UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID 
 

FACULTAD DE VETERINARIA 
Departamento de Fisiología (Fisiología Animal)  

 
 

 
 
 

EFECTO DE LA FUENTE DE ZINC EN LA 
MORFOMETRÍA TESTICULAR Y EPIDIDIMARIA, 
ASÍ COMO SU RELACIÓN CON LA PRODUCCIÓN 

Y CALIDAD SEMINAL DEL VERRACO. 
 
 

MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR 

PRESENTADA POR 

 
Adelfa del Carmen García Contreras 

 
 

Bajo la dirección de los doctores 
 

Carlos García Artiga 
Jaime Gosálvez Berenguer 

  
  

Madrid, 2011 
 
 

ISBN: 978-84-694-2678-4                                                © Adelfa del Carmen García Contreras, 2010                             
                                                                                                                                                                   
                                                                                                                                                                   
                                                                                                                              



UNIVERSIDAD COMPLUNIVERSIDAD COMPL
FACULTAD DE 

DEPARTAMENTO DE FISIO
UNIDAD DOCENT

EFECTO DE LA FUENTE 
MORFOMETRÍA TESTICUL

COMO SU RELACIÓN C
CALIDAD SEMINA

ADELFA DEL CARMEN

TESIS DOC
201

LUTENSE DE MADRIDLUTENSE DE MADRID
 VETERINARIA
LOGÍA (FISIOLOGÍA ANIMAL)
TE DE ZOOLOGÍA

 Y NIVEL DE ZINC EN LA 
LAR Y EPIDIDIMARIA, ASÍ ,

CON LA PRODUCCIÓN Y 
AL DEL VERRACO

N GARCÍA CONTRERAS 

CTORAL  
10



 



 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  

 

 

 

 

 

 

 

UUNNIIVVEERRSSIIDDAADD  CCOOMMPPLLUUTTEENNSSEE  DDEE  MMAADDRRIIDD                          
FFAACCUULLTTAADD  DDEE  VVEETTEERRIINNAARRIIAA                                                  

DDEEPPAARRTTAAMMEENNTTOO  DDEE  FFIISSIIOOLLOOGGÍÍAA  ((FFIISSIIOOLLOOGGÍÍAA  AANNIIMMAALL))    
UUNNIIDDAADD  DDOOCCEENNTTEE  DDEE  ZZOOOOLLOOGGÍÍAA  

EFECTO DE LA FUENTE Y NIVEL DE ZINC EN LA 
MORFOMETRÍA TESTICULAR Y EPIDIDIMARIA, ASÍ 

COMO SU RELACIÓN CON LA PRODUCCIÓN Y 
CALIDAD SEMINAL DEL VERRACO 

Tesis Doctoral 

MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR 
PRESENTADA POR  

 

 Adelfa del Carmen García Contreras 

 
Bajo la dirección de los Doctores: 

Carlos García Artiga, Jaime Gosálvez Berenguer y 
Antonio Palomo Yagüe 

 
Madrid, 2010



 



 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  

 

 

 

 

 

 

 

EFECTO DE LA FUENTE Y NIVEL DE ZINC EN LA 
MORFOMETRÍA TESTICULAR Y EPIDIDIMARIA, 

ASÍ COMO SU RELACIÓN CON LA PRODUCCIÓN 
Y CALIDAD SEMINAL DEL VERRACO 

Tesis Doctoral 

Adelfa del Carmen García Contreras 

Madrid, 2010

UUNNIIVVEERRSSIIDDAADD  CCOOMMPPLLUUTTEENNSSEE  DDEE  MMAADDRRIIDD                          
FFAACCUULLTTAADD  DDEE  VVEETTEERRIINNAARRIIAA                                                  

DDEEPPAARRTTAAMMEENNTTOO  DDEE  FFIISSIIOOLLOOGGÍÍAA  ((FFIISSIIOOLLOOGGÍÍAA  AANNIIMMAALL))    
UUNNIIDDAADD  DDOOCCEENNTTEE  DDEE  ZZOOOOLLOOGGÍÍAA  



 



 

 

 

 

 

 Carlos GARCÍA ARTIGA, Profesor Titular del Departamento de Fisiología 
(Fisiología Animal), U.D. de Zoología de la Facultad de Veterinaria, Universidad 
Complutense de Madrid; Jaime GOSÁLVEZ BERENGUER, Catedrático de 
Genética del Departamento de Biología de la Universidad Autónoma de Madrid y 
Antonio PALOMO YAGÜE, Profesor Asociado del Departamento de Sanidad 
Animal de la Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid. 

 

  INFORMAN 

 

 

 Que la Tesis Doctoral titulada Efecto de la fuente y nivel de Zinc en la 
morfometría testicular y epididimaria, así como su relación con la 
producción y calidad seminal del verraco, de la que es autora la  M en C 
ADELFA DEL CARMEN GARCÍA CONTRERAS ha sido realizada bajo nuestra 
dirección y que cumple las condiciones exigidas para ser presentada a efectos de 
ser juzgada. 

 

Madrid, 1 de septiembre de 2010 

 

 

 

CARLOS GARCÍA 
ARTIGA 

  

 

 

 

JAIME GOSÁLVEZ 
BERENGUER 

 

 

 

 

ANTONIO PALOMO 
YAGÜE 



 



 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Esta tesis fue posible gracias al apoyo recibido por: Programa 
de Mejoramiento del Profesorado (PROMEP); División de 
Ciencias Biológicas y de la Salud y POLIVET-AZ de la 
Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Xochimilco, 
Universidad Complutense de Madrid, Grupo SETNA 
Nutrición, Universidad Autónoma de Madrid. Fundación GG. 



 



  
 

 

 

 

 

   

AGRADECIMIENTOS 



 



AGRA

 

que m
en él s
que se
genero

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import
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Gracia

movim
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bibliog
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Mis padre
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ENTOS 

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o iniciar. Es
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y a quien 
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tante es dec

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cimiento, am
racias, siem
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que no me t

ompartiendo
en que regr
arboles, un
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ro no creo q
Él respond

s llegar a do
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ue quieres, 
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mi madre, a
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que lo apren
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r siempre m

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A ambos los

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ento es algo
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s agradecim
portante qu

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van dirigi

to, tampoco
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ntas hojas d
sobre el tec
re en la gra
que se dij

ento y añora
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mpre es actu
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o con usted
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na montaña 
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que se pued
dió, porque
onde deseas
e olvide que
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eña (qepd).

ante una inm
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ompromiso. 
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da que si me
i amor. Pro

les amo, y r
s he perdido
os haciendo

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que no sol

mientos será
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que signific
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o es fundam
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desde este 
clado de la 
amática, o 
jo, yo solo
anza, los cu
que tienen 
ad e ilusió
ual, vigente
e que sea la
bsoleta.  

des un peda
de su pueb
con una cru
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da aterrizar
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s, aunque es
e las cosas n
o debes ha
. 

minente ciru
ocimiento t
No pierdas

na. Porque l
e voy, lo ún
ofesora. Ad

respeto, me
o, a mi mad
o el doctor

o, pero a la 
o los conoc

án leídos en
al lado un t

a para cada
gradecimien

mental como 
ue compart

momento e
computado
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o sacare m
uales dirigi
una correl

n. Creo qu
e y pertinen
a más antigu

azo de mi a
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uz muy gra
rma más ráp
sobre la mo

e quedas co
so te ocupe 
no siempre 
acer, nunca

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e hará libre
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la vida te e

nico que te p
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e decían esto
dre justo ant
rado. Pero a

vez tan par
cimientos c
n años veni
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a uno el real
ntos tal vez

lo expresas
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escribiré, so
ra produzca

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ande coloca
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o, ya que lo
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o y no lo en
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ificativa en

encia biblio
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s, por ello p

onde mi pad
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que lo más 
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y sino apre

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, me dijo: H
obtenerlo re

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as (qepd).  

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que no 
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endes a 

Gracias 

Hija no 
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a ahora 
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tas dos 



 



leccion
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Ing. A
proyec
a estud
de mi 

tenido
cuando
este pu

cabeza
un mis
proces
compa
y hone
Si Dio
aprend
ayudar
M en 

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hay qu
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piensa

entend
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lo que

abnega
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arriesg

nes de vida
osos, que s
Abraham 
cto, haciénd
diar. Gracia
familia. Lo

Esta dedic
o de ilusión 
o hicimos l
unto.  

Una vez m
a las cosas 
smo proyec
so, gracias p
añero y ami
esto. Esta in
os permite,
dizaje, esfu
rte en todo
C. Ing. Jes

Jesús Ado
por permitir
ue luchar p
recuerda qu
a en ser feliz

Adelfa Za
der lo much

mos de mujer
 nos gusta. 

Doña Cho
ada, que co
difíciles. G

gada, por go

 

a, y espero 
son mis h
García Co

dose cargo d
as a mis sob
s amo y nec

catoria tiene
por obtene

a maestría. 

más, me as
que con cer

cto de vida, 
por esperarm
igo. Tú eres
nvestigación
, espero te

uerzo y eje
o lo que se
ús Alberto 

olfo, gracia
rme enseñar
por ellos, co
ue no hay ti
z. 

arai, eres m
ho que sig
res que luch
Eres un teso

ofi, mujer e
on su ejemp
Gracias a m
ozar con nos

que mis hij
ermanos ad
ontreras. L
de todo, evi
brinos, Rica
cesito. 

e 25 años d
er el doctor
Habrían de

seguro de a
rteza son ne
y con él he

me para estu
s el más cau
n no sería p
ener 25 añ
emplo. Espe
e haga nec
 Guevara G

s por comp
rte con ejem
on trabajo, 
iempo. No 

mi niña ador
gnifica para
han y cump
oro, un triun

emblemátic
plo me dio 

mi suegra, d
sotros este v

jos las recu
dorados: M
Los amo y
itando que y
ardo, Aleja

de espera. E
rado y com
e pasar esos

aprender qu
ecesarias pa

emos vivido
udiar juntos
ustico de mi
posible si no
os más jun
ero la tuya

cesario, com
González. 

partir esta av
mplo, que no
honestidad 
lo pierdas 

ada, gracias
a mí tu apo
plen metas, y
nfo más gra

ca, luchador
la oportuni
oña Consu
viaje y ser t

uerden. Tam
MVZ. Rica
y gracias p
yo me preoc
ndro y Sof

Esos 25 año
mpartir junto

s años y mu

ue solo la m
ara que seas

o, así que gr
s una vez m
is críticos, p
o fuera un p
nto a ti, d
a en pronto
mo tú lo h

ventura con
o se deben 
y amor. G

en cosas va

s por soport
oyo. Pero n
y que por su
acias a tu co

ra incansab
dad de no d

uelo Gonzál
tan buena co

mbién me de
ardo, Lic. 
por compar
cupara, para
fía del Carm

s son los m
os un camin
uchas cosas 

muerte te p
s feliz. Tú y
racias por no

más, gracias p
pero tambié
proyecto co

de lucha co
o tiempo, y

has hecho c

n tus padres
dejar de lad

Gracias por 
anas y tonta

tar la ausenc
necesito qu
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omprensión.

ble, madre e
declinar, cu
lez de Gue
onmigo. 

ejaron tres t
Sofía Ma

rtir conmig
a que me de
men, por se

mismos que 
no que reco
 más para l

puede quitar
y yo compa
o desfallece
por ser mi e
én el más p
onjunto, de 
onstante, tr
y ahí estar
conmigo. T

. Le doy gr
do los sueño
ser tan bue
as. Ponte m

cia, y por tr
ue no olvid
s felices po
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ejemplar y 
uando las co
evara, por 

 

tesoros 
agda e      
go este 
edicara 
er parte 

hemos 
orrimos 
llegar a 

r de la 
artimos 
er en el 
esposo, 
aciente 
pareja. 

riunfos, 
ré para 

Te amo      

racias a 
os, que 

en hijo, 
metas y 

ratar de 
des que 
r hacer 

abuela 
osas se 
ser tan 

    

     



 



 

 
 
corto y
alguien
broche
la inve
 
hacer 
dos p
investi
Marti

 
tanto q
que no
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Dr. C
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Me 

 
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Gracia
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sean m

 

 
Este espac

y no querem
n, ya que u
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estigación.  

Mi cariño
realidad los

personas m
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in Rillo (qep

Mi estanc
que cuando 
o tiene retor

cosechar, 
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me a estudia
uerte, pero d
arlos Garc
d que le leg

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ciado el pró
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Por ello 
sional e ins
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pa a las pers

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Quiero ex
DEA. MVZ
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nuará. Nos f

Hace 25 a
las cosas tr
jos y jamás 
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muchas más 

cio que nos 
mos olvida
uno siempre
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s sueños de 

me mostraro
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me di cuen

rno. Pero co
el Dr. Sa

ar sin tapujo
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de mirada no
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n esa decisi
óximo 5 de 
tad y las gan

quiero agr
stitucional, 
os me permi
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os tiempo, p

presarle a m
Z. Yasmin 
partir esta a
erancia, pero
persona. T

falta la tuya.

años, usted 
runcas. Gra
dejare de a

partir conm
 en nuestro 

dan a los qu
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e deja esta 
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cimiento a l
obtener un

on en el 
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aña no ha s
nta, la perso
omo todos l
antiago, de
os, ni preju
rado me enc
oble, y que 
que siguien

o, y sin med
ión se echab
septiembre
nas de hace

radecer al 
sino su am

ite elegir pa
onviven con

por ello lo in

Gra

mi incansab
Guadalup

aventura, po
o principalm

Te quiero f
. 

me dijo qu
acias Dr. J
agradecer su

migo al meno
lindo país.

ue logramo
Por ello pid
parte hasta

ue uno fue d

los español
n grado de D

trabajo co
Dr. Ramiro

sido fortuita
na con la qu
os seres hum
ejo sembra
uicios. Por 
contré en un
a la postre 
ndo la escu
dir consecue
ba a cuestas
, y que ha t

er un trabajo

Dr. Carlo
mistad que 
ara estar y c
n él.   

nvierto con a

acias Jefe C

le amiga, co
pe De Loer
or dejar todo
mente por c
fiel amiga, 

ue hay que 
osé Guada
u apoyo inc
os por diez 

os llegar a es
do disculpa
a el último 
descubriend

les que me 
Doctora. Es
otidiano de
o Ramírez N

a, fue plane
ue yo trabaj
manos que 

ado un cam
ello al inic
na oficina d
se convertir

uela de entu
encia algun
s un trabajo 
tenido como
o interesante

os García
es hoy día

compartir, su

aquellos sere

Charly 

ompañera, c
ra Ortega, 
o para apoy

cuidar con t
esto no s

jugar a gan
alupe Herr
condicional.

meses esta

ste punto, s
as si me olv

minuto, pe
do durante e

han dado l
ta historia n

el ser vete
Necoechea 

eada durant
jaría había i
saben que s

mino lleno 
ciar mi nue
del la UCM
ría en mi Di

usiasmo, am
na, acepto se

que va a cu
o sustento e
e y lleno de

Artiga, no
a lo que m
u espíritu b

es que valen

colaborador
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yarme y apr
anto amor e

se ha termi

nar, que no
era Haro, 
. Aprecio m

a aventura in

iempre nos 
vido sin que
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el tiempo qu

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nace del am
erinario, pr
y el Dr. Sa

te mucho t
iniciado el c
solo sembra

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M, a un profe
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mor a los ce
er mi Direct
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el cariño, la
e oportunida

o solo su 
más aprecio 

ondadoso s

n la pena: 

ra, y un mu
y agradecim
render conm
este proyect
inado, la h

o es recome
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muy especia
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ue es el 
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Belén 

 
ayuda
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Dr. Anto
re positiva 
ad y palabra

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Dr. Jaime
frenda la id
man esfuer
o expresarle
a y con la v

Dra. Car
ueven, pero
te, que perm
ada Paqui 
 haces con c

Dr. Emili
d profesion
do. Felicida

Querido a
riño eterno p
estancia en 

Gracias In
ol de calida
ones y amis

Conocer p
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osidad y afe

Dr. Juan 
ugar en don
osas, y te of
ana del ir y
as. Gracias 
nvestigación
Lleó y Vet

Querida I
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d, por estar

no MVZ. Jo
zura de ser m

A José 
ecimiento.  

nio Palom
y dispuesta
as de confi
a donde se 

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dea que ten
zo y atenc

e mi admira
vida. Gracia

rmen Lópe
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mite que co
es interesan
calidad y en

io Martíne
nal, y su g
ades por ser

angelito, sab
por tu comp
tu país. Ve

ng. Luis S
d de SETN
stad. 

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ecto. Gracia

Carlos Fon
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frecen su ap

y venir de un
por ello y 

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t. María.  

Ing. Encar
migos: Chem
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osé Antonio
madres. 

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generosidad
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Soler de la
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dos persona

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por su a

le doy las 
este proyect
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dez, tu am
de ti y m

o mucho qu
aces tu trab
Gracias por

M. Antonia
d. Es un v
de investiga

quiero, que 
yo, ayuda y 
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a Mano, po
n gran calid

álidas y ate
licarse, eso 
triz Isabel 

Dra. Isabe
ie y de repe

ndicional, qu
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as a las cua

ez, gracias 
na y Ferna
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R. y a mi am

ayuda, nob

gracias por
to avanzara
este recono

rimental. 

neo y su siem
que con gus

tiempo en 
igador que a

mabilidad, 
me sorprend
ue sabes. So
bajo, pero p
r compartir t

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ÍNDICE 



 



ÍNDICE 

ÍNDICE 
 
1. INTRODUCCIÓN                                                                                                  1

1.1. Objetivo General                                                                                       
1.1.1. Objetivos específicos                                                                  

 

3
3

2. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 5
2.1. Generalidades  
2.2. Características físicas y químicas del Zn 
2.3. Absorción y metabolismo de Zn 
2.4. Almacenamiento del Zn 
2.5. Secreción, reabsorción y excreción del Zn 
2.6. Funciones del Zn 

2.6.1. Funciones del Zn en las enzimas 
2.6.2. Función del Zn en la reproducción 
2.6.2.1. Efecto del  Zn en el testículo 

2.6.2.2. Efecto del Zn en el epidídimo 
2.6.2.3. Efecto del Zn en la próstata 
2.6.2.4. Efecto del Zn en el espermatozoide 
2.6.2.5. Efecto del Zn en el desarrollo embrionario 

2.7. Relación de Zn con otros micronutrientes 
2.8. Efecto de la deficiencia de Zn 
2.9. Efecto tóxico del Zn 
2.10. Requerimientos nutricionales de Zn en verracos 
2.11. Fuentes alimenticias de Zn para la elaboración de piensos de 

verraco 
2.11.1. Contenido de Zn en los ingredientes del pienso 
2.11.2. Fuentes alimenticias de Zn 

2.11.2.1. Fuentes orgánicas 
2.11.2.2. Fuentes inorgánicas 

2.12. Espermatogénesis 
2.12.1. Plasma seminal 

2.13. Calidad seminal y pruebas de valoración 
2.13.1. Volumen de eyaculado 
2.13.2. Motilidad (Mot) 
2.13.3. Concentración espermática 
2.13.4. Morfoanomalías 

2.13.4.1. Gotas citoplásmicas 
2.13.4.2. Colas dañadas 
2.13.4.3. Membranas espermáticas 

2.13.5. Fragmentación del ADN espermático 
2.13.6. Capacidad fecundante de los espermatozoides                            

 

5
7
8

15
17
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19
22
22
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46
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53
53
54
55
55
56
57
57
59
61

3. MATERIAL Y MÉTODOS 63
3.1. Diseño de la investigación 

3.1.1. Material biológico 
3.1.2. Piensos experimentales 
3.1.3. Material de laboratorio 
3.1.4. Productos químicos 
3.1.5. Soluciones y medios para el análisis y cultivo celular 

63
63
65
66
68
68



ÍNDICE 

 
3.1.5.1. Diluyente BTS 
3.1.5.2. Solución salina formolada 
3.1.5.3. Solución PSA-FICT 
3.1.5.4.Solución DABCO 
3.1.5.5. Medio para la recolección y lavado de ovarios 
3.1.5.6. Medio para lavado de ovocitos 
3.1.5.7. Medio para lavado de espermatozoides 
3.1.5.8. Medio de fecundación 
3.1.5.9. Solución de Lacmoid 
3.1.5.10. Fluorocromo 
3.1.5.11. Solución de ácido clorhídrico (HCl 18.5%) 

3.2. Instalaciones 
3.3. Asignación de tratamientos 

3.3.1. Periodo de adaptación 
3.3.2. Periodo experimental 

3.4. Metodología 
3.4.1. Sistema de suministro de los tratamientos 
3.4.2. Evaluación del comportamiento productivo del verraco 

3.4.2.1. Ritmo de recogida del verraco (IE) 
3.4.2.2. Medidas testiculares y de epidídimos 
3.4.2.3. Índice gonadosomático (IG) 

3.4.3. Recogida de semen 
3.4.3.1. Evaluación básica del semen 

3.4.4. Índice de fragmentación de ADN espermático (IF) 
3.4.5. Fecundación in vitro (FIV)  

3.4.5.1. Muestras seminales 
3.4.5.2. Ovocitos inmaduros para inseminación in vitro 
3.4.5.3. Fecundación y cocultivo de gametos 
3.4.5.4. Tinción y valoración microscópica de la FIV 

3.4.6. Determinación de Zn 
3.4.6.1. Obtención de muestras para AEAA 

3.4.6.1.1. Muestras de testículos y epidídimos. 
3.4.6.1.2. Muestras de plasma seminal (PS)  
3.4.6.1.3. Muestras de sedimento espermático (SE)  

3.4.6.2. Análisis de espectrofotometría de absorción Atómica 
(AEAA)  

3.4.6.2.1. Digestión y dilución de muestras para AEAA 
3.4.6.2.1.1. Muestras de testículo 
3.4.6.2.1.2. Muestras de epidídimo 
3.4.6.2.1.3. Muestras de sedimento espermático (SE) 
3.4.6.2.1.4. Muestras de plasma seminal (PS) 

3.4.6.2.2. Lectura de espectrofotometría de absorción atómica 
3.5 Desarrollo de los experimento 

3.5.1. Experimento 1. Evaluación del comportamiento productivo de 
los verracos 

3.5.2. Experimento 2. Análisis de la dinámica de producción y calidad 
seminal que presentan los verracos, a través del 
espermiograma básico del eyaculado, y de la evaluación de la 
integridad acrosomal 

69
69
69
69
70
70
70
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71
71
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86
86
86
87
87
87
88
89

89

92



ÍNDICE 

 

 
3.5.3. Experimento 3. Evaluación del estado del ADN nuclear 

Espermático 
3.5.4. Experimento 4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro 

(FIV) de espermatozoides de verracos tratados con diferente 
fuente y nivel de Zn 

3.5.5. Experimento 5. Evaluación de la concentración de Zn en tejidos 
(testículos y epidídimos), plasma seminal (PS) y sedimento 
espermático (SE) 

3.6. Análisis estadísticos de los resultados 
 

4.RESULTADOS 
4.1. Evaluación del comportamiento productivo de los verracos 
4.2. Análisis de la dinámica de producción y calidad seminal que 

presentan los verracos, a través del espermiograma básico del 
eyaculado y de la evaluación de la integridad acrosomal 

4.3. Evaluación del estado del ADN nuclear espermático 
4.4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro (FIV) de 

espermatozoides de verracos tratados con diferente fuente y 
nivel de Zn 

4.5. Evaluación de la concentración de Zn de tejidos (testículos y 
epidídimos), plasma seminal (ZnPS) y sedimento espermático 
(ZnSE) 

 
5.DISCUSION  

5.1. Evaluación del comportamiento productivo de los verracos. 
5.2. Análisis de la dinámica de producción y calidad seminal que 

presentan los verracos, a través del espermiograma básico del 
eyaculado y de la evaluación de la integridad acrosomal 

5.3. Evaluación del estado del ADN nuclear espermático 
5.4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro de 

espermatozoides de verracos tratados con diferentes fuentes y 
niveles de Zn 

5.5. Evaluación de la concentración de Zn en tejidos (testículos y 
epidídimos), plasma seminal (PS) y sedimento espermático (SE) 

 
6. CONCLUSIONES 
7. RESUMEN 
8. SUMMARY 
9. ABREVIATURAS 
10. BIBLIOGRAFÍA 

 
 
 
 
 
 
 

94

96

98
100

103
103

115
127

135

143

149
149

157
169

174

179

185
187
191
195
199



 



ÍNDICE DE TABLAS 

 

ÍNDICE DE TABLAS 
 
Tabla 1. Necesidades diarias de Zn en verraco adulto. 35
Tabla 2.  Biodisponibilidad (BD) relativa de distintas fuentes de Zn en porcino. 44
Tabla 3. Material fungible.  65
Tabla 4. Material de laboratorio. 66
Tabla 5. Ingredientes y valor nutritivo del pienso base (PB) para verracos en 

producción. 66
Tabla 6. Tratamientos según fuente y nivel de Zn. 67
Tabla 7.   Reactivos para la realización de pruebas de laboratorio. 68
Tabla 8. Diluyente BTS para semen de verraco. 69
Tabla 9. Composición de la solución PBS. 70
Tabla 10. Medio de fecundación (MF). 71
Tabla 11. Periodo de experimentación. 73
Tabla 12. Condición corporal (CC) en verracos. 74
Tabla 13. Calidad de movimiento (CM) de los espermatozoides. 77
Tabla 14. Variables evaluadas en el análisis de fecundación in vitro (FIV) 83
Tabla 15. Condiciones de operación del espectrofotómetro para determinar Zn. 88
Tabla 16.  
 

Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de variables 
relacionadas con el comportamiento productivo de verracos 
alimentados con piensos  que contenían diferentes  fuentes y niveles 
de Zn. 103

Tabla 17. Efecto de la fuente y nivel de Zn en la condición corporal (CC) y la 
frecuencia de presentación (%) en verracos. 106

Tabla 18. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar del  efecto de pienso 
con diferente fuente y nivel de Zn en el tamaño de la región escrotal 
(testículo + epidídimo) de verracos. 108

Tabla 19. Valores de correlación entre  variables morfométricas testiculares  en 
verracos tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn en el pienso. 111

Tabla 20. Medias de mínimos cuadrados ± errores estándar de medidas  
morfométricas testiculares y epididimales de verracos alimentados 
con pienso con diferente fuente y nivel de Zn. 112

Tabla 21. Coeficientes de correlaciones (r) entre las variables morfométricas 
testiculares y epididimarías de verracos alimentados con diferente 
fuente y nivel de Zn. 113

Tabla 22. Coeficientes de correlaciones entre el peso vivo  final (Kg) de los 
verracos y el peso testicular y epididimario. 114

Tabla 23. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de las variables de 
producción y calidad  básica del eyaculado de verracos alimentados 
con pienso con diferente fuente y nivel de Zn. 115

Tabla 24. Coeficientes de correlación entre peso testicular (PT), concentración 
espermática (Spz mL-1) y volumen total de eyaculado (VT) de 
verracos alimentados con pienso con diferente fuente y nivele de Zn. 119

Tabla 25. Coeficientes de correlación entre peso epididimario (PE), volumen de 
la fracción pobre (FP) y total de eyaculado (VT) de verracos 
alimentados con pienso con diferente fuente y nivele de Zn. 120

Tabla 26. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de tipo de 
morfoanomalías espermáticas de verracos según tratamiento. 125



ÍNDICE DE TABLAS 

 

 

Tabla 27. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de acrosomas 
íntegros (IAc), dañados (AD) y reaccionados (AR), de 
espermatozoides de verraco alimentados con pienso con diferente 
fuente y nivel de Zn. 

125

Tabla  28  Valores de regresión de la concentración de Zn  (ppm) en sedimento 
espermático (ZnSE) y motilidad  (Mot). 161

Tabla 29. Frecuencia de presentación de índice de fragmentación de ADN 
espermático (IF)  según intervalo y tratamiento. 131

Tabla 30. Frecuencia de presentación de índice de fragmentación de ADN 
espermático (IF) durante un periodo de evaluación de 14 semanas 
con base a intervalos. 132

Tabla 31. Medias de mínimos cuadrados ± errores estándar del índice de 
fragmentación  de ADN espermático (IF) de verracos durante el 
periodo de evaluación, con diferentes fuentes y niveles de Zn. 133

Tabla 32.  Medias de mínimos cuadrados  y errores estándar (EEM) de ovocitos 
fecundados in vitro (FIV),  espermatozoides ovocito -1 (EO), ovocito 
monospérmico (OM) y eficiencia de fertilización (EF) en verracos, 
según fuentes y niveles de Zn. 135

Tabla 33. Proporción de pronúcleos (DPn), cabezas espermáticas (CE) y 
espermatozoides intactos (SpzO-1)  en ovocitos de cerda, cultivados 
con espermatozoides de verraco tratados con diferentes fuentes y 
niveles de Zn. 139

Tabla 34. Modelos de regresión lineal relacionando motilidad, morfoanomalías 
(MA), integridad acrosomal (IAc) con ovocitos penetrados in vitro 
(FIV), ovocitos monospérmicos (OM) y desarrollo de pronúcleos 
(DPn) según tratamientos con Zn.   142

Tabla 35. Correlaciones (r) entre ovocitos penetrados in vitro (FIV),  índice de 
fragmentación de ADN espermático (IF), concentración de Zn en 
sedimento espermático (ZnSE) espermatozoides por ovocitos maduro 
(SpzO-1). 142

Tabla 36. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de la composición 
química de testículos de verracos alimentados con fuentes y niveles 
distintos de Zn contenidos en el pienso. 144

Tabla 37. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de la composición 
química de epidídimos de verracos alimentados con fuentes y niveles 
distintos de Zn contenidos en el pienso. 145



ÍNDICE DE GRÁFICAS 

 

ÍNDICE DE GRÁFICAS   

  

Gráfica 1. Peso vivo (PV) por tratamiento durante el periodo evaluado. 
Las líneas representan medias semana-1……….  

 
104 

Gráfica 2.  Evaluación de la condición corporal (CC) por tratamiento 
durante el período evaluado.  

 
106 

Gráfica 3.  Crecimiento de la semicircunferencia (SC) testicular por 
tratamiento durante el periodo evaluado.  

 
109 

Gráfica 4.  Crecimiento longitudinal (LT) testicular de verracos durante el 
periodo evaluado. 

 
110 

Grafica 5. Producción de la fracción rica del eyaculado (FR) según 
tratamiento:………. 

 
117 

Gráfica 6. Producción de la fracción pobre del eyaculado (FP) según 
tratamiento:………. 

 
118 

Gráfica 7. Volumen total del eyaculado (VT) según tratamiento:………. 118 
Gráfica 8. Motilidad (Mot) según tratamiento:………. 121 
Gráfica 9. Calidad de motilidad espermática (CM) según 

tratamiento:………. 
 
122 

Gráfica 10. pH del eyaculado:………. 122 
Gráfica 11. Concentración espermática (Spz mL-1 x 106) según 

tratamiento:………. 
 
124 

Gráfica 12. Estado del  acrosoma espermático según tratamiento:………. 126 
Gráfica 13. Acrosomas reaccionados (AR) según tratamiento:………. 126 
Gráfica 14. Efecto de la fuente y nivel de Zn en el índice de 

fragmentación de ADN espermático (IF) de verracos. 
 
127 

Gráfica 15. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar del Índice de 
fragmentación de ADN espermático (IF), en verracos  
alimentados con diferentes fuentes de Zn. 

 
 
128 

Gráfica 16. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar del efecto del 
nivel de Zn en el índice de fragmentación de ADN 
espermático (IF) de verracos. 

 
 
129 

Gráfica 17. Interacción de la fuente y nivel de Zn utilizado en piensos de 
verraco, y su efecto en el índice de fragmentación del ADN 
de espermatozoides (IF). 

 
 
130 

Gráfica 18. Dinámica del índice de  fragmentación de ADN en 
espermatozoides (IF) de verracos, tratados con diferentes 
fuentes y niveles de Zn. 

 
 
134 

Gráfica 19. Fragmentación de ADN espermático (IF) presente en 
eyaculados de verracos durante un periodo continuo de 
evaluación. 

 
 
134 

Gráfica 20. Efecto de la fuente de Zn, en la proporción de ovocitos 
penetrados (FIV), obtenidos con semen de verraco. 

 
136 

   
 



ÍNDICE DE GRÁFICAS 

 

 

 

   

 
Gráfica 21. Efecto del nivel de Zn (ppm), en la proporción de ovocitos 

penetrados (FIV), utilizando semen de verraco.   
 
137 

Gráfica 22. Efecto del nivel de Zn en el número de espermatozoides 
ovocito-1 (EO), con semen de verraco.   

 
137 

Gráfica 23. Efecto del nivel de Zn, en la presencia de ovocitos 
monospermicos (OM), con semen de verraco. 

 
138 

Gráfica 24. Efecto del nivel de Zn, en el desarrollo de pronúcleos (DPn), 
con semen de verraco. 

 
140 

Gráfica 25. Efecto de la fuente de Zn, en el desarrollo de pronúcleos 
(DPn), utilizando espermatozoides de verracos. 

 
140 

Gráfica 26. Concentración de Zn (ppm) en el sedimento espermático 
(ZnSE) de verracos, tratados con diferentes fuentes y niveles 
de Zn en el pienso. 

 
 
147 

Gráfica 27.   Concentración de Zn (ppm) en sedimento espermático 
(ZnSE) de verraco por semana. 

 
147 

Gráfica 28.   Concentración de Zn (ppm) en plasma seminal (ZnPS) de 
verracos, tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn en 
el pienso. 

 
 
148 

Grafica 29. Concentración de Zn (ppm) en plasma seminal  (ZnPS)  de 
verraco por semana. 

 
148 

   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   



ÍNDICE DE FIGURAS 
 

   

 
 

 

 

 

 

  

ÍNDICE DE FIGURAS 
 
Figura 1. Sitios de absorción y excreción de Zn, a partir de las primeras 

porciones del intestino delgado, y distribución en el organismo. 9
Figura 2. Especificidad tisular y localización de los genes transportadores 

de Zn. 11
Figura 3.  Reacciones necesarias para la transformación de la glucosa en 

fructuosa a nivel espermatozoide. 20
Figura 4. Representación esquemática de la absorción de Zn en el lumen 

intestinal y la competencia de Zn con otros cationes divalentes 
por el transportador de metales multivalentes. 29

Figura 5.  Diagrama del ciclo celular espermático. 47
Figura 6. Eliminación del Zn de la cola del espermatozoide durante la 

maduración epididimaria……….… 49
Figura 7.   Morfología del espermatozoide. 49



ÍNDICE DE ESQUEMAS 

 
 
ÍNDICE DE ESQUEMAS  

  

Esquema 1.   Diseño general de la investigación 64
  
Esquema 2.   Representación del Experimento 1  91
  
Esquema 3.   Representación del Experimento 2  93
  
Esquema 4.   Representación del Experimento 3  95
  
Esquema 5.   Representación del Experimento 4  97
  
Esquema 6.   Representación del Experimento 5  99
   
    
    

 

 

 

   



ÍNDICE DE ILUSTRACIONES 

 

 

 

 

 

 

ÍNDICE DE ILUSTRACIONES  

  

Ilustración 1. Mediciones morfométricas de la región escrotal en 
verracos. 74

Ilustración 2.  Mediciones de testículos y epidídimos de verracos. 75
Ilustración 3.  
 

Espermatozoides teñidos con fluorocromo para 
determinar fragmentación de ADN. a.Espermatozoides 
no fragmentados; b.Espermatozoides fragmentados. 79

Ilustración 4.  Mezclas seminales (a) y dilución de las mismas (b) 
para la inseminación in vitro de ovocitos. 80

Ilustración 5. Ovarios de cerdas prepuberes para la obtención y 
evaluación de ovocitos para su utilización en la FIV. 81

Ilustración 6.  Obtención de cenizas (C). 84
Ilustración 7. Obtención de plasma seminal (PS). 85
Ilustración 8. Obtención de sedimento espermático (SE) y 

almacenamiento. 85
Ilustración 9. Filtrado de las muestras digeridas y matraces con 

dilución de las muestras para su lectura con el 
Espectrofotómetro de Absorción Atómica. 86

Ilustración 10.  Digestión de sedimento espermático (SE). a. Muestras 
de SE almacenadas en eppendorf. b. SE en 
HCl18.5%.        c. Solución digerida de SE. 87

Ilustración 11.  Dilución de muestras de plasma seminal (PS). 88
Ilustración 12. Espectrofotómetro de absorción atómica. 89



 



 

.  

INTRODUCCIÓN 
Zinc del griego sphaleros, engañoso 



 



INTRODUCCIÓN 

 
1. INTRODUCCIÓN 
 

El interés por mejorar y hacer más eficiente el uso de verracos en los 

centros de inseminación artificial, fomenta el desarrollo de investigaciones, 

generando información sobre cómo aumentar la calidad y cantidad de eyaculado, 

prolongar el tiempo de conservación de las dosis seminales, y obtener mayores 

índices de fertilidad y fecundidad. Por tanto, se hace necesario tener información 

sobre aspectos fundamentales como son la nutrición y alimentación de los 

verracos. Dentro del ámbito de la porcicultura, la nutrición y alimentación de los 

verracos ha recibido escasa atención y la información disponible para balancear 

de forma correcta las raciones que se administran a los machos reproductores es 

insuficiente. 

Hoy en día, las recomendaciones nutricionales para verracos están 

basadas en las que se realizaron hace 30 años, así como de los resultados 

obtenidos en la práctica, relacionados con aspectos generales de calidad seminal, 

sin tenerse en cuenta la morfología y fisiología de los espermatozoides de una 

manera más profunda e integral. Otro hecho importante es que las 

recomendaciones nutricionales publicadas para la formulación de pienso para 

verracos son similares a las de las hembras reproductoras. Se asume 

erróneamente que el pienso de cerdas en lactación, cubre los requerimientos de 

los verracos en producción.  

 Una circunstancia evidente al formular el pienso, es que las 

recomendaciones nutricionales suelen variar ampliamente, dependiendo de la 

fuente de información que se utilice (NRC, 1998, PIC, 2008; FEDNA, 2006; 
NSNG, 2010). Algunas de las recomendaciones pueden tener diferencias de más 

del 30%, ejemplo de ello son los requerimientos de minerales y vitaminas. Por su 

parte, la industria alimentaria ofrece una gran variedad de productos con los que 

se puede formular el pienso. Estos productos tienen diferente biodisponibilidad 

(BD) como es el caso de las fuentes minerales. Estas fuentes minerales suelen 

ser clasificadas según su origen o tipo, lo cual además se relaciona con la BD que 

ofrecen. Actualmente se ha fomentado el uso de minerales con alta BD, para 

evitar que los animales eliminen al ambiente un alto porcentaje de ellos. Las 

fuentes con mayor BD son las de origen orgánico, pero su uso es limitado debido 

a su alto coste. Además, en verracos el estudio del efecto de estas fuentes 

1



INTRODUCCIÓN 

orgánicas (FO) es incipiente, por lo que se siguen utilizando las fuentes 

inorgánicas (FI) de forma mayoritaria. 

La nutrición mineral en verraco debería estar relacionada con los tres 

aspectos productivos más importantes: 

a) El efecto de los minerales en el desarrollo de órganos reproductores 

primarios y secundarios para un funcionamiento adecuado de los mismos. 

b) Potenciación de la producción de eyaculados de calidad. 

c) La capacidad de producir altas tasas de fertilidad y fecundidad.  

 

Sin embargo, no hay que olvidar que todos ellos deben estar relacionados 

con el aumento de su longevidad en función de la eficiencia reproductiva y del 

menor impacto ambiental que se obtenga. 

Uno de los microminerales más importantes e involucrados con la 

capacidad reproductiva del verraco es el Zinc (Zn). Este micromineral está 

relacionado con la formación de la cromatina a través de metaloenzimas; confiere 

estabilidad a la cromatina a través de la formación de los “dedos de Zn”; forma 

parte de estructuras celulares como las fibras densas externas del 

espermatozoide (ODF) y se une a proteínas que permiten la estimulación de 

genes de transcripción (Maret, 2001; Henkel et al., 2003; Jackson et al., 2008). 

El Zn debe ser suministrado a través del pienso a los animales, utilizando 
las FI como el ZnO y el ZnSO4 u orgánicas como el lisinato de Zn (Zn-Lis), 

metionato de Zn (Zn-Met), levaduras enriquecidas con Zn, o moléculas de 

carbohidratos unidas al Zn, las cuales tienen gran difusión en la industria 

alimentaria animal (Rojas et al., 1995; Mateos et al., 1998; Edwards y Baker, 
1999). 

A la luz de los nuevos paradigmas de eficacia productiva, bienestar animal 

e impacto ambiental, el Zn como potente regulador biológico ha demostrado una 

estrecha relación con la función reproductiva. Sin embargo, el efecto que la 

inclusión de Zn en el pienso de verracos posee sobre la edad,  genética, ritmo de 

trabajo, impacto ambiental y efecto en la actividad morfológica espermática, están 

por determinarse. Por todo ello, los objetivos planteados en la presente 

investigación fueron: 

2



INTRODUCCIÓN 

 
1.1. Objetivo General 

 
 Determinar el efecto de la fuente y nivel de Zn sobre la eficiencia 

reproductiva de verracos. 

Para el cumplimiento del objetivo general, se realizaron cinco experimentos que 

tuvieron como objetivos particulares los que se describen a continuación: 

 
1.1.1. Objetivos Específicos 

 
 Experimento 1. Evaluar el comportamiento productivo de verracos, 

alimentados con piensos que contenían diferentes fuentes y niveles de Zn, 
a través de la ganancia de peso, condición corporal, consumo de pienso y 

desarrollo de órganos reproductivos. 

 

 Experimento 2. Analizar la dinámica de producción y calidad seminal que 

presentan los verracos, a través del espermiograma básico del eyaculado, 

y de la evaluación de la integridad acrosomal (IAc). 
 

 Experimento 3. Determinar el estado del ADN nuclear de 

espermatozoides sin diluir. 

 

 Experimento 4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro de 

espermatozoides (FIV). 
 

 Experimento 5. Evaluación de la concentración de Zn en tejidos 

(testículos y epidídimos), plasma seminal (PS), y sedimento espermático 

(SE). 

