REYNOLDS J.J.: Bone turnover, vitamin D and plasma calcium homeosta. - sis. En Talmage, Owen y Parsons edit. Calcium regulating hormoiu - 254. Excerpta Medica. 1975. 195. RICHELLE L.J.: One possible solution to the problem of the biochemis­ try of bone mineral. Clin.Orthop. 33, 211. 1964. 196. ROBINSON R.A., ELLIOT S.R.: The water content of bone I. J.Bone Joint Surg. 39 A, 167. 1957. 197. RUBINSON R.A.: Crystal-collagen-water relationhips in bone matrix. — Clin. Orthop. 17, 69. I960. 198. ROBINSON R.A.: Observations regarding compartements for tracer ca^ - cium in the body. En Prost. edit. Bone Byodinamics. 423, Little — Brown. Boston 1964. 199. ROBLES MARIN D . , SMITH AGREDA V., FERNANDEZ IZQUIERDO M . , NIETO SAR - MIENTO J . : Origen de la calcificacidn de la sustencia fundamental - y estudio vascular. Rev.Ortop.Traum. 18 IB, 517. 19 it. 200. ROWLAND R .E.: Exchangeable bone calcium. Clin. Orthop. 49, 233. 1966. 201. RUSSELL R.G., FLEISH H .: Inorganic pyrophosphate and pyrophosphatases in calcification and calcium homeostasis. Clin.Orthop. 69, 101. 1970 202. Salomon C.D., RAY R.D.: J.Bone Joint.Surg. 48 A, 1575. 1966. 203. SEIFERT G . : Morphologic and biochemical aspects of experimental extin osseous calcification. Clin.Orthop. 69, 146. 1970. 204. SEYLE H . : The present status of calciphylaxis and calcergy. Clin. Or- thop. 69, 28. 1970. 205. SOBEL A.E., BURGER M. , NOBEL S.: Mechanisms of nuclei formation in m_i neralizing tissues. Clin. Orthop. 17, 103. 1960. 206. SUTFIN L.V., HOLTROP M.E., OGILVIE R.E.: Microanalysis of individual mitochondrial granules with diameters less tham 1000 angstroms. - Science 174, 947. 1971. 207. TERMINE J.D., EANES E.D.: Calcium phosphate deposition from balanced salt solutions. Calc. tiss. res. 15, 81. 1974. 208. URIST M .R., DOWELL T.A.: The newly deposited mineral in cartilage - and bone matrix. Clin. Orthop. 50, 291. 1976. 209. URIST M . R . , METER P., MERICKEL K.S.: Calcium transport and calcifica. tion studies by microperfusion. Clin. Orthop. 78, 173. 1971. 210. VOGEL J . J ., ENNEVER J . : The role of a lipoprotein in the intracellu­ lar hydroxy apatite formation. Clin.Orthop. 78, 218. 1971. CALLO DE FRACTURA 211. ALLGOVER M . : Die bildung des grariulationsgewebes - en XV Congreso Soc. Intern. Chif. 1953 Lisboa. 211 A ALLGOVER M . : Chirurgie Springer, 1973. 212. ABDIN M . , PRIEDENSTEIN A.Y.: Electron microscopic study of bone induc­ tion. Clin. Orthop. 82,182. 1972. 213. AKESON V.H., WOO S.L., RUTHE!9X)RD L . , COUTTS R.D., GONSALVEZ M . , AMIEL D . : The effects of rigidity of internal fixation plates on long bone - remodeling. Acta Orthp. Scand. 47,241. 1976. 214. ANDERSON L.D.; Compression plate fixation and the effect if different types of internal fixation on fracture healing. J. Bone Joint. Surg. 47 A, 191. 1965. 215. ANDERSON C.E., PARKER J . : Invasion and resorption in enchondrai o s s M J cation. J. Bone Joint Surg. 48 A,8 9 9 , 1966. 216. ASADA T.: Uber die histogenese und die ossifikation des callus. Arch. - Klin. Chir. 147, 199. L>28. 217. AUSTEEN : The acute inflamatory response Hoi I order edii,. Arthritis - Lea Pebiger. 1973. 218. AXHAUSEN W .: The osteogenic phase of regeneration of bone. J. Bone - - Joint Surg. 38A, 593. 1956. 219. BASSETT C.A.L., CREIGHTON D.K., STINCHPIELD P.E.: Contribution of en - dosteum, cortex and soft tissues to osteogenesis. Surg. Gyn. Osbt. - 145, 152. 1961. 220. BASSETT C.A.L.: Current concepts of bone formation. J. Bone Joint.Surg. 44A, 1217. 1962. 221. BASSETT C.A.L.: Enviromental factors in the regulation of cell physio­ logy. In skeletal issues. Prost edit. Bone Byodinamics. 189. 1964 . Brown. 222. BAUER C .: Experimentelle calluserzeugeung durch replantation der ca11us bildenden Gewebe. Arch.Klin.Chir. 156, 251. 1929. 223. BAUER G.C., CARLSSON A. : Metabolism of bone salt investigated by siniu_l taneous administration of 45Ca and ^^P to rats. J.Bone Joint.Surg. 37 B, 658. 1955. 224. BELJAN J.R., HELLEVELL A.B., GOLDMAN M. : The effect of calcic ,i defi­ ciency on healing of experimental fractures in the avian tarsus as determined by the fracture repair ratio. Clin.Orthop. 78, 277. 1971. 225. BENTLEY G., GREER R.B.: The fate of chondrocytes in enchondrai ossify cation in the rabit. J. Bone Joint. Suj-g. 52B, 571. 1970. 226. BERESFORD W.: Healing in the experimentally fractured os priapi of - the rat. Acta. Orthop. Scan. 41, 129. 1970. 227. BERGMANN E.: Zu der frage der endostalen CallusbiIdung. Arch.Klin. - Chir. 129, 490. 1924. 228. BIER A.: Uber Knochenregeneration, uber Pseudoarthrosen und uber Kn^ chentrasplantate. Arch.Klin.Chir. 127, 1. 1923. 229. BLAISDELL F.E.: The osteogenic function of the periosteum. Arch.Surg. 11, 933. 1925. 230. BOHR H. , SORENSEN A.H.: Study of fracture healing by means of radioa_c tive tracers. J.Bone Joint.Surg. 32A, 5 6 f. 1950. 231. BOHR H. , RAUN H.V., VERNER H. : The osteogenic effect of bone tran_s - plants in rabbits. J. Bone Joint.Surg. 50B, 866. 1968. 232. BONFIGLIO M.: Repair of bone, ti'asplants, fractures. J.Bone Joint.Surg 40A, 446. 1958. 233. BOYNE P.J.: Autogenous cancellous bone and marrow trasplants. Clin. - Orthop. 73, 199. 1971. 234. BRIGHTON C.T., HEPPENSTALL R.B.: Oxygen tension in zones of the ep_i - physeal plate, the metaphysis and diaphysis. J. Bone Joint. Surg. - 53A, 719. 1971. 235. BRIGHTON C.T., KREBS A.G.: Oxygen tension of healing fractures lu the rabitt. J.Bone Joint.Surg., 54A, 323. 1972. 