3



 



 

 

REVISIÓN  
BIBLIOGRÁFICA 



 



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

2. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 

2.1. Generalidades 

Numerosos estudios relacionados con los requerimientos nutricionales en 

cerdos realizados durante la década de los años 60 y 70 se siguen utilizando 

actualmente. Sin embargo, es lógico pensar a la luz del desarrollo genético de los 

animales, los nuevos modelos de crianza y la variedad de fuentes alimenticias hoy 

existentes, que dichos requerimientos hayan sido modificadas, con la misma 

rapidez y eficiencia que las características y exigencias de crianza de los 

animales (Close y Cole, 2000). La investigación en verracos ha sido menor, por 

lo que la información sobre ellos es escasa y las necesidades nutricionales no son 

claras. Esto, impide tomar decisiones con certeza para mejorar su eficiencia 

reproductiva (Audet et al., 2004). En particular, el área de micronutrientes ha sido 

poco estudiada y dentro de ellos en especial el Zn. 

El Zn, es un mineral esencial para la vida (Hahn y Baker, 1993), 
encontrado normalmente en los ingredientes utilizados en la formulación de los 

piensos, ya sea como FI  y/o FO, y que evitan posibles signos carenciales en los 

animales (Cao et al., 2002; Jahanian et al., 2008). El Zn puede ser excretado a 

través de las heces o de la orina, dependiendo de la BD del mineral en el pienso. 

Hoy día se exige la utilización de piensos que eviten o disminuyan la excreción de 

Zn, ya que este mineral incide negativamente en el medio ambiente. Un pienso 

que contiene niveles de 100 a 250 mg de Zn Kg-1, produce en los purines una 

concentración de 850 a 1300 ppm de Zn Kg-1 de materia seca (MS) (Revy et al., 

2003). 

La Sociedad Británica de Ciencia Animal (BSAS), en 2003 estableció las 

recomendaciones sobre el uso mínimo de minerales adicionados a los piensos de 

los cerdos, sin considerar los niveles aportados por las materias primas, su BD o 

su origen (orgánico o inorgánico). En otros países se han tomado como válidos 

los requerimientos publicados por diversos organismos como el National 
Research Council (NRC), I’nstitut National de la Recherche Agronomique (INRA) 
o la, Fundación Española para el Desarrollo de la Nutrición Animal (FEDNA), los 

cuales están en concordancia con las normativas para la elaboración de piensos 

para el uso animal. Es el caso de la normativa No.1334/2003 (Official Journal of the 

5



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
European Union, 2003) de la Comisión de Regulación de la Unión Europea, en 

donde se expone que el nivel máximo de Zn en el pienso para todas las etapas 

productivas de los cerdos, debe ser 150 mg Kg-1, y el reglamento 767/2009, que 

será obligatorio atender a partir del 1º de septiembre de 2010, en donde se señala 

que el etiquetado de piensos deberá declarar el nivel y fuente de Zn. Hernández 
(2006) comparó los niveles de Zn recomendados para el pienso en cerdos, 

encontrando diferencias hasta de un 30%, y señaló que las normativas no 

consideran aspectos relacionados con el impacto ambiental, bienestar animal, 

eficiencia productiva, y/o sistemas de producción, por lo que concluye que las 

normativas sólo representan un límite, sin justificación real ante las distintas 

etapas productivas y los diversos sistemas de producción existentes actualmente. 

En los programas de alimentación de verracos, se enfatiza el cuidado de la 

formulación en nutrientes como proteína, energía, lisina, metionina, calcio (Ca) y 

fósforo (P), pero no siempre se observa el contenido de vitaminas y minerales que 

están incluidos en la premezcla vitamínico-mineral, la cual debería estar en 

concordancia con la condición fisiológica y a las exigencias de trabajo a las que 

están expuestos los verracos.  

El contenido de Zn en el pienso está presente en cantidades diversas, que 

puede ir desde 20 ppm hasta 220 ppm.  Mateos et al. (1998) señalan que las 

necesidades de Zn en el cerdo son altas en la mayoría de las etapas fisiológicas, 

y que se debe poner especial atención cuando la ración esté formulada con 

materias primas de origen vegetal, debido al contenido de fitatos, o con fuentes de 

Zn de baja BD, sin dejar de lado las posibles interacciones entre minerales que 

disminuyen la absorción del Zn (Hernández, 2006). Por su parte Close y Cole 
(2000) mencionan que las restricciones alimentarias en verracos, particularmente 

de minerales, producen un efecto más severo en ellos, debido a que disminuye el 

consumo de nutrientes necesarios para su óptima reproducción y condición 

corporal (CC), particularmente de minerales. Por lo tanto, el uso de fuentes de Zn 
con una mayor BD, y utilizadas para balancear el pienso a partir de la 

consideración del estado productivo del animal, salud, ambiente, sistema de 

alimentación y ritmo de trabajo, deberían ser el referente para obtener un pienso 

acorde con la función reproductiva del verraco. Por otra parte, el aparente ineficaz 

sistema de absorción de Zn que tienen los cerdos, sólo permite obtener alrededor 

del 30% del Zn suministrado en el pienso (NRC, 1998). Por ello, el uso de fuentes 

6



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
de Zn con mayor BD se ha generalizado, apostando por las FO dada su: facilidad 

de absorción, menor impacto ambiental, y mejora en el rendimiento de los   

cerdos (Apgar et al., 1995; Schiavon et al., 2000; Smits y Henman, 2000; 
Mullan et al., 2002). 

 
2.2. Características físicas y químicas del Zn 

El Zn es un ión metálico esencial para la vida, pequeño, hidrofílico, incoloro 

y diamagnético, constituyente de un gran número de proteínas, incluidas las 

enzimas distribuidas en todos los tejidos del organismo (Maret, 2001). Por lo 

tanto, es necesario para el buen funcionamiento de proteínas (metaloproteínas), 

con las que forma complejos (Zn-proteína), en las que participan reiteradamente 

la histidina y la cisteína. Estas metaloproteínas intervienen en procesos de 

catálisis enzimática, desempeñando un papel estructural que se caracteriza por la 

formación de los “dedos de Zn”, los cuales unen, estabilizan y fortalecen la 

estructura de la cromatina. De hecho el contenido de Zn puede oscilar en estas 

metaloproteínas entre el 4 y 10% (Jackson et al., 2008). Andreini et al. (2006) y 
Murakami e Hirano (2008) señalan que del total de Zn en el organismo, el 40% 

está ligado a proteínas y cubren funciones como factores de transcripción para la 

regulación de genes (≈ 2000 factores de transcripción incluidos) y el 60% a 

enzimas y proteínas que involucran el transporte del ión. El Zn es el encargado de 

establecer que la proteína tenga una estructura terciaria o cuaternaria. Es un 

metal que no sufre reacciones de óxido-reducción (redox), lo que le confiere una 

capacidad de estabilidad importante (Ebert y Altman, 2008; Jackson et al., 
2008). Involucra procesos de transferencia de electrones, pero debido a su carga 

eléctrica, no puede cruzar las membranas biológicas por mecanismos de difusión 

pasiva (Hortin et al., 1993; McMahon y Cousins, 1998). El Zn es un 

micronutriente crítico, desde el punto de vista fisiológico, ya que sus funciones 

son amplias y abarcan una infinidad de actividades, tales como: almacenamiento 

y liberación de insulina; confiere integridad a la membrana celular; interviene en 

procesos de maduración sexual y en la reproducción; participa en actividades de 

sensibilidad olfativa y gustativa; activo componente de la función tiroidea y de los 

procesos de coagulación sanguínea, y crucial para la  respuesta inmunitaria 

(Maret, 2001; Andreini et al., 2006; Molokwu y Li, 2006). Fukada et al. (2008) 
mencionan que al Zn se le reconoce como una molécula de señalización 

7



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
intracelular, por lo que se le ha dado el nombre de segundo mensajero (Regalla y 
Lyons, 2005; Yamasaki et al., 2007; Murakami e Hirano, 2008). Por otra parte, 

el análisis del genoma humano, ha mostrado que entre el 3 y el 10% de todos los 

genes pueden codificar proteínas que se unen a Zn (Maret, 2001; Jackson et al., 
2008). 

 
2.3. Absorción y metabolismo de Zn 

En el aparato digestivo, el Zn que se encuentra en forma libre, está en 

pequeñas cantidades ya que la mayoría se une a fosfatos, aminoácidos y otros 

ácidos orgánicos, los cuales son absorbidos principalmente en la región duodenal 

y parte proximal del yeyuno (Krebs, 2000). La absorción de Zn se realiza a través 

de los enterocitos, y a través de su membrana basolateral se transporta hacia la 

circulación portal (Figura 1). Por tanto, el primer sistema de control homeostático 

corporal del Zn es el sistema gastrointestinal (Hernández, 2006).  

Los mecanismos que absorben el Zn exógeno han sido poco estudiados, 

aunque se reconoce la existencia de procesos de saturación-insaturación del 

mineral que intentan establecer la homeóstasis metabólica del mineral (Krebs, 
2000), y que se relacionan con el consumo de Zn, la BD de las fuentes, las 

necesidades del organismo por el mineral, y la excreción del Zn endógeno. La 

absorción del Zn a nivel intestinal ocupa sistemas de transporte activo saturable, 

así como un proceso no-saturable de difusión pasiva. Este proceso depende del 

gradiente de concentración del catión de Zn que esté disponible para su 

absorción. Por lo tanto, se cree que existen múltiples factores que influyen en la 

absorción de Zn debido a lo siguiente: 

a) El aumento de la concentración de Zn satura el sistema de transporte 

activo. 

 
b)  La tasa de absorción de la mucosa intestinal puede verse reducida, debido 

a procesos patológicos. 

 
c) La presencia de otros cationes divalentes (Ejemplo: Ca) los cuales 

compiten por el canal no específico de Zn, llamado canal polivalente 

(Molokwu y Li, 2006). 
 

8



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9



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
La concentración de Zn en las células eucariotas según Maret (2001), es 

muy alta, alrededor de 200 µM, pero la cantidad de Zn que se localiza en estado 

libre en la célula, se registra en concentraciones pequeñas. La homeóstasis de Zn 
es fundamental en todos los tejidos y se mantiene a través de sensores que se 

activan por la presencia de una baja o alta concentración de Zn. Esta 

homeóstasis incluye mecanismos de regulación y expresión de genes de 

transcripción, los cuales codifican la transportación de Zn a través de la 

membrana plasmática, de las membranas intracelulares y de la MT (Jackson     

et al., 2008). 

El conocimiento de la existencia de estos genes transportadores (ZnT y 
Zip) ha aclarado algunas preguntas sobre qué es lo que sucede en los procesos 

de absorción de Zn, aunque no se conocen todos los mecanismos que intervienen 

durante el transporte de Zn por el organismo (Figura 2)  (Ohana et al., 2009). 

En mamíferos, la familia génica que se conoce como ZnT está constituida 

por diez miembros (Cousins et al., 2006; Ohana et al., 2009). Muchos de estos 

genes relacionados con el transporte de Zn, se encuentran en distintos tejidos 

para regular el contenido mineral en los diferentes compartimentos celulares, por 

lo que se asocian a endosomas, aparato de Golgi, o retículo endoplásmico 

(Figura 2) y por ello se les ha dado el nombre de “secuestradores” de Zn, ya que 

estos permiten almacenar el ión en compartimentos para que el citoplasma no se 

sature (Ohana et al., 2009). La identificación del gen para la proteína 

transportadora ZnT-1 ha mostrado su importancia en el tránsito entrada-salida de 

Zn en la célula, es la única localizada en la membrana plasmática y es la 

responsable de la expulsión del Zn intracelular, previniendo un efecto citotóxico 

por parte del Zn (Iguchi et al., 2004; Cousins et al., 2006). Un elevado consumo 

de Zn afecta la actividad de la proteína transportadora ZnT-1 en algunos tejidos, 

ya que este modifica la resistencia de la membrana celular y los canales de 

transferencia mineral, ocasionando la exportación del Zn intracelular (McMahon y 
Cousins, 1998; Krebs, 2000; Iguchi et al., 2004). Sin embargo, este mecanismo 

no siempre ocurre cuando disminuye el Zn (McMahon y Cousins, 1998; Cousins 
et al., 2006). El único mecanismo bien estudiado en mamíferos, que detecta y 

regula las condiciones que guarda el Zn intracelular es el aportado por el gen 

regulador de los factores de transcripción MFT1 [MRE (elemento-respuesta al 

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11



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

Las proteínas transportadoras ZnT-2 y ZnT-3 están restringidas a ciertos 

tejidos en los mamíferos. La  ZnT-2 está involucrada en la captura del Zn dentro 

de las vesículas (compartimentos endosómicos y lisosómicos) en el intestino, 

riñón, y testículos. Estos compartimentos están relacionados con la posibilidad de 

que el Zn almacenado en la célula no produzca toxicidad o en su caso lo 

almacena en altas concentraciones sin provocar daño a la célula (McMahon y 
Cousins, 1998; Iguchi et al., 2004). La proteína transportadora ZnT-3 se expresa 

en el cerebro y en los testículos. En el cerebro, es responsable de acumular Zn en 

las vesículas sinápticas y tal vez podría tener una función importante dentro de la 

espermatogénesis, en la formación de vesículas de Zn (McMahon y Cousins, 
1998; Ohana et al., 2009). La proteína ZnT-4, se ha encontrado en gran cantidad 

de tejidos, su mecanismo se ha asociado con la expulsión o 

compartimentalización en la glándula mamaria y es esencial para la regulación del 

contenido de Zn en la leche (Iguchi et al., 2004; Murakami e Hirano, 2008). La 

ZnT-5 se localiza en las vesículas secretoras de las células pancreáticas y en la 

membrana apical de los enterocitos.  Por ello, se relaciona con el crecimiento, 

contenido graso y función muscular. En ratones donde existe una alteración de la 

expresión del gen para la proteína transportadora Zn-T5, se observó escaso 

crecimiento, disminución de la grasa corporal, osteopenia, debilidad muscular y 

bradicardia (Cousins et al., 2006; Murakami e Hirano, 2008). El gen para el 

transportador  ZnT-8 está expresado exclusivamente en las células β-pancreáticas 

(Murakami e Hirano, 2008). En el caso del gen para  ZnT-9 se encuentra en el 

núcleo durante la mitosis (Tabuchi et al., 2000) y el gen para el transportador 

ZnT-10 podría estar relacionado con el transporte en la membrana 

plasmática(Cousins et al., 2006). 

De manera general, la familia de los genes transportadores ZnT, apoya a 

través de las capas lipídicas de la célula el transporte de este mineral, existiendo 

factores de oxidación celular, cambios en la concentración de otros minerales, y 

factores inmunológicos que pueden competir por los transportadores o inhibir la 

expresión de los mismo (McMahon y Cousins, 1998).  

La familia de genes Zip en mamíferos consta de 14 miembros (Figura 2) 
(Cousins et al., 2006; Murakami e Hirano, 2008). Según su función de 

“importación” de Zn al interior de la célula, la familia de proteínas asociadas 

12



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
puede ser dividida en cuatro subfamilias: Zip I, Zip II, gufA, y LZT. La absorción 

de Zn puede ser un proceso facilitado e impulsado por un gradiente de 

concentración. Algunas proteínas importadoras Zip pueden transportar diversos 

metales divalentes pero, particularmente en mamíferos, el Zn tiene factores o 

elementos Zip específicos para este metal. La mayoría de las proteínas 

transportadoras que regula la familia génica Zip, se han localizado en la 

membrana plasmática, sin embargo, la Zip7 está presente en el aparato de Golgi 

(Ohana et al., 2009). Los productos de la familia génica Zip pueden cambiar con 

base a las condiciones fisiológicas o a la disponibilidad biológica del Zn. También 

se ha observado que las hormonas pueden regular tanto la expresión de los 

genes Zip, como ZnT (Cousins et al., 2006).  

La proteína  importadora Zip1 se encuentra identificada en la próstata, está 

regulada por la prolactina y la testosterona, y puede estar relacionada con la 

presencia atípica de altos niveles de Zn en este tejido (Cousins et al., 2006). Las 

proteínas  Zip6 y Zip10, están involucradas en mecanismos de migración celular, 

por lo que es probable que intervengan en el desarrollo adecuado de las gónadas 

(Murakami e Hirano, 2008). 

Otro mecanismo celular para controlar la concentración de Zn son unas 

pequeñas proteínas llamadas metalotioneinas (MT), ricas en cisteína, las cuales 

se unen al Zn e intervienen en el proceso de absorción, distribución, almacenaje, 

liberación y transporte de este mineral (Krebs, 2000; Iguchi et al., 2004). La MT 

se une al Zn para estabilizar a la célula,  llevándola a un estado redox (Maret y 

Vallee, 1998; citado por Maret, 2001). La base molecular para esta unión es la 

vinculación a los átomos de azufre (S) del aminoácido donante (cisteína) el cual le 

confiere actividad redox sobre el átomo de Zn que también la contiene. El cambio 

de este potencial en la célula bajo condiciones oxidantes induce una cinética 

flexible de Zn, para transferirse contra gradiente o a sitios donde es menos afín, 

pero es requerido para actuar como un antioxidante (Maret, 2001).  

Una alta concentración de Zn activa el MTF1 induciendo la expresión de 

MT, que luego secuestra al Zn (Murakami e Hirano, 2008). Posteriormente la MT 

dona el Zn, lo que le confiere una actividad desintoxicante. La MT también está 

presente en la célula en su forma apo de tioneina (T) en cantidad diversa con 

respecto a MT (Yang et al., 2001). La T es un eficiente agente quelante endógeno 

y un receptor eficaz de Zn. Este hecho es importante ya que la relación MT/T, así 

13



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
como la regulación de la MT proporciona un medio para controlar la disponibilidad 

de Zn. Además, es de resaltar que la célula eucariota compartimentaliza el 

contenido de Zn (Figura 2), y de la misma manera lo hace con la MT (Maret, 
2001). La expresión de MT es particularmente alta en las células del parénquima 

del intestino, páncreas, riñón e hígado. En su estructura está contenido el 

aminoácido cisteína que envuelve al Zn. Se ha comprobado que la MT es 

afectada por los niveles de Zn, y en menor medida por la fuente utilizada en el 

pienso (Carlson et al., 2004; Hernández, 2006) que se consume, aunque puede 

observarse que en situaciones de estrés, glucocorticoides, citoquinas, 

inflamación, presencia de especies reactivas de oxígeno (reactive oxygen 

species, ROS), hormonas androgénicas, óxido nítrico (NO) y/o restricción de Zn, 

pueden disminuir la concentración de MT (Figura 2) (Krebs, 2000; Iguchi et al., 
2004; Cousins et al., 2006). El MTF1 suele apoyar de forma positiva el estímulo 

que realiza el Zn sobre la MT, por lo que se sugiere que el MTF1 es expresado en 

condiciones basales ante la presencia de Zn e interviene en la expresión de MT y 

ZnT-1 (Cousins et al., 2006; Murakami e Hirano, 2008). 

Aparentemente los niveles de Zn afectan la presencia de los genes ZnT y 

de la MT, pero no se observa relación entre la presencia de los genes ZnT y la 

MT (Krebs, 2000; Iguchi et al., 2004; Cousins et al., 2006). La MT por lo tanto, 

puede funcionar como una respuesta celular para limitar la concentración de Zn 

libre dentro de límites muy estrechos, además de funcionar como un regulador de 

las concentraciones de Zn en la célula (Krebs, 2000). Sin embargo, la MT 

también regula al cobre (Cu) intracelular, lo que puede impedir que la MT regule 

solamente la absorción de Zn y este se una a los sitios naturales, incrementando 

el Zn circulante en el organismo (Hernández, 2006). Cuando se incrementa el Zn, 

puede causar en las proteínas transportadoras un bloqueo el cual puede llevar a 

un desequilibrio, implicando desfavorablemente al metabolismo de lípidos y 

carbohidratos (Smith et al., 1997). Otra situación descrita es que la presencia de 

MT puede variar, dependiendo del periodo en que fue consumida una cantidad o 

fuente de Zn en el pienso (Hernández, 2006).  

Hedemann et al. (2006) demostraron que el Zn incrementa el mucus de la 

superficie gastrointestinal tal vez, como un mecanismo de regulación de la 

expresión génica de ZnT en el intestino delgado. Por lo tanto, se supondría que el 

Zn también regula la expresión de los genes secretores de mucina. 

14



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Otra proteína transportadora de metales divalentes es la DCT1 (divalent 

cation transporter 1) es la Nramp2 (proteína asociada a la resistencia natural de 

los macrófagos), la cual es altamente hidrofóbica, forma parte de las 

glicoproteínas de membrana, participa en el transporte de metales del ambiente 

extra e intracelular, ligados principalmente al Zn, hierro (Fe), manganeso (Mn), 
cadmio (Cd), cobalto (Co), níquel  (Ni), plomo (Pb) y Cu (Gruenheid et al., 1999; 
Tabuchi et al., 2000; Iguchi et al., 2004). En el ovocito se ha demostrado que la 

Nramp2 puede transportar los mismos cationes divalentes en un ambiente 

dependiente del potencial de hidrógeno (pH). Las Nramp2 pueden presentar 

mutaciones, disminuyendo la actividad de transporte del metal (Gruenheid et al., 
1999). El DCT1 se encuentra en el duodeno específicamente en las criptas y 

vellosidades menores del intestino. Este gen apoya la absorción de iones 

metálicos. En los ovocitos el DCT1 ha demostrado transportar Zn al interior,      

sin embargo, aun no está bien caracterizado (McMahon y Cousins, 1998;   
Krebs 2000). 

 
2.4. Almacenamiento del Zn  

Una vez absorbido el Zn, es transportado por la albúmina del plasma 

sanguíneo, y por algunas proteínas vinculantes como la transferrina, 

glicoproteínas ricas en histidina, y tal vez la MT (Cousins, 1996). Regalla y 
Lyons (2005) estudiaron la forma en que se distribuye el Zn en la célula, y 

encontraron que el Zn es lábil, cambia rápidamente de ligaduras, y por ello se 

disocia y asocia con facilidad. El Zn por lo tanto se distribuye y poco tiempo se 

mantiene libre. El glutatión es un mediador que facilita el cambio rápido del Zn de 

un sitio a otro. El Zn se absorbe y almacena reguladamente por todo el cuerpo en 

las vesículas citoplásmicas (zincosomas), y la concentración puede variar de 

especie a especie (Figura 2). Hernández (2006) señala que el nivel de Zn 

almacenado está más relacionado con la cantidad que con la fuente de Zn, ya 

que la expresión de MT se incrementa en los animales que contienen mayor nivel 

de Zn. Asimismo, el hecho de que las células entren en fase estacionaria permite 

que la concentración de Zn no cambie. Bajo estas condiciones se han encontrado 

de 600,000 a 3 millones de átomos de Zn por célula (Regalla y Lyons, 2005). Sin 

embargo, el Zn libre en la célula es muy bajo, llegando a ser de un átomo por 

célula, en E. colli. En humanos, el contenido de Zn es de 2 a 3 g y se encuentra 

15



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
distribuido en músculo (60%), tejido óseo (30%) y piel (5%). (Molokwu   y Li, 
2006). 

En un estado de carencia, los primeros sitios de almacén que pierden este 

ión son los zincosomas del hígado, riñón y páncreas (Spears, 1996). El 

almacenamiento de Zn suele variar según la fuente y edad de los animales 

(Krebs, 2000). Esto es debido a las diferencias que existen en el metabolismo, 

adicionando a estas el hecho de que las FO se distribuyen y almacenan de forma 

distinta. Se ha demostrado que las FO de Zn suelen almacenarse en mayor 

proporción en hígado, bazo, corazón e intestino delgado, que las FI (Spears, 
1996). A este respecto, Rojas et al. (1995) observaron que el Zn de la FO Zn-Lis 

se almacena en cantidades altas en los mismos tejidos que Spears (1996) había 

señalado, pero preferentemente en hígado, restándole importancia a los otros 

órganos (Krebs, 2000).  

Aunque, el aparato reproductor no suele ser elegido para almacenar 

grandes cantidades de Zn, su contenido mineral se afecta según sea el consumo 

y absorción.  En la medida en que se aumenta el consumo, se eleva la 

concentración en el tejido testicular, epididimario y prostático, así como en sus 

secreciones. En el caso de los testículos, cuando una dieta es baja en Zn, suelen 

generar una disminución aproximadamente del 11% de este mineral en el 

parénquima (Evenson et al., 1993). La concentración de Zn en la glándula 

prostática es elevada cuando se suministra Zn en las cantidades recomendadas y 

esto favorece la concentración que se observa en el PS (Iguchi et al., 2004). 
Estos autores determinaron que los niveles de Zn disminuyen en la próstata, 

cuando existe crecimiento de células cancerígenas. Además, se ha relacionado 

esto con la pérdida de concentración de MT, tal vez debido a la proteólisis de esta 

proteína, a través de su relación con la presencia de ROS (Figura 2). Por su parte 

Cousins et al. (2006), describieron que los cuadros de prostatitis bacteriana, 

están asociados directamente con la disminución del contenido de Zn plasmático 

debido a la disminución de la proteína Zip1. El almacenamiento de Zn en 

cantidades suficientes en la próstata, favorece la acumulación de Zn en los 

espermatozoides al mezclarse estos con las secreciones de la próstata durante la 

eyaculación (Evenson et al., 1993). Esta mezcla confiere a las células su 

capacidad de movimiento. En el PS el contenido de Zn ronda los 2.06 mM          

16



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
en humanos, 349 µM en cerdos, 1.04 mM en perros y 600 µM en conejos 

(Aonuma et al., 1978).  

La concentración de hormonas androgénicas, también potencializa la 

expresión de MT (Cousins et al., 2006), por lo que en la medida que se inicia la 

actividad sexual, también aumenta la producción de MT, y se incrementa la 

capacidad de almacenamiento y las necesidades de Zn. 

 
2.5. Secreción, reabsorción y excreción de Zn 

Existen mecanismos metabólicos que contribuyen a la eliminación de Zn, 

como son la obstrucción de la absorción, o la excreción celular (Bedwal y 
Bahuguna, 1994). Las células expulsan el Zn a través de mecanismos de 

activación de genes transportadores. Las secreciones pancreáticas, biliares, 

gastroduodenales, del flujo transepitelial de los enterocitos intestinales o de otro 

tipo de células, así como las descamaciones de las células de la mucosa 

(Cousins et al., 2006), se convierten en una fuente endógena de Zn excretado 

que actúa equilibrando el contenido celular de dicho ión. 

Los procesos que acompañan el desarrollo de la homeóstasis del Zn 

celular, como son la absorción-excreción-retención del ión, son dependientes de 

la cantidad de Zn que se pierde vía endógena y de su capacidad de absorción. Se 

ha demostrado que la cantidad de Zn excretado puede ser superior o igual a las 

cantidades de Zn exógeno. Por ello, cuando existe un exceso de Zn en el pienso 

de los animales, este, se convierte en el mecanismo regulador de la absorción a 

nivel intestinal (Cousins, 1996). 

El Zn excretado vía digestiva puede ser reabsorbido en la fracción más 

distal del intestino, dependiendo de la forma y cantidad de Zn presente, así como 

de los factores intraluminales y del lugar del intestino delgado donde se localice el 

ión (McMahon y Cousins, 1998; Krebs, 2000). La presencia de fitatos y grasa 

suele inhibir la reabsorción de Zn en el intestino ocasionando con ello un efecto 

de lavado (Krebs, 2000). McMahon y Cousins (1998), afirman que el transporte 

de Zn es un proceso sensible al tiempo, a la temperatura y al pH, pudiendo ser un 

mecanismo saturable o no. El transporte de este ión es probable que requiera 

energía y en algunos casos se puede transportar como un ión libre, pero el Zn 

17



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
que está unido o ligado es más difícil de ser transportado al interior de la célula y 

con ello afectar significativamente su entrada y distribución en la célula.  

Otro mecanismo de la célula que evita la expulsión de Zn, es la 

inestabilidad que muestran las proteínas transportadoras de la familia génica ZnT 
y que derivan en su proteólisis. Cuando ha existido una activación innecesaria de 

estas proteínas, se destruyen. En otros casos, cuando el Zn intracelular ha sido 

equilibrado con el extracelular, las proteínas transportadoras ZnT tienden a ser 

eliminadas. Por ello, la activación oportuna y la vida media de las proteínas 

transportadoras, asegura que su expresión ocurra sólo cuando los niveles 

intracelulares de Zn sean lo suficientemente altos para producir una gran 

cantidad, permitiendo la expulsión del Zn antes de producir daño celular como la 

inhibición del crecimiento celular o la desestabilización del ADN (Chivers, 2007). 

El páncreas y la bilis son mecanismos eficientes para la eliminación del Zn, 

ya que al ser excretados a través de su función exocrina llega al intestino delgado 

y de ahí es eliminado vía heces (Gralak, 2002, citado por Hernández, 2006). La 

excreción de Zn se produce principalmente por vía fecal y aunque por la vía 

urinaria se excreta poca cantidad de Zn, esta suele ser definitiva y rápida, ya que 

en 24 horas cantidades entre 0.4 a 0.6 mg pueden ser desechadas. Otras vías de 

excreción son el cabello, sudor, descamación de la piel, la bilis y el PS (Bedwal y 
Bahuguna, 1994; Chesters, 1997). 

Con respecto al PS Henkel et al. (2003) demostraron que el Zn expulsado 

por los espermatozoides durante la espermiogénesis es reabsorbido 

principalmente en la cola del epidídimo, pudiendo continuar en la parte proximal 

de los conductos deferentes. Es posible suponer que este mecanismo de 

reabsorción puede funcionar como un regulador de la homeóstasis de Zn en las 

células, no sólo del epidídimo, sino también de los espermatozoides. A su vez, la 

salida de Zn del espermatozoide puede estar en función de la concentración de 

proteínas, ya que estas, responden a otras fuentes de Zn, evitando que los 

espermatozoides expulsen el Zn contenido en cola.  

 

 

 

18



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

2.6. Funciones del Zn 

Es probable que el Zn influya en la disminución de la tasa de crecimiento 

(Chesters, 1997) ya que existe evidencia del efecto de este ión con el apetito, 

debido al incremento en la producción de opiáceos, colecistoquininas o 

neuropéptidos. Tal vez por ello, el Zn tiene efecto sobre el centro de la saciedad 

en el hipotálamo o en la actividad de absorción en el intestino (Cousins, 1996).  

 
2.6.1. Función del Zn en las enzimas 

Se sabe que el Zn es necesario en la actividad enzimática. Se reconocen 

alrededor de 300 metaloenzimas, por lo que es el mineral que más enzimas 

activa, estando presente en las seis clases de enzimas (Maret, 2001; Molokwu y 
Li, 2006; Murakami e Hirano, 2008). 

La mayoría de las enzimas que contienen Zn, se pueden clasificar en dos 

grupos básicos: 

a) La primera clase de enzimas, utilizan al Zn para coordinar los 

átomos de oxigeno (O2) o S en las moléculas de agua, alcoholes 

o tioles. Asimismo el Zn coordina la polarización de las uniones 

oxhidrilo (-OH) y sulfhidrilo (-SH), lo que induce a la acidificación 

del protón, para que el aminoácido se una. Los grupos -OH, 

alcóxido o tiolato que se generan pueden actuar como nucleófilos 

en la catálisis.  

 

b) La segunda clase de enzimas utilizan al Zn como aceptor de 

electrones, al polarizar el grupo carbonilo. Esto hace al átomo de 

carbono más electrofílico (Regalla y Lyon, 2005). 

El Zn está implicado en el metabolismo de proteínas, hidratos de carbono, 

y lípidos, por ello mantener un estado de homeóstasis del ión es esencial para el 

normal desarrollo de los procesos de crecimiento y reproducción (Mateos et al., 

1998; Hedemann et al., 2006; Molokwu y Li, 2006).  

La enzima superóxido dismutasa (SOD) es el primer mecanismo 

antioxidante de la célula. Esta función está dada a través de la reorganización de 

19



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
los átomos de la molécula, convirtiendo los radicales libres de O2, en peróxido de 

hidrógeno (H2O2), un radical menos dañino, dependiendo de la presencia de Zn 

como parte de su estructura. Sin embargo, la SOD también ocupa otros iones 

como Cu y Mn, siendo este último el que se utiliza en la SOD mitocondrial, 

mientras que Zn y Cu se encuentran en el citoplasma celular. El hecho de que la 

SOD se encuentre en la mitocondria, citoplasma y en los compartimentos 

extracelulares, permite garantizar que los superóxidos sean convertidos en H2O2. 

La contribución de esta enzima radica en evitar el daño en membranas celulares y 

en el ADN causado por los ROS. 

La fosfatasa alcalina (FA) es una metaloenzima, que incorpora tres átomos 

de Zn en su molécula, dos de los cuales son esenciales para su actividad y uno 

forma parte estructural de la molécula. Su función es hidrolizar enlaces éster 

fosfórico, entre un grupo fosfato y un radical orgánico en un pH básico, liberando 

P inorgánico, además de estar relacionada con la síntesis de ADN, en 

consecuencia, estimula el crecimiento celular (Molokwu y Li, 2006). 

La aminoacil-RNAt-sintetasa, que es el primer paso en la biosíntesis de 

proteínas, es directamente activada por el Zn en el proceso de osteosíntesis. 

También es parte importante de la enzima sorbitol deshidrogenasa (SoDH) que 

interviene en la ruta que convierte la glucosa a sorbitol y posteriormente en 

fructosa, la cual es utilizada como energía en el desplazamiento de la célula 

espermática (Figura 3). 

                        Aldolasa Reductasa                                      SoDH 
        Glucosa                                   Sorbitol                                Fructosa       
                                                       
                                   
                           NADPH + H+         NADP+                     NAD               NADH + H+ 

 
Figura 3. Reacciones necesaria para la transformación de la glucosa en fructosa 
a nivel espermatozoide. 
 

La enzima convertidora de la angiotensina (ACE, Angiotensin converting 

enzyme), está asociada con el desarrollo del testículo y la espermatogénesis. 

Parece ser que la deficiencia de Zn, disminuye en primer lugar la actividad de 

ACE, produciendo posteriormente una reducción de la testosterona, afectando 

directamente a la espermatogénesis. Algunas investigaciones señalan un efecto 

directo sobre las células de Leydig y de Sertoli (Bedwal y Bahuguna, 1994). 

 

20



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
En cerdos destetados, concentraciones elevadas de Zn suelen aumentar la 

secreción enzimática de la carboxilpeptidasa A y B [elimina el grupo carboxilo 

(COOH) de aminoácidos], quimiotripsina y tripsina; lipasa y amilasa pancreática 

entre 5 a 7 veces, favoreciendo la digestión de proteínas y el crecimiento de las 

microvellosidades intestinales, estimulando la síntesis enzimática de estas, 

mejorando la digestión y absorción de nutrientes, aumentando la eficiencia del 

crecimiento (Hedemann et al., 2006). En la próstata, el Zn inhibe la actividad 

enzimática de la aminopeptidasa N-uroquinasa y la actividad del activador del 

plasminógeno, ayudando así al control de la metástasis de las células 

cancerígenas en próstata (Iguchi et al., 2004). 

Dentro de las enzimas que se encuentran en el espermatozoide, está la 

anhidrasa carbónica la cual, es una proteína monomérica que requiere de Zn en 

su sitio activo. Su actividad radica en la función del carbonato deshidratasa, la 

cual le confiere su actividad biológica sobre los compuestos de un solo carbón 

[Ejemplo: Ácido carbónico (H2CO3) y dióxido de carbono (CO2)]. Se localiza en el 

citoplasma donde ejerce una acción buffer y de transporte de CO2. Toma este 

CO2 de la célula y lo combina con agua para obtener H2CO3. Después desprende 

este CO2. A través de este mecanismo permite al espermatozoide mantener el 

equilibrio hídrico y un pH constante. En el caso de la FA, la disminución de esta 

enzima está relacionada con la pérdida de tejido testicular y una disminución de la 

producción de espermatozoides. Por su parte la 5´nucleotidasa (5´-ND) es 

importante en la obtención de energía, la disminución de esta enzima disminuye 

el nicotinamida adenín dinucleótido (NAD) requerido para la motilidad espermática 

(Mot) (Aonuma et al., 1978). 

La Lactato Deshidrogenasa (LDH-X) es una isoenzima del tejido 

germinativo de las gónadas. Pertenece a las metaloenzimas y está relacionada 

con la Mot ya que provee de energía a través de las reacciones de lactato y 

piruvato. La ausencia de esta enzima está correlacionada con anormalidades en 

la región mitocondrial de la tracto intermedio de los espermatozoides y con una 

disminución de la concentración espermática. En humanos se ha observado que 

puede reducir la concentración espermática hasta en un tercio, cuando es menor 

a 20 x 106. El nivel de LDH-X en fluidos seminales tiene una correlación (r = 0.7) 
con la concentración espermática (Orlando et al., 1988). 

21



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
2.6.2. Función del Zn en la reproducción 

 
2.6.2.1. Efecto del Zn en el testículo 

 El parénquima testicular está formado principalmente por los túbulos 

seminíferos, donde se encuentran las células germinales, células de Sertoli y de 

Leydig, los espacios intersticiales que contienen vasos sanguíneos, linfáticos y 

nervios (Cole y Cupps, 1984; Hafez, 1984). El efecto del Zn en el parénquima 

testicular se ve reflejado en los conductos seminíferos, ya que una deficiencia 

afecta su desarrollo, además de intervenir en los mecanismos de inhibición de los 

factores de Müller y en la diferenciación testicular (Bedwal y Bahuguna, 1994). 
Por lo anterior, se menciona que el Zn contribuye al desarrollo y densidad de los 

túbulos seminíferos y participa en el crecimiento de los testículos (Evenson et al., 
1993; Bedwal y Bahuguna, 1994; Mahan et al., 2002). La espermatogénesis, 

depende del número de células de Sertoli que se desarrollan en el testículo 

(França et al., 2005). Una cantidad mayor de dichas células por gramo de 

testículo aumenta el número de células germinales (NRC 1998; Lleó, 2000; 
Strzezek et al., 2000; Marchesi, 2004). 

 La concentración de Zn parece estar influenciada por la actividad sexual, 

por lo que el contenido de Zn en el parénquima testicular es mayor en los 

animales adultos que en los prepúberes (Bedwal y Bahuguna, 1994). Estos 

mismos autores ponen de manifiesto que determinadas patologías que producen 

daños en el testículo, reflejan una disminución en la concentración de Zn 

posiblemente debido a una menor disponibilidad del mineral en el parénquima 

testicular. Asimismo, la falta de Zn puede afectar los procesos que regulan la 

síntesis de esteroides en las células de Leydig. Mateos et al. (1997), pusieron en 

evidencia que la restricción de Zn produce un aumento de gotas de colesterol    

en dichas células, afectando negativamente la esteroidogénesis testicular 

(Hesketh, 1982; Close y Roberts, 1991; Close, 1993a; Mahan et al., 2002). 

 
 
 
 
 
 

22



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

2.6.2.2. Efecto del Zn en el epidídimo 

Los cambios morfo-fisiológicos, metabólicos y bioquímicos que ocurren en 

los espermatozoides, como la condensación de la cromatina, el desarrollo y 

formación del acrosoma, la formación de las ODF (Outer dense fibres), así como 

los componentes de la membrana plasmática, son realizados desde las células 

germinales, continuando en el conducto epididimario hasta llegar a la porción 

distal del mismo, donde se almacenan. Estas modificaciones son necesarias para 

que el espermatozoide sea capaz de fecundar al ovocito.  

El epidídimo secreta y absorbe proteínas a través de las células 

principales, realizando endocitosis, y secretando al lumen un medio ácido. 

Además, tienen un mecanismo de defensa provisto de las células basales        

con mecanismos de fagocitosis y antioxidación (França et al., 2005). Henkel      
et al. (2003), descubrieron que existían dos proteínas en el epidídimo que unen al 

Zn, y señalaron que su concentración era cinco veces más grande en la cabeza 

que en la cola del epidídimo, sugiriendo que tienen una función biológica de 

movilizar al Zn una vez expulsado de la cola del espermatozoide. También, 

demostraron que el Zn que se encuentra en las células basales de epidídimo 

pertenece al espermatozoide. Existe por lo tanto una evidencia para explicar que 

si el epidídimo no produce estas proteínas o sus mecanismos de excreción-

absorción, son disfuncionales, el Zn puede acumularse y producir la pérdida de la 

homeóstasis del ión. El Zn del espermatozoide puede ser desechado por las 

secreciones epididimales o en su defecto se libera un mecanismo de bloqueo 

para la expulsión del Zn por parte del espermatozoide. Estos autores también 

observaron que el Zn puede reabsorberse en pequeñas cantidades en secciones 

del epidídimo, como la cola. Estas cantidades de Zn se encuentran unidas de 

forma débil y difusa a través del epitelio, transportándolas hacia el torrente 

sanguíneo. 

En el epidídimo, la actividad metabólica de los espermatozoides, células 

epiteliales y microorganismos puede derivar en una gran producción de ROS, lo 

que aumenta la posibilidad de que los espermatozoides sufran estrés oxidativo. 

Sin embargo, el epidídimo contiene mecanismos que evitan la oxidación de las 

membranas espermáticas y daños en el ADN. Estos mecanismos se 

23



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
corresponden con la SOD y la glutatión peroxidasa (GPx), enzimas que tienen 

como parte importante de su molécula al Zn. 

 
2.6.2.3. Efecto del Zn en la próstata 

La próstata es considerada como el órgano que mayor contenido de Zn 
presenta en todo el organismo (Quiles y Hevia-Méndez, 2004a, b). La próstata 

disminuye su peso al disminuir la concentración de Zn en ella. El crecimiento 

celular de este órgano es controlado a través de la inhibición de la actividad de la 

aconitasa mitocondrial, regulada por el Zn. Asimismo, el contenido de Zn aumenta 

en el PS, cuando existe cambio en la absorción de este metal en el tejido 

prostático (Iguchi et al., 2004). Jackson et al. (2008) señalan que la pérdida de 

la homeóstasis en el contenido de Zn prostático, está relacionado con procesos 

de cáncer en este órgano en humanos (Murakami e Hirano, 2008). Por su parte, 

el Zn en el eyaculado es indispensable para unirse a la célula espermática que lo 

necesita para la formación de las ODF (Henkel et al., 2003; Iguchi et al., 2004). 

 
2.6.2.4. Efecto del Zn en el espermatozoide 

La cola del espermatozoide contiene más del 93% del Zn total del mismo, 

localizado especialmente en las ODF. Las ODF, se extienden a lo largo del 60% 

de la longitud de la pieza principal de la cola del espermatozoide y están 

constituidas de proteínas estructurales que contienen una gran cantidad de 

cisteína. En el testículo, el Zn se une al grupo -SH de la cisteína y forman el 

complejo Zn-tiol, con objeto de que las ODF no se oxiden. Durante la maduración 

en epidídimo, el 60% del contenido mineral es expulsado y a continuación el 

grupo -SH es oxidado para formar puentes disulfuro (S-S), estabilizando y 

endureciendo las ODF (Henkel et al., 2003). 