236. BRIGHTON C.T., HUNT : Mitochondrial calcium and its role in calcitica tion. Clin.Orthop., 100, 406. 1974. 237. BROOKES M.: The blood sugly of bones. Butterworths, London, 1971. 238. BURGER M ., SHERMAN B . S . , SOBEL A.E.: Observations of the influence of chondroitin sulfate on tht rate of bone repair. J.Bone Joint.Surg. 44A, 675. 1962. 239. BÜR1NG K., URIST M.R.: Trans filter bone induction, Clin.Orthop., 71, - 235. 1968. 240. BUSH, E.: Ein beitrag zur frage der knochenregeneration. Arch.Klin. - Chir. 146, 586. 1927. 241. CAPO C., BOUGRAND P., BENOLIEL A.M.: Phagocytosis. J.Theor.biol. 47, 177. 1974. 242. CARTIER P.H., BERNARD B., LAGRANGE J.: Studies on the repair of frac­ tures using p32, En CIBA Bone Structure and metabolism, 148. Chur­ chill, 1956. 243. CHALMERS J . , GRAY D.H., RUSH J.: Observations on the induction of bo­ ne in soft tissues. J.Bone Joint.Surg. 57B, 16. 1975. 244. CLARK H.B., HAYES P.A.: A study of the comparative effects of rigid - and semirigid fixation on the healing of fractures of the mandible in dogs. J. Bone Joint.Surg. 45A, 731. 1963. 245. COHEN J., LACROIX P . : Bone and cartilage formation by periost'um. J. Bone Joint.Surg. 37A, 717. 1955. 246. COUTELIER L.: Recherches sur la guérison des fractures. Arscia. 1969, Bruxelles. 247. COUTTS R.D., HARRIS W.H., WEINBERG E.H.: Compression plating. Acta 0_r thop. Scand. 44, 256. 1973. 248. DANCKVARDT-LILLIESTRÔM G.: Reaming of the medullary cavity and its — effect on dyaphiseal bone. Acta Orthop.Scand. Suppl. 128. 1969. 249. DANCKVARDT-LILLIESTROM G., LORENZI G.L., OLERUD S.: Intramedullary - nailing after reaming. Acta Orthop.Scand.Suppl. 134. 1970. 250. DANCKVARDT-LILLIESTROM G., LORENZI G.L., OLERUD S.: Intracortical c,_r culation after intramedullary reaming with (luction of pressure in the medulary cavity. J.Bone Joint.Surg. 52A, 1390. 1970. 251. DANIS A.: Theorie et pratique de 1 'osteosynthese. Masson 1949 251 B DANIS A.: Le cal de fracture nâit de la moelle osseuse. Acta Orthop. Belg. 39, 696. 1973. 252. DEBRUNNER H., PROSCH L.: Experimentelle und klinische unteesuchungen zur Pseudoarthrosenfrage. Arch. Orthop.Unfall.Chir. 24, 261. 1926. 253. DELEU J., TRUSTA J.: Vascularization of bone grafts in the anterior - chamber of the eye. J . Bone Joint.Surg. 47B, 319. 1965. 254. DEUTSCH A., GUDMUNDSON C.: Nucleic acids in regenerating rabbit bone. Clin. Orthop. 69, 239. 1970. 255. DEUTSCH A., GUDMUNDSON C.: Ribonucleic acis in healing human bone.Clin Orthop. 80, 155. 1971. 256. DHEM A.: Le forage des canaux de havers. Rev. Chir. Orthop. 51, 583, 1965. 257. DIEHL K. , MITTELMEIR H. : Spongiosierung bei der Plattenos t<, osynthese . Z. Orthop. 112,236. 1974. 258. DIETERICH H.: Die histogenese des callus. Arch.Klin.Chir, 141,27.1926 259. DUBUC P.L., URIST M.R.: The accesibility of the bone induction princj_ pie in surface decalcified bone implants. Clin. Orthop. 55, 217. — 1967. 260. DURIEZ J.: Les processus fondamentaux de 1 ’osteogenese de reparation. Rev. Chir. Orthop. 58, suppl. I, 11. 1972. 261. DUTHIE R.B., BARKER A.N.: An autoradiographic study of mucopolysacha- ride and phosphate complexes in bune growth and repair. J.Bone Joint Surg. 37B, 304. 1955. 262. DUTHIE R.B., BARKER A.N.: The histochemistry of the preosseus stage - of bone repair. J. Bone Joint.Surg. 37B, 691. 1955. 263. EGGERS G.V.N.: Internal contact splint. J.Bone Joint.Surg. 3ÜA, 40, - 1948. 264. EGGERS G.V.N., SHINDLER T .O . , POM ERA T C.M. : The influence of tiw . tactcompiussion factor on osteogenesis in surgical fractures. J. - Bone Joint.Surg. 31A, 693. 1949. 265. Elves M.W., PRATT L.M.: The pattern of new bone function in isografts of bone. Acta Orthop. Scand. 46, 549. 1976. 266. Ennenking V.F., BURCHARDT H. , PUHL J.J., PIETROWSKI G. : Ph^ysica] und biological aspects of repair in dog cortical bone trasplants. J. - Bone Joint.Surg. 57A,237. 1975. 267. FELL H.B.: Some factors in the regulation of cell physiology in skê - letal tissues, en Frost, edit. Bone Byodinamics, 189, Little Brown, 1964. 268. Forum sur 1'osteogenese. Rev. Chir. Orthop. 52, 711. 1966. 269. FRIEDITIBERG : Compression forces in fracture healing. Surg. Gyn. - Obst. 94, 740. 1952. 270. FRIEDENSTEIN A.J.: Determined and inductible osteogenic precursor — cells. En Hard tissue growth repair and remineralization. 182, Fx- cerpta Medica, 1973. 271. GEISER M., TRUETA J.: Muscle action, bone rarefaction and bone forma­ tion J. Bone Joint. Surg. 40B. 1958. 272. GEISTM., SPENCER G.E., CHASE S.V., HERNDON C.H.: Effects of continuos suction of fracture site on fracture healing in dogs. Surg. Gyn. - - Obst. 118, 972. 1964. 273. GIRGIS P.G., PRITCHARD J.: Experimental production of cartilage during the repair of fractures of the skull vault in rats. J.Bone Joint. - Surg. 40B, 274. 1958. 274. GUDMUNSON C., SEMB L.A.: Enzyme studies of fractures with normal and - delayed union. Acta Orthop. Scand. 42, 18. 1971. 275. GUDMUNSON C., SEMB L.A.: Isoenzymes of lactic dehydrogenase and este­ rases in regenerating bone. Acta Orthop. Scand. 42, 297. 1971. 276. GUDMUNSON C., LIDGEN L.; Does dyphenylhydantoin accelerate healing of fractures in mice. Acta Orthop. Scand. 44, 256. 1973. 277. HAM A.V.: A histological study of the early phases of bone repair. J. Bone Joint.Surg. XII, 827. 1930. 278. HAM A.W., HARRIS V.R.: Repair and transplantion of bone. En Bourne Edit The biochemistry and physiology of bone III, 338, Academic Press, - 1972. 279. HEIKKINEN E.T., VIHERSAARI T., PENTTINEN R.: Effect of previous excer- cise on fracture healing. Acta Orthop. Scand. 45, 481. 1974. 280. HEIPLE K.G., HERNDON C.H.: The pathologic physiology of nonuion. Clin. Orthop. 43, 11. 1966. 281. HEIPLE K.G., HERNDON C.H., CHASE S.V., VATTLEVORTH A.: Osteogenic indue tion by osteosarcoma and normal bone in mice. J.Bone Joint.Surg. 50A, 311. 1968. 282. HELLEVELL A.B., BELJEN J.R., GOLDMAN M.: Effect of chronic administra­ tion of a glucocorticoid on the rate of healing of experimental ossê ous defects. Clin. Orthop. 100, 349. 1974. 283. HEROLD H.Z., HURVITZ A., TEDNOR A.: The effect of growth hormone on the healing of experimental bone deffects. Acta Orthop. Scand. 42, 377,- 1971. 284. HERZOG K.T.: Zum begriff der stabilen osteosynthese. Arch. Orthop. Un­ fall Chir. 55, 63. 1963. 285. HOFFMAN V.: Die autoplastischen knochentrasplantationen vom standpunkt der Biologie und architektonik. Arch.Klin.Chir. 129, 750. 1924. 286. HULTH A., OLERUD S.: Studies on amputation stumps in rabbits. J. Bone - Joint. Surg. 44B, 431. 1962. 287. HULTH A., OLERUD S.: Early fracture callus in normal and cortisone trea ted rats. Acta Orthop. Scand. 34, 23. 1964. 288. HURLEY L.A. , STINCHPIELD P.E. , BASSETT C.A.L., LYON F.H. : Tl,e role of - soft tissues in osteogenesis. An experimental study of canine spine - fusions. J. Bone Joint.Surg. 41A, 1243. 1959. 289. Jessen H.: Uber die bedeutung des Periosts bei der entstehung und beban dlung der pseudoarthrose. Arc. Klin.Chir. 137, 285. 1925. 290. JOVSEY J.: Studies on haversian systems in man and some animals. J . Anat. 100, 857. 1960. 291. JUDET R. et J. : L'osteogenese et les retards de consolidation et les pse_u doarthroses des os longs. 85 Congreso S.I.C.O.T., New York, I960. 292. KATZENSTEIN M.: Die wechseIseitigen stbrungen der knochenhaut und den - knockemarks im knochenaufbau. Arch.Klin.Chir. 145, 461. 1927. 293. KAHN A., SIMMONS D.: Investigation of cell lineage in bone using a dû - maera of chick and quail embryonic. Tissue. Nature, 258, 325. 1975. 294. KAWABATA M., RAY R.D.: Experimental study of peripheral circulation and bone growth. Ill, Clin. Orthop. 54, 175. 1967. 295. KELLEY R.O.: Ultraestructure of chondrogenesis in man. J . Embryol. exp. morph. 33, 387. 1975. 296. KEMBER N.F.: Cell division in enchondrai ossification. J. Bone J o l u L Surg. 42 B, 824. 1960. 297. KEITH A.: Bone growth and bone repair. Bril. J . Surg. V. 658. VI. 19, - 160. 1918. 298. KEVABAMANI, LAXNAR S., SETH P.K.: The role of petal technique in activa­ tion of osteogenesis. Acta Orthop. Scand.44, 611. 1973. 299. KIVISAARI J., NIINIKOSKI J.: Tissue oxigen and carbon dioxide tensions - in healing rabbits tibias. Acta Orthop. Scand. 46, 269. 1975. 300. MC KIBBIN B., RAY R.D.: Experimental study of peripheral circulation and bone growth II. Clin. Orthop. 53, 175. 1967. 301. KOCH H.: Uber knochenregeneration. Ach. Klin. Chir. 135, 48. 1925. 302. KOCH H.; Uber die bedeutung der knochenhaut bei der knochebrucheinrich- tung. Arch. Klin. Chir. 146, 425. 1927. 303. KONIG F .: Uber abbau am gebrochenen knochen sein wesen und seine bedeu­ tung. Arch. Klin. Chir. 146, 586. 1927. 304. KOSKINEN E.: The influence of hormonal treatement on experimental - fractures. Acta Orthop. Scand. suppl. 80. 1965. 305. KROMPECHER S.: Uber den primar angiogenen kallus: Morph. Jb. 102, - 337. 1962. 306. KROMPECHER S.: Uber den Spongiosakalluz. Z. Orthop. 112, 1196. 1974. 307. KRUSE R.L., KELLY P.J.: Acceleration of fracture healing distal to a venous tourniquet. J. Bone Joint Surg. 56 A, 730. 1974. 308. KUHLMAN R.E.: A microchemical study of the developing epiphyseal plji te. J. Bone Joint. Surg. 42A, 457. I960. 308 B KUHIA4AN R.E., MC NAMEE M.J.: The biochemical importance of the hypejr trophic cartilage cell area in enchondrai bone formation. J. Bone Joint. Surg. 52A, 1025. 1970. 309. KUHLMAN R.E., RAINEY R., O'NEIL R.: Biochemical investigations of - deer antler growth. II. J. Bone Joint. Surg. 45A, 345. 1963. 310. KÜNTSCHER G.: Das kallus problem. Enke. 1970. Sttutgart. 311. LACROIX P.: The growth of the bone marrow. J. Bone Joint Surg. 31A, 776. 1949. 312. LACROIX P.: Sur la reparation des fractures des mécanismes locaux. XV, Congreso Soc. Intern. Chir., Lisboa 1953. 313. LAURNEN E.L., KELLY P.J.: Blood flow, oxigen consumption carbon dioxL de production and blood calcium and pH changes in tibial fraci ti res in the dog. J. Bone Joint Surg. 51A, 298. 1969. 314. LEMAIRE R.G.: Calcium metabolism in fracture healing. An experimental kinetic study using Ca^5 in rats. J. Bone Joint Surg. 48A, 1145. - 1966. 315. LERICHE R., POLICARD A.: Les problèmes de la physiologie normale et pathologique de l'os. Masson 1926. Paris. 316. LEXER R.: Die frein trasplantationen II, Enke, 1924. Sttutgart. 317. LINDHOLM T.S.: Biochemical studies of tibial fracture callus in gro­ wing ostéopénie rats. Acta Chir. Scand. suppl. 449. 1975. 318. LINDHOLM T.S., LINDHOLM R., TOKKANEN S., LINO R.: Effect of forced - interfragmental movements on the healing of tibia1 fractures. Acta Orthop. Scand., 40, 721. 1969. 318 B LINDHOLM T.S., LINDHOLM R. , LIUKKO ; Fracture healing and mast cells I y II. Acta Orthop. Scand. 38, 115. 1967. 319. LINDHOLM T.S., LINDHOLM R.: Mast cells in endosteal and periosteal rê pair. Acta Orthop. Scand. 41, 129. 1970. 320 . LINDHOLM T.S., LINDHOLM R. , LIUKKO P., PAASINAKI, ISOKANKA, ROSSI, - AUTIO, TOMIN : The mast cell as a component of callus in healing — fractures. J. Bone Joint. Surg. 51B, 148. 1969. 321. LUBARSCH 0.: Inflamacidn en Aschohh Tratado de anatomfa patoldgica I, 571. Labor, 1934 Madrid. 