Los espermatozoides tienen un sistema muy eficaz de utilización de la 

energía. La incorporación de grandes cantidades de Zn protegen a los ODF y la 

posterior expulsión del mineral, una vez que estos se hayan endurecido (durante 

la espermiogénesis), se convierten en un potencial regulador del gasto energético, 

a través de transformación de la energía en un movimiento vigoroso que desplaza 

a los espermatozoides de forma rápida y progresiva. 

 

24



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Los espermatozoides dependen del mecanismo intra y extraespermático, y 

del epitelio basal epididimal, para expulsar el Zn contenido en su cola. Este 

mecanismo depende de la capacidad de absorción de las células principales del 

epidídimo (Henkel et al., 2003). Adicionalmente al movimiento que se obtiene por 

la expulsión del Zn, este ión aparentemente tiene un papel importante en la 

función y generación del movimiento por las ODF. Esto en humanos está bien 

estudiado, ya que en la medida que se incrementa el contenido de Zn en el 

flagelo, la motilidad disminuye, especialmente la progresiva.  

El contenido de Zn en la cabeza corresponde al 7% del contenido total. 

Este Zn se encuentra en el ADN estabilizando la cromatina (Kvist et al. 1987, 
citado por Henkel et al., 2003; Evenson et al., 1993). Este contenido es cuatro 

veces mayor al contenido en el PS (Bedwal y Bahuguna, 1994). En los procesos 

de meiosis y espermiogénesis el Zn impide daños en la célula, ya que le confiere 

protección y apoya la síntesis de ADN espermático (Molokwu y Li, 2006). 
Durante la espermiogénesis las histonas son reemplazadas por proteínas de 

transición y finalmente por protaminas (Evenson et al., 1999; Evenson, 2005; 
Ardón, 2005). Los “dedos de Zn”, que comprenden la mayor clase de factores de 

transcripción en el genoma, tienen su estabilidad gracias a la presencia de Zn 
(Yamasaki et al., 2007).  

EL Zn ha demostrado su trascendencia en condiciones donde existe 

tensión provocada por otros mecanismos. Este ión desempeña una función 

importante de fortaleza y estabilización que permite que las proteínas cuaternarias 

existentes en el ADN se mantengan intactas (Iyer et al., 1988; De Ambrogi et al., 
2006; Ebert y Altman, 2008). El grado de compactación del ADN espermático    

es seis veces mayor al que muestran las células somáticas (Ardón, 2005;         
De Ambrogi et al., 2006). En esta función el papel que juega el aminoácido 

cisteína contenido en las protaminas es fundamental, ya que ayuda en la unión y 

enlace de la cromatina espermática. En los espermatozoides maduros, las 

nucleoproteínas son pequeñas, y se enriquecen del aminoácido arginina. Estos 

ayudan a la estabilización del ADN a través de la formación de un complejo con 

grupos tioles de las protaminas en colaboración con el Zn, las cuales son 

oxidadas a grupos S-S, y colocadas entre e intra-protaminas durante la 

maduración espermática en el epidídimo (Evenson et al., 1993; Ardón, 2005). 

25



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
Este complejo protamina-ADN, se introduce en el surco principal de la cadena de 

ADN, lo que permite que al empaquetarse de forma lineal y no superenrollada, las 

fibras de cromatina se plieguen y entonces ocurra la inhibición total de la 

transcripción (Rodríguez, 2008). 

Durante la remodelación de la cromatina, existen roturas transitorias en el 

ADN. La aparición de estas roturas, están consideradas como parte de los 

mecanismos normales de organización. La función de las roturas parece ser la 

eliminación del ADN superenrollado. Pero estas roturas son reparadas durante la 

maduración espermática, desapareciendo una vez que las protaminas están 

completas. La organización adecuada del ADN nuclear espermático es 

fundamental para la replicación del mismo (Ardón, 2005). En espermatozoides 

maduros los mecanismos de reparación del ADN suelen ser inexistentes y 

aunque la célula intentara reparar esos daños, dependerá del lugar y grado del 

daño para que exista una reparación favorable y con ello asegurar la viabilidad del 

espermatozoide. La célula confiere su seguridad a mecanismos como la 

compactación del ADN y la capacidad antioxidante que aporta el PS y el ambiente 

en el que está de forma natural la célula (De Ambrogi et al., 2006; Boe-Hansen 
et al., 2008). 

Los aminoácidos cisteína e histidina controlan la liberación de Zn, 

permitiendo que el ADN se desempaquete para ayudar con los mecanismos 

antioxidantes pertinentes, cuando los espermatozoides inician su actividad motriz. 

El Zn controla la actividad del succinato el cual, a su vez controla la actividad 

respiratoria del espermatozoide durante su movimiento (Aonuma et al., 1978). 
Esta actividad respiratoria aumenta la generación de ROS los cuales son 

controlados por el Zn, gracias a su actividad antioxidante (Aonuma et al., 1978; 
Evenson et al., 1993; Xu et al., 2003; De Ambrogi et al., 2006). Asimismo, esta 

actividad antioxidante es apoyada por el efecto antibacteriano que tiene el PS, 

evitando que las bacterias aumenten la producción de ROS (Iguchi et al., 2004). 
La fuente más importante de Zn para el espermatozoide es el PS. Sin embargo, 

los métodos de extracción seminal limitan la función del mismo (Aonuma et al., 
1978). Por otra parte, se ha observado que en la medida que aumenta el Zn en el 

PS, la capacidad de fecundación disminuye por la reducción de la capacitación 

acrosomal. 

 

26



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

2.6.2.5. Efecto del Zn en el desarrollo embrionario 

Una de las características fundamentales con las que se evalúa la calidad 

seminal en cerdos, es la tasa de partos y el tamaño de camada. Sin embargo, las 

técnicas rutinarias de evaluación de la calidad del semen, no incluyen el estado 

de la cromatina e integridad del ADN. Se ha demostrado que tanto la cromatina 

espermática como la integridad del ADN, guardan una estrecha relación con la 

capacidad de fecundación y el desarrollo embrionario (Angelopoulou et al., 
2007; Boe-Hansen et al., 2008). Una correcta descondensación del ADN, 

permitirá la fusión del material genético de las dos células germinales. En los 

últimos años, se ha concedido especial atención a la presencia del Zn, ya que 

inhibe a las enzimas de degradación del ADN. De Ambrogi et al. (2006) 
señalaron la importancia de evaluar la estructura del ADN, debido a que una gran 

cantidad de muestras seminales que son consideradas como adecuadas tan sólo 

por su morfología, membranas celulares y porcentaje de Mot, tienen la posibilidad 

de que tengan daños en el ADN, produciéndose un efecto negativo tras la 

fecundación, en el desarrollo de pronúcleos y posterior desarrollo embrionario 

(Ardón, 2005; De Ambrogi et al., 2006). Esto puede ser explicado porque los 

espermatozoides con daño en ADN y cromatina, son capaces de penetrar los 

ovocitos, pero no de desarrollar el embrión ni iniciar el desarrollo genómico, 

provocando con ello el inicio de la apoptosis celular (Ardón, 2005). Por esta 

razón, los parámetros de calidad seminal no siempre están relacionados con el 

daño del ADN nuclear espermático (Angelopoulou et al., 2007). De Ambrogi    
et al. (2006), observaron que a pesar de que las membranas espermáticas no 

estaban dañadas, la fertilidad y el desarrollo embrionario disminuían. El cigoto 

puede utilizar mecanismos de reparación que pueden corregir parcialmente daños 

existentes después de la fecundación pero, la eficiencia de esos mecanismos 

dependerá de la localización del daño (De Ambrogi et al., 2006; Boe-Hansen    
et al., 2008).  

La fragmentación del ADN puede poner en grave riesgo el desarrollo 

embrionario (Ardón, 2005). Un mecanismo de daño en el ADN es la irradiación 

(Boe-Hansen et al., 2008). Sin embargo, el ADN puede ser liberado de los 

puentes S-S por la presencia de detergentes presentes en el medio de 

conservación, evitando que el espermatozoide llegue al proceso de fecundación 

27



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
con el ADN en condiciones adecuadas para el desarrollo sincrónico de pronúcleos 

(Evenson et al., 1993; Rodriguez, 2008). Matín-Rillo et al. (1996, 1999), 
admiten la posibilidad de que en el semen descongelado se presente una 

descondensación de la cromatina, originando una reducción de la Mot, pérdida de 

la integridad de la membrana plasmática y de la actividad mitocondrial, así como 

un menor desarrollo embrionario en cerdas inseminadas con dichos eyaculados, 

lo que explicaría los bajos resultados obtenidos en fertilidad y en prolificidad 

(Martín-Rillo et al., 1999; Evenson, 2005; Fraser et al., 2006).  

 
2.7. Relación de Zn con otros micronutrientes 

De forma general, los minerales tienen distintas interacciones (Ashmead, 
1993), que pueden interferir o coadyuvar su utilización en el tracto digestivo. Estas 

interacciones pueden ser descritas como: 

a. Interacciones que producen precipitados insolubles. Las sales son por lo 

general solubles en el estómago a pH ácido. Sin embargo, como el pH se 

incrementa en el intestino, la solubilidad se pierde, y el metal tiende a 

unirse a un anión o ligando. Por ejemplo, una compuesto orgánico como el 

ácido fítico o un compuesto inorgánico, como los fosfatos.  

 
b. Existe una competencia entre iones por el mecanismo de transporte activo 

de las células del lumen intestinal, para llegar hacia el citoplasma de las 

células intestinales. Debido a que los iones que se unen a las proteínas 

transportadoras para ser absorbidos pueden tener una competencia físico-

química entre cationes por los sitios activos de las proteínas 

transportadoras (Iguchi et al., 2004; Cousins et al., 2006). 
 

c. Reducción de la capacidad de las células del cuerpo para sintetizar 

proteínas transportadoras (genes transportadores Zip, ZnT, MT). La 

sustitución de un mineral por otro metal en una enzima, por ejemplo, puede 

acelerar o bloquear la actividad de la enzima. 

 
d. Bloqueo por el transporte y la excreción de minerales en las células de la 

mucosa intestinal por procesos patológicos. 

 
 

28



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29



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Un mineral relacionado directamente con la actividad de Zn es el silicio (Si) 

(Emerick y Kayongo-Male, 1990; Evenson et al., 1993). Este micromineral se 

encuentra en fuentes vegetales en grandes cantidades, por lo que un pienso con 

un elevado contenido de fibra suele incrementar el contenido de Si. El estado 

carencial de Zn, provoca un efecto negativo en la cinética de la célula, tanto en la 

proliferación como en la diferenciación celular, debido a que se presenta un 

bloqueo, que impide que las células realicen normalmente sus procesos 

meióticos, impidiendo el desarrollo del siguiente estado de maduración celular. 

Esto se ha asociado con una disminución en la ganancia de peso corporal y el 

tamaño testicular, al igual que existe una reducción del número de células 

haploides y por tanto, del número de espermatozoides producidos (Evenson      
et al., 1993). 

Se ha observado en piensos con bajo nivel de Zn y niveles de Si medios    

o altos, que las células epiteliales del testículo disminuyen la síntesis de ADN. Por 

otra parte si el Si está a bajas concentraciones, tiene un efecto potenciador        

de la actividad metabólica de Zn pero también, puede intervenir favoreciendo         

los excesos, y de esta manera provocar un efecto tóxico mayor (Evenson           
et al., 1993).  

Otro micromineral relacionado estrechamente con Zn es el Cu. En 

procesos donde se presenta un daño celular del epitelio (vitíligo), el nivel de Zn y 

Cu en plasma sanguíneo se encuentran reducidos. En procesos de 

hiperpigmentación, existe evidencia de la presencia de un elevado nivel de Cu, 

debido al consumo de piensos sustancialmente deficientes de Zn (Samuelson   

et al., 1999). El Cu puede impedir que la MT transporte los iones de Zn. Al 

incrementarse la concentración de Zn en el pienso se favorece la producción de 

MT. Este gen es más afín al Cu, pero al encontrar mayor cantidad de Zn, este 

inhibe la unión del Cu con el MT provocando una deficiencia de Cu, y/o un 

desequilibrio Zn:Cu (Smith et al., 1997). Sin embargo, Rojas et al. (1995) 
encontraron que en células del intestino delgado, el Cu no bloquea el ingreso de 

Zn en la célula, probablemente debido a que tienen diferentes rutas de absorción. 

También indican que en cada especie la proporción de MT que es estimulada por 

estos minerales es diferente y la susceptibilidad a ser activada depende de 

factores intrínsecos entre otros la edad y la especie. 

30



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
El Fe y el Ca cuando se encuentran en proporciones altas, también ejercen 

un efecto negativo en la absorción de Zn (Krebs, 2000). 

 
2.8. Efecto de la deficiencia de Zn 

Se han realizado numerosos estudios orientados a encontrar evidencias 

sobre los niveles de Zn que son necesarios para evitar efectos negativos por la 

deficiencia de este mineral. Se sabe que la disminución de Zn en el organismo 

originada por un bajo consumo, es rápidamente detectada a nivel celular. La 

evaluación del contenido plasmático de Zn en las células, es una técnica eficaz 

para determinar de forma inmediata cómo se realiza un proceso de apoptosis 

celular (O`dell, 2000; Maret, 2001).  

El Zn es un citoprotector y evita la apoptosis celular a través del control de 

las caspasas. Por lo tanto, al existir una deficiencia de Zn se puede encontrar 

disminución en el crecimiento, pérdidas de peso, anormalidades del esqueleto, 

anorexia, disfunción inmune, degeneración ocular macular (AMD), alopecia, 

dermatitis, retraso en la cicatrización de heridas, baja líbido y oligospermia 

(Mateos et al., 1998; Samuelson et al., 1999; Molokwu y Li, 2006). La 

deficiencia de Zn, ha sido estudiada por O`dell (2000) con relación a la alteración 

de la membrana plasmática, respecto a cambios en el contenido de lípidos y 

proteínas, así como a la depleción de la actividad enzimática de esta región. 

Además, la capacidad redox de la membrana se pierde debido a la formación de 

grupos -SH, haciendo más pronunciada la inactividad de las enzimas involucradas 

como puede ser la GPx. Por su parte Stohs y Bagchi (1995) estudiaron el efecto 

de la deficiencia de Zn en la producción de H2O2, debido a la inestabilidad que se 

produce en el citocromo P-450, produciéndose daño en las membranas celulares 

del hígado.  

Es probable que daños en piel estén relacionados con la disminución de la 

MT en el desarrollo de tejido conectivo (Fukada et al., 2008) en consecuencia 

una disminución del Zn. En cerdos en crecimiento, se observó que con 40 ppm de 

Zn contenidos en el pienso, sin suplemento y durante un periodo de cinco 

semanas, presentan signos de deficiencia, relacionados con paraqueratosis que 

incluían agrietamiento y endurecimiento de la piel (Edwards y Baker, 1999; 
Underwood y Suttle, 1999). Underwood y Suttle (1999), demostraron que en 

31



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
lechones puede producirse una reducción del tamaño y fuerza del fémur, debido a 

una pobre cantidad de Zn en la leche materna, y al inadecuado consumo de 

pienso sólido, durante la lactación y periodo de destete. 

Iguchi et al. (2004), señalan la relación que tiene una deficiencia de Zn 

con el hipogonadismo, acompañada de la inhibición de la espermatocitogénesis 

por disminución de testosterona (Bedwal y Bahuguna, 1994). El mecanismo que 

puede provocar el hipogonadismo y reducción en el desarrollo de los túbulos 

seminíferos, estaría relacionado con la inhibición de la división celular durante la 

mitosis ocasionada por la deficiencia de Zn (Murakami e Hirano, 2008). En los 

túbulos seminíferos el daño es irreversible, provocando esterilidad (Evenson      

et al., 1993; Bedwal y Bahuguna, 1994). Evenson et al. (1993), señalaron que 

el exceso de Zn en el pienso tiene un efecto negativo en la estructura de la 

cromatina, pero menor al que se presenta en casos de deficiencia. Underwood y 
Suttle (1999), indican pérdida de la líbido en los verracos. 

 
2.9. Efecto tóxico del Zn  

El Zn es potencialmente tóxico por lo que debe mantenerse bajo estricto 

control celular y almacenado en el sitio exacto (Regalla y Lyons, 2005). Algunos 

mecanismos de toxicidad de Zn están relacionados con la sustitución de este ión 

por otros cationes en enzimas no dependientes, inactivándolas. Por ejemplo el 

caso donde el Zn compite con Fe para incluirse dentro de la porfirina a través de 

la ferroquelatasa. El Zn ha mostrado que a nivel mitocondrial produce inhibición 

de los sitios de unión con otros minerales. De cualquier forma, no se puede 

permitir el acúmulo de Zn sin control en el citoplasma (Regalla y Lyons, 2005). 
Para ello, deben producirse la expresión de los genes importadores-exportadores 

(Zip/ZnT), así como de la MT (Chivers, 2007). Los niveles de Zn, provocan un 

mecanismo de señalización hacia los procesos de transcripción que regulan la 

expresión de los genes que controlan a las proteínas transportadoras de Zn 

(Yamasaki et al., 2007; Fukada et al., 2008). El exceso de iones de Zn, se libera 

inducido por la presencia del ZnT-1. Estos mecanismos son tan sensibles que 

pueden detectar concentraciones menores a 10-14 M de Zn. Sin embargo, la célula 

es capaz de adaptarse fácil y rápidamente a los niveles de Zn a los que es 

expuesta (Chivers, 2007). Un lugar de desintoxicación de Zn son las vesículas a 

32



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
las que las proteínas transportadoras de Zn, de la familia de los genes ZnT 
derivan y distribuyen el mineral (Figura 2). 

Según Szabo et al. (2004) los cerdos tienen una alta tolerancia a 

consumos de Zn en exceso. Sin embargo, se ha observado que dependiendo de 

la fuente con la que se realice este exceso se puede presentar con mayor 

facilidad una toxicidad. Un ejemplo de esto es el uso farmacológico de ZnO a 

niveles de 3000 ppm, donde los cerdos nunca presentaron signos de intoxicación 

(Hedemann et al., 2006). Cerdos que han consumido excesos de Zn (>200 ppm), 

suelen incrementar la concentración de este mineral en hígado, riñón y páncreas. 

Sin embargo, en piel, hueso y músculo no se observa un aumento significativo 

(Rojas et al., 1995; Schiavon et al., 2000; Hedemann et al., 2006). El consumo 

de Zn a niveles de 2500 ppm, incrementa la actividad de las enzimas 

pancreáticas (Hedemann et al., 2006). 

Por su parte Evenson et al. (1993), demostraron que un exceso de Zn 
(500 mg Kg-1) en el pienso puede desestabilizar las uniones S-S y los complejos 

de Zn-SH dentro y entre las protaminas, llevando a la desnaturalización de la 

estructura cuaternaria de la cromatina y presentando una mayor desestabilización 

del ADN in situ.  

 
2.10. Requerimientos nutricionales de Zn en verracos 

El Zn tiene propiedades multifuncionales que desempeñan un papel 

fundamental en el crecimiento, desarrollo, inmunidad y en la reproducción, por lo 

que es importante una estimación precisa de las necesidades de este mineral 

diariamente. 

El aporte de minerales en verraco suele ser el mismo que se ofrece a las 

hembras reproductoras, a pesar de las diferencias anatomo-fisiológicas entre 

ellos. También, el uso de fuentes de baja BD es recurrente en la elaboración de 

piensos para verracos, debido al mayor coste por Kg al incluir fuentes con mayor 

biodisponibilidad, a la aparente adaptación y a la gran resistencia que tienen los 

verracos ante un balance inadecuados del mineral. Edwards y Baker (1999) 
señalan que la mejor manera de elegir una fuente de Zn, está en el coste por 

unidad biodisponible del mineral. Pero desafortunadamente hay pocos estudios 

que ofrezcan información necesaria para tomar una buena decisión, por lo que 

33



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
sólo se considera el precio de la fuente utilizada dentro del coste final del pienso 

para verracos. 

Dentro de las necesidades nutricionales del macho reproductor, en el 

momento de elaborar un pienso sólo se toman en cuenta el estado de 

mantenimiento, proporcionando al semental un extra nutricional para reforzar sus 

actividades de ejercicio y monta, debido a que se considera que las condiciones 

de manejo y alojamiento del animal, no generan gastos mayores o necesidades 

superiores a las aportadas por el pienso. Aunque es deseable que durante la vida 

productiva del verraco, éste gane peso (Mateos et al., 1997; Palomo et al., 
1997), existen otras necesidades que deben ser cubiertas como son: la calidad 

del eyaculado, la longevidad del animal, la edad, raza, estado de salud, peso, 

ritmo de trabajo, la calidad y fuente de Zn, el contenido de fitatos, y el sistema de 

alimentación (Marchesi, 2005). De forma rutinaria estas consideraciones no se 

toman en cuenta, y lo que es peor, con frecuencia, se suministra el pienso de 

hembras a los verracos, asumiendo que no hay diferencias, ni efectos adversos 

en el semental. 

La técnica más común y aceptada para estimar las necesidades de 

minerales en cerdos es la utilización de modelos matemáticos. 

Desafortunadamente, no hay suficiente información científica para desarrollar un 

modelo preciso de requerimiento minerales que pondere todos los factores antes 

señalados. Por ello, el NRC (1998) y FEDNA (2006), recomiendan la utilización de 

niveles nutricionales de minerales, obtenidos de estudios relacionados con el 

comportamiento productivo, los cuales no siempre consideran variables 

reproductivas consistentemente importantes en la calidad del eyaculado. Además, 

se asume de forma práctica, que las diferencias nutricionales entre machos no 

castrados y verracos pueden ser pequeñas, pero siempre superiores en los 

verracos, y estos a su vez iguales a las hembras reproductoras, por lo que se 

aumenta el contenido mineral incluyendo el Zn, en el pienso de verracos.  

Los cerdos incluidos en programas de reproducción, deben continuar el 

crecimiento de sus órganos sexuales. Por ello, una práctica común es el 

suministro de Zn en cantidades superiores a las recomendadas para la etapa de 

finalización o cebo (100 ppm), garantizando con ello un adecuado desarrollo 

testicular y de glándulas sexuales (Marchesi, 2005). Sin embargo, esto no 

siempre va acompañado de una redefinición de los contenidos minerales 

34



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 

Fuente: I’nstitut national de la recherche agronomique (INRA), National Research Council (NRC), 
PIC Company; Fundación Española para el Desarrollo de la Nutrición Animal (FEDNA); National 
Swine Nutrition Guide (NSNG). 

restantes, por lo que se puede llegar a tener interacciones negativas entre los 

minerales (NRC, 1998). Por otra parte, con la mejora genética animal, es probable 

que se aumenten las necesidades de Zn (Hernández, 2006). Por esta razón, en 

centros de inseminación se utiliza pienso con niveles de Zn mayores o en su 

defecto se utiliza Zn inyectado. En la Tabla 1, se pueden observar las 

recomendaciones de Zn, que sugieren los organismos internacionales dedicados 

al estudio de los requerimientos nutricionales. 

 
Tabla 1. Necesidades diarias de Zn en verracos adultos. 

Recomendación del nivel de Zn en el pienso de verraco 
 

INRA Feedstuffs Close NRC PIC FEDNA NSNG
1985 1989 2006 1993a 1998 2006 2006 2010 
250 

mg Kg-1 
100 

mg Kg-1 
125 

mg kg-1 
100 

mg Kg-1 
100 

mg Kg -1 
95-140 

ppm 
95-140 

ppm 
165 

 ppm
             
 

 

 
Acorde con la información presentada en la Tabla 1, se elaboran 

comúnmente las premezclas minerales y estas a su vez están calculadas sobre 

un pienso base (PB), el cual es escaso o ausente de contenido mineral 

(Marchesi, 2003). Por ejemplo, para verracos jóvenes (8 a 12 meses de edad) se 

recomienda 100 ppm, con un máximo permitido por día de 150 ppm de Zn 
(Mateos et al., 2005). Además, es interesante recordar que no se tiene en cuenta 

la BD de los ingredientes utilizados para su elaboración (Marchesi, 2003). 
D’Allaire y Leman (1990), Louis et al. (1994b), y Lewis (1997) mencionan que 

del 40 al 60% de los verracos utilizados en monta natural presentan problemas de 

sobrepeso, limitando su actividad reproductiva, siendo la causa de eliminación de 

la explotación. Por esta razón, una práctica rutinaria es la disminución de la 

cantidad de pienso suministrado. La formulación de una premezcla mineral está 

realizada con base a la unidad del pienso (Kg), y no sobre la cantidad de 

minerales por día que el animal debe consumir. Por tanto, si los verracos no 

consumen la cantidad de pienso necesaria, existirá un consumo deficiente de 

minerales, provocando en la mayoría de los casos, deficiencias marginales que no 

son detectados fácilmente, pero que conllevan una disminución en el rendimiento 

del animal (Close y Cole, 2000; García et al., 2007). Close y Cole (2000) 

35



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
señalan que el sistema de alimentación restringido (1 vez día-1, 2 a 3 Kg día-1) al 

que son sometidos los verracos, es potencialmente un mecanismo para producir 

deficiencias de minerales. 

Las empresas dedicadas a la alimentación animal garantizan sus 

resultados utilizando niveles máximos permitidos por la normativa del país 

correspondiente, duplicando los requerimientos nutricionales sugeridos por alguno 

de los organismos oficiales (NRC, 1998), ocasionando además un incremento en 

la excreción de Zn a través de heces y orina (Hernández, 2006). Suponiendo que 

de esta manera no existirán signos de deficiencia en los verracos, se desconoce 

el efecto negativo que puede estar causando esta práctica en la producción y 

calidad del eyaculado. Para el veterinario clínico, la evidencia es que no se 

muestran efectos letales y dada la poca información sobre este tema, se admite 

que no hay efecto negativo en el eyaculado (García y De Loera, 2007). 

Por otra parte, que el Zn sea utilizado en dosis altas (3000 ppm) y muestre 

una baja posibilidad de producir daños tóxicos en los cerdos, no es un referente 

para pensar que en los verracos suceda lo mismo.  No hay que olvidar que el 

verraco produce células espermáticas que son muy sensibles a cambios 

metabólicos, sanitarios y ambientales (Marchesi, 2004; García, 2007).  

Estudios realizados en cerdos en etapas tempranas, ofrecen resultados 

que demuestran los efectos de diferentes fuentes y niveles de Zn. Sin embargo, 

en hembras reproductoras y en verracos sigue habiendo una serie de 

interrogantes que con la información científica existente, aún no son del todo 

claras. Dentro de estas incógnitas están la importancia o repercusión que tiene la 

utilización de los diferentes tipos de fuentes (FO vs FI) en las funciones 

reproductivas del verraco, el nivel óptimo de Zn que requieren los verracos en 

producción, el efecto que tienen los suplementos inyectados y orales aplicados a 

los verracos y cómo repercute este mineral en los distintos parámetros que 

cuantifican el valor de un verraco destinado a la producción de dosis seminales 

para la Inseminación Artificial (IA), como la producción y calidad seminal, 

concentrándose particularmente en cómo actúa el Zn en la célula espermática, 

estimulando la acción y/o participación de genes transportadores (actividad 

epigénica) (García, 2007). En resumen se podría asumir que los requerimientos 

minerales en sementales son complicados de identificar, más que los 

relacionados con los cerdos en cebo, ya que en el caso particular del semental, 

36



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
cada uno presenta un comportamiento diferente y sus eyaculados también son 

distintos (Marchesi, 2003). 

Existen dos métodos básicos para evaluar las necesidades de minerales en 

los cerdos, ambos mediante modelos matemáticos; el primero se basa en la 

cantidad de minerales almacenados en los tejidos (utilizada principalmente en los 

EE.UU.) (Wedekind et al., 1992; Wedekind et al., 1994) y el método de balance 

o digestibilidad (utilizado en países europeos) (Ammerman et al., 1995; Apgar y 
Kornegay, 1996; Hernández, 2006). Cualquiera de ellos establece un proceso 

largo, que dificulta su aplicación, pero que en este momento se hace necesario, si 

se desea conocer más sobre las necesidades nutricionales en verracos. Los 

estudios de nutrición en los verracos, exigen además el uso de información al 

menos de dos ciclos celulares espermáticos completos (≈14 semanas) y realizar 

pruebas en condiciones ambientales distintas, debido a la susceptibilidad que 

tienen los animales ante diferentes situaciones medioambientales, golpes de calor 

o frío y de manejo (Wedekind et al., 1992). 

 Con base a lo anterior, se ha demostrado que bajo condiciones de estrés 

térmico (elevación de temperatura), un aumento de los niveles de Zn en el pienso, 

tres a cuatro veces, incrementa la líbido y la concentración espermática. En 

dichos piensos debe aumentarse la concentración de Ca, ya que es posible la 

formación de quelatos entre Zn y Ca y por tanto, una disminución en la BD de 

ambos minerales (Quiles y Hevia-Méndez, 2002). Los niveles de Zn en el pienso 

entre 23 ppm hasta 100 ppm, no afectan las características de desarrollo e 

integridad del parénquima testicular, la líbido y la producción espermática (Louis 
et al., 1994b; Mateos et al., 1997). Riopérez (1991), Close y Roberts (1991) y 
Close (1993a, b), recomiendan que los cerdos consuman al menos un 20% más 

de Zn, llegando a 120 o 150 ppm de Zn en el PB. Con toda esta información, se 

puede deducir que utilizando un pienso que contenga entre 70 a 150 ppm, no hay 

problemas en el estado físico, producción y calidad seminal del verraco (Close, 
1998). Pero es aquí donde existe un vacío de información, ya que sólo definen 

calidad a través de la evaluación básica del eyaculado. Por otra parte no hay que 

olvidar que la normativa europea sólo permite un pienso con no más de 150 ppm, 

aunque no limita el uso de cantidades similares o superiores con productos 

inyectados o complementos alimenticios aplicados directamente al verraco 

(Mateo et al., 2005). 

37



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

2.11. Fuentes alimenticias de Zn para la elaboración de piensos de 
verraco 

 
2.11.1. Contenido de Zn en los ingredientes del pienso 

Los ingredientes naturales de las raciones para animales domésticos son 

frecuentemente deficientes en varios microminerales y vitaminas (Hortin et al., 
1993; Mateos et al., 1998, 2005). Así, el contenido de Zn en los cereales y otras 

semillas, puede diferir poco entre  variedades y especies, pero el contenido de Zn 

en el suelo donde se cultiva el cereal puede tener un efecto mayor (Revy et al., 

2003). La concentración de Zn en los cereales es de 30 a 40 mg Kg-1 de MS, pero 

varía según la fracción del mismo, ya que la distribución de Zn no es homogénea. 

La parte externa del cereal suele ser más rica que la interna (60-90 mg Kg-1 de 

MS) (Mateos et al., 2005). 

Las fuentes de proteína de origen animal (harina de carne, harina de carne 

y hueso, harina de pescado) son fuente importante de Zn (80-120 mg Kg-1 de MS) 

pero también de otros minerales como el Ca el cual, compite con el Zn, 

reduciendo la absorción de este último (Underwood y Suttle, 1999). 

En piensos que utilizan ingredientes de origen animal se observa un 

aumento de Zn biodisponible (100%) para el animal (Hortin et al., 1993), sin 

embargo, el Zn puede ser limitado por el contenido de fitatos, Ca y/o P. Por ello 

se recomienda utilizar una fuente externa de Zn en el pienso, dependiendo de la 

edad y estado fisiológico del animal (Spears, 1996). Las fuentes de proteína 

como la harina de soja, sésamo, algodón y cacahuete, son siempre más pobres 

en Zn (50 a 70 mg Kg-1 de MS) que las harinas de origen animal, y la BD del 

mineral depende del contenido de fitatos. El hexafosfato inositol y pentafosfato 

(ácido fítico) se unen al Zn y forman un compuesto poco soluble que reduce la 

absorción de este mineral. Los fitatos están presentes en plantas como granos y 

legumbres en concentraciones variadas pero elevadas (Hortin et al., 1993; 
Mateos et al., 1998). El trabajo de Spears (1996) en novillas que consumían un 

PB con 24 ppm Zn, sin aporte externo de Zn, demostró que la ganancia de peso y 

eficiencia alimenticia disminuían en un 7.3 y 8.1% respectivamente, en 

comparación con las novillas que fueron alimentadas con 25 ppm más de Zn a 

38



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
base de Zn-Met ó ZnO, y mejoraron su vida reproductiva, mientras que las 

novillas con el PB, nunca mostraron buenos resultados. 

El agua consumida por los animales suele ser un vehículo de minerales, 

incluido el Zn, el cual llega por lixiviación del suelo, y por el tubo galvanizado 

utilizado en las instalaciones de las granjas porcinas (Mateos et al., 2005).  

 
2.11.2. Fuentes alimenticias de Zn  

Las premezclas minerales que incluyen al Zn, no consideran el contenido 

de los ingredientes utilizados para formular el pienso, y sólo se asume el aporte 

de la premezcla (Hernández, 2006; García, 2007). Para formular las premezclas 

de minerales es importante conocer las necesidades por etapa fisiológica, peso 

del animal y la disponibilidad de los micronutrientes de las fuentes minerales a 

utilizar (Mateos et al., 1998).  

Para la elección de la fuente, la industria alimentaria debe considerar no 

sólo la forma, propiedades físicas (fluidez y almacenamiento) y químicas 

(contenido de Zn), sino el coste de la unidad de Zn biodisponible (Edwards y 
Baker, 1999; García et al., 2007). La BD de un micromineral se define como el 

porcentaje del mismo que es utilizado por el animal. Sin embargo, para determinar 

este valor es necesario tener en cuenta la raza, las características del pienso e 

interacciones entre minerales, así como la calidad de las fuentes y metodologías 

de valoración que se utilizan, ya que pueden modificar los resultados obtenidos. 

Debido a ello, existe una creciente investigación en este sentido, haciendo énfasis 

en la comparación de las fuentes con patrones que reflejen con mayor certeza la 

BD, absorción, metabolismo y almacenamiento del mineral, incorporando el 

control de calidad de las fuentes y la trazabilidad de estas (Mateos et al., 1998; 
2005). 

Las fuentes de Zn que hoy día se utilizan en la industria alimentaria animal 

se pueden dividir en dos grandes grupos, las fuentes orgánicas (FO) y las fuentes 
inorgánicas (FI). 

 
 
 
 

39



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 

2.11.2.1. Fuentes orgánicas 

Dentro de las FO se encuentran los minerales químicamente unidos a un 

agente quelante o ligando (O2, nitrógeno, amino, hidroxilo) el cual es capaz de 

donar un par de electrones para combinar a través de enlaces covalentes un 

metal, formando con ello una estructura de anillo heterocíclico con el metal 

(Spears, 1996). Cuando los ligandos se unen a un ión metálico a través de dos o 

más átomos de donantes, el complejo formado contiene uno o más anillos 

heterocíclicos y es llamado “quelato”. A medida que aumentan los anillos la 

molécula se estabiliza (Acda y Chae, 2002). 

La clasificación de las FO mineralizadas utilizada por la AAFCO (2002), 
define: 

a. Quelatos de aminoácidos con mineral. Es el producto resultante de la 

unión de un ión metálico con uno o máximo tres moléculas de 

aminoácido, unidos a través de enlaces covalentes. El peso molecular 

del quelato no debe exceder de 800 unidades. Un ejemplo de estos 

quelatos es: Metionato de Zn (Zn-Met), Lisinato de Zn (Zn-Lis). 

 
b. Proteinato metálico. Quelatos de una sal soluble, con proteínas 

parcialmente hidrolizadas (Ejemplo: Bioplex Zn®). 

 
c. Complejos polisacáridos. Es el producto de la unión de una sal metálica 

soluble, con una solución de polisacáridos (Spears, 1996; Mateos       

et al., 1998; Mateos et al., 2005; Hernández, 2006). La levadura 

enriquecida con Zn, está incluida en este grupo, y están generando 

interés por su BD y actividad potenciadora del sistema inmunológico. 

 

La forma de acción propuesta de estas fuentes puede ser una ventaja que 

sustenta el uso de ellas, ya que si el quelato tiene una adecuada estabilidad y su 

peso molecular es bajo, el aminoácido utilizado para quelatarlo será resistente a 

la acción de las peptidasas que rompen el enlace peptídico interno, entre los 

aminoácidos o el péptido. Con ello, se favorece la absorción directa del quelato en 

el intestino delgado sin necesidad de un transportador (Cousins, 1996; 
Hernández, 2006). Por otra parte, el contenido de fitatos existente en el tracto 

40



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
digestivo no entra en contacto fácilmente con el Zn ya que este se encuentra 

contenido en el quelato orgánico debido a la protección que le confiere la 

molécula biológica. Cuando el quelato llega al intestino y el pH aumenta, no 

afecta su absorción, ya que suele ser más rápida y los aminoácidos o prótidos 

protegen al ión para que no se una a otros minerales, aumentando así su peso 

molecular y haciéndolo no disponible. Otra vía propuesta es la donación por 

ionización de la mucina, que protege al Zn haciéndolo disponible para ser 

absorbido. Las FO son fácilmente canalizadas hacia los órganos y tejidos que los 

requieren (Spears, 1996; Mateos et al., 2005), se cree que tras la absorción del 

quelato intacto, la disociación de este se realiza directamente en el sitio de acción. 

 
Las FO están asociadas a aminoácidos o pequeñas fracciones peptídicas, 

lo cual explica que tengan mayor BD, y que se encuentren mayores cantidades de 

Zn en la célula con mayor rapidez. Lo anterior puede deberse al hecho de 

encontrar en los aminoácidos S, el cual tiene alta afinidad con el  Zn formando un 

complejo de bajo peso molecular, capaz de traspasar la membrana celular, 

aumentando así los índices de aparición en plasma sanguíneo con mayor rapidez, 

que las FI (Krebs, 2000). Se ha observado que el S de aminoácidos como 

cisteína y ácido glutámico favorece la absorción de Zn (Hortin et al., 1993). 
Además, el uso de FO ha mostrado una disminución en el nivel de inclusión en el 

momento de la formulación, sin afectar la eficiencia productiva de los animales, y 

disminuyendo la excreción de Zn a través de las heces y orina (Spears, 1996; 
Mullan et al., 2002). 

 
Desde la perspectiva del impacto ambiental, la reducción en un 50% de las 

FI incorporadas al pienso, sustituyéndolas por proteinatos de Zn, reduce 

significativamente la excreción del mineral en las heces (506 y 1267 mg Kg-1 de 

MS, en la FO e inorgánica respectivamente), además de obtenerse mayor 

eficiencia en el crecimiento. Hernández (2006) publicó una disminución de Zn del 

41% excretado al sustituir el ZnSO4 por un proteinato (Bioplex Zn®). Hay 

evidencias que señalan que cerdos en crecimiento alimentados con un pienso que 

contenía 100 mg Kg-1 de Zn-Lis o ZnSO4, tienen la misma tasa de absorción a 

nivel de intestino delgado (29.9 y 27.4% respectivamente) y a nivel de colon 

muestran la misma tendencia (28.1 y 24.7% respectivamente) (Cheng et al., 
1998). Los trabajos que han realizado Mavromichalis et al. (2000) y Case y 

41



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
Carlson (2002), señalan que no hay diferencias entre estas fuentes en la tasa de 

retención, por lo que proponen definir el valor de las fuentes en función de su 

efecto productivo. Carlson et al. (2004), utilizaron niveles de 200 y 400 ppm de 

Bioplex Zn® observando que la tasa de retención de Zn era lineal con respecto al 

nivel utilizado. Sin embargo, estas diferencias no fueron registradas entre Bioplex 

Zn® y ZnO, a pesar de que este último fue incorporado a razón de 2000 ppm en 

lechones.  

 
2.11.2.2. Fuentes inorgánicas 

Las FI que se utilizan en la alimentación animal son en forma de sulfatos, 

carbonatos, cloruros y óxidos. Sin embargo, los iones libres son muy reactivos y 

pueden formar complejos con otras moléculas de la ración, dificultando así su 

absorción. Dentro de las fuentes comerciales más utilizadas en la industria 

animal, están el ZnSO4, ZnO y ZnCl (García et al., 2007). El tipo de fuente puede 

ser distinto, así como su origen. Las hay grado alimentario, reactivo y analítico, 

que a pesar de ser similares, un amplio número de muestras presentan valores de 

concentración distintos que generan diferencias de BD del mineral (NRC, 1998; 
Edwards y Baker, 1999; García et al., 2007). Una calificación que se realiza en 

estas fuentes es el grado de BD, la permanencia en el organismo y la tasa de 

excreción. Esta última, es importante para los nuevos y necesarios controles de 

impacto ambiental que se realizan en los piensos, ya que el NRC (1998) indica 

que prácticamente el 50% de Zn consumido en el pienso, es excretado (Edwards 
y Baker, 1999; Close, 2000; Krebs, 2000). 

Es frecuente que las fábricas de pienso prefieran utilizar las sales de óxido, 

ya que son menos reactivas y contienen el doble de concentración mineral, 

comparadas con los sulfatos, los cuales ocupan mayor espacio en la premezcla 

mineral, adicionada al pienso (Mateos et al., 2005). En el caso de la fuente 

carbonatada y oxidada de Zn son relativamente insolubles en soluciones acuosas 

y por tanto se absorben menos. Las fuentes de Zn contenidas en sulfatos y 

acetatos suelen ser mejor valoradas por su mayor BD y absorción (Mateos et al., 
1998; Edwards y Baker, 1999), de acuerdo a los niveles encontrados en plasma 

sanguíneo y la concentración de Zn en los tejidos. 

 

42



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Las FI suelen estar contaminadas con metales pesados. Un estudio 

realizado por Edwards y Baker (1999), observaron que las fuentes de Zn 
inorgánico contenían en el 68% de las muestras metales pesados, tan tóxicos 

como el Pb, arsénico (As) y Cd. Lo que genera una disminución de la calidad de 

la fuente, un bajo rendimiento en los animales, así como un aumento en su 

potencial tóxico. Edwards y Baker (1999) encontraron que el ZnO puede 

contener Pb (0,05%), Fe en forma de óxido (2.5 a 3.3%) o Ca oxidado (1.3 a 4%). 