322. LUTTI A.M.: Heteroimplants of epiphyseal cartilage in fracture gaps. J. Bone Joint. Surg. 56B, 186. 1974. 323. MAKLEY J.T., HEIPLE K.G., CHASE S.M., HERNDON C.H. : The effect of r_e duced barometric pressure on fracture healing in rats. J. Bone - - Joint. Surg. 49A, 903. 1967. 324. MAN ABE S., SHIMA I., YAMANICHI : Cytokinetic analysis of osteogenic cells in the healing process after fracture. Acta Orthop. Scand.- 46, 161. 1975. 325. MARTIN B.: Uber experimentelle pseudoarthrosen bildung und die bedeu tung von Periost und Mark. Arch. Klin. Chir. 114, 664. 1920. 326. MARTIN B.: Zur knochenregeneration asu dem Periost. Arch. Klin. Chir. 120, 744. 1922. 327. MARTIN B.: Die sympathischen knochenerkrankung. Arch. Klin. Chir. 129, 45. 1924. 328. MARTIN B.: Uber die osteogenetische fahigkeit des périostes. Arch. - Klin. Chir. 144, 489. 1927. 329. MAURER P., EVRARD J. , HAUTHE V., MAZABRAUD A.: Contribution a I'etu de de la consolidation osseuse premier résultats. Etude des rea_c - tiens vasculaires. Rev. Chir. Orthop. 49, 689. 1963. 330. MAUREJR P., ZUCMAN J. , LAVALLE P.: Role de la vascularization peri- fracturaire et centromedullaire dans 1 'osteogenese eeparatrice . Rev. Chir. Orthop. 51, 229. 1965. 331. MELCHER A.H., DREYER C.J.: Protection of the blood cloth in healing - circunscribed bone defects. J. Bone Joint. Surg. 44B, 424. 1962. 332. MELCHER A.H., IRVING J.I.: The healing mechanism in artificially - - created circunscribed defects in the femora of albino rats, J. Bo­ ne Joint. Surg. 44B, 928. 1962. 333. MINDELL E.R., RODBON S., KWASMAN B.G.: Chondrogenesis in bone repair. A study of the healing fracture callus in the rat. Clin. Orthop. 79, 187. 1971. 334. MITTEL8TILLER S.: Beitrage zur Kentnnis der mikroskopischen befunfe - bei Pseudoarthrosen. Arch. Klin. Chir. 122, 939. 1923. 335. MONTICELLl G.: II callo osseo normale e patologico. Pisiopatologia. - 40 Congreso de la Soc. Ital. Ortop. Roma 1955. 336. MUNHEIM G.: Assessement of fracture healing in men by Sr&7 scintigra­ phy. Acta Orthop. Scand. 44, 621. 1973. 337. MULLER V . : Die Normale und pathologische Physiologie des knochens. - Barth, 1924 Leipzig. 338. MULLER M.E.: A propos de la guérison "per primam" des fractures. Rev. Chir. Orthop. 50, 697. 1964. 339. NARANG R., LLOYD W., WELLS H.: Grafts of decalcified allogenic bone - matrix promote the healing of fibula fracture gaps in rats. Clin. - Orthop. 80, 174. 1971. 340. NAVARRO QUILIS R ., LLOYD V., WELLS H.: Healing in denervated bones. Acta Orthop. Scand.45, 820. 1974. 341. NGUYEN W., JOWSEY J.: A Study of bone formation in dogs of different metabolic states. Acta Orthop. Scand. 40, 708. 1969. 342. NIINIKOSKI J., HUNT T.K., DUMPHY J.E.: Oxigen supply in healing tis­ sue. Amer. J. Surg. 123, 247. 1972. 343. NIINIKOSKI J., HUNT T.K.: Oxigen tensidn in lualing bone. Surg. Gyn. Obst. 134, 746. 1972. 344. OLERUD S., DANCKWARDT-LILLIESTROM G.: Fracture healing in compression osteosynthesis in the dog. J. Bone Joint. Surg. 50B, 844. 1968. 345. OLERUD S., LORENZI L.: Triple fluorochrome labeling in bone formation and resorption. J. Bone Joint Surg. 52A, 274. 1970. 346. OLERUD S., DANCKWADRT-LILLIESTROM G.: Fracture healing in compression osteosynthesis. Acta Orthop. Scand. suppl. 137. 1971. 347. OSTROWSKY K., WLODARKI K.: Induction of heterotopic bone formation. En Bourne edit. The biochemistry and physiology of bone. I l l , 299, Academic Press, 1972. London. 348. PARADIS G.R., KELLY P.J.: Blood flow and mineral deposition in canine tibial fractures. J. Bone Joint. Surg. 57A, 220. 1975. 349. PARTSCH P., BILLICH H. : Experimentelle untersuchungen uber das verha_l ten des vitalfarbaren zellen bei der Kallus-biIdung. Arch. Klin. — Chir. 147, 220. 1928. 350. PENTTINEN R.: Biochemical studies on fracture healing in the rat. Ac­ ta Chir. Scand. suppl. 432. 1972. 351. PENTTINEN, NIINIKOSKI S., KULONEN E. : Hyperbaric oxigenation and fra_c ture healing. Acta Chir. Scand. 138, 39. 1972. 352. PERREN S.M., HUGGLER A., RUSSEBERGER, ALLGOVER M., SCHENK R., VITHENE GER H., MULLER M.E.: Cortical bone healing. Acta Orthop. Scand. Suppl. 125. 1969. 353. PIEKARSKI K., VILEY A.M., BARTELS : The effect of delayed internal 14 xation on fracture healing. Acta Orthop. Scand. 40, 543. 1969. 354. PIZZETTI M., PAVETTO G.C., SILINQUINI P . O . , POLI N.: Richerche speri- mentali sulle osteosintesi. Min. Ortop. 18, 134, 703, 709, 714, 723. 1967. 355 . POST R.H., HEIPLE K.G., CHASE S.V., HERNDON C . H . : Bone grafts in di_t fusion chambers. Clin. Orthop. 44, 266. 1966. 356. PRASARD G.C., REYNOLDS J. J. : Effect of environement factors on the r_e pair of bone. J. Bone Joint. Surg. 50B, 401. 1968. 357. PRASARD G.C., UDUPA K.N.: Studies on ultrastructural pattern of osteo genic cells during bone repair. Acta Orthop. Scand. 43, 163. 1972. 358. PUR AN EN J. ; Reorganization of fresh and preserved bone trasplants. A_c ta Orthop. Scand. suppl. 92. 1966. 359. PURANEN J, KASKI P.: The clinical significance of osteomedullography in fractures of the tibial shaft, d. Bone Joint. Surg. 56A, 759, - 1974. 360. PUTTE K., URIST M.R.: Osteogenesis in the interuir of intramuscular implants of decalcified bone matrix. Clin. Orthop. 43, 257. 1966. 361. RAHN B.A., GALLINARO P., BATTENSPERGER A., PERREN S.M.: Primary bone healing J. Bone Joint. Surg. 53A, 783. 1971. 362. RAY R.D.: Osteogenesis and treatement of delayed union and non union of long bones. 85 Congreso S.I.C.O.T., New York, I960. 363. RAY R.D., SABET T.: Bone grafts. Cellular survival versus induction. J. Bone Joint. Surg. 45A, 337. 1963. 364. RAY R.D. , AOUAD R. , KAWABATA M. : Experimental study of peripheral ci_r culation and bone growth Clin. Orthop. 52, 221. 1967. 365. RA.Y R.D. , KAWABATA M. , GALANTE J. : Experimental study on peripheral circulation and bone growth. III. Clin. Orthop. 54, 175. 1967. 366. REYNOLDS P.O., KEY A.: Fracture healing after fixation with standard plates, contact splint and medullary nails. J. Bone Joint. Surg. - 36A, 577. 1954. 367. RHINELANDER F.W., PHILLIPS R.S.: Microangiography in bone healing.II J. Bone Joint. Surg. 50A, 643. 1968. 368. RHINELANDER F.W., BARAGRY R.: Microangiography in bone healing I. J. Bone Joint. Surg. 44, 1273. 1972. 369. RHINELANDER F.W.: Circulation of bone. En Bourne : The biochemistry - and physiology of bone II, 2. 1972. Academic Press. London. 370. RIESS E.; Experimentelle studien uber die knochenbildende kraft des périostes. Arch. Klin. Chir. 129, 750. 1924. 371. ROASENDA F ., LORENZI G.L.: Moderni orientamenti nel trattamento con osteosintesi delle fracture diafisarie. 54 Congreso Soc. Ital. Or­ top. Roma 1969. 372. ROHDE E.: Beitrage zur frage der metaplasie des bindegewebes in kno­ chen. Arch. Klin. Chir. 128, 302. 1924. 373. ROSE G.G., SHINDLER T.: The cytodifferentiation of osteoblasts in ti_s sue culture. J. Bone Joint. Surg. 42A, 458. 1960. 374. ROTHMAN R.H., KLENEK J., TOLOK J.J.: The effect of iron déficience — anemia on fracture healing. Clin. Orthop. 77, 276. 1971. 375. SALOMON C.D., VOLPIN G.: The effects of calcium deficient diet on — breaking strenght and other physical parameters of rat bones. Clin. Orthop. 82, 207. 1972. 376. SCHENK R., SPIRO, WIENER : Cartilage resorption in the epiphyseal - plate.J. Cell. Biol. 34, 276. 1967. 377. SCHNEIDER E.: Zur biologie der frakturheilung. Arch. Klin. Chir. 144, 689. 1927. 378. SEMB H.: Experimental limb dissuse and Lone flow. Acta Orthop. Scand. 40, 552. 1969. 379. SHAW N.E.: Influence of muscle blood flow no the circulation in bones. Proc. Roy. Soc. Med. 58, 877. 1965. 380. SHAW J.J., BASSETT C.A.L.: The effects of varying oxygen concentrations on osteogenesis and emryonic cartilage, in vitro. J. Bone Joint Surg. 49A, 73. 1967. 381. SIFFERT R.S.: Experimental bone trasplants. J. Bone Joint. Surg. 37A, 742. 1955. 382. SIFFERT R.S., BARASH E.S.: Delayed bone trasplantation. An experimen tal study of early host-trasplant relationships. J. Bone Joint. — Surg. 43A, 407. 1961. 383. SIMS F.H., KELLY P.J.: Relationship of bone remodeling, oxygen consump tion, and blood flow in bone. J. Bone Surg. 52A, 1377. 1970. 384. SIÀTIS P., ROKKANEN P.: The normal repair of experimental fractures. I. Acta Orthop. Scand. 35, 24. 1964. 385. SLATIS P., ROKKANEN P.: The normal repair of experimental fractures. II. Acta Orthop. Scand. 36, 221. 1965. 386. STERN B., GLIMCHER M.J., GOLDHABER P.: Effects of various oxygen ten­ sions on synthesis and degradation of bone collagen in tissue cultu_ re. Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 121, 869. 1966. 387. STRO’MBERG L.N.E. : Diaphyseal bone in rigid internal plate fixation. - Acta Chir. Scand. suppl. 456. 1975. 388. TONNA E.A., CRONKITE E.R.: Celular response to fracture studied with tritiated thimidine. J. Bone Joint. Surg. 43A, 352. 1961. 389. TONNA E.A., CRONKITE E.R. : Changes in : he skeletal cell proliferati­ ve response to trauma concomitant with aging. J. Bone Joint. Surg. 44A, 1557. 1962. 390. TONNA E.A., CRONKITE E.R.: The periosteum. Autoradiographic studies -- on cellular proliferation and transformation utilizing tritiated — thymidine. Clin. Orthop. 30, 218. 1963. 391. TONNA E.A., CRONKITE E.R.: Skeletal cell labeling following continuos infusion with T^. Lab. Invest. 19, 510. 1968. 392. TONINO A.J., DAVIDSON C.L., KLOPPAR P.J., LINDAU L.A.; Protection — from stress in bone and its effects. J. Bone Joint. Surg. 58B, 107. 1976. 393. TORTO P.: II callo osseo normale e patologico. Aspetti istologici. 40 Congreso Soc. Ital. Ortop. Roma 1955. 394. TRIEBEL H.: Knochentransformatiom, in neur auffasung. Arch. Klin. Chir. 120, 526. 1922. 395. TRUETA J.: Regeneration of bone and cartilage. XV Congreso de la Soc. Intern. Chir. Lisboa. 1953. 396. TRUETA J., CAVADIAS A.X.: Vascular changes caused by the Kdntscher ty­ pe of nailing. J. Bone Joint. Surg. 37B, 492. 1955. 397. TRUETA J., MORGAN J.D.: The vascular contribution to osteogenesis. I, Studies by the inyection method. J. Bone Joint. Surg. 42B, 97. I960. 398. TRUETA J.: The role of the vessels in osteogenesis. J. Bone Joint. — Surg. 45B, 402. 1963. 399. TRUETA J.: The dynamics of bone circulation. En Frost, edit. Bone Byo dinamics. 245, Little Brown, 1964. 400. UDUPA K.N., PRASARD G.C.: Chemical and histochemical studies on the - organic constituents in fracture repair in rats. J. Bone Joint. - - Surg. 45A, 770. 1963. 401. UHTHOFF H.K., DUBUC F.L.: Bone structure in the dog under rigid inte^ nal fixation. Clin. Orthop. 81, 165. 1971. 402. URIST M.R., WALLACE T.H., ADAMS T.: The function of fibrocartilagi - nous fracture callus. J.Bone Joint. Surg. 47B, 304. 1965. 403. URIST M.R., SILVERMAN B.F., BURING K ., DUBUC F.L., ROSEMBERG J . : The bone induction principle. Clin. Orthop. 53, 243. 1967. 404. URIST M.R., STATES B.S.: Bone formation in implants of partially and wholly demineralized bone matrix. Clin. Orthop. 71, 271. lb. ;. 405. VARMA B.P., METHA S.H.: Fracture healing with intramedullary nail. A^ ta Orthop. Scand. 38, 419. 1967. 