El ZnO químicamente puro contiene 80.3% de Zn, por lo que estos minerales 

contenidos en un producto grado alimentario podrían ser un factor de disminución 

en la BD. Existen estudios donde el ZnO grado analítico resulta ser más eficiente 

que el ZnO grado alimentario, por lo que el primero se puede comparar al ZnSO4 

grado analítico, pero su coste es mayor (Ammerman et al., 1998a; Edwards y 
Baker 1999). En 1999, Edwards y Baker describieron que las diferencias en la 

BD de las fuentes se debían a su composición química molecular, y al 

procesamiento de la fuente (Krebs, 2000). El ZnO mostró un 34% de BD al 

compararse con ZnSO4·H2O fabricado con una metodología Waelz, mientras que 

al compararlo con la misma fuente pero con grado alimentario tuvo una BD del 

40% (Edwards y Baker, 1999).  

En la Tabla 2, se observan algunas FI y FO frecuentemente utilizadas en la 

alimentación animal, donde su BD está proporcionada en función del mineral 

patrón (100% de BD) utilizado, que en este caso es el ZnSO4·H2O. 

Las fuentes de Zn normalmente son estudiadas en función de la respuesta 

que se obtiene ante su inclusión, en ganancia de peso (Kg), conversión 

alimenticia, producción enzimática, concentración en diversos tejidos y plasma 

sanguíneo. Pero la respuesta según Edwards y Baker (1999) y Wedekind et al. 
(1994), puede variar según la BD de las fuentes, especie y la edad a la que es 

suministrada, así como la metodología con la que se realizan las valoraciones.  

 
 
 
 
 
 
 
 
 

43



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Tabla 2. Biodisponibilidad  (BD) relativa de distintas fuentes de Zn en porcino. 

1Valor relativo a la fuente patrón a la que se le da el 100 %. 
Fuente: Ammerman et al. (1998b); Mateos et al. (2005); NSNG (2010). 
 

La diferencia en BD, que muestran las fuentes, suele estar acompañada de 

un comportamiento metabólico distinto (Rojas et al., 1995), lo cual queda 

demostrado con el estudio de Ward et al. (1996), quienes agregaron 250 mg de 

Zn Kg-1 de pienso como Zn-Met, 300 mg de Zn Kg-1 como polisacáridos de Zn y 

observaron que este nivel equivalía a 2000 mg de Zn Kg-1 de pienso utilizando 

como ZnO en cerdos destetados.  

Rojas et al. (1995), estudiaron el efecto de Zn-Met y ZnO en ovinos, 

observando que se comportaban de forma similar en el intestino, pero una vez 

que se absorbía el Zn, este ión mostró diferencias en el comportamiento 

metabólico, así mismo encontraron que Zn-Lis y ZnSO4 tenían mayor BD, ya que 

la concentración de Zn en el suero sanguíneo se presentaba más rápidamente y 

en mayor concentración que utilizando Zn-Met y ZnO. Edwards y Baker (1999), 
encontraron que la ganancia de peso de cerdos y pollos, utilizando piensos a los 

que se les incluyeron diferentes FI de Zn (ZnO, ZnSO4·7H2O), fue menor al utilizar 

ZnO, señalando que la BD era por tanto distinta. De la misma manera Sandoval 
et al. (1997) mostraron que la BD del ZnO en pollos era de tan solo 54 a 78 % 

con respecto a los valores encontrados para ZnSO4·H2O (81 a 99%). Wedekind y 

Fuente Compuesto Concentración de Zn 
(%) 

%1

Sulfato de Zn ZnSO4 ·H2O 35.5 100 

Sulfato de Zn ZnSO4 ·7H2O 22.3 100 

Carbonato de Zn 

Cloruro de Zn 

ZnC03 

ZnCl2 

56.0 

48.0 

100 

100 

Zn elemental Zn 100.0 130 

Óxido de zinc ZnO 72.0 50-80 

Lisinato de Zn   (Zn-Lis) Zn, aminoácido Variable 95-100

Metionato de Zn  (Zn-Met) 

Complejo Polisacárido-Zn 

Proteinato de Zn 

Zn, aminoácido 

Zn, Polisacárido 

Zn, Proteína 
hidrolizada 

Variable 

Variable 

Variable 

95-100

------ 

100 

44



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
Baker (1990) describieron el efecto del ZnO en pollos, obteniendo 39% menos en 

la ganancia de peso y una reducción del 44% en la concentración del mineral en 

hueso (tibia), con respecto al ZnSO4·H2O. La comparación en cerdos, mostró que 

ZnO tenía solo 68% de BD, con respecto a los valores encontrados con 

ZnSO4·H2O (Wedekind et al., 1994; Edwards y Baker, 1999).  

De forma general se puede señalar que si bien la BD de las FI es diferente, 

también lo son las FO, y cuando los resultados han sido comparados indican que 

hay diferencias en el valor de cada una las fuentes. Pero considerando la 

necesidad de unificar un criterio se sugirió una clasificación de las fuentes con 

base a su BD, con lo cual al ZnSO4 se le dio un valor de 100%, al Zn-Met de 80%, 

ZnO de 74.4%, y al Zn-Lis 46.8%. Estos valores fueron otorgados según el 

contenido de Zn en hueso y plasma sanguíneo (Schell y Kornegay, 1996). Con 

estos resultados se observa que ninguna fuente superó la BD de ZnSO4. Sin 

embargo, Hahn y Baker  (1993), ya habían demostrado que Zn-Met mostraba 

una concentración mayor de Zn en plasma, 1.2 veces más que ZnSO4 y 2.2 veces 

con respecto a ZnO, en lechones de menos de 20 Kg de peso vivo (PV). 

Trabajos en los que se incluyeron piensos sin la adición de alguna fuente 

de Zn (20 ppm) se encontró que los niveles de Zn en los tejidos y plasma 

sanguíneo, son menores a los obtenidos por cualquier fuente incluida en el pienso 

purificado. Rojas et al. (1995), relacionan esto al contenido de fitatos y a la 

cantidad de fibra en el pienso. Por lo tanto, la recomendación es la adición de una 

fuente de Zn en el pienso durante las diferentes etapas de producción (Rojas     

et al., 1995; Krebs, 2000).  

Antes de la década de los 80, dosis mayores a 200 ppm de Zn eran 

consideradas tóxicas en cerdos, debido a un efecto farmacológico del ZnO en 

lechones destetados (Smith et al., 1997; Mateos et al., 1998; Edwards y Baker, 
1999; Hollis et al., 2005), generalizando el uso de esa fuente, en niveles tan altos 

como 3000 ppm. Edwards y Baker (1999), identificaron que niveles de 1000 ppm 

de Zn, incrementan linealmente la concentración del mineral en plasma 

sanguíneo, pero excretan 16 veces más Zn que los cerdos que consumen 150 

ppm (NRC, 1998) y cuando los niveles de 1000 ppm bajan a 100 ppm, la 

excreción disminuye a tan solo 4 veces. Por ello, se afirma que solamente es 

absorbido un 30% de Zn suministrado en piensos con altas concentraciones de 

ZnO. En otro trabajo donde se utilizó el mismo nivel de Zn pero a través de 

45



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
ZnSO4·H2O, la concentración de Zn correspondió al 56% de la mostrada por el 

ZnO. Con lo anterior se concluye que las fuentes no sólo tienen diferente BD, sino 

que son absorbidas y utilizadas de forma distinta. 

En los últimos años se han iniciado estudios a nivel molecular donde        

se identifica al Zn como una estructura epigenética, ya que ha mostrado una 

función activadora y/o reguladora de genes transportadores de este mineral en 

células de prácticamente todo el organismo (hígado, intestino, páncreas, 

testículos) (McMahon y Cousins, 1998). Estudios sobre los mecanismos del 

control ingreso-salida del mineral a nivel celular, han demostrado que las fuentes 

de Zn se comportan de forma distinta. Zn-Lisina produce mayor concentración de 

MT en tejidos como hígado, riñón y páncreas, seguidos de ZnSO4 y Zn-Met 

(Rojas et al., 1995). Estos mismos autores señalan que a pesar de que Zn-Lis y 

Zn-Met son fuentes orgánicas, estas estimulan de forma diferente a la célula para 

que produzca MT (Krebs, 2000). Se observa que la concentración de MT en 

células de tejido hepático, intestinal y pancreático de animales que consumieron 

en el pienso ZnO es baja. Lo anterior demuestra que ZnO no sólo tiene una 

menor BD, sino que tiene un valor biológico pobre. Los valores de MT en esta 

fuente, fueron similares a los que se presentan en animales alimentados con 

piensos libres de fuentes de Zn (Rojas et al., 1995; Krebs, 2000). 

 
2.12. Espermatogénesis 

La espermatogénesis es el proceso mediante el cual se generan las células 

sexuales o espermatozoides. En los mamíferos este proceso genera las únicas 

células que pueden ser expulsadas del organismo para realizar su función 

biológica de unión al ovocito maduro. Se inicia a partir de células germinales 

primordiales. En el caso del verraco el proceso de espermatogénesis inicia 

durante la pubertad, la cual ocurre alrededor de las 12 semanas de edad. A partir 

del inicio de la pubertad, la espermatogénesis se realiza ininterrumpidamente 

(Rodríguez, 2008) en los túbulos seminíferos de los testículos (Figura 5).  

La espermatogénesis es un proceso compuesto de tres fases: 

• Espermatogónica: Fase de proliferación ó mitótica, en la cual, se 

producen espermatocitos primarios, debido a la activación de las 

espermatogonias que inician la meiosis. 

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47



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Finalmente, los espermatozoides se liberan del túbulo seminífero en un 

proceso que se conoce como espermiación regulado por las células de Sertoli. 

Durante la espermiación los espermatozoides son desplazados al borde del lumen 

del túbulo seminífero mediante una compleja cooperación entre filamentos y 

túbulos citoplasmáticos de las células de Sertoli (Rodríguez, 2008; Saavedra, 
2009).  

A partir de este proceso, y dado que la célula espermática está 

transcripcionalmente inactiva, requerirá realizar un cambio conformacional, el cual 

está relacionado con:  

I. Sustitución de las histonas por las protaminas (proteínas nucleares), 

para compactar el material genético y proteger al ADN de daño 

oxidativo, lo cual genera una disminución del volumen nuclear, de 

alrededor del 98%  (una disminución de ≈500 a 10 µm3 ) por la 

pérdida de agua (Fuentes-Mascorro et al., 2000a,b; França et al., 
2005);  
 

II. Desarrollo del paquete enzimático hidrolítico localizado en la parte 

anterior de la cabeza espermática;  

 
III. Formación de las ODF del axonema, para producir Mot  (Figura 6); 

 
IV.  Desarrollo de la membrana plasmática que presenta una polaridad 

extremadamente equilibrada debido a su  bicapa lipoproteínica 

(Saavedra, 2009). 
 

Todas estas acciones deberán ser completadas en el epidídimo, 

produciéndose la maduración del espermatozoide. En el epidídimo el 

espermatozoide cambia las proteínas y lípidos de la membrana plasmática, 

gracias a las secreciones del epitelio epididimal, expulsa la gota citoplásmica (GC) 
y cambia el patrón de movimiento, el cual desde su salida del testículo es débil o 

nulo (Ardón, 2005; França et al., 2005; Sansegundo, 2008).Estos cambios se 

realizan durante el tránsito por la cabeza y cuerpo del epidídimo, para 

posteriormente ser almacenado en la cola del epidídimo, donde se mantiene 

48



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49



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
La cabeza del espermatozoide está formada por el acrosoma y el núcleo, 

ambos rodeados por la membrana plasmática. El acrosoma es una estructura con 

forma de capuchón que cubre los dos primeros tercios de la cabeza del 

espermatozoide y está delimitado por una membrana acrosomal interna y una 

externa que se divide en tres diferentes segmentos (apical, principal y ecuatorial), 

contiene enzimas hidrolíticas tipo acrosina, hialuronidasa, y otras hidrolasas y 

esterasas (Tulsiani et al., 1998).  

Fuentes-Mascorro et al. (2000b), señalan que el núcleo ocupa 

prácticamente todo el espacio de la cabeza y que debido a la forma y volumen del 

núcleo, la cromatina del espermatozoide maduro es refractario a enzimas 

hidrolíticas, tratamientos con tinciones, colorantes o fluorocromos. La cromatina 

espermática está fuertemente empaquetada en una estructura toroidal, con un 

diámetro externo de 900 Å, con 150 Å de diámetro interno y contiene alrededor de 

60 Kb de ADN, unidos unos a otros por algunos tramos de ADN desenrollados. 

Existe evidencia que cuando se presenta una interacción excesiva entre 

protaminas, provocada por la cantidad de puentes o uniones, esto puede   

generar una cromatina altamente estable, difícil de descondensar, y por tanto con 

los consecuentes problemas de retraso o falta de desarrollo del embrión e 

inducción a una muerte temprana del mismo (Fuentes-Mascorro et al., 2000a; 
Madrid-Bury et al., 2005 Fraser y Strzezek, 2007). 

En los verracos, cada ciclo de espermatogénesis dura 8.6 a 9.0 días, el 

transcurso que cubren dentro de epidídimo es de unos 9 a 12 días (3 a 5 días en 

cabeza y 2 días en el cuerpo), pudiendo quedar almacenado de 4 a 7 días en la 

cola, dependiendo de la actividad sexual en el macho (França et al., 2005; 
Sansegundo, 2008). La duración total de la espermatogénesis es de alrededor de 

40 días, como resultado de dos semanas aproximadamente que dura cada una de 

las fases del proceso (França et al., 2005; Rodríguez, 2008). 

La pérdida de células germinales (apoptosis) se produce normalmente 

durante la espermatogénesis, teniendo un papel crítico en la concentración de 

espermatozoides, ya que de cada espermátida que potencialmente puede 

producir 10 células, sólo se generarán 2 o 3. La apoptosis es también frecuente 

durante la meiosis y está probablemente relacionada con daño cromosómico. 

Mientras, el 15% de las células se pierden durante la espermiogénesis, debido 

50



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
probablemente a la capacidad de las células de Sertoli para apoyar la maduración 

celular (França et al., 2005).  

La capacidad que tienen las células de Sertoli para funcionar eficazmente 

está relacionada con la concentración de hormonas con las que se retroalimenta. 

Por ello, cuando existe una deficiencia de Zn y se reduce la actividad de la        

5α-reductasa, se observa que la dihidrotestosterona disminuye la producción de 

testosterona y por tanto, la espermatogénesis también se muestra reducida. 

(Bedwal y Bahuguna, 1994; Leake et al., 1984, citado por Henkel et al., 2003). 

 
2.12.1. Plasma seminal  

El plasma seminal (PS) es definido como el medio líquido en el cual los 

espermatozoides se encuentran inmersos tras la eyaculación. En esencia se trata 

de  una mezcla de las secreciones procedentes de los túbulos seminíferos, el 

epidídimo, y las glándulas accesorias (vesículas seminales, próstata, glándulas 

bulbo-uretrales o de Cowper). Este líquido está caracterizado por ser específico 

de especie y altamente variable entre individuos de la misma especie, así como 

entre eyaculados de  un mismo individuo, pudiendo variar por diferentes procesos 

patológicos, época del año, nutrición y estado fisiológico del animal (Caballero, 
2007). Con base al conocimiento relacionado de los espermatozoides que se han 

extraído del epidídimo, se puede señalar que el PS no resulta de vital importancia 

para la capacidad fecundante de los espermatozoides epididimarios in vitro. Sin 

embargo, el PS tiene funciones de regulación de procesos a  nivel espermático, 

del tracto genital femenino y en la fecundación. Esta función se refiere 

principalmente a la nutrición, protección, regulación de la Mot y capacitación de 

los espermatozoides, reconocimiento y unión entre gametos. 

Para que el PS realice su actividad debe permanecer lo más constante 

posible. Para ello, cada estructura anatómica que participa en la generación de 

este líquido deberá aportar en tiempo y forma su producto. Por ejemplo, las 

vesículas seminales aportan entre el 15 al 25% del volumen del PS, a través de la 

mezcla de fructosa, inositol, ácido cítrico, ergotionina, glicerifosforilcolina y varios 

aminoácidos (taurina, hipotaurina, ácido glutámico, carnitina).  

La próstata por su parte produce alrededor del 55 al 70% del volumen 

plasmático y sus secreciones son alcalinas en donde están inmersos los 

51



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
prostosomas (Piehl et al., 2006), gránulos que tienen como principal 

característica el almacenamiento de Ca, lípidos (colesterol, esfingomielina y 

fosfatidilcolina), pequeñas moléculas de guanidín difosfato (GDP), adenosín 

difosfato (ADP) y adenosín trifosfato (ATP), y una gran cantidad de iones de Ca y 

Zn, enzimas como fosfolipasa A, ATPasa, y peptidasa, de un tamaño entre 21 y 

100 nm. Durante la eyaculación los prostosomas se mezclan con los 

espermatozoides y liberan el Ca al citosol del espermatozoide (Saavedra, 2009).  

Se ha encontrado una relación entre los prostosomas con procesos de 

estabilización de membranas, previniendo la capacitación y reacción acrosómica 

espontánea (Caballero, 2007). Por su parte, el Zn muestra sus propiedades 

estabilizadoras de macromoléculas y su actividad antibacteriana (Strzezek et al., 
1987). Sin embargo, cuando los verracos son sobreutilizados, y la temperatura 

ambiental aumenta como es el caso del verano, el contenido de Zn varía.         

Los verracos sobreutilizados (3 a 4 montas por semana) muestran niveles 

variables de Zn en el PS, dependiendo de la época: Verano, 1.72 mg 100 mL-1 y 

en invierno 2.59 mg 100 mL-1 (Strzezek et al., 2000). En el caso de las glándulas 

bulbo-uretrales, producen la fracción gelatinosa característica de los verracos y 

participa en el volumen del PS con el 2 al 5%. Por su parte el epidídimo aporta 

prostaglandinas, factores descapacitantes como el colesterol (Cross, 1996a, b; 
Bernal, 2006), proteínas de la familia de las espermadhesinas como AQN1 

(Alanina-glutamina-asparagina), AWN1 (alanina-triptófano-asparagina) y PSP 

(proteína del PS porcino). Todo ello permite encontrar un PS con un pH cercano  

a 7 (Caballero, 2007; Sansegundo, 2008). Otras sustancias del PS son las 

enzimas (proteasas, acrosina, nucleasas, fosfatasa ácida y alcalina, SOD), las 

cuales actúan en la licuefacción del semen, la digestión de células espermáticas 

muertas y dañadas, así como en dar protección contra los ROS (Strzezek, 2002; 
Bernal, 2006).  

Entre otros aspectos relacionados con la composición del PS esta su efecto 

en la Mot, observándose que la adición de PS heterólogo puede afectar positiva o 

negativamente la Mot, dependiendo de cuál sea la fuente de PS (Kneuppel et al., 
2000; citado por Caballero, 2007). También suele existir una variación entre las 

diferentes fracciones del PS, ya que se ha observado que la correspondiente a la 

fracción rica (FR) del eyaculado, muestra un apoyo mayor para la obtención de 

mejores tasas de penetración al realizar FIV. Todas estas variaciones pueden ser 

52



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
aumentadas si la actividad de extracción seminal se aplica continuamente, 

provocando disfunciones epididimarias y desequilibrios en la secreción de las 

glándulas sexuales accesorias, afectando la composición de sus fluidos, y el 

desarrollo normal de la célula espermática (Strzezek et al.,1995). 

 
2.13. Calidad seminal y pruebas de valoración 

La evaluación del eyaculado se realiza con el objetivo de disminuir el efecto 

de la calidad seminal sobre los resultados de fertilidad y prolificidad. La calidad 

está relacionada con factores inherentes al macho (raza, edad, genética, salud), 

sistema de obtención y almacenaje del eyaculado (Ardón, 2005; Pérez-Llano    

et al., 2006). Asimismo, las características seminales suelen estar relacionadas 

entre ellas, y pueden cambiar según las condiciones del eyaculado, el tiempo que 

ha transcurrido desde su obtención, evaluación y utilización. El almacenamiento 

del eyaculado es el inicio del cambio de calidad, en indicadores como el pH, Mot, 
grado de contaminación, aglutinación, viabilidad. También suceden cambios en el 

metabolismo energético e IAc y de ADN espermático. Estos cambios se agudizan 

cuando el estado biogenético está alterado, debido a que la calidad inicial es 

fundamental para la conservación de las células, así como por el tipo de 

conservación del eyaculado (refrigerado o congelado). La  calidad inicial tiene que 

ver con características genéticas (mutaciones de genes) y con características 

congénitas (ADN roto, fragmentado, descondensado, alteraciones en acrosoma y 

cola) (Liu y Baker, 1992; Ardón, 2005; Rodríguez, 2008; Boe-Hansen et al., 
2008; López-Fernandez et al., 2008).  

De manera general y de forma comercial las pruebas que son utilizadas 

para valorar la producción y calidad seminal son las que a continuación se 

describen: 

 
2.13.1. Volumen de eyaculado  

Durante la eyaculación el PS y el contenido del epidídimo pasan por la 

uretra y a través de movimientos peristálticos se liberan. La recogida del 

eyaculado según la técnica de Martín-Rillo (1986) debe realizarse de forma 

fraccionada, para evitar el efecto del PS en la actividad metabólica de los 

espermatozoides. De esta manera se obtiene el volumen del eyaculado (Vol), el 

53



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
cual está formado por tres fracciones: preespermática, Fracción Rica (FR) o 

espermática y Fracción Pobre (FP), o postespermática. 

 
2.13.2. Motilidad  

Esta característica se relaciona con la capacidad de los espermatozoides 

de llegar al lugar de la fecundación, atravesando el tracto reproductivo femenino. 

Pero también es fundamental en los procesos de FIV (Ardón, 2005). La 

valoración de la Mot es la primera característica que se observa al microscopio, 

presentando limitaciones en función del método utilizado. En la mayoría de los 

casos la valoración es subjetiva y variable. Aunque en los últimos años se han 

mejorado los protocolos utilizando sistemas automatizados de análisis 

espermático (CASA), arrojando información tan precisa como la velocidad 

individual, morfología de los espermatozoides, amplitud del movimiento, tipo de 

movimiento. Sin embargo, este sistema tiene un elevado coste y requiere de 

estandarización debido a los diferentes sistemas ópticos y software, limitando la 

extrapolación de los resultados de un laboratorio a otro (Malo, 2009). La Mot es 

un indicador de calidad seminal, que se desarrolla durante la estancia de los 

espermatozoides en el epidídimo, en donde los cambios conformacionales de    

las células permiten adquirir al principio, un movimiento débil, circular no 

progresivo, apoyado por el aporte de excreciones epididimarias y cantidades de 

andrógenos que ayudan a este proceso. Al llegar a la cola del mismo, el 

espermatozoide muestra una cola rígida y recta con la que pueda moverse 

rápidamente y dirige linealmente el movimiento. Este movimiento se le denomina 

“motilidad progresiva”. Por ello, es necesario que las propiedades mecánicas de 

las ODF se desarrollen a través de la incorporación de gran cantidad de Zn 

(Hidiroglou y Knipfel, 1984; Henkel et al., 2003). 

La característica de Mot, está relaciona con otros indicadores de calidad, 

capacidad fecundante y de desarrollo embrionario (Sansegundo, 2008). Ardón 
(2005) analizó la relación de la Mot y la cromatina inestable, pero no encontró 

ninguna. Mientras que la integridad de las membranas parece estar 

estrechamente relacionada con una disminución de la Mot, debido al incremento 

de los ROS durante el movimiento, los cuales lipoperoxidan dichas membranas 

incluidas las mitocondriales, produciendo un agotamiento del ATP, que conduce a 

54



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
una fosforilación insuficiente del axonema, provocando además que el ADN 

también se dañe (Sansegundo, 2008; López-Fernández et al., 2008). 

 
2.13.3. Concentración espermática 

La determinación de la concentración espermática es parte del análisis 

básico necesario para la valoración de un eyaculado. La OMS (1999) determinó 

que esta característica era necesaria y que la mejor metodología era la que se 

realizaba con la cámara de Neubauer. Sin embargo, existen otras metodologías 

entre las que se encuentran las que utilizan la cámara de Makler, o Bürker. Otros 

métodos son los que utilizan el NucleoCounter SP-100 y el Spermax, los      

cuales no requieren la observación directa en el microscopio, ni el contaje de las 

células, pero sí una mayor inversión en equipo (Hansen et al., 2006). Aunque   

los resultados de contaje directo con cámara suelen ser precisos, requieren mayor 

tiempo, siendo además necesarios en la mayoría de los casos para estandarizar 

las técnicas implementadas en los laboratorios de inseminación artificial,            

en donde se emplean fotocolorímetros, o sistemas de contaje automatizados 

(Malo, 2009). 

 
2.13.4. Morfoanomalías 

Un eyaculado con un aumento de las morfoanomalías (MA) espermáticas 

es indicativo de una fertilidad disminuida. Por ello, la necesidad de incrementar el 

nivel tecnológico para obtener espermiogramas objetivos de excelente calidad, ha 

derivado en la creación de sofisticados programas computarizados. El análisis 

automatizado de la morfología espermática (Automated Sperm Morphology 

Analysis -ASMA-) determina el tamaño y la forma del espermatozoide de una 

manera objetiva y reproducible, siendo utilizada desde hace algún tiempo de 

manera experimental para determinar las dimensiones individuales de los 

espermatozoides de cerdos, además de hacer posible la separación de los 

espermatozoides de una muestra seminal en subpoblaciones (Quintero-Moreno 
et al., 2009). Sin embargo, la técnica de evaluación más utilizada es la extensión 

de semen teñido sobre portaobjetos y examinándolas por microscopía de campo 

claro.  

 

55



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
Existe una variedad importante de MA relacionadas con daño en cabeza 

(microcabezas, cabezas en forma irregular, cabezas gigantes), y con la cola, en 

donde las gotas citoplásmicas distales (GD) y proximales (GP) son las más 

estudiadas, junto con las colas enrolladas o también llamadas colas en látigo 

(CL).  

La evaluación de las MA indican valores normales que van de 7.3 a 8.8%. 

Sin embargo, estas anormalidades pueden variar, y estar relacionadas a otros 

daños celulares como cromatina inestable. Ardón (2005) en su estudio encontró 

una relación estrecha (r = 0.85) entre las MA y la fragmentación del ADN.  

 
2.13.4.1. Gotas citoplásmicas  

La GC es un indicador de la madurez espermática. Por lo tanto, su 

presencia indica que la capacidad fecundante de los espermatozoides puede 

estar disminuida. Las GC deben ser diferenciadas, y de manera práctica se 

clasifican en GP y GD. Esta clasificación identifica a las células en las que el 

citoplasma residual almacenado en la gota se encuentra más próximo a la pieza 

de conexión y anillo de Jensen (Bedford, 1975, citado por Sansegundo, 2008). 

En particular, las GP son consideradas como las de mayor importancia 

para los resultados de fertilidad y prolificidad. Mozo (2006) recomienda que no 

exceda del 10%. 

López-Fernández et al. (2008) identificaron que la morfoanomalía GP se 

relacionaban con el índice de fragmentación de ADN (IF) y con el estado de 

maduración de las células. También, con el daño de las membranas de los 

espermatozoides, por la mayor cantidad de ROS producidos en el epidídimo, o 

por el estrés oxidativo del mismo espermatozoide al tratar de moverse ya que la 

GC suele disminuir la capacidad de movimiento. 

Por su parte Ardón (2005) evaluó espermatozoides de cerdo y observó 

que la relación entre GC y cromatina inestable estaban relacionadas (r = 0.7). 
Aunque en su trabajo no hizo diferenciación del tipo de GC, los resultados 

mostraron que las GC se presentaban de un 12 a un 25% de espermatozoides, y 

que de ellos el 2.5 al 10.2% contenían cromatina inestable. Por ello, señaló que 

un eyaculado con más de 15% de GC, reduce la fertilidad en los verracos, y 

56



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
seguramente otros espermatozoides del mismo eyaculado presentaran daño en la 

cromatina. 

 
2.13.4.2. Colas dañadas 

La cola espermática formada durante la espermiogénesis, requiere la 

eliminación del Zn para formar las ODF, obteniendo la fortaleza y longitudinalidad 

necesaria para su movimiento. Sin embargo, problemas en la maduración 

epididimaria pueden ser motivo para encontrar colas con poca fortaleza en su 

movimiento, o colas flexionadas, por ello se clasifican como daños secundarios.  

Una vez que son eyaculados, el choque térmico o soluciones hipotónicas, 

pueden inducir la aparición de espermatozoides con CL o en ovillo, falseando los 

resultados de una actividad de maduración inadecuada, por lo que a estas se les 

puede considerar como daños terciarios. 

Las técnicas más utilizadas para la evaluación son la tinción de las células 

a través de un frotis. La ventaja es el gran número de espermatozoides             

que pueden verse y la facilidad con la que se realiza mediante un microscopio    

de campo claro. El valor máximo recomendado en un eyaculado es de 10% 

(Mozo, 2006). 

 
2.13.4.3. Membranas espermáticas 

La membrana espermática es una estructura dinámica que participa en el 

reconocimiento y transporte de moléculas, estas funciones permiten que el 

espermatozoide adapte su metabolismo al medio en que se encuentra, 

proporcionando un sistema molecular para el reconocimiento del ovocito 

(Hammerstedt et al., 1990). Durante la maduración en el epidídimo, existen 

cambios en la membrana a través de la modificación del patrón constituyente de 

proteínas, es decir, se adicionan proteínas epididimales, se pierden o se 

redistribuyen las ya existentes, y se adiciona colesterol a la membrana 

(Sansegundo, 2008). Estas membranas deben ser capaces de proteger a la 

célula, siendo su integridad indispensable. Además, la integridad del citoplasma 

no sólo es fundamental para el metabolismo del espermatozoide, sino que 

también lo es para una adecuada capacitación y reacción del acrosoma y por lo 

tanto, para la fertilidad del macho (Yanagimachi, 1994). 

57



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
 
De forma práctica se realiza un análisis de la reacción acrosomal (AR), 

daño acrosomal (AD), y daño en la membrana mitocondrial (DMM). El daño más 

frecuentemente encontrado en dichas membranas es a través de los ROS los 

cuales, participan en reacciones de sustracción de H+, rotura de uniones, y 

adición de radicales. Los ROS, son capaces de oxidar lípidos de las membranas 

celulares, proteínas y carbohidratos, dañar el ADN y afectar al ácido hialurónico 

produciendo apoptosis celular. A pesar de la susceptibilidad que tienen los 

espermatozoides a los ROS, la actividad de la GPx y SOD, suele ser efectiva. 

Para ello, es necesario contar con suficiente cantidad de Zn (Iyer et al., 1988). El 

daño a las membranas de los espermatozoides pueden estar relacionadas con la 

subfertilidad que muestran algunos machos, y se ha demostrado que contienen 

un ADN dañado, provocando infertilidad (De Ambrogi et al., 2006). Además, el 

tiempo de conservación suele afectar la integridad de las membranas y este es 

común encontrarlo acompañado con un ADN fragmentado (Boe-Hansen et al., 
2005). O´Dell (2000) señala que las membranas celulares cuando tienen una 

disminución de Zn, los grupos -SH se oxidan y se forman grupos S-S, inactivando 

los canales de transporte no sólo de Zn, sino de Ca. Estos grupos S-S pueden 

unirse con una molécula proteínica asociativa (GPx), que en estado normal no lo 

realiza. De ahí que su función esté relacionada con procesos antioxidantes. 

Ardón (2005) evaluó la inestabilidad de la cromatina y su relación con la 

integridad de la membrana acrosomal, encontrando que al estar dañada la 

membrana, suele también estarlo la cromatina. Por su parte, Evenson et al. 
(1999) analizaron semen de humano e identificaron en los espermatozoides 

lesiones poco perceptibles en la cabeza del espermatozoide “puntas de un 

iceberg”, y observaron que aún cuando un número bajo de espermatozoides 

presentaban estas, un porcentaje alto de células tenía alteraciones en los 

cromosomas, relacionados con muerte embrionaria. Por lo tanto, un eyaculado 

con evidencias de daño morfológico, es adecuado considerarlo como candidato a 

ser analizado de forma más exhaustiva (Ardón, 2005).  

 La evaluación de la integridad de la membrana constituye una importante 

información en la evaluación de la fertilidad potencial del macho. La incorporación 

de técnicas de valoración espermática como la prueba hiposmótica 

(HOST«hyposmotic swelling test») permitirían complementar el espermiograma 

58



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
convencional. La integridad de membrana se evalúa como porcentaje de 

espermatozoides que responden a cambios de presión osmótica. El HOST 
(Jeyendran et al., 1984), permite evaluar la funcionalidad de la membrana 

plasmática de los espermatozoides mediante la observación de alteraciones 

morfológicas que sufren las células espermáticas al ser expuestas a condiciones 

hipotónicas (incremento de tamaño y flagelos curvos o en ovillo). Se ha 

observado que la suspensión de espermatozoides en un medio hipotónico 

ocasiona un desequilibrio osmótico entre el medio extra e intracelular, situación 

que el espermatozoide trata de equilibrar difundiendo agua al compartimento 

intracelular y, como consecuencia la célula aumenta su volumen (Bredderman y 
Foote, 1969). 

 La morfología del acrosoma puede ser estudiada por distintas técnicas. 

Pursel et al. (1972), determinaron una clasificación del estado del acrosoma con 

ayuda de un microscopio de contraste de fases observando el borde apical del 

acrosoma. Asimismo, el marcaje del acrosoma realizado a través del uso de 

lectinas unidas a fluorocromos está siendo utilizado con mayor frecuencia. Las 

lectinas más utilizadas son la PSA (Pisum sativum agglutinin) y Con A 

(Concavalina A) combinada con el fluorocromo FITC (isotiocinato de 

fluoresceína), o la lectina SBTI (Trypsin inhibitor from Soybean) combinada con 

biotina. Todas estas lectinas se unen a la enzima acrosina, siendo la intensidad 

de marcaje elevada en los acrosomas intactos (Pinart et al., 2006). 

 
2.13.5. Fragmentación del ADN espermático 

 La determinación del estado en el que se encuentra el ADN, no es una 

técnica que se utilice de manera rutinaria en el control de la calidad seminal en los 

centros de IA porcina. La evaluación del estado del ADN puede facilitar el 

diagnóstico de posibles fallos reproductivos relacionados con el verraco (Liu y 
Baker, 1992; Ardón, 2005; López-Fernández et al., 2008). 

 Es frecuente que los verracos presenten cierto grado de fragmentación de 

ADN espermático, el cual está considerado como normal en función de la 

capacidad que tiene la célula de restablecer aquellos pedazos de ADN que se 

desprenden durante la síntesis del mismo. En un análisis es común encontrar 

eyaculados con 5% de espermatozoides que presentan ADN fragmentado 

59



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
(López-Fernández et al., 2008; Boe-Hansen et al., 2008). Sin embargo, estados 

patológicos, o febriles, golpes de calor y el aumento en la edad, están 

considerados como factores de incremento de esta fragmentación (Ardón, 2005; 
López-Fernández et al., 2008). Con base en esta información Waberski et al. 
(2002), Rybar et al. (2004), Enciso et al. (2006), De Ambrogi et al. (2006) 
López-Fernández et al. (2008) señalan que el eyaculado fresco de verraco 

muestra valores frecuentes de IF de 10%, normales 5%, óptimos 3.3%.Estos 

valores no se relacionan con algún efecto significativo de la capacidad 

reproductiva del verraco, pero un 15% de IF, no debe ser descartado para su uso 

en procesos de producción de dosis seminales para la IA. Aquellos animales que 

muestran IF entre el 15 y 20% son individuos relacionados con claros problemas 

de fertilidad (Boe-Hansen et al., 2008).  

Waberski et al. (2002) y López-Fernández et al. (2008) determinaron la 

frecuencia con la que los verracos presentan este IF, la cual es del 64 al 87.6% de 

lo verracos, y de estos verracos el 75% no llegan al 3% de IF. Sin embargo, 

Vorger (2004, citado por Ardón, 2005) mostró una frecuencia menor (14.5%) en 

la población de verracos que evaluó con daño en ADN, pero los valores de IF 
fueron mayores (9.2%). No obstante esto, existen individuos que pueden llegar a 

presentar en semen recién eyaculado valores de IF del 17% (Waberski et al., 
2002) a los cuales es conveniente analizar de forma rutinaria. 

Ardón (2005) por su parte recomienda que verracos con un aumento 

significativo en la fragmentación de ADN o que el daño persista al evaluar los 

eyaculados, debe ser analizada la conveniencia de mantenerlos en programas de 

reproducción asistida, ya que suelen recaer con mayor frecuencia y con valores 

de IF más altos. La incidencia de daño en ADN de animales que recaen suele ser 

del 50% de la población y el IF puede estar entre el 6.8 y 22% (Volker, 2004, 
citado por Ardón 2005). 

Para evitar una inadecuada interpretación del estado que guarda el ADN 

en los espermatozoides, se deben analizar de inmediato o en su defecto 

almacenarlos con algún medio de conservación. Pérez-Llano et al. (2006) 
demostraron que al mezclar con diluyente para conservar y nutrir a los 

espermatozoides a una temperatura de entre 15ºC y 17ºC, la fragmentación del 

ADN se retrasaba. Sin embargo, la dilución del eyaculado no evita la evolución de 

60



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
daño en el ADN, si los espermatozoides ya lo tienen, como tampoco se evitará la 

generación en otros espermatozoides cuando el tiempo, calidad y tipo de medio 

de conservación no sea el adecuado, la temperatura de conservación, y/o el 

estado sanitario de la muestra sean inapropiados (Boe-Hansen et al., 2008). 
Asimismo, no debe ser olvidada que la raza del macho (64%) y las diferencias 

entre los eyaculados (26.1%) ofrecen variación en los resultados que se 

encuentran en el IF.  

Al evaluar espermatozoides obtenidos de epidídimo se observó que la 

fragmentación del ADN era menor, atribuyendo esto a que la compactación del 

ADN era insuficiente, y que el daño al ADN ocurre probablemente en la última 

fase de maduración epididimal, y durante la eyaculación. De Ambrogi et al. 
(2006), también relacionaron el IF con las células inmaduras encontradas en el 

eyaculado y observo que el IF producía una pérdida de la viabilidad espermática 

(r = 0.85). 

 
2.13.6. Capacidad fecundante de los espermatozoides 

La capacidad fecundante (CF) de los espermatozoides se ha definido como 

la habilidad que tienen estas células para fecundar un ovocito fisiológicamente 

normal y estructuralmente intacto (Yanagimachi, 1994). El método más preciso y 

que mayor información arroja para predecir la CF es el que utiliza la penetración 

de ovocitos en sistemas in vitro (Yanagimachi et al., 1976; Gil et al., 2006). 
Aunque esta prueba no valora fases fundamentales del proceso de penetración 

del ovocito como son el reconocimiento, la unión y la penetración de la zona 

pelúcida. La CF está relacionada con los parámetros de calidad espermática que 

incluyen la Mot, la integridad morfológica de cada una de las partes de la célula 

(acrosomas, ADN y cola), contaminación microbiana del eyaculado y con la 

cantidad de células espermáticas en el medio (Johnson et al., 2000). La 

valoración con la prueba in vitro de los verracos, ofrece algunas limitantes como 

son inconsistencia de los resultados por la evaluación de un reducido número de 

células, la variabilidad por la subjetividad del observador y la correspondiente a 

las muestras seminales, ya que la raza, edad, el nivel nutricional y el tipo de 

almacenamiento y transporte suelen afectar al eyaculado (Graham et al., 1980; 
Saacke, 1984; Evenson y Thompson,  1994; Saacke et al., 1994). A pesar de 

todo ello Martínez et al. (1996) señalan que existe una elevada correlación entre 

61



REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 
las tasas de penetración in vitro y la FIV de los verracos. La FIV puede además 

inducir la producción de embriones in vitro aumentando la difusión genética en 

ganado porcino. Sin embargo, siguen existiendo problemas como la polispermia y 

desarrollo embrionario que requieren mayor estudio (Gil et al., 2010). 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

62



 

   

MATERIAL Y MÉTODOS 



 



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3. MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.1. Diseño de la investigación 

La presente tesis se inició en septiembre de 2007, en la granja porcina “La 

Jabonera”, localizada en el pueblo de Sanchonuño, provincia de Segovia, 

comunidad Castilla y León. Fueron planificados en esta investigación cinco 

experimentos, que permitieron cumplir con los objetivos planteados (Esquema 1). 

 
3.1.1. Material biológico 

Para el primer experimento se utilizaron 35 verracos F1 (Landrace x York), 

con una edad de 8.5 meses y peso inicial (PI) de 145.68 ± 2.99 Kg (media ± 

EEM), CC grado 3. 

En el Experimento 2, se utilizó la FR del eyaculado colectada 

semanalmente.  

 Para la determinación del IF, Experimento 3, se utilizó una muestra de la 

FR (2 mL) obtenida de cada verraco. Inmediatamente después de la extracción 

fue congelada a -20ºC y llevada al laboratorio para su análisis.  

 El Experimento 4, consistió en realizar pruebas de fecundación in vitro 

(FIV), utilizando ovocitos procedentes de ovarios de cerdas prepuberales F1 

(Landrace x Large White), con un peso medio de 90 a 100 Kg, sacrificadas en un 

matadero industrial y transportados al laboratorio en un intervalo de tiempo que no 

superó una hora. Los ovarios fueron almacenados en un recipiente isotérmico a 

38ºC con solución salina, y seleccionados con base a la presencia de folículos 

antrales de 2 a 6 mm de diámetro. Con el fin de partir de muestras homogéneas 

se desecharon todos aquellos que presentaban cuerpos lúteos o algún tipo de 

morfoanomalía macroscópica. Las dosis seminales utilizadas para inseminar a los 

ovocitos correspondieron a los tres mejores verracos de cada tratamiento. 

 Durante el Experimento 5, se realizaron los análisis de espectrofotometría 

de absorción atómica (AEAA). Una vez que fue terminado el periodo de 

extracción seminal, los verracos fueron enviados a matadero, obteniendo los 

testículos y epidídimos, siendo procesados para su análisis. Las muestras de PS 

63



MATER

y SE 

segun

 

 

RIAL Y MÉTOD

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64



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.1.2. Piensos experimentales 

Los ingredientes para la elaboración del pienso fueron aportados por Grupo 

SETNA Nutrición, S.A., el cual formuló y elaboró la premezcla mineral y 

vitamínica. El PB fue fabricado en la planta de piensos NUTECAL localizada en 

Benavente, Comunidad de Castilla León. 

La fórmula del PB se muestra en la Tabla 3. Los requerimientos 

nutricionales utilizados para su formulación fueron los recomendados por el NRC 
(1998) para verracos en producción. En la premezcla mineral no fue incluida 

ninguna fuente de Zn.  

Del PB fue tomada una muestra para realizar un AEAA, determinando en 

ella la concentración de Zn.  

Tabla 3. Ingredientes y valor nutritivo del pienso base (PB) para verracos en 
producción1. 