406. WILLICH C.T.: Experimentelles uber knochenregeneration und pseudoartho senbildung. Arch. Klin. Chir. 129, 203. 1924. 407. WILKINSON : Use of radiophosforus in fractured bones. Surg. Gyn. Obst. 408. WRAY J.R.: edit. CircuLi.tion and the skeletal system. A.A.O.S. J. B^ ne Joint. Surg. 50A, 764. 1968. 409. WRAY J.R.: The effect of age on the vascular response to trauma. J. - Trauma 1, 576. 1961. 410. YAMAGISHI M., YOSHIMURA Y.: The biomechanics of fracture healing. J. Bone Joint. Surg. 37A, 1035. 1955. 411. YOUNG M.H.: The repair of experimental defects in rabbit skulls. J. - Bone Joint. Surg. 46B, 329. 1964. 411 A YOUNG M.H.: Bone and dérivâtes of bone repair of skeletal defects. — Clin. Orthop. 50, 257. 1967. 412. ZUCM4N J.: L'elaboration du cal dans les fractures diaphysaires. Rev. Chir. Orthop. 52, 109. 1966. 413 . ZUCMAN J . , MAURER P . , BERBESSON C . : Etude e x p é r i m e n t a l e de l ' a c t i o n - o s t e o g e n i q u e des g r e f f e s de p e r i o s t e , de m o e l l e o s s e u s e e t de l ' a l ^ s a g e c e n t r o m e d u l l a i r e . Rev. C h i r . O r th o p . 54, 221. 1968. 413 B ZUCMAN J . , MAURER P . , BERBESSON C . : The e f f e c t o f a u t o g r a f t s o f bone and p e r i o s t e u m i n r e c e n t d i a p h y s i a l f r a c t u r e s . J . Bone J o i n t . S u rg . 50B, 409 . 1968. 414 . ZUCMAN J . , PIKETTY D . : E tude e x p é r i m e n t a l e de l ' a c t i o n d e s g r e f f e s de m o e l l e o s s e u s e e t d ' o s dans l e s f r a c t u r e s d i a p h y s a i r e s r e c e n t e s - - g r a v e s . Rev. C l i i r . O r t h o p . 56, 3 . 1970. FENOMENOS ELECTRICOS Y BIOMECANICOS 415. ANDERSONJ.C., ERIKSSON C. : P i e z o e l e c t r i c p r o p e r t i e s o f d r y and wet bone . N a t u r e . 227 , 491 . 1970. 416 . ARNOLD G. , KOKEMOHR M . : P u n k t i o n e l l e E i g e n s c h a f t e n von Rohrenknochen un t e r a x i a l e r B e l a s t u n g . Z. Expe r . C h i r u r g . 6 , 68 . 1973. 417 . ASCENZI A . , BELL G . H . : Bone as a m e c h a n ic a l E n g i n e e r i n g prob lem. En Boujr ne e d i t . The b i o c h e m i s t r y and P h y s i o l o g y o f Bone I , 311, Academic - - P r e s s , 1972. 418 . ATHENSTAEDT H . : Pe rmanen t e l e c t r i c p o l a r i z a t i o n and p y r o e l e c t r i c beha - v i o u r o f t h e v e r t e b r a t e s k e l e t o n . Z. A n a t . E n t w i c k l . g e s c h . 131, 1, 21, - 1970. 419 . ATHENSTAEDT H. : Pe rm anen t l o n g i t u d i n a l e l e c t r i c p o l a r i z a t i o n and pyroel_ec t r i e b e h a v i o u r o f c o l l a g e n o u s s t r u c t u r e s and n e rv o u s t i s s u e i n man and o t h e r v e r t e b r a t e s . N a t u r e , 228, 830. 1970. 420 . BASSET C . A . : B i o p h y s i c a l p r i n c i p l e s a f f e c t i n g bone s t r u c t u r e . En Bourne e d i t . The b i o c h e m i s t r y and p h y s i o l o g y o f bone I I I , 1, Academic P r e s s , 1971. 421 . BASSETT C . A . , PAVLUK R . J . , PILLA A .A . : Augm en ta t ion o f bone r e p a i r by iji d u c t i v e c o u p le d f i e l d s . S c i e n c e 144, 575. 1974. 422. BECKER R .O . : The b i o e l e c t r i c f a c t o r s i n Amphibian l imb r e g e n e r a t i o n . J . Bone J o i n t . S u r g . 43A, 643 . 1961. 423 . BECKER R .O . , BASSETT C . A . , BACHMAN C .H . : B i o e l e c t r i c f a c t o r s c o n t r o l i n g bone s t r u c t u r e . En F r o s t , e d i t . Bone b y o d i n a m ic s . 209 , L i t t l e , 1964. 424. BECKER R . O . , BROWN F.M.: P h o t o e l e c t r i c e f f e c t s i n human bone . N a t u r e , - 206 , 1325. 1965. 425 . BECKER R . O . , BACHMAN C .H . , SIL4M0S M .H . , LAVINE L . S . : B i o e l e c t r i c e f f e c t s i n t i s s u e s . C l i n . O r th o p . 43 , 251 . 1966. 426 . BECKER R .O . , MURRAY D .G . : The e l e c t r i c a l c o n t r o l s y s te m r e g u l a t i n g f r a c ­ t u r e h e a l i n g i n a m p h i b i a n s . C l i n . O r th o p . 73, 169, 1970. 427 . BECKER R .O . : S t i m u l a t i o n o f p a r t i a l l imb r e g e n e r a t i o n i n t h e r a t . N a t u r e , 235, 109. 1972. 428 . BEHARI J . , GUHA K . , AGARWAL P . N . : Tem pera tu re dependence o f t h e e l e c t r j _ c a l c o n d u c t i v i t y o f bone . C onnec t , t i s s . r e s . 2 , 325. 1974. 429 . BELLAIRS R . : C e l l d i f e r e n c i a t i o n y c e l l g rowth and m o r p h o g e n e s i s . En: The c e l l i n m e d i c a l s c i e n c e . Academic P r e s s London 1973. 430 . BLACK J . , KOROSTOFP E . : P i e z o e l e c t r i c phenomena in v i a b l e human bone . En 12 Congreso SICOT, T e l - A v iv , 1972, 966, E x c o r p t a M edica . 431 . BLAIMONT P . , HALLEUX P . , JEDVAB J . : D i s t r i b u t i o n des c o n t r a i n t e s o s ­ s e u s e s dans l e f em ur . Rev. C h i r . O r th o p . 54, 303. 1968. 432 . BRIGHTON C . T . , FRIEDENBERG Z . B . , BLACK J . : E f f e c t s o f a p p l i e d e l e c t i û c a l c u r e n t i n c o n n e c t i v e t i s s u e . SICOT, 12 C ongreso , T e l - A v i v , 1972, 960. E x c e r p t a Médica . 433 . BRIGHTON C . T . , FRIEDENBERG Z .B . , ZEMSKT L .M . , POLLIS P . R . : D i r e c t - c u _ r r e n t s t i m u l a t i o n o f n o n - u n i o n and c o n g e n i t a l p s e u d o a r t h r o s i s . J . - Bone J o i n t . S u r g . 57A, 368. 1975. 434 . BROOKES M . , WARDLE E .N . : Muscle a c t i o n and t h e chape o f t h e f em ur . J . Bone J o i n t . S u r g . 44B, 398. 1962. 435. BURSTEIN A .H . , ZIKA J . M . , HEIPLE K.G . , KLEIN L . : C o n t r i b u t i o n o f c o U a gen and m i n e r a l t o t h e e l a s t i c - p l a s t i c p r o p e r t i e s o f bone . J . Bone J o i n t Su rg . 57A, 956. 1975. 436 . CASTRO F. d e . : Q u e l q u e s o b s e r v a t i o n s s u r l ' i n t e r v e n t i o n du sys tème ne^ veux autonome danz l ' o s s i f i c a t i o n . T rab . Lab. I n v . B i o l . Un ie . M_a - d r i d , 26 , 215. 1930. 437 . COCHRAN G .B . : E x p e r i m e n t a l methods f o r s t i m u l a t i o n o f bone h e a l i n g by means o f e l e c t r i c e n e r g y . B u l l . N.Y. A c a d . S c i . 48 , 899. 1972. 438 . CHAMAY A . , RICHEZ J . , BIELER L . : L ' i n f l u e n c e des m ic r o —c o u r a n t s é l e c ­ t r i q u e s s u r 1 ' o s t e o g e n e s e , Rev. C h i r . O r th o p . 58, 389. 1972. 439 . CHAMAY A . , TSCHANTZ P . : M e c h a n ic a l i n f l u e n c e s i n bone r e m o d e l i n g expe­ r i m e n t a l r e s e a r c h on W o l f f ' s law. J . Biomech. 5, 173. 1972. 440 . CURREY J . D . : The a d a p t a t i o n o f bone t o s t r e s s . J . T h e o r e t . B i o l . 20, 91. 1968. 441. CURREY J . D . : M e c h a n ic a l p r o p e r t i e s o f b o n e . C l i n . O r th o p . 73, 210. - 1970. 442 . DIGBY P . S . B . : Mechanism o f c a l c i f i c a t i o n i n mammalian bone. N a t u r e , - 212 , 1250. 1966. 443 . DIGBY P . S . B . : P o t e n t i a l s and c a l c i f i c a t i o n i n mammalian t e e t h and a r ­ t e r y . Ann. N.Y. Acad. S c i . y A n a s t . 438 , 202 . 1974. 444 . EDE D .A . , LAW J . T . : Computer s t i m u l a t i o n o f v e r t e b r a t e l im b morphogene s i s . N a t u r e , 231 , 244. 1969. 4 4 5 . ENLOW D .H . ; W o l f f ' s law and t h e f a c t o r o f a r c h i t e c t o n i c c i r c u m s t a n c e . A m e r . J . O r t h o d o n t . 54, 803 . 1968. 4 4 6 . EPKER B .N . , FROST H .M . : C o r r e l a t i o n o f bone r e s o r p t i o n and f o r m a t i o n w i t h p h y s i c a l b e h a v i o r o f l o a d e d bone . J . D e n t . r e s . 44 , 33. 1965. 44 7 . EVANS F . G . , VINCENTELLI R . : R e l a t i o n s o f t h e c o m p r e s s iv e p r o p e r t i e s - o f human c o r t i c a l bone t o h i s t o l o g i c a l s t r u c t u r e and c a l c i f i c a t i o n . J . Biomech. 7 , 1. 1974. 4 4 8 . EVANS F . G . : S t r e s s and s t r a i n i n b o n e s . Ch. Tliomas, S p r i n g f i e l d , 1957 4 4 9 . EVANS F . G . : M e c h a n i c a l p r o p e r t i e s o f bone . Ch. Thomas, S p r i n g f i e l d , - 1973. 4 5 0 . FRIEDENBERG Z . B . , BRIGHTON C .T . : B i o e l e c t r i c p o t e n t i a l s i n bone. J . B_o ne J o i n t . S u r g . 48A, 915. 1966. 45 1 . FRIEDENBERG Z . B . , KOHANIM M . : The e f f e c t o f d i r e c t c u r r e n t on bone . - S u rg . Gyn. O b s t . 127, 97. 1968. 45 2 . FRIEDENBERG Z . B . , ANDREWS E . T . , SMOLENSKI B . I . , PEARL B .W . , BRIBHTON G . T . : Bone r e a c t i o n t o v a r y i n g amounts o f d i r e c t c u r r e n t . S u rg . Gyn. O b s t . 131, 894 . 1970. 453 . FRIEDENBERG Z . B . , ROBERTS P . G . , DIDIZIAN N .H . , BRIGHTON C .T . : S t im u la t i o n o f f r a c t u r e h e a l i n g by d i r e c t c u r r e n t i n t h e r a b b i t f i b u l a . J . Bone J o i n t . S u r g . 53A, 1400. 1971. 454 . FRIEDENBERG Z . B . , ZEMSKY L .M . , POLLIS R . P . , BRIGHTON C .T . : The r e s p o n se o f non t r u m a t i z e d bone t o d i r e c t c u r r e n t . J . Bone J o i n t . S u r g . — 56A, 1023. 1974. 455 . FUKADA E . , YASUDA I . : On t h e p i e z o e l e c t r i c e f f e c t o f bone . J . P h y s . - Soc . J a p . 12, 1158. 1957. 456 . FUKADA E . : M e c h a n i c a l d e f o r m a t i o n and e l e c t r i c a l p o l a r i z a t i o n i n b i o j p g i c a l s u b s t a n c e s . B i o r h e o l o g y . 5, 199. 1968. 457 . GJELSVIK A . : Bone r e m o d e l i n g and p i e z o e l e c t r i c i t y . J . Biomech. 6 , 187, 1973. 458 . GLOBUS M . , LIVERSAGE R.A. : Nerve d e p e n d e n t r e g e n e r a t i o n i n v i t r o . J . Embryo1. exp .m o rp h . 33, 813. 1975. 459 . HALL B .K . : H i s t o g e n e s i s and m o rphoge ne s i s o f bone . C l i n . O r t h o p . 74, 249. 1971. 46 0 . JANSEN M . : On bone f o r m a t i o n . M a n c h e s t e r U n i v e r s i t y p r e s s . 1920. 461 . JORGENSEN T . E . ; The e f f e c t o f e l e c t r i c c u r r e n t on t h e h e a l i n g t im e o f c r u r a l f r a c t u r e s . A c t a O r t h o p . S c a n d . 43 , 421 . 1972. 462 . JUSTUS R . , LUPT J . H . ; A mechanochem ica l h y p o t h e s i s f o r bone r e m o d e l i n g i n d u c e d by m e c h a n i c a l s t r e s s , C a l . T i s s . r e s . 5, 22. 1970. 463 . LANDRY M . , PLEISCH H . : The i n f l u e n c e o f i n m o b i l i s a t i o n on bone form^ - t i o n . J . Bone J o i n t . S u r g . 46B, 764 . 1964. 464 . LANYON L . E . , SMITH R .N . : Bone s t r a i n i n t h e t i b i a d u r i n g no rm al quadru p e d a l l o c o m o t i o n . A c ta O r th o p . Scand . 41, 238. 1970. 465 . LANYON L . E . : E x p e r i m e n t a l s u p p o r t f o r the t r a j e c t o r i a l t h e o r y o f bone s t r u c t u r e . J . Bone J o i n t . S u r g . 56B, 160. 1974. 466 . LANYON L . E . , HAWS ON V.G. , GOODSHIP A . E . , SHAH J . S . : Bone d e f o r m a t i o n r e c o r d e d i n v i v o from s t r a i n a t t a c h e d gauges t o t h e human t i b i a l - s h a f t . A c ta O r t h o p . S c a n d . , 46 , 256. 