Ingredientes Inclusión 
(Kg) 

Valor nutricional Composición 

Cebada 47.253 Peso (Kg) 100.000 
Maíz 12.562 Humedad (%) 10.465 
Trigo  10.659 Proteína bruta (%) 17.000 
Cuartas 9/20 5.000 Grasa bruta (%) 4.974 
Melaza 2.000 Ac. Linoleico (%) 1.205 
Soja  (44.0% PC) 20.230 Fibra bruta (%) 4.396 
Fosfato bicálcico 1.06 Calcio (%) 0.75 
Sal  0.5 Sodio (%) 0.177 
DL- Metionina (99%) 0.086 Fósforo total (%) 0.579 
L-Lisina (78%) 0.1 Fósforo Dig.  (%) 0.250 
L-Treonina 0.050 E.M.  Kcal Kg-1 3400 
Premezcla Vit+Min2 0.500 Prot.Dig. (%) 14.325 
TOTAL  100.000 Lis.Dig. (%) 0.850 
  Met.Dig. (%) 0.301 
  Met+Cis Dig. (%) 0.553 
  Treo.Dig. (%) 0.538 

1Contenido de Zn en el PB: 25 ppm Kg-1 de pienso.2Incluye (Kg dieta-1): Vitamina A 
(trans-acetato de retinol), 10.000 UI; Vitamina  D3 (colecalciferol), 2.000 UI; Vitamina 
E (acetato de tocoferol), 25 mg; Tiamina (mononitrato de tiamina), 0.16 mg; 
Riboflavina, 0.781 mg; Piridoxina (HCl-piridoxina), 0.375 mg; Vitamina B12  
(cianocobalamina), 4.0 mg; Vitamina K (bisulfato de menadiona), 0.62 mg; Ácido 
Nicotínico, 4.0 mg; Ácido Pantoténico (D-pantotenato de calcio), 1.9 mg; Colina 
(cloruro de colina, 60%), 21 mg; Ácido Fólico (50%), 1.25 mg; Biotina 2%, 1.6 mg; 
MnO, 14.0 mg; FeSO4·7H2O, 24.0 mg; CuSO4· 5H2O, 5 mg; KI, 0.33 mg; CoCO3, 0.36 
mg; Na2SeO3, 2.5 mg; CaCO3, 0.32 mg. 

 

Las fuentes de Zn utilizadas en los tratamientos se muestran en la Tabla 4. 

La concentración de Zn, con valor alimenticio fue para las fuentes de: 36% en 

ZnSO4·H2O, 72% para el ZnO y, 15% en Metionato de Zn (Zn-Met). 

 

65



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
Tabla 4. Tratamientos según fuente y nivel de Zn. 
Tratamiento Fuente2 Nivel de Zn3  ppm Fórmula3 

Control ----- 25 1 PB 
ZnSO4150 ZnSO4·H2O 150 PB+ ZnSO4·H2O ZnSO4200  200 
ZnO150 ZnO 150 PB +ZnO ZnO200  200 
Zn-Met150 Metionato de 150 PB + Metionato de Zn Zn-Met200 Zn 200 

1 Contenido de Zn en el pienso base (PB): Análisis de espectrofotometría de 
absorción atómica del (AOAC, 2000). 2Todas las fuentes fueron grado alimentario 
con un contenido comercial de Zn de: 36%, ZnSO4·H2O; 72% ZnO; 15% Metionato 
de Zn. 3Se agregó la fuente de Zn al PB para obtener los niveles (ppm) mostrados 
en los tratamientos. 

 

3.1.3. Material de laboratorio 

En las Tablas 5 y 6 se realiza una descripción del material fungible y de 

laboratorio que fueron utilizados en los experimentos realizados. 

 

Tabla 5. Material fungible. 
Material Marca 

comercial 
Material Marca 

comercial 
Aceite de inmersión Olimpus Guantes de látex natural  
Agujas 22G, 21 G Teruno Papel indicador pH 4-10 Merk 
Bolsas con cierre de 
seguridad con bandas 
blancas 

 Parafilm M 100 mm ancho POBEL 

Bandejas de aluminio para 
1, 2, 3 Kg 

 Placas de Petri 35 x 10 mm; 90 
x 14 mm 

Cellstar 

Cubreobjetos 18 x 18 mm; 
15 x 15 mm 

VWR Int. Portaobjetos VWR Int. 

Eppendorf 0.25, 0.5, 1, 2.5 
mL 

Eppendorf Puntas desechables plásticas 
5, 10, 20, 50, 100 y 200 µL 

Gilson 

Filtros Albet 150 mm Filter-Lab Puntas desechables plásticas 
0.5, 1, 5 mL 

Gilson 

Guantes desechables de 
vinilo 

 Rotuladores cristalográficos 
o.4, 1 mm 

 

  Vasos desechables de plástico  

 

 

 

 

 

 

66



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
Tabla 6. Material de laboratorio. 
Material Marca 

comercial 
Material Marca 

comercial 
Agitador de tubos POBEL Gradillas para eppendorf 100 

unidades. POBEL 

Agitador magnético con 
temperatura Dialyzers Gradillas para tubos de ensayo 

70 x 155 x 155 POBEL 

Báscula electrónica 
portátil  Ohaus ±5 mg Gradillas para tubos de ensayo POBEL 

Balanza triple barra 
2600 mg Ohaus Guantes anticalóricos POBEL 

Baño de arena Selecta Imanes POBEL 
Baño maría Selecta Maniquí portátil  
Balanza analítica Mettler AE 200 Maquina selladora,  300 mm POBEL 

Báscula de jaula  Pre-material Matraz Erlenmeyer 100, 250, 
500, 1000 mL POBEL 

Bureta digital 25, 50 mL POBEL Matraz volumétrico 100, 250, 
500 POBEL 

Cajas de poliespán  Micropipetas 5,10,20,100,1000 
µL POBEL 

Cámara de Neubauer Brand Microscopio de contraste de 
fases  

Campana de flujo 
laminar 
Campana de extracción  

 Microscopio estereoscópico 
SMZ-2T 
Nikon 
 

Centrífuga Sorvall RC2-
B Super Speed Pierce Biotechnology Microscopio de fluorescencia 

Leitz DMLB 
Leica 
Microsystems 

Bandejas plásticas 
70x40; 30x20 cm  Mufla 

Controller 
B170 
Nabertherm 

Cinta métrica  Nevera 5ºC  
Contador manual de 
células Clay Adams Nevera a -20ºC  

Crisoles de porcelana 5 
cm diámetro  Pera de goma POBEL 

Dosificador Labmax  
10, 100 mL Witeg Pinzas para vasos 30 cm POBEL 

Desecador de cristal, 40 
cm POBEL Pinzas para crisoles  30 cm 

long. POBEL 

Embudos para análisis  
12, 15 cm  Pipetas de cristal 1, 2, 5, 10 mL POBEL 

Espátulas vibratoria 
acanalada 19 cm 
longitud 

POBEL Probeta 50, 100, 250, 500 mL POBEL 

Espátulas doble 7 ancho 
mm;  200 mm longitud POBEL Reloj avisador digital POBEL 

Espectrofotómetro de 
absorción atómica 
SpectrAA  

Varian,Springvalley Termo  

  Termómetro POBEL 
Estufa 1-200 ºC Selecta Termoplatina Selecta 
Estuches de disección  Aspirador de goma POBEL 
Frasco lavador  tapón 
de rosca POBEL Vaso de precipitado 100, 250, 

500, 1000 POBEL 

Goma antideslizante POBEL Vernier Stainless 
Hardened 

 
 

 

 

67



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.1.4. Productos químicos   

En la Tabla 7, se describen los reactivos utilizados para la evaluación de la 

calidad seminal y en los experimentos de IF y FIV. 

 
3.1.5. Soluciones y medios para el análisis y cultivo celular 

Los medios utilizados para la realización de las diferentes pruebas de 

laboratorio se describen en orden, con base a la realización de los experimentos. 

 

Tabla 7. Reactivos para la realización de pruebas de laboratorio. 
Prueba Casa comercial Prueba Casa comercial 

Determinación de Fragmentación de ADN Medios de fecundación in vitro 
Agua destilada  Agua bidestilada Sigma 
Etanol  Panreac BSA (bovine serum 

albumin) 
 

Kit Sperm-Sus-
Halomax 

ChromaCell,SL. 
Madrid 

BTS  

Yoduro de propidio  Invitrogen, Carlsbad  Cafeína Sigma 
Antifaiding  Cl2Ca-2H2O Sigma 
  KCl  
Determinación de Zn en tejidos, PS y SE* NaCl  
Agua desionizada SETNA Cl2Mg-6H2O  
HCl 37% PANRREAC CO3Hna Sigma 
Solución patrón 1000 
ppm de Zn 

PANRREAC D-L Ácido láctico Sigma 

  Glucosa Sigma 
Evaluación seminal  Hipotaurina Sigma 
Agua destilada  Hoescht-33342 Sigma 
Agua desionizada  Kanamicina  
Agua Milli-Q Millipore KH2PO4 Sigma 
Citrato de sodio  Lacmoid Sigma 
Formol  L-Glutamina Sigma 
Glucosa  Na2HPO4 Sigma 
Isocintao de 
Fluoreceina  

Sigma NaCl Sigma 

KCl Sigma DABCO Sigma 
Lectina PSA  Penicilina G potásica Sigma 
NaHCO3 Sigma Piruvato de sodio Sigma 
Na·EDTA·2H2O Sigma PO4H2K Sigma 
Rosa de bengala  SO4Mg·7H2O Sigma 
  Sulfato de Estreptomicina Sigma 
  Taurina Sigma 
  Tris Sigma 
  Vectashield Vector 

Laboratories, Inc 
*AOAC, 2000.  

 
 

68



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.1.5.1. Diluyente BTS 

 El medio BTS fue realizado en el laboratorio de Reproducción del 

Departamento de Fisiología Animal de la Universidad Complutense de Madrid 

(Tabla 8). El BTS fue utilizado para la dilución de la FR, conservación y transporte 

de las muestras para las pruebas de IF y FIV.  

 
Tabla 8. Diluyente BTS para semen de verraco. 

 
 
 
 

 
 

BTS = Beltville Thawing Solution. Fuente: Pursel y 
Johnson, 1975. 

 
 

3.1.5.2. Solución salina formolada 

Se disolvieron 9 gr de Cloruro sódico en 1000 mL de agua destilada y 3 mL 

Formaldehído. Hasta su utilización, esta solución fue almacenada a temperatura 

ambiente. 

 
3.1.5.3. Solución PSA-FICT 

La lectina Pisum sativum (PSA) fue diluida en agua ultrapura Milli-Q en una 

relación 1:20 con Fluoresceína-5-Isotiocinato (FITC).  

 
3.1.5.4. Solución DABCO 

Un gramo de 1,4-Diazabyciclo-[2.2.2] Octano (DABCO): 
Triethylenediamina, fue mezclado en una solución de glicerol con agua destilada 

en una relación 1/9. 

 

 

 

 

Ingredientes Concentración (mM) 
Glucosa 0,0002 
Na·EDTA·2H2O 3,36 
NaHCO3 20 
KCl 5 

69



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.1.5.5. Medio para la recolección y lavado de ovarios  

El medio utilizado para la recolección de ovarios desde el matadero hasta 

el laboratorio, fue realizado con solución salina (0.9% NaCl) adicionado con 70 µg 

mL-1 de Kanamicina y atemperado a 38ºC. 

La solución salina fue utilizada para lavar los ovarios dos veces, hasta 

seleccionar los folículos adecuados para su punción con una aguja de 18G, 

conectada a una jeringuilla de 10 mL. 

 

3.1.5.6. Medio para lavado de ovocitos 

Los ovocitos fueron lavados con una solución PBSDm (Solución fosfatada 

tamponada de Dulbecco modificada) (Tabla 9) suplementada con BSA (albúmina 

de suero bovino) en el momento de su utilización.  

 
Tabla 9. Composición de la solución PBS*. 
Reactivo Concentración (mM) 
NaCl 136.89 
KCl 2.68 
Na2HPO4 10.14 
KH2PO4 1.76 
  *PBS= Solución fosfatada tamponada. 

 

3.1.5.7. Medio para lavado de espermatozoides 

Los espermatozoides fueron lavados y manipulados con la solución 

PBSDm adicionada con 2 mg mL-1 de BSA. La solución fue filtrada 

posteriormente. 

 
3.1.5.8. Medio de fecundación  

La composición del MF utilizado para la fecundación in vitro se observa en 

la Tabla 10. Previo a su utilización, se agregaba cafeína (2 mM) y 0.2% de BSA, 

a continuación, se incubaba 40 h ajustando el pH a 7.4. Una vez transcurrido este 

periodo de equilibrio, el medio fue filtrado para su utilización. 

 

70



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
Tabla 10. Medio de fecundación (MF). 

Reactivo Concentración (mM) 
NaCl 113.1 
KCl 3.0 
Cl2Ca·2H2O 7.5 
Tris 20 
Glucosa 11 
Piruvato de sodio 5 

 

 
3.1.5.9. Solución de Lacmoid  

Se disolvió 1 g de Lacmoid en 45 mL de agua bidestilada. Se calentó hasta 

el punto de ebullición. Una vez que alcanzó la temperatura ambiente, se fue 

añadiendo ácido acético glacial, hasta una cantidad de 45 mL. Se almacenó en un 

lugar fresco y oscuro.  

Antes de su utilización, se filtraba la cantidad necesaria para la evaluación 

de los ovocitos fecundados. 

 
3.1.5.10. Fluorocromo 

Se mezcla en una relación 1:1 (v/v) el Yoduro de propidio y antifading. 

 
3.1.5.11. Solución de ácido clorhídrico (HCl18.5%) 

En la campana de extracción se mezcló 500 mL de agua desionizada, con 

500 mL de HCl al 37%. Se dejó reposar y se almacenó a temperatura ambiente.  

 
3.2. Instalaciones  

Para cumplir con los objetivos planteados en esta investigación, se utilizó 

una nave cerrada, con ventilación automática para la época de calor. Las jaulas 

para los verracos fueron individuales, con bebedero de chupete, comedero de 

canaleta y sistema automático para el suministro del pienso. Suelo enrejillado 

dispuesto encima de la fosa de deyecciones. 

El área de trabajo para la extracción seminal fue acondicionada dentro de 

la misma nave, en una superficie de 2.5 x 2.5 m. Se dispuso de un maniquí para 

la monta, y una alfombra antideslizante, para facilitar la actividad de los verracos.  

71



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
En la misma granja se acondicionó un laboratorio para realizar los análisis 

de contrastación seminal, y elaboración de las muestras necesarias para los 

experimento 2, 3 y 4. 

El Experimento 2 y parte del Experimento 5 se desarrolló en el laboratorio 

de la Unidad Docente de Zoología (UDZ), Dpto. de Fisiología, de la Facultad de 

Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid. El Experimento 3, fue realizado 

en el Laboratorio de Genética de la Facultad de Ciencias, de la Universidad 

Autónoma de Madrid. El Experimento 4, fue llevado a cabo en el laboratorio de 

Reproducción del Hospital de Enseñanza Veterinaria de la Universidad de Murcia. 

Para la realización del Experimento 5, los verracos fueron sacrificados en el 

matadero frigorífico ESFOSA, Vic, en Barcelona, recuperando los testículos y 

epidídimos. Los análisis de MS, humedad (H) y cenizas (C), de dichos órganos se 

realizaron en el laboratorio de Producción Animal de la Facultad de Veterinaria de 

la Universidad Complutense de Madrid. Todas las muestras del experimento 5 

fueron llevadas al laboratorio de Análisis y Control de Calidad de Materias Primas 

y Piensos del Grupo SETNA Nutrición, S.A. en Madrid.  

 

3.3. Asignación de tratamientos 

Los verracos (repeticiones) fueron aleatoriamente distribuidos en las jaulas 

individuales, donde permanecieron durante todo el periodo experimental. 

Posteriormente y de forma aleatoria a cada cinco verracos, les fue asignado uno 

de los siete tratamientos mostrados en la Tabla 6. 

 
3.3.1. Periodo de adaptación 

Las primeras cuatro semanas fueron utilizadas para la adaptación de los 

verracos tanto a las instalaciones, como a los tratamientos. En este periodo se 

entrenaron los verracos a saltar sobre el potro de recogida. Se utilizó la técnica de 

la mano enguantada descrita por Hancock y Hovell (1959). Los verracos fueron 

considerados aptos para ingresar al periodo experimental cuando mostraron 

buena líbido y regularidad en los saltos (García et al., 1999).  
 

72



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.3.2. Periodo experimental 

 El periodo experimental se prolongo por espacio de 16 semanas. Durante 

dicho periodo, los verracos tuvieron un ritmo de recogidas de un salto semanal. 

Los dos primeros experimentos abarcaron las 16 semanas. El Experimento 3 duró 

14 semanas. El Experimento 4 se desarrollo durante las dos últimas semanas. El 

Experimento 5, se realizó una vez sacrificados los animales. En la Tabla 11, se 

muestra la distribución de los experimentos. 

 
 

Tabla 11. Periodo de experimentación.  
Actividad Experimento Tiempo (Semanas) Animales 
Adaptación  4 35 
 1 16 35 
 2 16 35 
Experimental 3 14 35 
 4 2 21 
 5 -------- 35 

 
 

3.4. Metodología 

 
3.4.1. Sistema de suministro de los tratamientos 

 El pienso fue suministrado diariamente, utilizando un sistema restringido, 

ofreciendo 1.8 a 2.5 Kg día-1 verraco-1, y agua ad libitum.  

 El pienso para cada verraco era pesado diariamente, y la cantidad ajustada 

semanalmente, según fuera el caso. Para ello se consideraba el PV (Kg), y la 

evaluación física de los verracos determinando la CC.  

 
3.4.2. Evaluación del comportamiento productivo del verraco 

Para evaluar el comportamiento productivo del verraco se utilizaron las 

siguientes variables:  

Las variables PV, GPS (ganancia de peso semana-1), PF (peso final) de 

cada verraco fueron obtenidas semanalmente, una vez terminada su eyaculación, 

y pesando cada animal de forma individual con una báscula con jaula. 

73



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74



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75



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.4.2.3. Índice gonadosomático (IG) 

El IG es un indicador de la relación existente entre el crecimiento testicular 

y el crecimiento corporal (PV) en los verracos. Para obtener el valor de IG se 

aplicó la siguiente ecuación: 

 
 

 
 
 

3.4.3. Recogida de semen 

El semen se recogió en dos termos que contenían un vaso desechable, 

cubierto con un filtro. Uno de los termos además era calentado a 37ºC para 

recoger con la FR. El otro, se mantuvo a temperatura ambiente para recoger la 

FP. 

Inmediatamente después de recoger ambas fracciones, se procedió a la 

evaluación del semen.  

 
3.4.3.1. Evaluación básica del semen 

La evaluación de la producción y calidad seminal se realizó a través de las 

siguientes variables: 

Volumen de eyaculado. Los mL de FR y FP fueron medidos a través de 

una probeta graduada. El volumen total (VT) fue obtenido sumando el volumen de 

las dos fracciones. 

Motilidad. El porcentaje de motilidad espermática (Mot, %), se realizó 

depositando una gota de semen en un portaobjetos, cubriéndolo con un cubre 

objetos atemperado a 37ºC. Posteriormente se observó la preparación en un 

microscopio de campo claro a 200x. El porcentaje de espermatozoides con 

movimiento se valoró en una escala de 0 a 100% (Lleó, 2000). 

Calidad de Movimiento (CM): Se calificó utilizando una escala de 0 a 5 

según la técnica descrita por Martín-Rillo et al. (1996) y Lleó (2000). Para esta 

valoración se colocó en un portaobjetos atemperado a 37ºC una gota de FR, 

IG (%) = peso testicular (g) / PV (Kg) 

76



MATERIAL Y MÉTODOS 

seguido de un cubreobjetos, también debidamente atemperado. Se observó en un 

microscopio de campo claro con el objetivo de 20x. La escala de valores se 

muestra en la Tabla 13. 
 

Tabla 13. Calidad de movimiento (CM) de los espermatozoides. 
Calidad de movimiento Valor 
Movimiento progresivo vigoroso muy rápido 5 
Movimiento rápido y progresivo  4 
Movimiento progresivo lento y sinuoso 3 
Movimiento anormal, algunos progresivos 2 
Pocos espermatozoides móviles, con movimiento progresivo, o girando 
sobre sí mismos 

1 

Movimiento inexistentes, espermatozoides inmóviles (necrospermia) 0 

 
 

Concentración espermática: El contaje de células espermáticas se realizó 

utilizando la cámara de Neubauer. Para ello, se mezcló una muestra de FR con 

solución salina formolada, en una relación 1:200, utilizando una pipeta de 

Thomas. Posteriormente se agitó por un periodo de 3 min y se tiraron las tres 

primeras gotas. Una gota fue colocada sobre cada una de las plataformas de la 

cámara e inmediatamente observadas en un microscopio de campo claro, con un 

objetivo de 20x. Los cuadros fueron contados siguiendo la técnica descrita por 

González et al. (2008) y Hansen et al. (2006). 

La concentración fue expresada como número de espermatozoides 

contenidos en un mL de FR (Spz mL-1). 

Para la concentración espermática total (Spz eyaculado-1), se utilizó la 

siguiente ecuación: 

 
 
 

 
 
pH: Se utilizaron tira reactivas con un intervalo de medición de 5 a 10, 

colocando una gota de 10 µL de FR sobre la tira. Unos segundos después se 

observaba el cambio de coloración de la tira y se comparaba con la escala patrón 

de colores que presentaban estas tiras reactivas.  
 
 

Spz eyaculado-1= Spz mL-1 x (FR + FP) 

77



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
  Morfoanomalías (MA): Una muestra de 20 µL de FR fue colocada en un 

porta objetos, posteriormente se añadieron 30 µL de tinción rosa de Bengala. 

Ambas fueron extendidas de forma horizontal y homogéneamente sobre el 

cubreobjetos, dejándola secar a temperatura ambiente.  

 Se valoró el tipo de MA en donde se incluyeron las  CL, GP, y GD. Se 

contaron 200 espermatozoides con un microscopio de campo claro y objetivo de 

20x. Se obtuvo la proporción de cada tipo de MA y se consideró el total de ellas. 

  Evaluación de acrosomas: Para la evaluación de los acrosomas se utilizó 

una muestra diluida de la FR en BTS (3:7 v/v), con una concentración de 5 x 106 

Spz mL-1. Se colocó una muestra de 15 µl en un portaobjetos para realizar un 

frotis, dejando secar, y posteriormente sumergir en etanol puro durante 30 min, 

pasado este tiempo se dejo secar a temperatura ambiente (Risopatrón et al., 
2001; Jiménez et al., 2003). 

De la lectina PSA-FICT fueron tomados 25 µl colocándolos sobre el frotis, 

almacenándolos inmediatamente en una cámara oscura durante 10 min. Para 

retirar el sobrante de PSA-FICT, se aplicó agua destilada directamente en el frotis 

y se procedió al secado a temperatura ambiente. Finalmente se colocó una gota 

de DABCO cubriéndose seguidamente con un cubre objetos, retirando el 

sobrante por absorción con papel de filtro (Sukardi et al., 1997; Cox et al., 1998, 
Risopatrón et al., 2001; Jiménez et al., 2003). 

Las muestras fueron analizadas en un microscopio con un filtro de 480 nm 

con el objetivo de 100x de inmersión. Se contaron 200 células por muestra, 

evaluando las características acrosomales según la clasificación de Nicolaeva et 

al. (1998); Jiménez et al. (2003); Chenoweth (2005):  

Integridad Acrosomal (IAc): Todos los espermatozoides que mantuvieron la 

tinción PSA-FICT, y mostraban una membrana uniforme y completa. 

Acrosoma dañado (AD): Aquellos espermatozoides que mostraron 

deformidad de la membrana manteniendo la tinción PSA-FICT. 

Acrosoma reaccionado (AR): Todos aquellos espermatozoides que perdieron 

la tinción de PSA-FICT.  

 

78



 

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81



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
 Una vez seleccionados los ovocitos se lavaron tres veces en medio 

PBSDm y se transfirieron a placas de Petri (35 x 10 mm) con 2 mL de MF 

previamente atemperado a 39ºC y estabilizado en una estufa con CO2. 

 
3.4.5.3. Fecundación y cocultivo de gametos 

 Se tomaron 50 µL de dilución espermática 1 x 106 Spz mL-1, agregándolos 

a la placa de Petri que contenía una media de 20 a 22 ovocitos. 

 Los gametos fueron coincubados bajo una atmósfera de 5% de CO2 en aire 

a 39ºC, con una humedad del 95 al 100%, durante un periodo de 16 a 18 h. Tras 

la coincubación los ovocitos fueron retirados del MF y se lavaron tres veces en 

medio PBSDm, pipeteando repetidas veces para eliminar los espermatozoides 

adheridos a la zona pelúcida.  

 
3.4.5.4. Tinción y valoración microscópica de la FIV 

Con el fin de evaluar los indicadores de fecundación, los ovocitos 

denudados se colocaron en portaobjetos a modo de microgotas, con líneas de 

vaselina laterales y sobre éste un cubreobjetos que era presionado 

cuidadosamente para evitar la ruptura de los mismos. Se fijaron en una solución 

de ácido acético glacial y etanol puro en una relación 1:3 (v/v) a temperatura 

ambiente durante 72 h. Posteriormente, los ovocitos fueron teñidos con Lacmoid 

al 1% y se examinaron con un microscopio de contraste de fase a 20x y 40x.  

Los indicadores de FIV se evaluaron a las 15 h post-inseminación. Los 

ovocitos degenerados, inmaduros y ovocitos con el oolema roto o con una 

apariencia anormal del citoplasma fueron excluidos de la prueba. Las 

características de cada indicador evaluado se muestran en la Tabla 14. 

 

 

 

 

 

 

82



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
Tabla 14. Variables evaluadas en el análisis de fecundación in vitro (FIV). 
Variable Medida Identificación Ecuación Observaciones 
Ovocitos 
inseminados Número OI  Total de ovocitos 

coincubados 

Ovocitos 
penetrados % OP OP * 100 / total 

de OI  

Ovocito con presencia de 
espermatozoides o cabezas 
con su respectivo flagelo  

Ovocitos 
monospérmicos % OM OM * 100 / OP 

Ovocitos conteniendo sólo 
una cabeza de 
espermatozoide o un 
pronúcleo masculino y los 
dos cuerpos polares  

Espermatozoides 
por ovocito Número EO  

Número de espermatozoides 
en cualquier estadio de 
descondensación por OP 

Eficiencia de 
fecundación % EF % OM * 100 / OI  

Desarrollo de 
pronúcleos % DPn  

Presencia de un pronúcleo 
masculino, estando presente 
su correspondiente flagelo y 
los dos cuerpos polares 

Fuente: Gil et al., 2006. 
 

3.4.6. Determinación de Zn  

 
3.4.6.1. Obtención de muestras para AEAA 

Las muestras utilizadas para la determinación de Zn, fueron obtenidas de 

los testículos y epidídimos, una vez que los verracos fueron sacrificados. En tanto 

que el PS y el SE se obtuvieron de los eyaculados de los verracos utilizados en 

esta investigación. 

 
3.4.6.1.1. Muestras de testículos y epidídimos 

La técnica utilizada para la determinación de MS, H y C, fue la reportada 

por la AOAC (2000).  

 Se tomaron 200 g de tejido testicular para su análisis, mientras que del 

epidídimo se tomo el órgano completo. Posteriormente las muestras se colocaron 

en crisoles de porcelana y sometidas a desecación por 24 h, a temperatura 

constante de 98 a 100ºC. Transcurrido ese tiempo, los crisoles se transfirieron a 

un desecador hasta que su temperatura fue constante. 

Una vez pesados en la balanza analítica, el porcentaje de MS y/o H se 

obtuvo por diferencia.  

83



MATER

Poste

porce

120ºC

de los

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una te

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RIAL Y MÉTOD

 
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84



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3.4.6

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TERIAL Y MÉ

            

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85



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RIAL Y MÉTOD

 
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mL con 

86



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.4.6.2.1.2. Muestras de epidídimo 

La muestra de C del epidídimo fue pesada en cantidades de 0.5 g. El 

procedimiento para la digestión de las muestras fue el mismo que el descrito para 

el testículo. Sin embargo, en este caso el filtrado fue en un matraz volumétrico 

aforado a 100 mL.  

 
3.4.6.2.1.3. Muestras de sedimento espermático (SE) 

El SE seco fue pesado en una balanza analítica y posteriormente colocado 

en un matraz Erlenmeyer de 500 mL. 

La digestión del SE fue realizada con la misma metodología descrita para 

las C de testículo y epidídimo (Ilustración 10).  

La solución restante de la digestión fue filtrada en un matraz volumétrico 

aforado a 100 mL, siguiendo la metodología descrita para el resto de las 

muestras. 

 

 

 

 

 

 

 
Ilustración 10. Digestión de sedimento espermático 
(SE). a. Muestras de SE almacenadas en eppendorf. 
b.SE en HCl18.5%. c. Solución digerida de SE. 

 

 
3.4.6.2.1.4. Muestras de plasma seminal (PS) 

Con una micropipeta se tomó 1 mL de PS depositado en un matraz 

volumétrico aforado a 100 mL, previamente tarado. El matraz con el PS fue 

pesado una vez más en una balanza analítica (Ilustración 11). 

Se agrego agua desionizada al matraz hasta aforarlo a 100 mL, diluyendo 

el PS agitándolo vigorosamente para obtener un solución homogénea.  

a                   b                     c 

87



MATER

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RIAL Y MÉTOD

 
 

 

 

 

 
 

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TERIAL Y MÉ

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ÉTODOS 

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89



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
Durante las16 semanas que duró el experimento se obtuvo el PV y la GPS. 

La dinámica de crecimiento por semana de cada verraco, se obtuvo a través de la 

información de todo el periodo experimental. El PV tomado en la semana 16, se 

considero como el PF de este experimento. 

Tras la eyaculación, los verracos eran examinados físicamente para 

evaluar la CC. Los verracos fueron calificados con base al aspecto físico 

utilizando los valores que se muestran en la Tabla 12. En ningún caso se permitió 

que la CC superara valores de 4 y ni se presentaran verracos con CC menor a 2. 

También fue evaluado el crecimiento morfométrico de ambos testículos, 

siguiendo la metodología descrita anteriormente (sección 3.4.2) y evaluando las 

variables: SCTD, SCTI, SCTT, LTD, LTI. Con esta información se obtuvo la 

dinámica de crecimiento testicular por semana. 

Una vez sacrificados los verracos, se procedió a la disección de los 

órganos sexuales. Fueron identificados los 70 testículos y 70 epidídimo, 

colocados en cajas térmicas de poliespán, para ser transportados al laboratorio de 

Producción Animal de la Universidad Complutense de Madrid. Las variables 

medidas en estos órganos se describen en la sección 3.4.2.2. 

El número de observaciones (n) obtenidas durante las 16 semanas 

evaluadas, fueron 560 para las variables CPD, PV e IE, y 529 de CC. 

 El IG se obtuvo utilizando el PF del verraco y el peso testicular 

diseccionado. Se utilizó la ecuación que se describe en la sección 3.4.2.3. 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

90



 

Esquemaa 2. Repres

 

 
sentación

 
 
 
 
 

n del Expe

MAT

erimento 1

TERIAL Y MÉ

 

ÉTODOS 

91



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.5.2. Experimento 2. Análisis de la dinámica de producción y calidad 

seminal que presentan los verracos, a través del 
espermiograma básico del eyaculado, y de la evaluación de la 
integridad acrosomal 

 
El objetivo de este experimento fue evaluar el efecto de los tratamientos 

que contenían diferente fuente y niveles de Zn, en la producción y calidad del 

eyaculado de verracos. Para ello, se utilizaron las instalaciones de la Granja la 

Jabonera, durante un periodo de 16 semanas, tiempo durante el cual fueron 

recogidos semanalmente los eyaculados de los animales. Cada verraco recibía el 

pienso en un solo suministro. 

Un total de 577 eyaculados fueron evaluados. Las variables se analizaron 

siguiendo la sección 3.4.3. En el laboratorio dispuesto en la granja, se preparaba 

el material para el eyaculado y los medios de conservación para las submuestras 

seminales que posteriormente eran trasladadas al laboratorio de la UDZ. 

El eyaculado de los verracos era almacenado en termos independientes 

para la FR y FP. Ambas fracciones eran medidas con una probeta y se obtenía el 

volumen (mL). La suma de los valores de FR y FP, fue considerada como el VT. 

De la FR se obtuvieron los valores de Mot, CM, pH, Spz mL-1, MA, CL, GP, GD y 

siguiendo las técnicas descritas anteriormente para cada una de estas variables. 

En la séptima semana de experimentación fue iniciado el análisis para 

identificar el estado de los acrosomas. Se utilizó una submuestra que se obtenía a 

través de la mezcla de 3 mL de FR con 7 mL de BTS. Esta submuestra era 

colocada en un tubo de plástico tapado herméticamente, y depositada en una caja 

de poliespán con refrigerantes, para conservarla a 17ºC, así era llevada al 

laboratorio UDZ, en un periodo no mayor a 4 h. Se procedía a realizar el análisis 

del estado acrosomal preparando las muestras según la metodología descrita en 

la sección 3.4.3.1. Se obtuvieron los porcentajes de IAc, AD, y AR de cada 

muestra. 

Con los valores de cada una de las variables se analizó la dinámica que 

presentó durante las 16 semanas que duro este experimento. 

 
 

92



 

Esquemaa 3. Repres

 
 

sentación
 
 
 
 
 
 

 del Exper

MAT

rimento 2

TERIAL Y MÉ

. 

ÉTODOS 

93



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.5.3.  Experimento 3. Evaluación del estado del ADN nuclear 

espermático 

 
El objetivo del Experimento 3 fue evaluar el efecto de la fuente y nivel de 

Zn en el estado que guardaba el ADN espermático. Se utilizaron un total de 416 

muestras de FR. 

Para ello, fueron utilizadas a partir de la semana 6 y durante 14 semanas, 

submuestras de la FR del eyaculado de los 35 verracos del Experimento 2. Los 

análisis fueron realizados en el Laboratorio de Genética de la Facultad de 

Ciencias, de la Universidad Autónoma de Madrid. 

La técnica utilizada para cumplir con este objetivo fue la descrita              

por Lopéz-Fernández et al. (2007, 2008), la cual incluye el uso del Kit        

Sperm-Sus-Halomax® (ChromaCell SL, Madrid, Spain). Con esta técnica se 

obtuvieron los índices de fragmentación del ADN espermático (IF) por semana y 

tratamiento. 

Para ello se tomaban 25 μl de una muestra de FR la cual era diluida con 

PBS, hasta llegar a una concentración de 2 x 106 Spz mL-1, y posteriormente se 

procedía a realizar la metodología descrita en la sección 3.4.4.  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
 

94



Esquemaa 4. Repres

 

 
sentación

 

 

 

 del Exper

MAT

rimento 3

TERIAL Y MÉ

. 

ÉTODOS 

95



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.5.4. Experimento 4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro 

(FIV) de espermatozoides de verracos tratados con diferente 
fuente y nivel de Zn 

 
Para estudiar el efecto de la fuente y nivel de Zn incluido en el pienso de 

los verracos en la capacidad fecundante de los espermatozoides, se realizó un 

experimento con ovocitos de cerda prepúberes en el laboratorio de Reproducción 

del Hospital de Enseñanza Veterinaria de la Universidad de Murcia. Se utilizaron 

14 dosis seminales (2 por tratamiento) y un total de 1160 ovocitos. 

La técnica utilizada fue la descrita por Gil et al. (2006) y modificada por 

Almiñana (2008) la cual esta mencionada en este Capítulo en la sección 3.4.5. 

Este experimento se realizó durante la semana 15 y 16 de eyaculación de los 35 

verracos utilizados en el Experimento 2. Utilizando la información previa (14 

semanas) de la calidad seminal que producían dichos verracos se procedió a 

seleccionar a los tres mejores de cada tratamiento. Lo que permitió elegir 21 

animales, eliminando el efecto individual del verraco, buscando con ello que los 

resultados mostraran la capacidad de penetración de los espermatozoides que les 

debió conferir el tratamiento. 

 Un mL de cada FR fue tomado con una micropipeta, y colocado en el tubo 

plástico estéril con tapa de 20 mL de capacidad, el cual contenía 17 mL de medio 

de conservación BTS. De esta manera se obtuvieron 7 mezclas de FR por 

semana, las cuales correspondieron a una por tratamiento y con ellas se produjo 

cada una de las dosis seminales que fueron utilizadas en un tiempo no mayor a 

10 h en la técnica de FIV. En este experimento fue utilizada una dosis de mezcla 

seminal de cada tratamiento por semana. 

La producción de las dosis seminales fue realizada como se explicó en la 

sección 3.4.5.1. Con ellas se inseminaron los ovocitos seleccionados para este 

experimento. En cada semana se incluyó una media de 88 ovocitos por 

tratamiento, distribuyéndolos aleatoriamente en cuatro cajas de Petri y colocando 

22 ovocitos en cada una de ellas. Fueron evaluadas las variables de FIV que se 

muestran en la Tabla 14. 

 

 

96



Esquemma 5. Rep

 

 

 
presentaci

 
 
 
 
 

ón del Ex

MAT

perimento

TERIAL Y MÉ

o 4. 

ÉTODOS 

97



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.5.5. Experimento 5. Evaluación de la concentración de Zn en tejidos 

(testículos y epidídimos), plasma seminal (PS) y sedimento 
espermático (SE) 

 
En la semana decimo novena se llevaron los verracos al matadero 

frigorífico ESFOSA, Vic, en Barcelona. Se obtuvieron por disección el paquete de 

órganos sexuales de los 35 verracos. Los testículos fueron separados de los 

epidídimos y limpiados de los restos de membranas y tejidos adheridos. 

Para la realización de este experimento se procedió a utilizar la técnica 

oficial de la AOAC (2000). De cada testículo fue tomada una muestra como se 

describió en la sección 3.4.6.1, obteniéndose el porcentaje de MS, H y C que 

contenían cada uno de los 70 testículos y 70 epidídimos de acuerdo con la 

metodología antes descrita (sección 3.4.6.1.1). 

Una vez obtenidas las C, se realizaron las diluciones  según la metodología 

señalada en la sección 3.4.6.2.1.1 y 3.4.6.2.1.2.   

Para la obtención de las muestras de PS y SE, se siguió la metodología 
descrita en la sección 3.4.6.1.2 y 3.4.6.1.3 respectivamente. Un total de 490 

muestras de PS, y 157 de SE se digirieron con base en la metodología que se 

anota en la sección 3.4.6.2.1.3, para el SE y en la sección 3.4.6.2.1.4 para el PS. 

La lectura de espectrofotometría fue realizada con la metodología descrita 

en la sección 3.4.6.2.2. 

Los AEAA permitieron determinar la dinámica que tuvo la concentración de 

Zn en el SE (ZnSE) durante cinco semanas (semana 12 a 16) y de 16 semanas 

para el ZnPS. 

 

 

 

 

 

98



Esquemma 6. Rep

 

 

presentaci

 

ón del Ex

MAT

perimento

TERIAL Y MÉ

o 5. 

ÉTODOS 

99



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
3.6. Análisis estadísticos de los resultados 

 
 Para realizar los análisis de resultados se utilizó el paquete estadístico SAS 
(Statistical Analysis Systems 2003, SAS/ STAT User’s Guide, Release 9.0, Inst. 

Inc, Cary NC, USA). 

El objetivo general de la investigación fue determinar el efecto de la fuente 

y nivel de Zn en la eficiencia reproductiva de verracos. Para ello se probaron 

durante un total de 19 semanas, siete tratamientos los cuales se pueden observar 

en la Tabla 6. Durante estas semanas se desarrollaron cinco experimentos.  

Se utilizaron 35 verracos, considerándolos como unidades experimentales, 

los cuales fueron distribuidos aleatoriamente en las jaulas que se utilizaron para 

alojarlos, posteriormente se asignaron de la misma manera los tratamientos a 

cinco verracos que constituyeron las repeticiones de cada tratamiento.  

Antes de realizar el análisis de la varianza para un modelo de efectos 

mixtos con los modelos propuestos en cada experimento, se probaron las 

estructuras de covarianza de los datos de cada variable: Componentes de 

varianza (VC), Simetría Compuesta (CS), Autoregresiva (AR1) y No estructurada 

(UN), y se seleccionó la mejor de acuerdo a los criterios de información de Akaike 

(AIC) y el criterio Bayesiano de Swarz (BIC) según el valor mínimo obtenido. 

Para probar los supuestos de normalidad y homogeneidad de la varianza 

del modelo, se realizaron las pruebas de Shapiro-Wilks y Bartlett respectivamente. 

Las variables que no cumplieron estos supuestos fueron transformadas a arco 

seno de 1+Y  y logaritmo natural de Y según se distribuyeran los datos como 

una binomial o como un función exponencial, buscando cumplir con las 

suposiciones del modelo mencionadas.  

En el caso de las variables expresadas en escalas débiles o que no 

cumplían las suposiciones de distribución normal de las observaciones se recurrió 

a la estadística no paramétrica, aplicando la prueba de U-Mann-Withney, cuando 

se compararon únicamente dos medias y la prueba de Kruskall-Wallis cuando se 

tenían más de dos medias independientes. 

 

100



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
En el análisis de comparaciones múltiples de medias, utilizando variables 

continuas, se utilizó la prueba de comparaciones múltiples denominada Diferencia 

Honesta Significativa, también conocida como Prueba de Tukey. Así mismo, se 

uso la prueba ajustada de Tukey (Adjusted Tukey, SAS) cuando se compararon 

medias de Mínimos Cuadrados (LSMEANS). Para la comparación de medias en 

variables expresadas como rangos se utilizó una modificación de la prueba de 

Tukey denominada Prueba de Nemenyi.  

Antes de realizar el experimento se establecieron dos niveles de confianza 

(α), considerando como significativa una diferencia entre un par de medias 

cuando el nivel de probabilidad fue de P<0.05 y altamente significativa si fuera 

P<0.01. 

De acuerdo con lo anterior, se procedió a analizar la información obtenida 

en cada uno de los experimentos realizados. 

Los valores de cada variable fueron analizados con un Diseño 

Completamente al Azar (DCA) con medidas repetidas en tiempo, utilizando el 

PROC MIXED de SAS, en el cual el modelo incluyó los efectos fijos del 

tratamiento, tiempo y la interacción tratamiento*tiempo, así como los efectos 

aleatorios de animal y error, con este procedimiento se analizaron las diferencias 

entre verracos a lo largo del periodo de estudio (19 semanas) y entre verracos 

dentro de periodo. También fue incluido el análisis del efecto del nivel y fuente y la 

interacción de los mismos.  

 En particular las variables CC, CL, GP, GD, e IF fueron analizadas 

utilizando la prueba de Kruskall-Wallis, debido a la escala empleada para su 

valoración. 

Para analizar los resultados de FIV se utilizó un análisis de comparaciones 

preplaneadas entre grupos de tratamientos [Comparaciones ortogonales de 

tratamientos o Contrastes ortogonales (C1, C2, C3….C6)]. Para ello, se consideró 

la estructura factorial de tratamientos 3 x 2 (fuentes x niveles) + un testigo, 

estableciendo seis contrastes (C1: Control vs Fuentes de Zinc; C2: Fuentes 

inorgánicas vs Fuente orgánica; C3: ZnSO4·H2O vs ZnO; C4: ZnSO4150 vs 

ZnSO4200; C5: ZnO150 vs ZnO200; C6: Zn-Met150 vs Zn-Met200). 

101



MATERIAL Y MÉTODOS 

 
También se probó el grado de asociación entre las variables morfométricas 

testiculares, y las variables PT, PE, PV, así como entre las variables PT, Spz mL-1 

y VT, y el PE, FP y VT, estimando el coeficiente de correlación (r).  

  Para establecer relaciones causa-efecto se utilizó un modelo de regresión 

lineal múltiple, con el PROC GLM (modelo lineal general) de SAS, estimando los 

coeficientes (β’s) para las variables IF, ZnSE, SpzO, FIV, OM, DPn, Mot, MA e 

IAc. 

En la selección de las variables para ser incluidas en el modelo de 

regresión se utilizó el procedimiento de regresión por pasos (PROC STEPWISE) 
del programa SAS. 

 

102



 

Zn 

RESULTADOS 



 



RESULTADOS 
 
4. RESULTADOS 
 

4.1. Evaluación del comportamiento productivo de los verracos 

Los verracos utilizados para obtención de dosis seminales, deben ser 

cuidadosamente mantenidos durante su estancia en centros de inseminación. En 

una evaluación semanal se considera pertinente analizar el peso corporal inicial 
(PI), ganancia de peso semanal (GPS), o al menos la condición corporal (CC), 
con objeto de detectar la existencia de posibles problemas en los verracos que 

puedan alterar la calidad seminal. Para ello, es necesario considerar el consumo 

de alimento suministrado (CPD) y el ritmo de trabajo (IE) al que son sometidos. 
Los resultados obtenidos de esta evaluación productiva se presentan en la    

Tabla 16. 
 
 
Tabla 16. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de variables 
relacionadas con el comportamiento productivo de verracos alimentados con 
piensos que contenían diferentes fuentes y niveles de Zn.* 

*Comportamiento productivo de verracos (n=35): Peso inicial (PI); peso final (PF); ganancia de 
peso semana-1 (GPS); consumo de pienso día-1 (CPD); condición corporal (CC); intervalo entre 
eyaculados (IE). Periodo de evaluación: 16 semanas. Error estándar (EEM). **Las variables GPS 
y CPD fueron analizadas utilizando como covariable el IE y para PF se utilizó como covariable el 
PI. a,b Medias con distinto superíndice en columna son diferentes (P = F). 
 
 

 

 

Tratamiento   
PI 

 
PF 

      Variables 
GPS**          CPD** 

 
CC* 

 
IE 

 Kg Kg g Kg Grado Día  

Control  142.48 166.87 1.410 2.016a 2.69c 6.36b 

ZnSO4150 142.48 162.63 1.260 1.943ab 2.83bc 7.38a 

ZnSO4200 145.40 168.38 1.680 1.870b 3.09b 6.87ab 

ZnO150 145.64 166.77 1.610 1.850b 3.45a 7.09ab 

ZnO200 149.25 170.86 1.690 1.903b 3.05b 6.76ab 

Zn-Met150 139.70 162.81 1.320 1.910b 2.83bc 6.43ab 

Zn-Met200 140.80 166.71 1.480 1.923b 2.89b 6.25b 

EEM 2.99 3.24 0.260 0.02 0.04 0.22 
Probabilidad (P = F) 0.33 0.63 0.91 0.0001 0.0001 0.001 

103



RESULTADOS 
 

La edad media de los verracos al inicio de la prueba biológica fue de 8.5 

meses. El PI no mostró diferencias (P = 0.33) entre tratamientos. Sin embargo, 

para incrementar la precisión en la evaluación de tratamientos, el PI fue incluido 

como covariable en el modelo estadístico. Las medias de mínimos cuadrados de 

PF no mostraron diferencias entre tratamientos (P = 0.63). El tratamiento 

ZnSO4150 mostró el PF más bajo con 162.63 Kg, siendo ZnO200 el que produjo 

mayor peso (170.68 Kg) en los verracos al finalizar la prueba. 

La GPS no mostró diferencias (P = 0.91) entre tratamientos (Tabla 16), 
aunque se puede observar un mayor valor en los tratamientos que contenían 

como fuente ZnO y en el tratamiento ZnSO4200. El aumento osciló entre 180 a 

400 g de GPS. Por su parte, la evaluación de la interacción Tratamiento*Tiempo, 

no arrojó diferencias dentro de tratamientos (P = 0.23) durante las 16 semanas del 

experimento pero, identifica al ZnSO4150 y al Zn-Met150 como los tratamientos 

con GPS más bajos, siendo el ZnO200 el de mayor ganancia media durante 8 

semanas (Gráfica 1).  

 

 

 
 
 
 
 

Gráfica 1. Peso vivo (PV) por tratamiento durante el periodo evaluado. Las líneas 
representan medias semana-1: Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; ZnO150 X;  
ZnO200 ∗; Zn-Met150 ●; Zn-Met200 +. Error estándar de la media (EEM): PV (EEM, 3.54, 
n=551); CC (EEM, 0.23, n= 551). Probabilidad de la interacción Tratamiento*Tiempo NS. 
(P = 0.23). 
 

130

140

150

160

170

180

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

PV
   
(K
g)

Semana

0

104



RESULTADOS 
 
El CPD en los verracos del tratamiento Control fue mayor (P = 0.0001), con 

respecto al resto de los tratamientos, a excepción del ZnSO4150. Estos dos 

tratamientos fueron los de mayor consumo durante la prueba, al menos 87.5 ± 

26.5 g más por día (media ± DE), mientras que el ZnO150 (1.850 Kg día-1) fue el 

menos consumido, siendo notoria la diferencia (≈166 g día-1) con respecto al 

Control (2.016 Kg día-1) (Tabla 16).  

 Los tratamientos que incluyeron alguna fuente y nivel de Zn fueron 

estadísticamente iguales (P > 0.05), pero numéricamente diferentes entre ellos en 

el CPD, al menos 93 g de pienso día-1. 

 Los verracos tuvieron CPD diferentes durante el periodo evaluado, que 

oscilaron entre 285 a 628 g día-1 (P = 0.0001). El consumo de los verracos de los 

tratamientos Control y ZnO150 durante el periodo evaluado, se mantuvo por 

encima de todos los tratamientos y no mostró diferencias (P > 0.05). 

 La CC observada en los verracos con el sistema de alimentación utilizado 

en este experimento, generó diferencias entre tratamientos (P = 0.0001)       

(Tabla 16). Los verracos del tratamiento Control tuvieron una CC media de 2.69, 

siendo este valor más bajo que los demás tratamientos (ZnSO4200, ZnO150, 

ZnO200 y Zn-Met200). Mientras que el tratamiento ZnO150, mostró el grado de 

CC (3.45) más alto. 

En la Tabla 17, se observa que ningún tratamiento tuvo animales con CC 1 

o/y 5. Además, destaca el hecho que de 529 evaluaciones realizadas de CC 

durante esta etapa, el tratamiento Control con una frecuencia del 6.24%, el 

ZnSO4150 con un 3.02% y el Zn-Met150 con un 3.02% tuvieron mayor número de 

animales con CC 2. El Zn-Met200 registró la mayor frecuencia de animales con 

grado 3 y el tratamiento ZnO150 presentó verracos con grado 4, con una 

frecuencia de 5.1%. Mientras que en el tratamiento ZnSO4150 no se presentó 

ningún animal con grado 4. 

 

 

 

 

105



RESULTADOS 
 

Tabla 17. Efecto de la fuente y nivel de Zn en la condición corporal (CC) y la 
frecuencia de presentación (%) en verracos. 

Tratamiento Frecuencia de presentación del grado de CC tratamiento -1**

 2 3 4             n 

Control 6.24 7.94 0.76 79 
ZnSO4150 3.02 11.15 0.0 75 
ZnSO4 200 0.38 14.56 2.08 90 
ZnO150 0.57 6.24 5.1 63 
ZnO200 0.76 9.64 1.32 62 
Zn-Mer150 3.02 10.78 1.32 80 
Zn-Met200 2.08 12.48 0.57 80 
 
EEM 

 
1.55 

 
1.48 

 
1.56 

 

 
% 

 
16.07 

 
72.78 

 
11.15        

 
100 

n 85 385 59 529 
*Medias de mínimos cuadrados ± error estándar (EEM). Periodo de evaluación: 16 semanas.    
Las medias fueron obtenidas utilizando como covariable el IE. **No existieron valores para           
la condición corporal (CC) con grado 1 y 5. n = Valores de evaluaciones de CC por tratamiento    
(n = ∑ tratamiento-1 grado de CC-1). n = Observaciones por grado de CC-1. 
 

 

En la Gráfica 2, se observa que la mayor variación entre tratamientos en 
relación a la CC ocurrió en las primeras nueve semanas, en las cuales el Control 
y Zn-Met150 tuvieron CC inferiores al grado 3. Caso contrario ocurrió con ZnO150 
ya que, durante 12 semanas se mantuvo con una CC mayor al grado 3.  

 

 

 

 

 

2

3

4

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

C
C

  (
gr

ad
o)

Semana

4

3

2

0

Gráfica 2. Evaluación de la condición corporal (CC) por tratamiento durante el período 
evaluado. Las líneas representan medias semana-1: Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; 
ZnO150 X; ZnO200 ∗; Zn-Met150 ●; Zn-Met200 +. Error estándar de la media (EEM) = 0.23; 
n = 551. Probabilidad de la interacción Tratamiento*Tiempo NS (P = 0.94). 

106



RESULTADOS 
 
El coeficiente de correlación estimado entre las variables GPS y CC, fue 

bajo (r = 0.40; P = 0.0001), indicando que al incrementarse la GPS aumenta la CC 

y que la asociación entre CPD y CC es negativa, pero este coeficiente es bajo     

(r = -0.29). 

Con respecto al IE en la Tabla 16, se muestran las diferencias entre 

tratamientos (P = 0.001), en donde el tratamiento con mayor IE correspondió al 

ZnSO4150 con 7.38 días, siendo diferente al tratamiento Control (6.36 días) y al 

Zn-Met200 (6.25 días). En el resto de tratamientos no se apreciaron diferencias  

(P > 0.001). 

Los resultados de la medición de la región escrotal para obtener el SCTD y 

SCTI, no registraron diferencias significativas entre tratamientos (P = 0.09 y         

P = 0.22 respectivamente) (Tabla 18). La SCTT siguió el mismo comportamiento 

de crecimiento testicular que de forma individual (P = 0.06). Bilateralmente, los 

testículos mostraron mayor desarrollo (≈1.26 a 2.35 cm) con la fuente ZnSO4·H2O 

que al utilizar Zn-Met con ambos niveles de Zn. 

Al evaluar los tratamientos en un mismo punto del tiempo para SCTD y 

SCTI, se apreciaron diferencias (P = 0.0001) (Tabla 18). Sin embargo, la 

interacción Tratamiento * Tiempo sólo mostró diferencias (P = 0.02) para el SCTI 
(Gráfica 3b). Por otra parte, el crecimiento que muestra la SCTD y SCTI en todos 

los tratamientos es similar, a excepción del Zn-Met200. Los testículos de los 

verracos del Zn-Met200 crecieron por debajo de la media general (Gráfica 3a, b). 

El LTD no reflejó diferencias entre tratamientos (P = 0.12). Las diferencias 

entre el tamaño más grande de LTD (ZnSO4200, 24.28 cm) y el más pequeño 

(Zn-Met200, 22.07 cm) fue de 2.21 cm. Es destacable que el LTI de ambos 

tratamientos sí fueron diferentes (P = 0.05) (Tabla 18). El resto de tratamientos no 

mostraron diferencias en ambas características (P > 0.05). Por su parte, el efecto 

tiempo favoreció significativamente el crecimiento longitudinal de la región 

escrotal (LTD, LTI) (P = 0.0001) pero este fue homogéneo durante toda la prueba 

(interacción Tratamiento*Tiempo) por lo que no reveló diferencias en ambas 

variables (LTD, P = 0.21; LTI, P = 0.32) (Gráfica 4).  

 

107



RESULTADOS 
 

Tabla 18. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar del efecto de pienso 
con diferente fuente y nivel de Zn en el tamaño de la región escrotal (testículo + 
epidídimo) de verracos.* 

Tratamiento  Variables 

 SCTD SCTI SCTT LTD LTI PV 
 cm cm cm cm cm Kg 
Control 12.52 12.52 23.33 23.06 23.04ab 154.14
ZnSO4150 12.34 12.33 23.41 22.93 23.46ab 153.37
ZnSO4200 13.07 12.92 24.82 24.28 24.45a 158.04
ZnO150 12.70 12.27 23.55 23.90 23.92ab 159.06
ZnO200 12.18 12.06 23.12 22.46 22.56ab 160.18
Zn-Met150 11.77 11.69 21.90 22.94 23.00ab 151.28
Zn-Met200 10.47 10.8 20.08 22.07 22.44b 153.72

EEM 0.60 0.58 1.02 0.57 0.47 3.12 

 Probabilidad (P = F) 

Tratamiento 0.09 0.22 0.06 0.12 0.05 0.37 
Tiempo  0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001
Tratamiento*Tiempo 0.38 0.02 0.67 0.21 0.32 0.45 

*Valores tomados de la región escrotal in vivo (incluye epidídimo y testículo). Verracos evaluados 
35 (n). Periodo de evaluación: 16 semanas. Evaluaciones variable-1 = 529.Semicircunferencia 
testicular derecha (SCTD); semicircunferencia testicular izquierda (SCTI); semicircunferencia 
testicular total (SCTT); longitud testicular derecha (LTD); longitud testicular izquierda (LTI); peso 
vivo del verraco (PV). a,b Medias con distinto superíndice en columna son diferentes (P < 0.05). 
 

En las Gráficas 4a y 4b, se refleja la longitud de la región escrotal       

(LTD, LTI), medida semanalmente en los tratamientos, observando que               

el comportamiento de ZnSO4200 y Zn-Met200, fue distinto ya que el primero         

a partir de la quinta semana superó a todos los tratamientos, en tanto que            

el segundo se mantuvo por debajo de la media general, durante toda la prueba. 

Las correlaciones realizadas entre las características SCTD y SCTI con      

el PV, muestran que en todos los tratamientos están correlacionadas 

significativamente (P = 0.0001), excepto con el ZnSO4150 y Zn-Met200 (P > 0.05) 

(Tabla 19).  

Los valores de correlación estuvieron en un intervalo de r = 0.32 a r = 0.79, 

siendo los tratamientos con ZnO los que presentaron mayor correlación. 

 

 

 

108



RESULTADOS 

Gráfica 3. Crecimiento de la semicircunferencia (SC) testicular por tratamiento durante el 
periodo evaluado. a. Semicircunferencia testicular derecha (SCTD); b. Semicircunferencia 
testicular izquierda (SCTI); Las líneas representan las medias semana-1: Control ♦; 
ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗; Zn-Met150 ●; Zn-Met200 +. Error 
estándar de la media (EEM): SCTD = 0.65, n = 529; SCTI = 0.63, n = 529. Probabilidad de la 
interacción Tratamiento*Tiempo NS: SCTD (P = 0.38); SCTI (P = 0.02). 
 

 
En el caso de la correlación de SCTT con PV, esta fue significativa        

para todos los tratamientos, y los valores de r tuvieron un intervalo de r = 0.25       

a r = 0.76. El ZnSO4150 y Zn-Met200 fueron los tratamientos en donde la 

correlación resultó más baja y con menor probabilidad (r = 0.35 y r = 0.25;           

P < 0.05). 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

La longitud de ambos testículos (LTD y LTI) está correlacionada con el PV    

(P = 0.0001) (Tabla 19) pero, los valores de r mostrados por los tratamientos 

fueron variables (r = 0.28 a r = 0.73) para cada tratamiento. 

 

7
8
9

10
11
12
13
14
15
16

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

SC
TD

 (c
m

)

a

0

7
8
9

10
11
12
13
14
15
16

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

SC
TI

 (c
m

)

Semana

b

0

109



RESULTADOS 
 
Las medidas morfométricas de testículos y epidídimo se muestran en la 

Tabla 20. En ninguna de las características evaluadas en ambos órganos se 

observaron diferencias (P > 0.05). 

 

 

 

 

Los valores de PTD fueron en promedio inferiores a los de PTI. Los 

tratamientos que registraron el peso más bajo fueron el ZnSO4150 y Zn-Met200. 

Las diferencias de peso entre los tratamientos fueron de ≈50 y 68 g en el testículo 

derecho e izquierdo respectivamente. La longitud testicular (LT) de ambos lados 

no mostró ser distinta estadísticamente (P = 0.93, LTD; P = 0.29, LTI), pero los 

valores numéricos permitieron observar que entre tratamientos había al menos 

0.21 cm en LTD y 1.22 cm en LTI de diferencia. El ancho testicular (AT) (P = 0.23, 

ATD; P = 0.19, ATI) y la circunferencia testicular (CT) (P = 0.81, CTD; P = 0.92, 

CTI) tampoco fueron afectadas de manera distinta por los tratamientos. La 

diferencia más amplia entre los valores de ATD y ATI (≈0.74 cm y 0.69 cm 

19

21

23

25

27

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

LT
D

 (c
m

)

0

a

19

21

23

25

27

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

LT
I (

cm
)

Semana

0

b

Gráfica 4. Crecimiento longitudinal (LT) testicular de verracos durante el periodo evaluado: a. 
Longitud testicular derecha (LTD); b. Longitud testicular izquierda (LTI). Las líneas representan 
medias semana-1: Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗; Zn-Met150 ●;  
Zn-Met200 +. Error estándar de la media (EEM): LTD  = 0.64, n = 529; LTI = 0.53, n = 529. 
Probabilidad de la interacción Tratamiento*Tiempo NS: LTD (P = 0.21); LTI (P = 0.33). 
 

110



RESULTADOS 
respectivamente) correspondieron al ZnSO4200 y Zn-Met200. En cuanto a la CT, 
los valores registraron una diferencia de 0.4 a 1.0 cm, siendo la CT más pequeña 

para el Zn-Met200 con 19.8 cm en la CTD y 20.0 cm en la CTI. 

 
Tabla 19. Valores de correlación entre variables morfométricas testiculares en 
verracos tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn en el pienso. 

 
Tratamiento Variables 

SCTD* SCTI* SCTT* LTD* LTI* PV 
Control SCTD 1.00 0.78 0.89 0.92 0.87 0.47 

SCTI 1.00 0.79 0.84 0.84 0.55 
SCTT 1.00 0.88 0.87 0.48 
LTD 1.00 0.94 0.41 
LTI 1.00 0.28 ** 
PV 1.00 

ZnSO4150 SCTD 1.00 0.87 0.92 0.69 0.83 0.51 
SCTI 1.00 0.92 0.57 0.79 0.21NS 
SCTT 1.00 0.58 0.81 0.35 ** 
LTD 1.00 0.87 0.65 
LTI 1.00 0.57 
PV 1.00 

ZnSO4200 SCTD 1.00 0.80 0.91 0.81 0.75 0.54 
SCTI 1.00 0.91 0.72 0.83 0.47 
SCTT 1.00 0.79 0.90 0.63 
LTD 1.00 0.90 0.63 
LTI 1.00 0.65 
PV 1.00 

ZnO150 SCTD 1.00 0.91 0.90 0.87 0.84 0.58 
SCTI 1.00 0.89 0.85 0.89 0.75 
SCTT 1.00 0.86 0.85 0.62 
LTD 1.00 0.85 0.66 
LTI 1.00 0.73 
PV 1.00 

ZnO200 SCTD 1.00 0.91 0.96 0.86 0.87 0.79 
SCTI 1.00 0.92 0.89 0.82 0.79 
SCTT 1.00 0.90 0.89 0.76 
LTD 1.00 0.93 0.69 
LTI 1.00 0.63 
PV 1.00 

Zn-Met150 SCTD 1.00 0.77 0.91 0.90 0.82 0.34** 
SCTI 1.00 0.86 0.80 0.83 0.41 
SCTT 1.00 0.90 0.89 0.41** 
LTD 1.00 0.93 0.29** 
LTI 1.00 0.27** 
PV 1.00 

Zn-Met200 SCTD 1.00 0.89 0.96 0.83 0.91 0.32** 
SCTI 1.00 0.91 0.70 0.84 0.11 NS 
SCTT 1.00 0.80 0.90 0.25* 
LTD 1.00 0.93 0.51 
LTI 1.00 0.39 
PV 1.00 

Variables: Semicircunferencia testicular derecha (SCTD); semicircunferencia testicular izquierdo 
(SCTI); semicircunferencia testicular total (SCTT); longitud testicular derecho (LTD); longitud 
testicular izquierda (LTI); peso vivo del verraco (PV). *Las correlaciones entre las variables 
SCTD, SCTI, SCTT, LTD, LTI dentro de tratamientos mostraron diferencias altamente 
significativa (P < 0.0001). ** Correlación con probabilidad (P = 0.05). NS (P > 0.05). 

111



RESULTADOS 
 
Tabla 20. Medias de mínimos cuadrados ± errores estándar de medidas 
morfométricas testiculares y epididimales de verracos alimentados con pienso 
con diferente fuente y nivel de Zn.* 
Tratamiento Medidas morfométricas en órganos 
 Testículo Epidídimo
 PTD LTD ATD CTD PTI LTI ATI CTI IG PED PEI
 g cm cm cm g cm cm cm % g g 
Control  311.3 11.2 7.19 20.7 317.4 11.4 7.3 20.8 0.19 81.6 86.0
ZnSO4150 274.8 11.3 7.36 20.3 305.0 11.6 7.4 20.5 0.17 84.6 84.5
ZnSO4200 303.3 11.5 7.58 20.8 336.0 12.4 7.8 20.8 0.19 89.5 91.8
ZnO150 311.3 11.5 7.29 20.7 316.0 12.0 7.6 20.8 0.19 81.2 80.6
ZnO200 321.5 11.2 7.05 20.2 328.2 11.3 7.3 20.4 0.18 82.0 83.2
Zn-Met150 325.0 11.7 7.08 20.8 342.8 11.9 7.4 20.8 0.20 86.6 88.6
Zn-Met200 276.0 11.3 6.84 19.8 314.8 11.7 7.3 20.0 0.18 70.0 74.2

EEM 18.68 0.29 0.19 0.56 22.95 0.36 0.21 0.52 0.014 5.2 5.5 
Probabilidad 
(P = F)** 

 
0.80 

 
0.93 

 
0.23 

 
0.81 

 
0.49 

 
0.29 

 
0.19

 
0.92

 
0.68 

 
0.23 

 
0.39

*Medidas morfométricas obtenidas de testículos y epidídimo de verracos recién sacrificados        
(n = 70). Peso testicular derecho (PTD); longitud testicular derecho (LTD); ancho testicular 
derecho (ATD); circunferencia testicular derecha (CTD); peso testicular izquierdo (PTI); longitud 
testicular izquierdo (LTI); ancho testicular izquierdo (ATI); circunferencia testicular izquierda 
(CTI); índice gonadosómico, peso testicular / peso vivo * 100 (IG); peso epididimario derecho 
(PED); peso epididimario izquierdo (PEI).**Probabilidad NS (P > 0.05). 

 

Con relación al IG no hubo diferencias (P = 0.68) (Tabla 20) entre 

tratamientos, y los valores medios de los tratamientos fueron cercanos. Sin 

embargo, los tratamientos que sobresalieron con valores extremos en IG fueron el 

ZnSO4150 (0.17%) y el Zn-Met150 (0.20%). El primero por haber alcanzado el 

valor menor, y el segundo por obtener el IG más alto en este experimento. 

En cuanto al peso de los epidídimos (Tabla 20), no se encontró diferencias 

estadísticas entre tratamientos en ambos lados (P = 0.23, PED; P = 0.39, PEI). 
Sin embargo, las diferencias numéricas indican que estas oscilan entre 19.5 g y 

17.63 g para PED y PEI respectivamente. Es interesante señalar el efecto que 

ejerció el tratamiento Zn-Met200 sobre el menor peso epididimario, mientras que 

el ZnSO4200 favoreció un mayor peso. 

Con respecto a las correlaciones encontradas entre los pesos de los 

testículos y epidídimos, los tratamientos se comportaron de forma distinta    

(Tabla 21). Los pesos testiculares (PTD y PTI) de los tratamientos ZnSO4200 y 

ZnO150 tuvieron una correlación menor a r = 0.5, mientras que Zn-Met200 refleja 

correlaciones significativamente altas (r = 0.73 a r = 0.88) para PTD y PTI 

112



RESULTADOS 
respectivamente. El comportamiento ejercido al correlacionar los epidídimos (PED 
y PEI) y testículos, demuestra que tuvieron distinta correlación dependiendo del 

tratamiento y no todos fueron significativamente diferentes (P < 0.05). El PED y 

PEI está relacionado (P < 0.05) con el peso de los testículos sólo en los 

tratamientos ZnSO4200, ZnO150 y Zn-Met en ambos niveles. 

El análisis entre el peso del testículo (PT) y epidídimo (PE) con el PF 

determinó que no existe relación significativa (P > 0.05) entre dichas variables 

(Tabla 22).  

 
Tabla 21. Coeficientes de correlaciones (r) entre las variables morfométricas 
testiculares y epididimarías de verracos alimentados con diferente fuente y nivel 
de Zn. 

TRATAMIENTO                                                VARIABLES*  

  PTD PTI (P = F) PED (P = F) PEI (P = F) 
Control PTD 1.00 0.95 (0.01) 0.36 (0.55) 0.38 (0.53) 
 PTI  1.00  0.31 (0.61) 0.40 (0.50) 
 PED    1.00  0.43 (0.52) 
 PEI      1.00  
ZnSO4150 PTD 1.00 0.90 (0.04) 0.60 (0.29) 0.10 (0.87) 
 PTI  1.00  0.54 (0.34) 0.44 (0.45) 
 PED    1.00  0.47 (0.43) 
 PEI      1.00  
ZnSO4200 PTD 1.00 0.27 (0.09) 0.39 (0.04) 0.56 (0.06) 
 PTI  1.00  0.47 (0.05) 0.75 (0.05) 
 PED    1.00  0.97 (0.001) 
 PEI      1.00  
ZnO150 PTD 1.00 0.68 (0.06) 0.48 (0.04) 0.89 (0.04) 
 PTI  1.00  0.39 (0.06) 0.66 (0.05) 
 PED    1.00  0.91 (0.03) 
 PEI      1.00  
ZnO200 PTD 1.00 0.45 (0.95) 0.85 (0.15) 0.83 (0.17) 
 PTI  1.00  0.25 (0.74) 0.02 (0.98) 
 PED    1.00  0.95 (0.05) 
 PEI      1.00  
Zn-Met150 PTD 1.00 0.98 (0.003) 0.79 (0.11) 0.86 (0.05) 
 PTI  1.00  0.79 (0.11) 0.87 (0.05) 
 PED    1.00  0.99 (0.001) 
 PEI      1.00  
Zn-Met200 PTD 1.00 0.93 (0.02) 0.88 (0.04) 0.86 (0.05) 
 PTI  1.00  0.73 (0.05) 0.91 (0.03) 
 PED    1.00  0.82 (0.05) 
 PEI      1.00  

*Variables: Peso testicular derecho (PTD); peso testicular izquierdo (PTI); peso epididimario derecho (PED); 
peso epididimario izquierdo (PEI). **Entre paréntesis (P = F) se muestran los valores α (Probabilidad 
de rechazar Ho). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

113



RESULTADOS 
 
Tabla 22. Coeficientes de correlaciones entre el peso vivo final (Kg) de los 
verracos y el peso testicular y epididimario. 
Tratamiento                                  Variables* 
  PT PE   (P = F) PF** (P = F) 
Control PT 1.00 0.31 (0.36) 0.13 (0.72) 
 PE  1.00 0.16 (0.70) 
 PV   1.00 
ZnSO4150 PT 1.00  0.50 (0.14) 0.40 (0.25) 
 PE  1.00 0.46 (0.17) 
 PV   1.00 
ZnSO4200 PT 1.00 0.53 (0.07) 0.19 (0.55) 
 PE  1.00 0.14 (0.96) 
 PV   1.00 
ZnO150 PT 1.00 0.80 (0.005) 0.61 (0.11) 
 PE  1.00 0.08 (0.84) 
 PV   1.00 
ZnO200 PT 1.00 0.42 (0.49) 0.38 (0.34) 
 PE  1.00 0.45 (0.20) 
 PV   1.00 
Zn-Met150 PT 1.00 0.84  (0.002) 0.20 (0.58) 
 PE  1.00 0.50 (0.13) 
 PV   1.00 
Zn-Met200 PT 1.00 0.90 (0.0005) 0.06 (0.87) 
 PE  1.00 0.41 (0.23) 
 PV   1.00 
*Variables: Peso testicular (PT); peso epididimario (PE), peso final (PF). Entre paréntesis (P = F) se 
muestran los valores α (Probabilidad de rechazar Ho). 

 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

114



RESULTADOS 
 

4.2. Análisis de la dinámica de producción y calidad seminal que 
presentan los verracos, a través del espermiograma básico del 
eyaculado y de la evaluación de la integridad acrosomal 

 
 La producción y calidad del eyaculado se muestra en la Tabla 23. En ella 

se registran sus valores medios por tratamiento, la diferencia de los efectos 

principales y su interacción. Las variables FR, FP, VT, Mot, CM, pH y MA no 

fueron diferentes (P > 0.05), pero la Spz mL-1 si mostró efecto de los tratamientos 

aplicados (P = 0.02). 

 
Tabla 23. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de las variables de 
producción y calidad básica del eyaculado de verracos alimentados con pienso 
con diferente fuente y nivel de Zn. 
Tratamiento  Variables de producción y calidad seminal1 

 
 n FR 

mL 
FP 
mL 

VT 
mL 

Mot 
% 

CM 
grad
o 

pH Spz mL-1 

x 106 
MA 
% 

Control 91 64.05 103.54 167.40 83.95 3.21 8.24 907.30ab 3.69 

ZnSO4150 78 67.27 112.62 180.50 83.84 3.15 8.20 1114.83a 3.33 

ZnSO4200 92 75.01 132.63 207.32 80.43 3.00 8.10 1006.51ab 7.48 

ZnO150 69 59.24 68.85 130.58 82.31 3.04 8.22 1073.29ab 7.81 

ZnO200 67 63.40 121.82 183.40 84.32 3.20 8.14 1081.57ab 4.88 

Zn-Met150 91 71.05 102.6

8 

172.3

9 

84.50 3.42 8.18 971.38ab 3.42 

Zn-Met200 89 64.59 94.76 157.91 78.98 2.95 8.26 855.07b 12.28 

 
EEM 

  
8.15 

 
19.71 

 
26.93 

 
1.80 

 
0.14 

 
0.04 

 
72.12 

 
3.34 

      
Probabilidad (P = F) 

 
Tratamiento 

  
0.85 

 
0.38 

 
0.55 

 
0.15 

 
0.21 

 
0.13 

 
0.02 

 
0.56 

 
Tiempo 

  
0.0001 

 
0.0002 

 
0.0003 

 
0.00
2 

 
0.000
1 

 
0.0001 

 
0.0001 
 

 
0.000
3 

Tratamiento* 
Tiempo 

  
0.63 

 
0.16 

 
0.11 

 
0.01 

 
0.05 

 
0.0002 

 
0.0001 

 
0.11 

1Fracción rica (FR); fracción pobre (FP); volumen total (VT); motilidad (Mot); calidad de movimiento (CM); 
concentración espermática mL-1 (Spz mL-1); morfoanomalías (MA). a,b Medias con distinto superíndice en 
columna son diferentes (P = F). 
 

A pesar de no existir diferencias estadísticas en la FR, los tratamientos 

ZnSO4200 y Zn-Met150 mostraron mayor Vol. Además, la utilización de FI 
(ZnSO4·H2O y ZnO) aumentan la producción de dicha fracción, al incrementar el 

115



RESULTADOS 
nivel de Zn (200 ppm). Sin embargo, la utilización de la FO Zn-Met a una 

concentración similar, manifestó un efecto inverso, disminuyendo la FR. Por otra 

parte, el tratamiento Control reflejó una media de FR de 64.05 mL, ligeramente 

superior a los tratamientos con ZnO. 

 En cuanto a la producción de FP, no existió diferencia entre el Control y los 

distintos tratamientos. Los resultados más bajos correspondieron al ZnO150 con 

68.85 mL, seguido del Zn-Met200 con 94.76 mL y el tratamiento Control con 

103.54 mL. 

 Al analizar el comportamiento de los tratamientos según la fuente y nivel de 

Zn se observa que, las FI con 200 ppm de Zn, aumentan el volumen de FP. Sin 

embargo, dicha concentración tiene un efecto negativo, reduciéndose el Vol 
cuando se utiliza la FO. Los resultados más altos correspondieron al tratamiento 

ZnSO4200 con 132.63 mL.  

 En la variable VT no fueron significativas las diferencias entre los 

tratamientos (P = 0.55). Los valores estuvieron en el orden de 130.58 mL 

(ZnO150) y 207.32 mL (ZnSO4200). Hay en los tratamientos que contenían FI una 

evidencia de aumento en el VT al suministrar 200 ppm de Zn, pero este efecto no 

se observó con la FO, ya que Zn-Met200 disminuyó el VT, con respecto a         

Zn-Met150 (172.39 vs 157.91 mL respectivamente). 

Por otra parte, los tratamientos modificaron los valores de las distintas 

variables evaluadas durante el Tiempo que duró el experimento (Tabla 23) siendo 

significativos en todas las variables de producción y calidad seminal analizadas       

(P < 0.002). También, se muestra efecto en la interacción Tratamiento*Tiempo de 

las variables Mot, (P = 0.01), CM (P = 0.05), pH (0.0002) y Spz mL-1 (P = 0.0001). 

Las variables FR (P = 0.63), FP (P = 0.16) y VT (P = 0.11) no fueron 

diferentes. La dinámica del comportamiento de estas variables durante las 

semanas evaluadas, se observan en las Gráficas 5, 6 y 7.  

El patrón de comportamiento de cada tratamiento resultó distinto. Aunque 

se identifica a los tratamientos ZnSO4200 y Zn-Met150 como los de mayor 

producción de FR (Gráfica 5). El resto de tratamientos, se mantuvieron con 

menor producción (<80 mL) durante las 16 semanas de evaluación.  

 

116



RESULTADOS 

 
Grafica 5. Producción de la fracción rica del eyaculado (FR) según tratamiento: 
Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗ ; Zn-Met150 ●;       
Zn-Met200 +. Las líneas representan la media tratamiento-1 semana-1. Error 
estándar de la media (EEM) = 11.65; n = 529. Probabilidad de la interacción 
Tratamiento*Tiempo NS (P = 0.63). 

 

En el caso de la producción de FP del ZnO150 se mantuvo por debajo de 

los valores medios del resto de tratamientos (Gráfica 6), mientras que el 

ZnSO4200 fue el de mayor producción de FP durante al menos 10 semanas de 

evaluación. 

Por su parte el VT (Gráfica 7), muestra una dinámica de producción más 

cercana a la que muestra la FP, ya que esta contribuye más al VT que la FR. 

Al evaluar las correlaciones entre las diferentes fracciones del eyaculado se 

encontraron correlaciones significativas en algunos tratamientos.  

En la Tabla 24 se describen las correlaciones entre PT, Spz mL-1 y VT.    
La correlación entre Spz mL-1 mostró una fuerte asociación con PT en ZnSO4150 

(r = 0.77; P = 0.009); mientras que la Spz mL-1 tiene una alta correlación con el 

VT, en los tratamientos Control (r = 0.99; P = 0.001) y el Zn-Met150 (r = 0.70;      

P = 0.02). En este último tratamiento también existió correlación entre VT y PT    
(r = 0.64; P = 0.05).  

 

 

 

20

30

40

50

60

70

80

90

100

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

FR
 (m

L)

Semana

0

117



RESULTADOS 
 

Gráfica 6. Producción de la fracción pobre del eyaculado (FP) según tratamiento: 
Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗ ; Zn-Met150●;    
Zn-Met200 +. Las líneas representan las medias tratamiento-1 semana-1. Error 
estándar de la media (EEM) = 25.38; n = 529. Probabilidad de la interacción 
Tratamiento*Tiempo NS (P = 0.16). 
 

 

Gráfica 7. Volumen total del eyaculado (VT) según tratamiento: Control ♦; 
ZnSO4150 ■; ZnSO4200▲; ZnO150 X; ZnO200∗ ; Zn-Met150 ●; Zn-Met200 +. 
Las líneas representan las medias tratamiento-1 semana-1. Error estándar de la 
media (EEM) = 32.30; n = 529. Probabilidad de la interacción Tratamiento*Tiempo 
NS (P = 0.11). 
 

 

 

 

0
20
40
60
80

100
120
140
160
180

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

FP
 (m

L)

Semana

0

50

100

150

200

250

300

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

VT
  (

m
L)

Semana

118



RESULTADOS 
 

Tabla 24. Coeficientes de correlación entre peso testicular (PT), concentración 
espermática (Spz mL-1) y volumen total de eyaculado (VT) de verracos 
alimentados con pienso con diferente fuente y nivele de Zn. 

*Entre paréntesis (P = F) se muestran los valores α (Probabilidad de rechazar Ho). 

 
La producción seminal evaluada a través de las variables FP y VT tuvo una 

fuerte correlación con el PE (Tabla 25). En los tratamientos ZnO150 la correlación 

fue de r = 0.73 (P = 0.015) y r = 0.70 (P = 0.025) respectivamente. El Zn-Met 

mostró una correlación más estrecha entre las mismas variables (r = 0.91:           

P = 0.0002; y r = 0.92: P= 0.0002 en el mismo orden). Mientras que en el          

Zn-Met200 sólo se registró correlación entre PE y VT (r = 0.60; P = 0.06). 

Por otra parte se muestra en la Tabla 25, una alta correlación (intervalo de 

r = 0.7 a r = 0.99; P < 0.001) entre FP y VT en todos los tratamientos evaluados. 

Con relación a la Mot no hubo diferencias entre tratamientos (P = 0.15). El 

Zn-Met200 presentó los porcentajes más bajos con un 78.98%. Los resultados 

más altos correspondieron al Zn-Met150 y ZnO200 con un 84.50% y 84.32% 

respectivamente. 

 

Tratamiento  Variable 

 Variable PT 
r 

Spz mL-1

r (P = F) 
VT 

r (P = F) 
Control PT 1.00 -0.42 (0.22) -0.37 (0.29) 

 Spz mL-1  1.00 0.99(0.001)* 
 VT   1.00 

ZnSO4150 PT 1.00 0.77 (0.009)* -0.43 (0.21) 
 Spz mL-1  1.00 -0.47 (0.17) 
 VT   1.00 

ZnSO4200 PT 1.00 0.19 (0.55) -0.28 (0.37) 
 Spz mL-1  1.00 -0.38 (0.22) 
 VT   1.00 

ZnO150 PT 1.00 -0.04(0.90) 0.16 (0.66) 
 Spz mL-1  1.00 -0.08 (0.83) 
 VT   1.00 

ZnO200 PT 1.00 -0.16 (0.70) 0.09 (0.83) 
 Spz mL-1  1.00 -0.50(0.21) 
 VT   1.00 

Zn-Met150 PT 1.00 -0.14 (0.70) 0.64 (0.05)* 
 Spz mL-1  1.00 0.70 (0.02)* 
 VT   1.00 

Zn-Met200 PT 1.00 -0.35 (0.33) 0.41 (0.23) 
 Spz mL-1  1.00 -0.40(0.25) 
 VT   1.00 

119



RESULTADOS 
 
La CM, mostró la misma tendencia que la variable Mot, donde el             

Zn-Met200 registró el valor más bajo 2.95, y con 150 ppm de Zn junto con el 

tratamiento Control, tuvieron los registros más altos con un 3.42 y 3.21 

respectivamente. 

 
Tabla 25. Coeficientes de correlación entre peso epididimario (PE), volumen de la 
fracción pobre (FP) y total de eyaculado (VT) de verracos alimentados con pienso 
con diferente fuente y nivel de Zn. 

TRATAMIENTO  VARIABLE 
  PE 

r 
FP 

r (P = F) 
VT 

r (P = F) 
Control PE 1.00 0.40 (0.26) 0.40 (0.26) 

 FP  1.00 0.99(0.001) 
 VT   1.00 

ZnSO4150 PE 1.00 0.14 (0.70) 0.30 (0.40) 
 FP  1.00 0.97 (0.0001) 
 VT   1.00 

ZnSO4200 PE 1.00 -0.11 (0.72) -0.09 (0.78) 
 FP  1.00 0.99 (0.0001) 
 VT   1.00 

ZnO150 PE 1.00 0.73 (0.015)* 0.70 (0.025)* 
 FP  1.00 0.97 (0.0001) 
 VT   1.00 

ZnO200 PE 1.00 0.081 (0.85) 0.10 (0.81) 
 FP  1.00 0.98 (0.0001) 
 VT   1.00 

Zn-Met150 PE 1.00 0.91 (0.0002)* 0.92 (0.0002)* 
 FP  1.00 0.99(0.0001) 
 VT   1.00 

Zn-Met200 PE 1.00 0.59 (0.70) 0.61 (0.06)* 
 FP  1.00 0.98 (0.0001) 
 VT   1.00 

*Entre paréntesis (P = F) se muestran los valores α (Probabilidad de rechazar Ho). 
 

La interacción Tratamiento*Tiempo fue altamente significativa para las 

variables Mot (P = 0.01), CM (P = 0.05), y pH (P = 0.0002). Las diferencias 

mostradas durante las distintas semanas se observan en las Gráficas 8 y 9. 