1975. 467 . LA VINE L . S . , LUSTRIN I . , SHAMOS M.H. , MOSS M.L.: The i n f l u e n c e o f ele_c t r i e c u r r e n t on bone r e g e n e r a t i o n i n v i v o . Ac ta O r t h o p . S c a n d . , 42, - 305. 1971. 468 . LAVINE L . S . , LUSTRIN I . , SHAMOS M.H., RINALDI R . S . , LIBOFF A . R . : E l e c ­ t r i c enhancem en t o f bone h e a l i n g . S c i e n c e . 175, 1118. 1972. 469 . LOTKE P . A . , BLACK J . , RICARDSON S . : E l e c t r o m e c h a n i c a l p r o p e r t i e s o f hu man a r t i c u l a r c a r t i l a g e . J . Bone J o i n t . S u rg . 56 A, 1040. 1974. 470 . MAROUDAS A . : P h y s i c o c h e m i c a l p r o p e r t i e s o f c a r t i l a g e i n t h e l i g h t o f - i o n exchange t h e o r y . B io p h y s . J . 8 , 575. 1968. 47 1 . MC ELHANEY J . H . : The cha rge d i s t r i v u t i o n on t h e human femur due to load J . Bone J o i n t . S u r g . , 49A, 1561. 1967. 47 2 . MILGRAM J . V . , ROBINSON R .A . : E l e c t r o n m i c r o s c o p i c d e m o s t r a t i o n o f un­ m y e l i n a t e d n e r v e s i n t h e h a v e r s i a n c a n a l s o f a d u l t dog . B u l l . J . Hop k i n s Hosp. 117, 163. 1965. 47 3 . MINKIN C . , POULTON B . P . , HOOVER V . H . : The e f f e c t o f d i r e c t c u r r e n t on bone . C l i n . O r t h o p . 57, 303. 1968. 47 4 . MITTELMEIER H . ; P i e z o e l e k t r i s c h e und s p a n n u n g o p t i s c h e u n t e r s u c h u n g e n z u r b io m e c h a n ik d e r S c h r a u b e n o s t e o s y n t h è s e . Z. O r th o p . 110, 893, - 1972. 4 7 5 . PEUVELS F . : Gesammelte a b h a n d l u n g e n . S p r i n g e r 1975. 4 7 6 . PAUVELS F . : A t l a s z u r b io m e c h a n ik d e r ge sunden und k r a n k e n H i i f t e . S p r i n g e r . 1973. 477 PAUVELS F . ; K u r z e r i i b e r b l i c k u b e r d i e m ec ha n isc he B eansp ruchung des - knochens . Z. O r t h o p . , I l l , 681 . 1973. 478 . POPESCU M., SGARBORA I , DENISCHI A . : E x p e r i m e n t a l r e s e a r c h on t h e p i ^ z o e l e c t r i c p r o p e r t i e s o f b o n e . S . I . C . O . T . 12 Congreso T e l - A v iv 1972. 962; E x c e r p t a M ed ica . 479. -POPE M.H., MURPHY M.C.: F r a c t u r e e n e r g y o f bone i n a s h e a r mode. Med. B i o l . E n g i n . , 12, 763 . 1974. 480. RABISCHONG P . , AVRIL J . : Role b iom echan iqu , des p o u t r e s c o m p o s i t e s o s - m u s c l e s . Rev. C h i r . O r th o p . 51, 437 . 1965. 481. RABIN E . L . , PUGH J . W . , STEINBERG R . S . : T r a b e c u l a r m i c r o f r a c t u r e s i n - r e s p o n s e t o s t r e s s . S . I . C . O . T . , 12 Congreso T e l - A v i v , 1972. 59, Ex - c e r p t a Médica . 482 . REILLY D . T . , BURSTEIN A.H . : The m e c h a n i c a l p r o p e r t i e s o f c o r t i c a l bone. J . Bone J o i n t . S u r g . 56A, 1001. 1974. 483. REINISH G . , NOVICK A . S . : P i e z o e l e c t r i c p r o p e r t i e s o f bone as f u n c t i o n o f m o i s t u r e c o n t e n t . N a t u r e , 253 , 626 . 1975. 484. RICHEZ J . , CHAMAY A . , BIELER L . : Bone changes due t o p u l s e s o f d i r e c t e l e c t r i c m i c r o c u r r e n t . V i r c h . A r c h . P a t h . A n a t . , 357, 11. 1972. 485 . ROSE S.M., ROSE F . C . : E l e c t r i c a l s t u d i e s on n o r m a l l y r e g e n e r a t i n g , on X - ray e d and on d e n e r v a t e d l imb s tu m p s . Growth , 38, 363. 1974. 486 . SCOTT J . H . : The m e c h a n i c a l b a s i s o f bone f o r m a t i o n . J .B o n e J o i n t . S u r g . 39B, 134. 1957. 487. SEDEL L . : P r o p i e t e s m écan iques de l ' o s . Rev . C h i r . O r t h . 60, 643. 1974. 488. SED LIN E. : A r h e o l o g i c a l model f o r c o r t i c a l b o n e .A c t a Or thop . Scand . s_u p p l . 83. 1965. 489 . SHAMOS R .H . , LAVINE L . S . : P h y s i c a l b a s e s f o r b i o e l e c t r i c e f f e c t s i n m_i n e r a l i z e d t i s s u e s . C l i n . O r t h o p . , 35, 177. 1964. 490 . SHERMAN M .S . : The n e r v e s o f bone . J . Bone J o i n t . S u r g . 45A, 522, 1963. 49 1 . STEINBERG M .E . , BUSENKELL G . L . , BLACK J . , KOROSTOFF E . : S t r e s s induced p o t e n t i a l s i n m o i s t bone . J . Bone J o i n t . S u r g . 56A, 704. 1974. 492 . VEIGERT M ., VERHAHN C . , MELLEROVICZ H . , BANDOV R . : S t i m u l a t i o n o f longj_ t u d i n a l g r o e t h and f r a c t u r e h e a l i n g by e l e c t r i c c u r r e n t . S . I . C . O . T . - 12 Congreso T e l - A v iv 1972. 546, E x c e p ta Medica . 493 . VEIGERT M . : K n o c h e p o t e n t i a l e b e i e l e k t r i s c h e s t i m u l a t i o n . Z. O r th o p . — 111, 778. 1972. 494 . VEIGERT M . : Anregung d e r k n o c h e n b i I d u n g d u r c h e l e k t r i s c h e a s t r o m . Spri j i g e r 1973. 495 . VERHAHN C. , WEIGERT M. ; Die S t i e m u l i e r u n g d e r p r i m a r e n k n o c h e n h e i lu n g d u r c h e l e k t b r i s c h e n G l e i c h s t r o m . A. O r t h o p . , 112, 1226. 1974. 496 . WILSON L. : E :x p e r im e n ta l a t t e m p t s t o s t i m u l a t e bone g ro w th . J . Bone — J o i n I Sii; g . 52A, 1033. 1970. 497 . VOLPERT L . : I P o s i t i o n a l I n f o r m a t i o n and t h e s p a t i a l p a t t e r n o f c e l l u l a r d i f f e r e n t i ; a t i o n . J . T h e o r e t . B i o l . , 25, 1. 1969. 498 . MARINO A .A . , BECKER R . O . : P i e z o e l e c t r i c i t y and a u t o i n d u c t i o n . C l i n . — O r th o p . 10(0, 247. 1974.