En las primeras cinco semanas la Mot se comportó de forma similar en 

todos los tratamientos. Sin embargo, a partir de la sexta semana los tratamientos 

ZnSO4200, ZnO150, y Zn-Met200 disminuyeron la Mot por debajo del 80%. 

Además, el tratamiento Zn-Met200 no superó los valores de Mot mostrados 

durante las primeras cinco semanas, conservando porcentajes del 70% la mitad 

del periodo evaluado. Por su parte, el tratamiento Control, ZnSO4150 y              

120



RESULTADOS 
Zn-Met150, se mantuvieron constantes y los valores de Mot nunca fueron 

inferiores a 80%.  

En el caso de la CM, el comportamiento indicó que los tratamientos 

variaron durante el periodo evaluado (P = 0.05). Se observa en la Gráfica 9, que 

existe una diminución en el grado de CM conforme avanzó el periodo de 

evaluación, lo que produjo que los tratamientos presentaran CM entre 2 y 3. 

Siendo el Zn-Met200 el que estuvo durante mayor número de semanas con una 

CM menor a grado 3.  

No existió diferencias entre tratamientos al analizar el pH (P = 0.13). Los 

valores oscilaron entre 8.10 y 8.26. Sin embargo, el pH mostró cambios durante el 

tiempo evaluado (P = 0.0001) y registró una interacción significativa con el 

tratamiento (P = 0.0002). En la Gráfica 10, se observan cambios más drásticos en 

los tratamientos ZnSO4200, ZnO200, los cuales muestran cierta ciclicidad cada 5 y 

6 semanas. Los valores menores fueron para estos dos tratamientos, 

reduciéndose hasta pH de 7.7. Aunque el comportamiento del tratamiento          

Zn-Met150 mostró valores constantes de pH durante 10 semanas este, ocasionó 

cambios drásticos del pH por debajo de 7.9, al inicio y final del periodo de 

evaluación. 

Gráfica 8. Motilidad (Mot) según tratamiento: Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200 
▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗ ; Zn-Met150 ●; Zn-Met200 +. Las líneas representan las 
medias tratamiento-1 semana-1: Error estándar de la media (EEM) = 3.34; n = 527. 
Probabilidad de la interacción Tratamiento*Tiempo (P = 0.01). 

 

 

60

65

70

75

80

85

90

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

M
ot

   
(%

)

Semana

0

121



RESULTADOS 

Gráfica 9. Calidad de motilidad espermática (CM)  según tratamiento: Control ♦; 
ZnSO4150 ■; ZnSO4200 ▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗ ; Zn-Met150 ●; Zn-Met200 +. 
Las líneas representan las medias tratamiento-1 semana-1: Error estándar de la 
media (EEM) = 0.33; n = 527. Probabilidad de la Interacción Tratamiento*Tiempo 
(P = 0.05). 

 

Gráfica 10. Valores del pH del eyaculado: Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200▲; 
ZnO150 X; ZnO200 ∗ ; Zn-Met150●; Zn-Met200 +.Las líneas representan las 
medias tratamiento-1 semana-1: Errores estándar de la media (EEM) = 0.12;           
n = 523. Probabilidad de la Tratamiento*Tiempo (P = 0.0002). 

 
 

En relación con Spz mL-1 (P = 0.02), el tratamiento ZnSO4150 produjo la 

concentración más alta. Aunque el tratamiento Control no mostró diferencias con 

el resto de los tratamientos (P > 0.05), se aprecia una reducción de los Spz mL-1 

de 17.8% cuando se compara con los tratamientos que contenían FI, mientras 

que la diferencia con el tratamientos con 150 de Zn-Met fue menor (6.62%). La 

Spz mL-1 se vio afectada durante el periodo de evaluación (P = 0.0001) existiendo 

además una interacción entre el Tratamiento*Tiempo (P = 0.0001), como se 

1,5

2,5

3,5

4,5

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

C
M

  (
gr

ad
o)

Semana 

0 

7,4

7,6

7,8

8

8,2

8,4

8,6

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

pH

Semana

0

7.6

7.8

8.0

8.2

8.4

8.6

122



RESULTADOS 
observa en la Tabla 23 y Gráfica 11. De manera general, todos los tratamientos 

tuvieron una producción media entre 850 a 1200 x 106 Spz mL-1, exceptuando el 

tratamiento Zn-Met200, el cual a la mitad del periodo evaluado tuvo una 

producción inferior a la mostrada por el resto de los tratamientos (Gráfica 11), 
pero con una tendencia a incrementarse al final de la investigación. En el caso del 

tratamiento Control, la concentración fue oscilante, mostrándose durante varias 

semanas por debajo de la producción del resto de los tratamientos que fueron 

adicionados con alguna fuente de Zn. 

En cuanto a las MA no se encontraron diferencias (P = 0.56) entre los 

distintos tratamientos, ni en la interacción Tratamiento*Tiempo (P = 0.11). Aunque 

durante el tiempo en que fue evaluada la variable MA se produjeron cambios      

(P = 0.0003).  

En la Tabla 26, se observa el tipo de MA (CL, GP, GD) que se 

presentaron, siendo significativas las diferencias en CL y GD (P = 0.0001). Las CL 
producto del tratamiento ZnSO4200 (5.79%) fueron similares (P = 0.0001) al      

Zn-Met200 (4.67%), y mayores al resto de los tratamientos. En el caso de las GP 

no existió diferencia entre los tratamientos (P = 0.097), y los valores no superaron 

el 5%.  

En el caso de las GD, seis tratamientos mostraron valores de medias 

iguales (P > 0.05), pero el tratamiento Zn-Met200 mostró ser diferente                 

(P = 0.0001) a todos ellos, ya que la producción de GD fue al menos duplicada 

con el uso de este tratamiento. 

En la Tabla 27, se observan los resultados de los análisis de acrosomas, 

apreciando que los tratamientos no produjeron diferencias en IAc (P = 0.43), AD 
(P = 0.28), y AR (P = 0.25). Tampoco se observó que existiera un cambio en el 

patrón de producción de IAc (P = 0.42), AD (P = 0.29) y AR (P = 0.22) durante el 

tiempo evaluado. 

 
 
 
 
 
 

123



RESULTADOS 
 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Gráfica 11. Concentración espermática (Spz mL-1 x 106) según tratamiento: 
Control ♦; ZnSO4150 ■; ZnSO4200▲; ZnO150 X; ZnO200 ∗ ; Zn-Met150●;       
Zn-Met200 +. Las líneas representan las medias tratamiento-1 semana-1. Errores 
estándar de la media (EEM) = 190.38; n = 527. Probabilidad de la interacción 
Tratamiento*Tiempo (P = 0.0001)  
 
 

La interacción Tratamiento*Tiempo (Tabla 27) de las variables 

acrosomales, también fue analizada, observando que no existía interacción en 

IAc (P = 0.11) y AD (P = 0.34), presentándose una tendencia (P = 0.06) de 

interacción Tratamiento*Tiempo en los AR. La dinámica del comportamiento de 

estas variables se observan en las Gráficas 12a, 12b, y 13 

En general los tratamientos se presentan dentro de un intervalo de 5 a 

14%. Aunque existió una tendencia a mostrarse más incrementado el porcentaje 

de AR en el tratamiento Zn-Met150 y Zn-Met200 de hasta un 20.12% y 24.22% 

respectivamente. Caso contrario fue observado en los tratamientos Control y 

ZnO150, con un aumento al final de la evaluación del 17.72% y 17.38% 

respectivamente. 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

0
200
400
600
800

1000
1200
1400
1600
1800

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

Sp
z 

m
L 

-1

Semana

124



RESULTADOS 
 
Tabla 26. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de tipo de 
morfoanomalías espermáticas de verracos según tratamiento. 
Tratamiento Tipo de morfoanomalía tratamiento-1 

% 

 CL GP GD 
Control 3.49bc 2.21 2.29b 

ZnSO4150 2.82bc 2.05 2.81b 

ZnSO4200 5.79a 2.18 3.08b 

ZnO150 2.94bc 4.10 3.90b 

ZnO200 3.03bc 2.15 3.67b 

Zn-Met150 2.58c 2.70 2.61b 

Zn-Met200 4.67ab 3.56 7.48a 

 
EEM 

 
0.50 

 
0.41 

 
0.46 

Probabilidad (P = F) 0.0001 0.097 0.0001 
*Medias expresadas en valores originales. χ2, Kruskall-Wallis. Colas látigo (CL); gotas 
citoplásmicas proximales (GP); gotas citoplásmicas distales (GD).a,b,c Medias con distinta literal 
en columna, son diferentes (P = F). 

 

 

Tabla 27. Medias de mínimos cuadrados ± error estándar de acrosomas 
íntegros (IAc), dañados (AD) y reaccionados (AR), de espermatozoides de 
verraco alimentados con pienso con diferente fuente y nivel de Zn. 
Tratamiento  Variables (%) 

  IAc AD AR 
Control  84.82 7.34 7.75 
ZnSO4150  86.89 5.77 6.94 
ZnSO4200  84.10 6.27 9.44 
ZnO150  86.62 5.25 8.10 
ZnO200  83.01 9.47 7.24 
Zn-Met150  86.19 4.93 8.85 
Zn-Met200  82.89 7.12 9.88 
 
EEM  

 
1.90 

 
1.17 

 
1.24 

     
                                                       Probabilidad (P = F) 

Tratamiento  0.43 0.28 0.25 
Tiempo  0.42 0.29 0.22 
Tratamiento*Tiempo  0.11 0.34 0.06 

 

 

 
 
 
 
 
 
 

125



RESULLTADOS 

Gráfica 1
Control ♦;
Zn-Met200
Integridad 
media (EE
interacción

Gráfica 1
ZnSO4150
Zn-Met200
estándar 
Tratamien

 

50
55
60
65
70
75
80
85
90
95

100

IA
c 

  (
%

)

1 00

90

80

70

60

0

5

10

15

20

A
D

  (
%

)

0

5

10

15

20

25

30

A
R

  (
%

)

2. Estado d
; ZnSO4150 
0 +. Las l

acrosomal 
EM): IAc = 
n Tratamient

3. Acrosom
0  ■; ZnSO
0 +. Las líne
de la media
to *Tiempo (

0
5
0
5
0
5
0
5
0
5
0

7 8

0

0

0

0

0

0 //

0

5

0

5

0

7 8
//

7 8
//

del acrosoma
■; ZnSO42

líneas repre
(IAc) y acr
4.42; n = 3

to *Tiempo N

as  reaccion
O4200  ▲; 
eas represen
a (EEM) = 
(P = 0.06). 

8 9

8 9

9 1

a espermátic
200▲; ZnO1
esentan las
rosoma daña
321; AD = 2
NS: IAc (P = 

nados  (AR
ZnO150  X

ntan las med
3.31; n= 32

10 11

10 11

Sem

10 11
Sema

co según tra
150 X; ZnO2
s medias tr
ado (AD). E
2.55; n = 32
0.11); AD (P

R)  según tra
X; ZnO200 
ias tratamie

21. Probabil

12 13

12 13

mana

12 13
ana

atamiento: tr
200 ∗ ; Zn-
ratamiento-1 
Errores está
21. Probabil

P = 0.34). 

atamiento:  
 ∗ ; Zn-M

nto-1 semana
idad de la 

14 15

14 15

14 15

ratamiento: 
-Met150 ●;  

semana-1: 
ndar de la 
lidad de la 

Control ♦; 
Met150  ●;  

a-1. Errores 
interacción 

16

a

16

b

16

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 
 

  

             

126



4.3

 

super

tratam

tratam

2.61%

(9.2 ±

algun

 

difere

Contr

(P < 

respe

 

 
3. Evaluac

Los trata

raron el 10

El IF de

mientos pro

miento Con

%), sin mos

± 2.92%), 

os tratamie
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Al analiz

ncias (P <

ol (Gráfic
0.0001), u

cto a ZnO 

Ín
di

ce
de

 F
ra

gm
en

ta
ci

ón
 %

Gráfica 
de ADN 
mínimos
superínd

ción del es

amientos u

% de IF, a

el Zn-Met

obados, ev

ntrol (2.91 

strar difere

y ZnO20

entos varia

zar el efec

< 0.05) en

a 14). El 

un 43.89%

(P = 0.05)

0

5

10

15

20

25

b

Control 

14. Efecto d
espermático

 cuadrados
dice en las ba

stado del 

utilizados 

a excepción

t200 (16.7

videnciand

± 2.6%), 

encias (P >

00 (6.5 ± 

aron del 53

cto de la 

ntre las FI
Zn-Met au

% en relac

). 

b

a

     150        2
ZnSO4·H

de la fuente y
o (IF) de ve
s ± error 
arras, son dif

ADN nucl

en este e

n del Zn-M

71 ± 2.6

o esta sup

ZnSO4150

> 0.05) co

2.93%). L

3 al 77.6% 

fuente de

y la FO, e

umentó 72

ión al ZnS

ab
ab

00      150      
2O              Zn

Tratamiento

y nivel de Zn
erracos. Las 
estándar (E
ferentes (P =

ear esper

estudio re

Met200 (Grá

64%), fue 

perioridad 

0 (4.4 ± 2.

n ZnSO420

Las difere

de IF. 

e Zn (Grá
esta última

2.3% el IF
SO4·H2O (

ab

b

  200        150
nO                  

os

n en el índic
barras repr

EEM). a,bMe
= 0.02). 

rmático 

egistraron 

áfica 14). 

mayor q

(P < 0.05)

.63%) y Z

00 (7.7 ± 2

encias de 

áfica 15), 
a además 

F con resp

(P = 0.002

a

0       200
Zn-Met

ce de fragme
resentan me
edias con 

RESUL

valores q

que los d

) con respe

n-Met150 

2.41%), Zn

Zn-Met20

se encon

fue difere

pecto al C

2), y 28.5%

entación 
edias de 

distinto 

LTADOS 

ue no 

demás 

ecto al 

(3.9 ± 

nO150 

0 con 

ntraron 

ente al 

Control      

% con 

127



RESUL

 
 

increm

Contr

esper

(Gráf
 
 

 

 

 

 

 

 

de fue

aume

200 p

una ta

ppm v
en el 

LTADOS 

Gráfica 
fragment
diferente
a,bMedias
 

Entre las 

mento en 

ol. La inc

rmatozoide

ica 15), ma

 
 

El análisi

ente de Z
ntó un 56%

Por otra 

ppm) con re

asa de IF s

vs Control

IF, del 50%
 
 
 
 
 
 
 
 

0

Fu
en

te
  d

e 
 Z

n
(p

pm
)

15. Medias 
tación de A
s fuentes de
s con distinto

FI no se e

torno al 2

corporación

es fragme

anteniéndo

is de los n

Zn, mostró

% el IF, co

parte, si s

elación al 

superior (5

l, respectiv

% y 72%, c

0 2

Zn-

ZnO

ZnS

Control

de mínimos
ADN esperm
e Zn. Fuente
o superíndice

encontraro

20% de IF
n de ZnS

ntados, p

ose con va

niveles de 

ó diferencia

n respecto

se compar

tratamient

5.73 ± 2.72

vamente). 

cuando se 

4

-Met

O

SO4·H2O

b

s cuadrados 
mático (IF), 
es inorgánica
e en las barra

n diferenci

F en relac

SO4·H2O in

pero no fu

alores por d

Zn evalua

as (P < 0

o a 150 ppm

ra el efecto

to Control 

2% y 10.23

Estos res

utilizan niv

6

IF  (%)

b

± error est
en verraco

as (FI); Fuen
as, son difer

ias (P = 0.

ión al ZnS

ncrementó

ue distinta

debajo del

ados de fo

.0001), ya

m (Gráfica

o de los d

(25 ppm), 

3 ± 2.66% 

ultados ind

veles de 15

8

b

tándar del Ín
os alimentad
ntes orgánic
entes (P < 0

52), pero e

SO4·H2O, 

ó 48.6% l

a al Cont

 5% de IF.

orma indep

a que el u

a 16).  

dos niveles

ambos niv

vs 2.91 ± 

dican un a

50 y 200 p

FI

10

b

ndice de 
dos con 
as (FO). 
.05). 

el ZnO refl

y 40% so

a presenc

trol (P = 

. 

pendiente 

uso de 200

s de Zn (1
veles prod

2.6%; 150

aumento n

ppm de Zn.

12

a FO

ejó un 

obre el 

cia de 

0.65)  

al tipo 

0 ppm 

50 vs 

ujeron 

 y 200 

otable 

. 

128



 

 

 

 

 

 

 

al incr

adicio

obser

(ZnSO

Zn-Me

76.7%

con e

de niv

ppm, 

2.93%

entre 

(P = 0

 

 
 

En la Grá
rementarse

onada en e

Al compa

rva un IF s

O4·H2O: 15

et indujo u

% (150 ppm

l ZnO, ya 

vel, pero pr

6.49 ± 2.9

El IF pro

%; ZnSO42

ellas, pero

0.03). 

 
 
 
 
 
 
 

Gráfica 16
nivel de Z
verracos. a

(P < 0.0001

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90

100

Es
pe

rm
at

oz
oi

de
s 

%
 

áfica 17, s

e el nivel d

el pienso. 

arar el incr

superior (P

50 ppm, 4.

un cambio 

m, 3.89 ± 2

que no mo

rodujo un d

3%). 

ducto de l

200, ZnO2

o si en 150

6. Medias de
Zn en el índ

a,bMedias co
1). 

1

se muestra

de Zn, aun

remento d

P = 0.02) 

36 ± 2.63%

(P < 0.000

2.57% vs 2

ostró camb

descenso 

as FI en lo

00 respec

0 ppm (ZnS

e mínimos c
dice de frag
on distinto 

b

150              
Nivel de

a el compo

que este c

de Zn en la

en la prim

% vs 200 p

01) en el I
200 ppm, 1

bios signifi

del IF del 3

os niveles 

ctivamente)

SO4150, 4.

cuadrados ±
gmentación 
superíndice 

                   2
e Zn (ppm)   

ortamiento

cambio dep

as fuentes

mera fuente

ppm, 7.71 

F, que gen

16.7 ± 2.59

cativos (P 

30% (150 

de 200 p

) (P = 0.2

.4 ± 2.63%

± error están
de ADN es
entre barra

a

200 

 del IF el c

pende de l

s ZnSO4·H

e, equivale

± 2.41%).

neró un au

9%). Caso 

= 0.23) co

ppm, 9.27 

pm (7.7 ± 

1) no mue

% vs ZnO15

ndar del efec
spermático (
as, son dife

Sin  fragm

Fragment

RESUL

cual se mo

la fuente m

H2O y Zn-M

ente a un 

 Mientras 

umento de

contrario o

on el incre

± 2.92% v

2.41% vs
estra difere

50, 9.2 ± 2

cto del 
(IF) de 
erentes   

mentación

tados

LTADOS 

odifica 

mineral 

Met se 

≈57% 

que el   

 hasta 

ocurre 

mento 

vs 200 

s 6.5 ± 

encias 

2.92%) 

129



RESULTADOS 

Gráfica 17. Interacción de la fuente y nivel de Zn utilizado en piensos de verraco, y 
su efecto en el índice de fragmentación del ADN de espermatozoides (IF). Los 
valores fueron transformados utilizando Arco Seno √Y. Las líneas representan 
medias de mínimos cuadrados ± error estándar (EEM) tratamiento-1, utilizando los 
valores originales. a,b Medias con distinto superíndice, son diferentes (P < 0.0001). 

 
 

En la Gráfica 17, se observa que el Zn-Met150 tuvo valores cercanos al 

ZnSO4150 (P = 0.40) (3.89 ± 2.57% vs 4.36 ± 2.58%) y al ZnO200 (3.89 ± 2.57% 

vs 6.49 ± 2.93%) (P = 0.07). Por otra parte, la interacción de Zn-Met150 con 

ZnSO4200 (3.89 ± 2.57% vs 7.71 ± 2.41%) (P = 0.002) y ZnO150 (3.89 ± 2.57% 

vs 9.27 ± 2.92%) (P = 0.003) fueron distintas.  

El nivel de 150 ppm de Zn, con el uso de las fuentes ZnSO4·H2O y Zn-Met, 

no superó la producción de 5% del IF.  

La frecuencia con la que los eyaculados presentaban IF en cada 

tratamiento se muestra en la Tabla 29. Los resultados mostraron que el 6.49% de 

las muestras analizadas no presentaron espermatozoides fragmentados y la 

mayoría (52.16%) estuvo dentro del intervalo de 1 a 5% de IF. Existió un 12.98% 

de las muestras que presentó valores mayores al 15%, de las cuales 6.27% 

tuvieron IF alrededor de 20%. 

El tratamiento que presentó con mayor frecuencia IF y que tuvo los valores 

más altos fue el Zn-Met200 (intervalo 6 a 15 y >15%). Este tratamiento en 

particular tuvo dos verracos que llegaron a producir valores de IF de 60%. 

 

0
2
4
6
8

10
12
14
16
18
20

Ín
di

ce
 d

e 
fr

ag
m

en
ta

ci
ón

 % Zn-Met  

ZnSO4·H2O 

ZnO

150                                     200
Nivel de Zn (ppm)

a (P = 0.23) 

b (P = 0.02) 

b (P < 0.0001) 

130



RESULTADOS 
 

Tabla 29. Frecuencia de presentación de índice de fragmentación de ADN 
espermático (IF) según intervalo y tratamiento. 

*Frecuencia intervalo-1 = ∑ Frecuencia de IF (%) tratamiento-1. Intervalos obtenidos con prueba 
de Kruskall-Wallis.  

 

Por otra parte, interesaba conocer si la fragmentación se presentaba de 

forma constante en los eyaculados por ello, se analizó el efecto del Tiempo 

(semana) dentro de los intervalos de IF (Tabla 30). Aunque el IF no cambió 

significativamente durante el tiempo evaluado (P = 0.37), se observa que los 

eyaculados con IF cero dejaron de presentarse a partir de la semana 16, lo que 

produjo un incremento de eyaculados con presencia de células fragmentadas en 

los intervalos <15%. 

Al analizar la interacción Tratamiento*Tiempo en la tasa de IF (Tabla 31) 
no se encontraron diferencias (P = 0.35) observándose que el tratamiento Control 

mantuvo un patrón de comportamiento similar durante las 14 semanas evaluados 

(0.24 a 6.39%). Mientras que el resto de tratamientos presentaron mayor 

variabilidad. Los tratamientos que utilizaron alguna de las fuentes de Zn, no 

presentaron IF menores a 1.24% y llegaron a producir 29.3% de células con 

fragmentación, como el caso del Zn-Met200.  

La comparación entre FI y FO permitió observar que las primeras llegaron a 

producir un IF de 14.23% (semana 11), mientras que la FO duplicó el valor de IF 

(29.3%, semana 14). Aunque el ZnO150, mantuvo en promedio mayor número de 

semanas con IF altos. 

 
 
 

Tratamiento n Frecuencia de IF (%) por intervalos 

  0 1-5 6-15 >15 
Control 67 1.44 12.26 2.16 0.24 
ZnSO4150 59 0.24 9.13 4.81 0.0 
ZnSO4200 64 0.24 6.73 6.01 2.40 
ZnO150 51 0.96 5.78 2.64 2.89 
ZnO200 49 1.20 5.77 3.61 1.20 
Zn-Met150 63 2.16 9.13 3.37 0.48 
Zn-Met200 63 0.24 3.37 5.77 5.77 
      
EEM  1.01 1.78 1.82 1.83 
%  100 6.48 52.17 28.37 12.98 
n 416 27 217 118 54 

131



RESULTADOS 
 

Tabla 30. Frecuencia de presentación de índice de fragmentación de ADN 
espermático (IF) durante un periodo de evaluación de 14 semanas con base a 
intervalos. 

Tiempo** n Frecuencia de IF* por intervalos % 

  0 1-5 6-15 >15  
6 22 0.48 3.37 0.48 0.96 5.29 
7 26 0.48 3.37 1.68 0.72 6.25 
8 31 0.48 4.33 1.92 0.72 7.45 
9 30 0.72 4.33 1.44 0.72 7.21 
10 28 0.24 3.85 1.44 1.20 6.73 
11 32 0.48 1.68 3.61 1.92 7.69 
12 33 0.72 3.85 1.92 1.44 7.93 
13 32 0.97 3.61 2.16 0.96 7.69 
14 32 1.44 3.13 2.16 0.96 7.69 
15 28 0.48 4.09 1.44 0.72 6.73 
16 32 0.0 4.57 1.92 1.20 7.69 
17 31 0.0 3.85 2.88 0.72 7.45 
18 30 0.0 3.13 3.61 0.48 7.21 
19 29 0.0 5.05 1.68 0.24 6.97 
EEM  1.84 1.80 1.82 1.84  
n  416 27 217 118 54  
%  6.49 52.21 28.34 12.96 100 

*Los intervalos fueron establecidos según la mayor frecuencia analizada en la prueba biológica.        
** Periodo evaluado: 14 semanas. Los valores fueron sometidos a una prueba de Kruskall-Wallis. 

 

Además se observó que con 150 ppm de Zn, el IF máximo fue de 13.70% 

(semana 11), en cambio para el nivel de 200 ppm, el valor máximo fue 29.3%.  

De esta manera, el incremento del IF (semana 11, 12 y 17, 18), se realizó a 

intervalos de 6 y 7 semanas, para luego disminuir a porcentajes tan bajos como 

los que le precedieron. 

En la Gráfica 18, se observa la dinámica de IF que los tratamientos 

mostraron durante las 14 semanas evaluadas. Los tratamientos que desde el 

inicio tuvieron una tasa de IF alta, mantuvieron ese índice durante todo el periodo 

de evaluación.  

Los tratamientos durante las semanas evaluadas llegaron a presentar 

incrementos notables. El tratamiento Control durante las semanas 6 y 12 registró 

un incremento de alrededor del 92 y 56 % respectivamente, y en siete semanas 

mostró valores inferiores a la media del periodo evaluado (2.91 ± 2.6%). 

 
 

132



RESULTADOS 
 

Tabla 31. Medias de mínimos cuadrados ± errores estándar del índice de 
fragmentación de ADN espermático (IF) de verracos durante el periodo de 
evaluación, con diferentes fuentes y niveles de Zn. 
Tiempo* Índice de fragmentación (IF) Tratamiento-1 
 Control ZnSO4150 ZnSO4200 ZnO150 ZnO200 Zn-Met150 Zn-Met200 EEM 

6 0.24 5.78 7.11 5.48 8.66 2.92 10.91 4.45 

7 2.12 2.54 8.14 6.90 10.08 3.50 14.47 4.42 

8 1.34 4.36 9.92 5.70 3.50 2.70 12.41 3.95 

9 3.96 4.82 8.70 12.21 1.40 1.24 16.68 3.99 

10 3.32 1.94 7.91 9.78 12.00 2.2 12.96 4.14 

11 6.39 8.80 13.40 13.70 14.23 2.60 20.80 3.89 

12 1.32 3.12 4.00 10.20 1.65 11.42 24.55 3.83 

13 4.80 6.21 7.53 12.18 1.20 1.96 13.44 3.92 

14 4.24 3.32 6.62 12.65 5.43 1.14 29.30 3.89 

15 1.24 1.24 8.46 6.90 3.62 3.84 13.13 4.15 

16 1.80 4.56 10.75 8.4 6.23 2.80 11.82 3.92 

17 4.68 3.51 4.84 13.50 8.50 4.54 15.09 3.93 

18 3.36 8.74 6.28 7.74 7.93 11.24 20.70 4.01 

19 1.96 2.40 3.90 3.50 6.60 3.40 18.70 4.18 

 

EEM 3.80 4.02 3.52 4.33 4.44 3.74 4.03  

n= 416.No existió diferencia significativa entre las semanas tratamiento-1 (P = 0.35). 
 

En los tratamientos ZnSO4150 y ZnSO4200, se observa que el IF fue menor 

a 10%, siempre con valores más bajos para el nivel de 150 ppm. Sin embargo, en 

ambos casos, existió aumento del IF a intervalos regulares de 6 y 7 semanas 

(semana 11 y 16) implicando un incremento del IF entre el 62 y 100%. 

La fuente ZnO, mostró que 150 ppm produce mayor porcentaje de IF que el 

ZnO200. A pesar de los incrementos obtenidos de forma cíclica con ambos 

tratamientos, no hubo cambios (P > 0.05) durante el tiempo evaluado. Ambos 

niveles de ZnO mostraron valores durante la mitad de la prueba por debajo de la 

media del IF (6.5 ± 2.93%), aunque en la semana 11 se observó el mayor 

incremento de IF (14.23 ± 4.4%, ZnO150; 8.50 ± 4.4%, ZnO200). 

El IF correspondiente a la FO registró amplios cambios durante la 

evaluación llegando a alcanzar diferencias del 90%. Los valores del Zn-Met200 

siempre fueron superiores a los de Zn-Met150. Este tratamiento, se mantuvo por 

debajo de su valor medio de IF (3.9 ± 2.61%) durante 11 semanas, mientras que 

133



RESULTADOS 

0

5

10

15

20

25

30

Ín
di

ce
 d

e 
Fr

ag
m

en
ta

ci
ón

 %

Semana

Control
ZnSO4150
ZnSO4200
ZnO150
ZnO200
Zn‐Met150
Zn‐Met200

Tratamiento

6      7      8       9    10   11    12    13    14    15    16    17    18   19
//

el Zn-Met200 presentó un comportamiento variable llegando a mostrar un 29.30 ± 

4.0% de fragmentación en la semana 9. 

 Al analizar la Gráfica 19, se aprecia que independientemente de los 

tratamientos, existieron diferencias entre semanas (P = 0.02). 

Por último, se realizó un análisis de correlación entre la concentración de 

Zn en el sedimento espermático (ZnSE) de los diferentes tratamientos y el IF (%). 

Dicha correlación (r < 0.13) no mostró diferencias (P > 0.05). 

 

 
 

 

 
 
 
 
 

Gráfica 18. Dinámica del índice de fragmentación de ADN en espermatozoides (IF) 
de verracos, tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn. Probabilidad de la 
Interacción Tratamiento*tiempo NS (P > 0.05). 

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9

10
11
12
13
14

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

a
ab

a

ab

b

ab
ab

ab

ab

a
ab

a

ab

ab

Semana

Ín
di

ce
de

 fr
ag

m
en

ta
ci

ón
 %

6      7     8      9     10   11   12   13   14    15   16   17   18    19

Gráfica 19. Fragmentación de ADN espermático (IF) presente en eyaculados de 
verracos durante un periodo continuo de evaluación. a,bDistinto superíndice entre 
semanas, son diferentes (P = 0.02). Los valores utilizados son las Medias ± error 
estándar (EEM) de los siete tratamientos.

Control 
ZnSO4150 
ZnSO4200 
ZnO150 
ZnO200 
Zn-Met150 
Zn-Met200 

134



RESULTADOS 
 

4.4.Evaluación de la capacidad fecundante in vitro (FIV) de 
espermatozoides de verracos tratados con diferente fuente y nivel de 
Zn 

 
En la Tabla 32, se muestran los resultados de las variables relacionadas 

con la capacidad de penetración de los espermatozoides de verracos tratados con 

distintas fuentes y niveles de Zn en el pienso, utilizando ovocitos inmaduros (FIV). 
También se incluye el número de espermatozoides que penetran cada ovocito 

(EO) y la proporción de ovocitos que tuvieron sólo un espermatozoide (OM). Estas 

dos últimas variables se reflejan en la eficacia de fecundación del tratamiento 

(EF).  

 
Tabla 32. Medias de mínimos cuadrados y errores estándar (EEM) de ovocitos 
fecundados in vitro (FIV), espermatozoides ovocito-1 (EO), ovocito monospérmico 
(OM) y eficiencia de fertilización (EF) en verracos, según fuentes y niveles de Zn. 
Tratamiento* Fuente Nivel Variable1 

 
                                n 

  FIV 
% 

EO 
No. 

OM 
% 

EF 
% 

Control 152 -------------- 25 85.3 6.9 8.0 6.6 
ZnSO4150 144 ZnSO4·H2O 150 87.4 8.7 9.1 7.7 
ZnSO4200 155 200 87.8 8.7 4.8 4.1 
ZnO150 157 ZnO 150 87.8 8.3 4.1 3.8 
ZnO200 154 200 85.9 7.1 4.4 3.9 
Zn-Met150 142 Zn-Met 150 87.4 8.7 2.3 1.9 
Zn-Met200 147 200 72.5 6.5 8.9 6.8 

 
 Total 1051                        EEM 3.42 0.54 2.46 2.1 

                      Comparaciones ortogonales de tratamientos                         
Contrastes                                                                            Probabilidad  (P = F)**                          
C1= Control vs  resto de Tratamientos* 0.98 0.06 0.22 0.24 
C2= Fuentes Inorgánicas  (ZnSO4·H2O; ZnO) vs 
       Fuente Orgánica (Zn-Met) 

0.01 0.33 0.51 0.41 

C3=  ZnSO4·H2O vs ZnO 0.64 0.06 0.31 0.35 
C4= ZnSO4150 vs ZnSO4200 0.67 0.99 0.09 0.09 
C5= ZnO150 vs ZnO200 0.61 0.22 0.94 0.94 
C6= Zn-Met150 vs Zn-Met200 0.02 0.03 0.13 0.17 

 1EF = número de ovocitos monospérmicos ovocito-1 inseminados. n = número de ovocitos 
inseminados tratamiento-1.**Se consideraron significativos los valores (P < 0.05). 

  

 

 

 

135



RESUL

 

grupo

de las

vs FO
nivel (

(C3) 

(P = 0

propo

nivele

(C4: P

FIV al

(P = 

respe

regist

LTADOS 

El valor 

o restante d

s FI con la

O 79.95 ± 

(ppm) de Z
 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Para iden

entre ZnS

0.64) (Tab
orciones ce

A través 

es de Zn d

P = 0.67; C
l utilizar 20

En relac

0.06) del 

cto al prom

rados por 

70

Fu
en

te
de

 Z
n

0

Gráfica 2
(FIV), obt
mínimos 
barras, so

FIV del tra

de tratamie

as FO (C2)
3.0, P = 0

Zn utilizado

ntificar el c

SO4·H2O 

bla 32). Los

ercanas al 

del contra

entro de la

C5: P = 0.6

00 ppm (P 

ción al nú

tratamient

medio de lo

las FI (8.2

Inorgánica

Orgánica

Control

20. Efecto de
tenidos con 
cuadrados 

on diferentes

atamiento 

entos (C1; 

) se observ

0.01) (Gráf
o en el PB

comportam

vs ZnO,

s valores o

87%.  

aste C4, C
as fuentes

61). Pero l

= 0.02) (T

mero de 

o Control 

os tratamie

26 ± 0.55) f

7575               

e la fuente de
semen de ve
± error está
s (P < 0.05).

Control n

P = 0.98).

van diferen

fica 20) a
(Gráfica 2

miento entr

 encontrá

obtenidos 

C5 y C6 se

. Las FI no

la FO (Zn-

abla 32, G

EO, el co

(6.9 ± 0.5

entos con a

fueron igua

80      80        

FIV % 

c

e Zn, en la p
erraco. Las b

ándar (EEM)

o fue dife

. Sin emba

ncias sign

unque, es

21). 

re las FI se

ándose po

de FIV pa

e analizó e

o mostraro

-Met = C6)

Gráfica 21)

ontraste C
54) a un m

alguna de 

ales (P = 0

85            85   

proporción de
barras repre
). a,b,c Distint

erente al e

argo, al co

ificativas (

ta diferenc

e realizó u

orcentajes

ra ambas 

el compor

on diferenc

) mostró di

).  

C1 mostró

menor núm

las fuentes

0.33) a la F

9  90

ab

bc

e ovocitos pe
sentan las m
o superíndic

efecto med

mparar la 

FI, 87.23 ±

cia depend

una compa

s similares

fuentes tu

rtamiento d

ias entre n

isminución

 una tend

mero de E
s de Zn. L

FO (7.65 ±

900

enetrados 
medias de 
ce en las 

dio del 

media 

± 2.82 

dió del 

aración 

s FIV      

vieron 

de los 

niveles 

n de la 

dencia      

O con 

os EO 

± 0.58) 

      

    

136



(C2). P
cuand

el nive

Sin e

Gráfica 
ovocito-1 
Fuente o
cuadrado
son difere

Pero al co

do se utiliza

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

No se ap

el de Zn (1

mbargo, a

0

15

30

45

60

75

90
FI

V 
 %

0

2

4

6

8

10

EO
  (

nú
m

er
o)

Gráfica
penetra
(FI) ■; 
mínimos
barras, 

22. Efecto 
(EO), con s

orgánica (FO
os ± error e
entes (P < 0

mparar las

a el ZnO (T

preció ning

150 a 200 

al compara

a 

25 

22

a

a 21. Efecto
ados (FIV), u

Fuente org
s cuadrados
son diferente

del nivel de
emen de ve

O) ■. Las ba
estándar (EE
.05). 

s FI (C3) se

Tabla 32).

gún cambio

ppm) dent

ar el comp

                     

                   

2525                 

ab

o del nivel d
tilizando sem

gánica (FO)
s ± error est
es (P < 0.05

e Zn en el 
rraco. Contr
arras repres
EM).a,bDistint

e observó 

 

o en los E
tro de la m

portamiento

        a         a 

          150    
Zn ppm

150

Zn (p

             1

ab  

de Zn (ppm
men de verra
■. Las ba

tándar (EEM
).  

número de
rol ■; Fuente
sentan las m
tos superínd

una tende

EO (Gráfic
misma FI (C
o del Zn-M

                     

                   
m

ppm)

50                

      a

m), en la pro
aco. Control 
rras represe

M). a,b Distint

e espermato
e inorgánica 
medias de m
dices entre 

ncia (P = 0

a 22) cuan

C4; P = 0.9

Met150 vs 

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137



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138



RESULTADOS 
 
El DPn en ovocitos maduros de cerda se muestra en la Tabla 33. Los 

resultados indican que no existieron diferencias (P > 0.05) entre tratamientos. El 

tratamiento Control reflejó valores mayores de DPn (58.9 ± 6.5 y 53.9 ± 4.8%). 

existiendo una tendencia (P = 0.08) a disminuir el porcentaje de DPn en los 

tratamientos que utilizaron ZnO (ZnO150, 34.5 ± 1.9; ZnO200, 36.5 ± 2.8%) y 

ZnSO4150 (38.1 ± 3.8%). 

En cuanto al comportamiento entre los tratamientos con Zn-Met, se 

observó que a pesar de no ser diferentes estadísticamente, el Zn-Met200 (53.9 ± 

4.8%) presentó mayor porcentaje de DPn que el Zn-Met150 (43.2 ± 5.4%). 

La comparación realizada a través del nivel de Zn arrojó un incremento en la 

proporción de DPn cuando se emplearon 200 ppm. El incremento se presentó en 

las tres fuentes, ZnSO4200 vs ZnSO4150 de 8.7%, ZnO200 vs ZnO150 2%, y   

Zn-Met200 vs Zn-Met150 10.7%. 

Al analizar el efecto de fuente y nivel de Zn en las FI se observó una 

disminución del DPn. La diferencia fue significativa al utilizar 150 ppm, con 

respecto al Control y al Zn-Met200 (Gráfica 24). 

 
Tabla 33. Proporción de desarrollo de pronúcleos (DPn), cabezas espermáticas 
(CE) y espermatozoides intactos (SpzO-1) en ovocitos de cerda, cultivados con 
espermatozoides de verraco tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn. 
Tratamiento Variables 

       DPn        CE   SpzO* 
        %         %      % 

Control 58,9 ± 6,5  35,6 ± 7,1  5,5 ± 3,3 ab 

ZnSO4150 38,1 ± 3,8  61,9 ± 3,8           0.0 b 

ZnSO4200 46,8 ± 4,4  49,2 ± 6,9  4,0 ± 4,0 ab 

ZnO150 34,5 ± 1,9  50,5 ± 4,5 14,9 ± 4,9 a 

ZnO200 36,5 ± 2,8  56,1 ± 3,8  7,5 ± 2,7 ab 

Zn-Met150 43,2 ± 5,4  51,9 ± 5,5  4,9 ± 2,6 ab 

Zn-Met200 53,9 ± 4,8  42,2 ± 6,0  4,2 ± 2,9 ab 

Probabilidad (P = F)          0,08          0,34       0,006 

Los valores representan las medias de mínimos cuadrados ± error estándar (EEM). a,bDistintos 
superíndices en columna, son diferentes (P = 0.006). 

 
 
 
 
 

139



RESUL

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en su 

140



RESULTADOS 
comportamiento. EL tratamiento Control llegó a tener un número de CE hasta del 

16.4% menor con respecto a los tratamientos en los que se aplicó alguna fuente 

de Zn (Tabla 33). 

Tanto el nivel como la fuente de Zn produjeron efectos distintos en la 

presencia de CE. Por ejemplo el ZnSO4·H2O y Zn-Met disminuyen en 12.7% y 

9.7% respectivamente las CE, pero el ZnO aumentó dicho índice hasta un 5.56%.  

Por su parte, la presencia de SpzO-1 mostró una tendencia a diferir entre 

los tratamientos (P = 0.006). Esta diferencia se ve reflejada claramente al 

comparar el ZnO150 (14.9 ± 4.9%) con el ZnSO4150. Este último no presentó 

SpzO-1. Los resultados indican que el ZnO aumenta la presencia de SpzO-1, 

implicando un descenso en la tasa de DPn y CE. 

Para determinar la existencia de relación entre las características de 

calidad seminal, capacidad fecundante de los espermatozoides y DPn, se realizó 

un análisis de regresión lineal seleccionando los modelos mediante el 

procedimiento “stepwise”, el cual arrojó efectos significativos (P < 0.05) al 

establecer una relación negativa (R2 = -0.54) entre MA, con el FIV y DPn en los 

tratamientos ZnO150 y Zn-Met200 (P = 0.02). Así como, la relación (R2 = -0.47) 

negativa entre IAc y los OM en el tratamiento Zn-Met200 (Tabla 34). En el resto 

de tratamientos no existieron relaciones causa efecto significativas con ninguna 

de las variables. 

El análisis muestra que el 54% de la variación en la capacidad de 

penetración espermática de los espermatozoides puede ser explicada por las MA 

del tratamiento ZnO150. Mientras que los IAc (47%) y el DPn (54%) explican el 

comportamiento que mostró el tratamiento Zn-Met200 con los OM y DPn 

respectivamente. 

Finalmente, se realizó un análisis de correlación entre el FIV, EO, OM, EF, 
DPn, CE y SpzO-1, con el IF y ZnSE obteniéndose sólo correlaciones 

significativas entre los tratamientos ZnSO4200 y Zn-Met150 (Tabla 35). 

El porcentaje de FIV del tratamiento ZnSO4200 se correlacionó 

positivamente (P = 0.05) con el IF (r = 0.49), y con ZnSE (r = 0.53). En el caso del 

Zn-Met150 los porcentajes de FIV sólo mostraron una tendencia (P = 0.08) de 

asociación entre el IF y ZnSE (r = -0.52 y r = -0.49 respectivamente).  

141



RESULTADOS 

* γ̂  i
=Variable dependiente: FIV=Ovocitos fecundados in vitro; OM=Ovocitos monospérmicos; 

DPn=Desarrollo de pronúcleos. Modelo general γ̂
i
=β   o+β   1X1+β   2X2+β   3X3+ξί. Los modelos 

fueron seleccionados (PROCStepwise) cuando P < 0.05. 

 
Tabla 34. Modelos de regresión lineal relacionando morfoanomalías (MA), 
integridad acrosomal (IAc) con ovocitos penetrados in vitro (FIV), ovocitos 
monospérmicos (OM) y desarrollo de pronúcleos (DPn) según tratamientos con 
Zn. 

 

  

 

 

 

Las correlaciones estudiadas entre SpzO-1, IF y ZnSE fueron positivas para 

el tratamiento Zn-Met150 (P = 0.05) en ambos casos, mientras que en el 

tratamientos ZnSO4200 sólo se observó una tendencia (P = 0.06) (Tabla 35). 
 

Tabla 35. Correlaciones ( r ) entre ovocitos penetrados in vitro (FIV), índice de 
fragmentación de ADN espermático (IF), concentración de Zn en sedimento 
espermático (ZnSE) espermatozoides por ovocitos maduro (SpzO-1). 
Tratamiento  Variables 
     IF      (P = F) ZnSE   (P = F) SpzO-1  (P = F) 
ZnSO4200 FIV 0.49      (0.05) 0.53      (0.05) ---------- 
 IF -------- -------- 0.49      (0.06) 
 ZnSE -------- -------- 0.50      (0.06) 
     
Zn-Met150 FIV 0.52      (0.08) 0.49       (0.08) ----------- 
 IF -------- -------- 0.47       (0.05) 
 ZnSE -------- -------- 0.53       (0.05) 

Se consideró significativo cuando la P < 0.05. Coeficientes de correlación muestral. 
 

 
 
 
 
 
 
 
 

Tratamiento Variable* Modelo R2 P = F 

ZnO150 FIV γ̂ i =  90.3 – 0.182MA -0.54 

 

0.02 

Zn-Met 200 OM γ̂ i =  0.87 – 0.009IAc -0.47 0.03 

 DPn γ̂ i =  55.2 – 1.68MA -0.54 0.02 

142



RESULTADOS 
 

4.5. Evaluación de la concentración de Zn de tejidos (testículos y 
epidídimos), plasma seminal (ZnPS) y sedimento espermático 
(ZnSE)  

 
 En la Tabla 36, se muestra la composición química de los testículos, 

observándose que ninguna de las variables evaluadas en ambos testículos, 

presentó diferencia (P > 0.05). Es evidente que en el tratamiento Control con un 

nivel de Zn de 25 ppm, no disminuyó la concentración de MS, C y concentración 

de Zn, ni el nivel más alto (200 ppm) alteró dichas variables. Sin embargo, fue 

observado un ligero incremento del contenido de Zn testicular (ZnTes) utilizando 

Zn-Met200, aproximadamente entre 14 a 17 ppm de Zn, mientras que en las FI la 

concentración disminuyó al aumentar el aporte del mineral presentando mayor 

efecto con ZnO. La evaluación de ambos epidídimos (ED, EI) (Tabla 37), indica 

que no hubo diferencia entre tratamientos tanto en la composición de H (ED,        

P = 0.85; EI,  P = 0.76) y de MS (ED, P = 0.87; EI, P = 0.77).  

 Las C, no mostraron diferencias en ambos epidídimos (ED, P = 0.08; EI,    
P = 0.06) pero, los tratamientos con mayor nivel de Zn (200 ppm) registraron una 

reducción en el contenido de ellas, siendo los tratamientos con azufre, los que 

mostraron mayor cambio. 

 Analizando la concentración de Zn (ppm) en epidídimo (ZnEp), se observa 

una tendencia (ED, P = 0.09; EI, P = 0.07) a aumentarlo en ambos epidídimos. 

Este incremento se situó entre 4 y 32 ppm de Zn dependiendo de la fuente de Zn 
utilizada en el PB. A pesar de todo, el tratamiento Control no fue el que tuvo los 

valores más bajos ZnEp (ED, 67.82 ± 9.20; EI, 67.81 ± 8.73 ppm; media ± EEM). 

 En el caso de la concentración de Zn (ppm) en el ZnSE, no existió efecto 

significativo del tratamiento (P = 0.39). Ningún tratamiento registró valores por 

debajo de 900 ppm de ZnSE. El tratamiento Control (920.34 ± 136.21 ppm) no 

mostró diferencias con el resto de tratamientos. En la Gráfica 26 se puede 

observar que el tratamiento Zn-Met200 presentó una concentración mayor de Zn 

≈300 ppm, en comparación al resto de tratamientos.  

 
 
 
 

143



 

    
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RESULTADOS 

144



      
Ta

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 F

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RESULTADOS

145



RESULTADOS 
 
Además, es evidente que la mayor diferencia entre tratamientos se 

registra en la FO. El Zn-Met150 tuvo 906.63 ± 134.6 ppm, mientras que el        

Zn-Met200 presentó una media de 1294 ± 134.60 ppm de Zn. 

 También se observa un ligero incremento en el tratamiento ZnO200 

(1088.59 ± 151.52 ppm). Esto indica que sólo la fuente oxidada y la quelatada 

con metionina, producen un almacenamiento de Zn por encima de 1000 ppm. 

 La fuente con mayor homogeneidad en la concentración de ZnSE fue la 

azufrada (ZnSO4150, 931.02 ± 136.21; ZnSO4200, 920.41 ± 138.87 ppm). 

 Por otra parte, al analizar la dinámica de concentración del ZnSE, durante 

cinco semanas (Gráfica 27), se comprobó que no existía interacción 

Tratamiento*Tiempo (P = 0.40). La concentración de Zn aumentaba o disminuía 

por semanas pero estas diferencias no fueron suficientes para determinar 

diferencias estadísticas.  

 El tratamiento Zn-Met200 nunca tuvo valores de ZnSE por debajo de 1000 

ppm (1090.87 a 1626.23 ± 181.41; media ± EEM). Excepcionalmente, el 

tratamiento Control y ZnSO4150 mostraron valores superiores a 1000 ppm en el 

ZnSE, pero sólo el Control produjo valores tan bajos como 686.19 ± 181.41 ppm.  

 En el caso de la concentración de Zn en el PS (ZnPS) (Gráfica 28), no 

existió efecto del tratamiento (P = 0.33). Con el Zn-Met se obtuvieron las 

concentraciones más bajas de ZnPS (Zn-Met150, 13.53 ± 3.0; Zn-Met200, 16.38 

± 3.0 ppm) al compararla con las FI. Por su parte, los tratamientos con fuente 

azufrada (ZnSO4150, 17.96 ± 3.05; ZnSO4200, 21.02 ± 2.76 ppm) muestran un 

comportamiento similar al tratamiento Control (17.12 ± 3.0 ppm).  

 Por otra parte, se observa que el nivel de Zn de 200 ppm incrementó la 

ZnPS (ZnSO4200, 21.02 ± 2.76; ZnO200, 22.75 ± 3.38; Zn-Met200, 16.37 ± 3.0 

ppm). La ZnPS evidencia que la cantidad de Zn en la FO fue menor que en las 

FI. 

Al analizar la interacción Tratamiento*Tiempo (Gráfica 29), fueron 

identificadas diferencias (P = 0.009) sólo en el tratamiento ZnSO4200, que fue 

causada por la concentración inicial de Zn (semana 2 = 9.31 ppm). En el resto de 

tratamientos, no se observaron diferencias durante el periodo evaluado. 

146



 

 

 

 

 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Gráfica 
de verra
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(138.87)
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26.Concentr
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representan 
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12

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Zn
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147



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(EEM). Con
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33). 

15 16

de verraco 
ados. Error 

(4.69) ▲; 
0 (4.96) +. 

148



 

   

DISCUSIÓN 
Zinc del Aleman Blender ,engañar. 



 



DISCUSIÓN 

 
5. DISCUSIÓN  

 
5.1. Evaluación del comportamiento productivo de los verracos  

 
  Uno de los problemas más habituales en un centro de inseminación 

artificial es mantener a los verracos con una GPS, CC y PV adecuados. Estos 

parámetros están relacionados con la edad, época del año, actividad sexual, raza 

o línea genética del animal. Además, hay que evitar la aparición de problemas de 

sobre peso y lesiones de aplomos que puedan afectar la líbido y la calidad 

seminal (Louis et al., 1994a, b; Wilson et al., 2004). 

 El PF registrado no mostró diferencias significativas (P = 0.63) entre 

tratamientos. Estos resultados ponen de manifiesto que los verracos durante las 

16 semanas de investigación, ganaron peso de manera uniforme coincidiendo con 

los resultados publicados por Kemp (1989) y Wilson et al. (2004). 

 La evaluación de la CC y la obtención de la GPS según Neary y Yager 
(2002), PIC (2008) y Tokach (2009) permiten realizar cambios oportunos en el 

suministro de pienso, ayudando a salvaguardar la condición física, salud y 

producción de los verracos, estando recomendada su estimación al menos, una 

vez por semana. En este experimento fue adoptada esta metodología. Por tanto la 

estimación semanal de la CC y la GPS, permitió tomar decisiones oportunas a la 

hora de introducir cambios en la administración de pienso según indica el NRC 

(1998) para verracos en producción. El suministro mínimo de PB fue 1.8 Kg día-1 

verraco-1 y el máximo de 2.5 Kg día-1 verraco-1.  

En relación con la GPS no se encontraron diferencias (P = 0.91) entre 

tratamientos. Los valores medios de GPS oscilaron entre 1.260 a 1.690 Kg 

semana-1 (ZnSO4150 y ZnO200 respectivamente) siendo superiores a los 

publicados por Louis et al. (1994b) quienes suministraron 1.8 a 2.0 Kg de   

pienso día-1 verraco-1 obteniendo una ganancia de 1.180 Kg semana-1 verraco-1. 

Kemp et al., (1989) recomiendan para verracos jóvenes (<12 meses) una 

ganancia de peso diaria de 400 g día-1 (2.800 Kg de ganancia semana-1). Una vez 

alcanzado el año de edad, aconsejan una ganancia diaria de 200 g (1.400 Kg 

semana-1). Esta última recomendación sólo fue alcanzada por los tratamientos 

149



DISCUSIÓN 

ZnSO4200 (1.670 Kg), y ZnO200 (1.720 Kg) aunque no reflejaron diferencias con 

el resto de tratamientos. 

  Los resultados del presente estudio coinciden con Wedekind et al. (1994), 
quienes no encontraron una mayor ganancia de peso al utilizar diferentes fuentes 

y niveles de Zn en cerdos en fase de finalización. El mismo comportamiento fue 

observado por van Heugten et al. (2003) en cerdos destetados, quienes 

compararon ZnSO4 con dos fuentes orgánicas, Zn-Met y Zn-Lis a un nivel de 80 y 

160 ppm de Zn, no encontrando diferencias entre fuentes y niveles. En esta 

misma línea se encuentra el estudio de Buff et al. (2005) realizado en cerdos 

destetados utilizando 150 ppm de Zn con dos fuentes distintas, Zn-Polisacárido y 

ZnO. 

 En 1970 Liptrap et al., sugirieron incrementar a 50 y 80 ppm de Zn un PB 
que contenían 22 y 35 ppm respectivamente, ya que mejoraron la ganancia de 

peso en cerdos en fase de finalización. Sin embargo, estos datos fueron 

obtenidos con una PB que no utilizaba fitasas en su formulación. Estos mismos 

autores realizaron un estudio con machos no castrados en fase de crecimiento, 

observando que estos requieren de un suministro de Zn en el PB a una 

concentración mayor que los machos castrados. Creech et al. (2004), coinciden y 

señalan, que las fuentes de proteinatos de Zn, aumentan la eficiencia de 

crecimiento de los cerdos comparada con ZnSO4, y recomienda que el 50% del 

requerimiento de Zn sea a través de una FO. 

 Sin embargo, en esta investigación el tratamiento Control tuvo un 

comportamiento similar al resto de tratamientos. Una razón puede ser el 

incremento en el CPD y la mayor biodisponibilidad del Zn contenido en el PB, 

debido a la inclusión de fitasas. No existe suficiente evidencia científica sobre el 

efecto que tiene el consumo de fuentes y niveles de Zn en verracos en producción 

incluso, los datos llegan a ser contradictorios. 

 Teniendo en cuenta la GPS y la CC, se realizaron los cambios de 

suministro (Kg) de pienso de forma individual. Aquellos animales que mostraban 

GPS positivas pero por debajo de 160 g día-1 y/o CC grado <3, les fue adicionado 

entre 100 a 200 g más de piensos día-1, hasta conseguir que el verraco mejorara 

ambas características lo cual, fue más fácil conforme transcurrieron las semanas 

de estudio debido a que al aumentar la edad, los requerimientos nutricionales de 

150



DISCUSIÓN 

los verracos disminuyen y la GPS y CC son más fáciles de mantener con el 

sistema de alimentación establecido (Kemp et al., 1989; Colembrander y Kemp, 
1990; Mateos et al., 1997).  

 Por lo descrito anteriormente, el CPD y la CC registraron diferencias entre 

tratamientos. Los verracos del tratamiento Control y ZnSO4150, mostraron 

problemas para mantener el grado 3 de CC durante el periodo evaluado (grado 

2.69 y 2.83 respectivamente). Debido a ello, se les suministró una mayor cantidad 

de pienso (2.016 y 1.943 g día-1, respectivamente) lo que permitió que entre 

ambos tratamientos no existieran diferencias. Este incremento de CPD aumentó 

el consumo de todos los nutrientes contenidos en el PB, evitando los efectos 

adversos de una posible deficiencia de Zn para el caso del Control. 

 Según Miller y Kornegay (1983) y Martin et al. (1994), el pienso con      

50 ppm o menos, puede ocasionar paraqueratosis, lesiones en patas o 

disminución del crecimiento, todos ellos, signos patognomónicos externos de una 

deficiencia de Zn. También, puede existir daño en esófago y en otras partes del 

tracto digestivo sin presencia de signos externos, como muestra el trabajo de 

Liptrap et al. (1970). Los autores antes mencionados, demostraron que es más 

frecuente y grave las lesiones en verracos que en hembras o machos castrados 

cuando disminuye el nivel de Zn. Estos signos suelen aumentar cuando existe 

una concentración mayor de otros minerales (Ca, Fe, Cu, Mn) con respecto al Zn, 

o el pienso contiene un alto nivel de fitatos (Creech et al., 2004; Williams et al., 
2005). En esta investigación, es posible que hayan sido suficientes las 25 ppm 

contenidas en el PB (Control), tanto para no presentar lesiones macroscópicas de 

paraqueratosis o lesiones en patas, como para producir de forma similar a los 

verracos que consumieron tratamientos con alguna de las fuentes y niveles de Zn. 

 En el ZnSO4150 el aumento de CPD (285 a 628 g día-1) no provocó mejora 

en la GPS, ni en la CC. Es probable que los resultados estén asociados a la 

presencia de un problema neumónico en dos verracos pertenecientes a este 

tratamiento. Por tal motivo, el suministro de pienso se aumentó para reducir el 

riesgo de disminución del crecimiento o muerte.  

 Por otra parte, la reducción del CPD en ZnO150, no fue suficiente para 

disminuir la incidencia de cerdos con tendencia a mostrar una CC de grado 4 

durante todo el experimento. En este caso, el problema fue la presencia de 

151



DISCUSIÓN 

verracos con baja líbido, rehusando a saltar sobre el maniquí, de acuerdo al ritmo 

de recogidas propuesto. Kemp (1991), Close y Roberts (1991), NRC (1998), 
señalan que la demanda de energía para la monta es muy pequeña (5% del total 

energético necesario, lo equivalente a 103 Kcal de ED eyaculación-1), pero esta 

no cambia cuando los verracos tienen un buen estado físico, y/o en un medio con 

pocas variaciones climáticas. 

 Las diferencias en el CPD no fueron significativas entre tratamientos con 

fuente y nivel adicional de Zn (Tabla 16), pero mostraron diferencias durante el 

periodo evaluado, debido a los cambios en la administración de pienso aplicado 

para mantener la GPS y la CC. 

 Los cambios en la CC durante el periodo de evaluación estuvieron sujetos 

al CPD, pero también al IE y al ambiente al que fueron sometidos los verracos. 

Ningún tratamiento mostró una CC grado 1 o 5. Los resultados de la dinámica 

semanal de CC, demuestran que el manejo alimenticio redujo la frecuencia con   

la que los verracos presentaban CC menor o mayor al grado 3. Asimismo, lo más 

difícil fue conseguir que los verracos no disminuyeran el grado de CC a 2, ya    

que existieron factores ambientales (frio, calor) que afectaron el comportamiento 

de los sementales. El experimento se realizó en los meses de octubre a febrero. 

Las temperaturas de la nave durante dicho periodo oscilaron entre -5 a 31ºC. Por 

tanto, la dinámica que presentaron los tratamientos en la CC durante las semanas 

de evaluación se debe a la suma de condiciones ambientales, que llevaron a   

esta variable a cambios erráticos (patrón de subir y bajar) coincidiendo con 

Tokach (2009). Por esta razón, este autor recomienda pesar los cerdos, lo cual 

no siempre es factible de realizar. Sin embargo, en el presente estudio sí se llevo 

a cabo dicha práctica. La correlación que mostraron las variables GPS y CC fue 

de r = 0.40. 

  Louis et al. (1994b) admiten que el cuidado alimenticio al que están 

sometidos los verracos es estricto y con un margen estrecho, puesto que cambios 

pequeños en el suministro de pienso (≈10% del consumo día-1) pueden generar 

rápidas y drásticas diferencias en la CC, líbido, producción seminal, calidad 

espermática, y capacidad fecundante de los espermatozoides (Close y Roberts, 
1991; Close, 1993a; Wilson et al., 2004).  

 

152



DISCUSIÓN 

 
 El ritmo de recogidas establecido en esta investigación fue de un salto a    

la semana. El ZnSO4150 (7.38 días) mostró diferencias con el Control (6.36 días) 

y Zn-Met200 (6.25 días). Los resultados demuestran que el incremento en el IE 

fue de 1.02 a 1.13 días con respecto a los tratamientos señalados. Estudios 

realizados al respecto manifiestan que el IE puede estar afectado por factores    

de salud, temperatura ambiental, líbido o por la calidad y cantidad de            

pienso consumido (Kemp, 1989; Kemp et al., 1989; Louis et al., 1994a,b; 
Mateos et al., 1997; Wilson et al., 2004; Hoy, 2007).  

 En este estudio el mayor IE del ZnSO4150, se debió probablemente a un 

problema de salud que presentaron dos de los verracos. Sin embargo, el 

resultado del Control fue posiblemente mejorado por el aumento en el CPD y su 

efecto en el epitelio testicular. Kemp (1989) y Wilson et al. (2004) coinciden en 

que el aumento de 0.25 a 0.32 Kg de pienso día-1 verraco-1, ayuda a mantenerlos 

en niveles productivos adecuados, además de evitar el efecto ambiental             

(al menos 1ºC por debajo de su línea de termoneutralidad, 20ºC). No obstante, 

Liptrap et al. (1970) encontraron que verracos que consumían pienso con 22 a 

29 ppm de Zn redujeron el tamaño testicular relacionando esto hecho con la 

disminución de la líbido que presentaron. 

 Los verracos del Zn-Met200 se comportaron con mayor líbido y calidad de 

monta durante todo el experimento, destacando el hecho que ningún verraco dejó 

de saltar. Esto, puede estar relacionado con el efecto que la fuente y nivel de Zn 

ejercen sobre el desarrollo de las células de Leydig y los receptores LH los 

cuales, inducen la excreción de enzimas esteroidogénicas, aumentan la 

producción de esteroides testiculares incluida la androsterona y la actividad de 

esteroidogénesis. En este sentido, se hace necesario la realización de análisis 

para determinar la concentración de andrógenos así como un análisis histológico 

de testículo para establecer dicha relación (Lunstra et al., 2003; Wilson et al., 
2004; Zamaratskaia, 2004; França et al., 2005; Johnson et al., 2008). El resto 

de los tratamientos mostraron un IE significativamente igual. 

Al analizar el nivel de Zn se observa que los tratamientos con mayor 

concentración (200 ppm) tuvieron una reducción del IE aunque entre ellos, no 

existieron diferencias significativas. A pesar de las diferencias el IE puede 

considerarse como una variable constante. Además, el comportamiento general 

153



DISCUSIÓN 

de los animales frente al maniquí fue bueno. Por lo tanto, las diferencias no se 

observan relacionadas con consumo de pienso en los tratamientos que contenían 

adicionalmente alguna fuente de Zn, pero sí con la manera en que 

metabólicamente funcionan las fuentes y niveles de Zn en el tejido testicular. 

 Existen evidencias científicas suficientes (Evenson et al., 1993; Bedwal y 

Bahuguna, 1994; Mahan et al., 2002; Lunstra et al., 2003; Hostetler et al., 
2003; França et al., 2005; Ugwu et al., 2009), para mostrar la estrecha relación 

que existe entre el Zn y el crecimiento tisular incluido el peso y tamaño de 

testículos, debido al mayor desarrollo y densidad de los túbulos seminíferos. Por 

ello, se esperaba encontrar algún efecto en el tamaño de la región escrotal 

(SCTD, SCTI, LTD y LTI). Sin embargo, no hubo diferencias entre tratamientos.  

 Schell y Kornegay (1996) y Edwards y Baker (1999) mencionan que las 

fuentes de Zn producen crecimiento somático de forma distinta, ya que al 

comparar las FO (Zn-Met y Zn-Lis), con las FI, la ganancia de peso es mayor en 

las primeras. Sin embargo, Cheng et al. (1998), no encontraron dicha diferencia 

señalando que las FO se comportan igual que el ZnSO4·H2O pero, diferente al 

ZnO coincidiendo esto último con  Rojas et al. (1995) y Ward et al. (1996). 
Mientras que, Creech et al. (2004) señalan que el nivel de Zn utilizado con dichas 

fuentes varía la respuesta en el crecimiento tisular.  

 El análisis de la SCTT revela una tendencia de aumento de tamaño 

testicular en los tratamientos con ZnSO4·H2O. La diferencia en SCTT mostró      

≈3 cm más de tamaño en comparación con el Zn-Met, y en cuanto a la LT las 

diferencias entre ambos tratamientos fue de ≈1.16 cm. Estos resultados se 

ajustan a los presentados por Martin et al. (1994) quienes señalan que esta 

fuente tiene un efecto positivo y mayor a los que muestran las FO y otras FI. 

 Las medidas escrotales de verracos con 12 meses de edad publicadas por 
Trudeau y Sanford (1986), (ancho, 7.5 a 8.5 cm; longitud, 14.5 a 16.0 cm) fueron 

inferiores a las registradas en esta investigación, 10.47 a 13.07 cm de ancho 

(SCT) y 22.07 a 24.45 cm de LT.  

 Valorando el crecimiento del área escrotal se aprecia un aumento 

significativo y lineal, coincidiendo con lo publicado por Allrich et al. (1983) y Lee 
et al. (1987). El efecto de los tratamientos en las variables medidas, demuestran 

154



DISCUSIÓN 

que cada tratamiento produjo de forma particular una dinámica de crecimiento que 

fue constante y homogénea durante el periodo evaluado. 

 Analizando las posibles correlaciones entre PV y medidas del área escrotal 
(SCTD, SCTI, SCTT, LTD y LTI), se observó que la correlación fue distinta entre 

tratamientos. Los valores significativos estuvieron en el orden de r = 0.25 y           
r = 0.79. Estos valores se aproximan a los descritos por Almeida et al. (2006), 
quienes encontraron una r = 0.87. Cada tratamiento tuvo correlaciones distintas, 

siendo el Zn-Met quien mostró  una menor correlación entre el PV con las 

medidas del área escrotal (r = 0.21 a r = 0.55). En cambio, en el ZnO la 

correlación encontrada fue significativamente alta (r = 0.47 a r = 0.75). Es 

importante comprender que estas mediciones deben tomarse con reserva, ya que 

no son un indicador adecuado del crecimiento testicular, coincidiendo con lo 

expresado por Allrich et al. (1983). 

 La medición del PT y PE se realizó en los animales sacrificados en 

matadero. Los tratamientos no mostraron efecto significativo para ambos tejidos. 

Sin embargo, se observa que existe un aumento en el PT en verracos que fueron 

tratados con Zn-Met150. Las diferencias llegaron a ser del orden de ≈22 a 50 g 

con respecto a los valores más bajos. A pesar de ello, los resultados obtenidos en 

este estudio fueron inferiores a los datos de PT en animales entre 8 y 12 meses 

de edad publicados por Allrich et al. (1983) y Lee et al. (1987) quienes 

obtuvieron valores de 510 a 638.5 ± 43.9 g (media ± EEM) y Okwun et al. (1996) 
con valores de 497.78 ± 34.74 g. Huang y Johnson (1996) realizaron un estudio 

en diez generaciones de verracos seleccionando por PT. Estos machos tuvieron 

un PT de 318.0  ± 10.1 g mientras que los verracos que no habían sido 

seleccionados sólo alcanzaron 255.1 ± 12.3 g. Teniendo en consideración estos 

resultados, y la heredabilidad de la característica de tamaño testicular (h2 = 0.35), 

se considera fundamental utilizar la nutrición como un potenciador del desarrollo y 

crecimiento del parénquima testicular. El tamaño y PT puede representar de 

forma significativa la producción de 3.2 a 6.1x109 Spz g-1 de testículo (Trudeau y 
Sanford, 1986; Allrich et al., 1983; Johnson et al., 1994; Rathje et al., 1995; 
Harder et al., 1995; Huang y Johnson, 1996). 

 Con respecto al resultado obtenido por el tratamiento Control no es fácil 

explicar por qué un nivel de 25 ppm de Zn, pudo producir similares pesos 

testiculares que el resto de tratamientos. Tal vez la explicación esté relacionada 

155



DISCUSIÓN 

con lo expuesto por estudios donde se observó que bajo condiciones basales     

de Zn, la MTF1 del citoplasma suele apoyar de forma positiva al Zn en la 

producción de MT y ZnT1, permitiendo almacenar mayor cantidad de Zn en los 

zincosomas transfiriendo cantidades suficientes al núcleo (McMahon y Cousins, 
1998; Cousins et al., 2006; Hernández, 2006; Murakami e Hirano, 2008; 
Jackson et al., 2008). 

Los resultados indican que al aplicar mayor nivel de Zn o cambiar la fuente 

no se mejoró el PT. Esto está en concordancia con lo expuesto por Carlson et al. 
(2007) y Hernández, (2006), quienes identificaron que es más evidente el efecto 

del nivel de Zn que el cambio en la fuente de dicho elemento. Por ello, la pregunta 

sería si vale la pena utilizar la concentración (165 ppm) que el NSNG (2010) ha 

publicado recientemente, cuando la evidencia científica es incipiente, y no 

argumenta el efecto negativo que puede sufrir el crecimiento tisular de testículo o 

la reducción de la producción y calidad espermática en verracos cuando se utiliza 

un nivel superior a 150 ppm y se incluyen fuentes orgánicas. 

 En cuanto al IG, se puede señalar que no existieron diferencias entre 

tratamientos pero, los valores fueron inferiores a los encontrados por          

Okwun et al. (1996) y Almeida et al. (2006). Estos autores muestran IG de 0.4, el 

doble del obtenido en los tratamientos probados. Por tanto, los valores indican un 

menor crecimiento testicular con respecto al PV de los machos. Es probable que 

la restricción alimenticia haya afectado el desarrollo de los testículos, y no se 

encontraron diferencias debido a que todos los verracos fueron sometidos al 

mismo sistema. 

 Ya en 1961, Stevermer et al. determinaron que los cambios nutricionales 

en verracos suelen afectar de manera más rápida y con mayor magnitud            

los órganos accesorios que a los testículos. En el caso de los epidídimos (PED, 
PEI), se puede señalar que el peso no evidenció diferencias entre tratamientos. 

Los resultados de este estudio (70.0 a 91.8 ± 5.5 g; media ± EEM) son cercanos  

a los publicados por Harder et al. (1995) (62 a 87 g), superiores a los de Huang y 
Johnson (1996) (60.8 ± 2.5 g a 79.2 ± 2.1 g) y más bajos que los de Allrich et al. 
(1983) (147.2 ± 5.6 g). A pesar de las diferencias encontradas con otras 

investigaciones, el desarrollo de los epidídimos está en relación con edad y peso 

de los verracos analizados.  

156



DISCUSIÓN 

 
 Sin embargo, los valores demuestran la existencia de diferencias en el PE 
del orden de 17.63 g a 19.5 g, ya que el ZnSO4200 (PED, 89.5 g; PEI, 91.8 g) 

registró epidídimos más pesados que el resto de tratamientos siendo el             

Zn-Met200 el que menor peso produjo (PED, 70.0 g; PEI, 74.2 g). 

 La concentración de Zn existente en el epidídimo está estrechamente 

relacionada con el Zn liberado por los espermatozoides durante su maduración 

(Henkel et al., 2003; França et al., 2005). A la vista de los resultados obtenidos 

se considera que existió un efecto negativo del Zn en aquellos verracos que 

consumieron la fuente orgánica con 200 ppm, provocando un efecto citotóxico en 

el epitelio epididimario que se ve reflejado tanto en el peso como en los resultados 

de calidad seminal que serán presentados en el siguiente capítulo. 

 

5.2. Análisis de la dinámica de producción y calidad seminal que 
presentan los verracos, a través del espermiograma básico del 
eyaculado y de la evaluación de la integridad acrosomal  

 
El volumen de eyaculado en las variables FR, FP y VT, no mostró 

diferencias entre el tratamiento Control y el resto de los tratamientos. 

Los valores de FR obtenidos en este experimento, fueron menores a los 

reportados por Gadea (1997) describiendo valores entre 101.68 a 120.87 mL. 

Martínez (2002), Roca et al. (2006) y Ugwu et al. (2009) reportaron intervalos de 

valores de FR de 46 a 185 mL. Estos investigadores utilizaron verracos de 6 a 48 

meses, sometidos a un IE similar al utilizado en este estudio (7.78 días). Knox 
(2000) establece que un buen método de extracción permite obtener un volumen 

de FR entre 80 y 100 mL. Louis et al. (1994a, b) y Huang y Johnson (1996) 
mostraron que la edad no tienen un efecto lineal con el volumen del eyaculado en 

verracos mayores de 9 meses, mientras que el IE si lo afecta. Ugwu et al. (2009) 
determinaron que puede existir diferencias entre razas al comparar el Vol de FR. 

También demuestran que el tamaño testicular y el peso corporal afectan a esta 

variable debido a su alta correlación (r = 0.79).  

Es probable que el tamaño testicular obtenido en este estudio y que se 

refleja en el valor de IG <2, sea una de las causas para explicar el menor Vol en 

la FR. 

157



DISCUSIÓN 

 
Hacker et al. (1994) mostraron que el sistema de alimentación afecta el 

Vol de eyaculado en verracos menores de 180 días, observando que la restricción 

del pienso redujo el Vol de 117 a 83 mL. Estos valores son similares a los de este 

estudio (63.40 a 75.01 ± 8.15 mL: media ± EEM); además la cantidad de pienso 

suministrada estaba basada en el peso corporal del verraco, similar al sistema de 

alimentación de esta investigación. Brown (1994) menciona que el sistema de 

alimentación en verracos maduros no afecta el Vol del eyaculado, ni la 

concentración espermática, pero en verracos jóvenes (<180 días) puede reducir el 

tamaño testicular y la concentración espermática. En este experimento se inició la 

restricción de pienso a los 6.5 meses, con un PI de 110 Kg, suministrando 3.5 Kg 

de pienso, por ello no se considera la causa para obtener menor FR. Al inicio de 

la recolección de eyaculados, se redujo la cantidad de pienso (1.8 a 2.5 Kg), lo 

cual probablemente no fue suficiente para permitir un crecimiento testicular mayor 

y por lo tanto un aumento en el Vol de la FR (Harden et al., 1995; Huang y 
Johnson, 1996; Lunstra et al., 2003). 

Es importante hacer notar que el tratamiento Control tuvo un nivel de Zn de 

25 ppm, al menos cinco veces menos que el resto de los tratamientos, y que 

alcanzó niveles de FR similares, lo cual probablemente se deba a que el CPD 

favoreció al tratamiento Control. Kemp (1989) y Brown (1994) afirman que los 

animales primero satisfacen sus necesidades nutricionales de mantenimiento y 

desarrollo, y el resto lo derivan a la reproducción, esto explica que el consumo de 

50.4 mg día-1 de Zn de los verracos del tratamiento Control, fuera suficiente para 

producir la misma cantidad de FR que los verracos asignados al restos de 

tratamientos, los cuales consumían al menos 285 mg día-1 del mineral. Esto 

significa que los niveles de Zn recomendados (NRC, 1998; FEDNA, 2006; NSNG, 
2010) pudieran estar sobreestimados. Creech et al. (2004) demostraron que un 

pienso base con 23 a 27 ppm, adicionado con 50 a 500 ppm no mejoró el 

desarrollo de cerdos en crecimiento y finalización. 

En cuanto a los tratamientos que contenían alguna de las fuentes, se 

observa que las FI aumentaron la FR, al incrementar el nivel de Zn, lo cual no fue 

observado en el Zn-Met, indicando que esta FO a un nivel de 200 ppm no mejora 

el Vol de la FR, y  por el contrario tiende a perjudicarlo (Turgut et al., 2003). 
Wilson et al. (2004) mencionan que un aumento de 75 a 150 ppm de Zn en el 

158



DISCUSIÓN 

pienso, no mejoró la producción y calidad seminal, pero ayudó a mejorar los 

problemas locomotores de los verracos. 

Hunt et al. (1992), Martin et al. (1994) y Knox (2000) señalan que una 

concentración reducida de Zn en el pienso puede apoyar al crecimiento tisular, 

incluido el de células de Leydig, pero no desarrollar la capacidad total de los 

receptores a LH y por tanto, disminuir la concentración de testosterona, 

provocando una menor producción de espermatozoides y de secreciones de las 

glándulas accesorias, ocasionando una reducción en la libido. Según Hunt et al. 
(1992) en humanos, la contribución de la secreciones de las glándulas accesorias 

(FP) al VT, es del 60% al 80 % y en el cerdo es de 80% a 90% (Knox, 2000).  

Los resultados en esta investigación no mostraron que entre tratamientos 

existieran diferencias en la producción de FP. Los datos corresponden a valores 

de eyaculados normales, exceptuando el ZnO150 (68.85 mL). Knox (2000) 
señala que la FP suele estar entre 70 a 400 mL. Sin embargo, el tratamiento 

ZnO150 redujo entre 27 a 52% la producción de FP, con respecto al resto de los 

tratamientos. Este tratamiento, tuvo verracos que mostraron menor líbido, y el IE 

aumentó. Por ello existe la posibilidad de que estos animales tuvieran un 

comportamiento distinto debido al nivel de Zn y no tanto por la fuente, ya que los 

resultados evidenciaron que los tratados con 200 ppm de ZnO, se comportaron de 

forma más cercana al resto de los tratamientos. 

Louis et al. (1994a) y Brown (1994) mencionan que un inadecuado 

consumo de nutrientes afecta de forma rápida a las glándulas accesorias y se ve 

reflejado en la producción de FP, además describen que la FP está relacionada 

con el tamaño del epidídimo, por lo que es probable que el menor tamaño 

mostrado por los tratamientos ZnO150 y Zn-Met200 haya sido consecuencia de la 

menor cantidad observada con respecto al resto de los tratamientos. El 

coeficiente de correlación (Tabla 25) entre las variables FP y PE, en ZnO150       

(r = 0.73) y Zn-Met150 (r =0.91), mostró una fuerte asociación que indica que si el 

tamaño del epidídimo disminuye, el Vol de FP será afectado de la misma manera. 

Utilizando este hecho se puede mencionar que es probable que las glándulas 

accesorias y en particular la próstata hayan sido afectadas al igual que el 

epidídimo  

 

159



DISCUSIÓN 

 
No hay que pasar por alto que al menos en las FI, el aumento de nivel de 

Zn (150 a 200 ppm) produjo un incremento en el Vol de FP. Pero al igual que en 

la FR, se observa que el aumento de la concentración del mineral en el Zn-Met 

perjudicó la producción de FP. 

El VT reportado por Louis et al. (1994a,b), Marin-Guzman et al. (1997), 
Estienne y Harper (2004), Rodríguez (2008), Sulabo et al. (2008) muestra un 

valor medio alto (155 mL a 276 mL) al que fue obtenido en esta investigación 

(130.58-207.32 ± 26.93 mL: media ± EEM). Sin embargo, los valores cercanos a 

los reportados por los autores antes señalados, fueron los producidos por FI a 

nivel de 200 ppm (ZnSO4200, 207.32 mL; ZnO200, 183.4 mL; EEM=26.93). El Vol 
de estos tratamientos muestra un incremento que representó en la fuente 

ZnSO4·H2O un 15%, y en ZnO el 43%. Mientras que la FO al utilizar el nivel de 

200 ppm produjo un ligero decremento (7.7%) en el VT. 

Es evidente que el tratamiento Control a pesar de la menor cantidad de  

Zn, tuvo mayor VT que el ZnO150 (36.82 mL = 22%) y que el Zn-Met200          

(9.5 mL = 5.7%), ya que en estos dos últimos tratamientos la menor FP contribuyó 

a que se redujera el VT. Esto muestra el efecto negativo del menor tamaño que 

tienen los epidídimos y las glándulas accesorias en ambos tratamientos. 

Al analizar el efecto del tiempo en las variables FR, FP y VT, se 

encontraron diferencias que indican que conforme aumentó la edad, PV, TT y TE, 

se incremento la producción (mL), lo que coincide con Huang y Johnson (1996), 
Ford et al. (1997) y Lunstra et al. (2003). Sin embargo, el efecto del tratamiento 

durante el periodo de 16 semanas evaluadas, no mostro diferencia. Lo que indica 

que los tratamientos no modificaron su efecto durante el periodo probado.  

La Mot encontrada en este experimento no mostró diferencias entre 

tratamientos, y los valores se ubicaron dentro de lo considerado como     

adecuado para esta característica seminal (>70%) (Shipley, 1999; Knox, 2000; 
Audet et al., 2004; Roca et al., 2006; Fraser y Strzezeck, 2007; Jacyno et al., 
2007). Gadea (1997) publicó que la Mot de eyaculados clasificados por la 

prolificidad demostrada (>10 lechones camada-1) fue de 65 a 80%. Roca et al. 
(2006) describieron que cuando un eyaculado muestra porcentajes de Mot de 

83% suele producir tasa de fertilidad altas, mientras que valores de 80% generan 

160



DISCUSIÓN 

tasas pobres. Por su parte Huang y Johnson (1996) mostró que el incremento de 

eyaculados por semana disminuye la Mot de 85 a 73%. 

Desde el punto de vista nutricional, Louis et al. (1994a) señalan que la Mot 
no es afectada por el nivel de proteína, y los valores suelen variar entre un 80% a 

84%. Sulabo et al. (2008) probaron dos sistemas de alimentación (restringida y 

ad libitum), los cuales no modificaron la Mot (86 a 90%). Para el caso de esta 

evaluación, se puede señalar que los resultados fueron ligeramente inferiores a 

los valores señalados, considerándolos como eyaculados que probablemente no 

producirán problemas de fertilidad, excepto el tratamiento Zn-Met200.  

A pesar de no existir diferencias entre tratamientos, en el Zn-Met200 se 

observó una disminución de 1 a 6% de la Mot. Hunt et al. (1992) describió que el 

Zn mejora la Mot, pero cuando existe un consumo excesivo, la Mot se deprime 

significativamente; por su parte Turgut et al. (2003) señalan que la sobredosis de 

Zn reduce la motilidad. 

En el 2000, Althouse et al., encontraron que la Mot no se ve afectada por 

el tipo de fuente de Zn, ya que compararon fuentes quelatadas con ZnSO4 y ZnO. 

Por ello es probable que la reducción de la tasa de Mot se deba al nivel de Zn 

incluido en el pienso. 

Estudios sobre la concentración de Zn en el espermatozoide y PS indican 

que no está relacionada con la Mot (Behne et al., 1988; Hunt et al., 1992). En 

este estudio, no se encontró una relación lineal entre la concentración de Zn con 

el sedimento espermático (SE) y la Mot, en todos los tratamientos, excepto el Zn-

Met200. Los valores del coeficientes de determinación muestran que la Mot en el 

tratamiento Zn-Met200 disminuye cuando se incrementa el Zn en el SE (R2 = 0.71, 

P = 0.0001) (Tabla 28).  

 
Tabla 28. Valores de regresión de la concentración de  Zn (ppm) en sedimento 
espermático (ZnSE) y motilidad (Mot). 
Tratamiento Intercepto β1χι Probabilidad 

P = F 
R2

Control 80.69 0.004 0.17 0.08 
ZnSO4150 82.51 0.002 0.62 0.01 
ZnSO4200 76.14 0.005 0.18 0.08 
ZnO150 84.66 -0.005 0.27 0.06 
ZnO200 81.77 0.002 0.54 0.02 
Zn-Met150 86.74 -0.004 0.13 0.09 
Zn-Met200 110.72 -0.028 0.0001 0.71 

Ecuación de regresión: γι=βo+β1χι +ει;. R2=Coeficiente de determinación. 

161



DISCUSIÓN 

 
Es evidente que el comportamiento de las fuentes de Zn es distinto, como 

lo señala Rojas et al. (1995), pero en este estudio se hace patente, que el nivel 

también lo es y puede afectar adversamente. Tal es el caso del Zn-Met, que a  

150 ppm produce una Mot de 84.5 ± 0.15% y con 200 ppm, la reduce a 78.98      

± 0.15%. 

Martin et al. (1994) señalan que el Zn interviene en el control de la síntesis 

de esteroides, en la integridad del retículo endoplasmico liso de las células de 

Leydig, así como en la sensibilidad de los receptores a LH y los mecanismos de 

liberación de testosterona en el testículo, lo que confiere alguna razón para 

pensar que cualquier cambio en la concentración de Zn en el pienso puede  

alterar las variables antes descritas, contribuyendo de forma directa con el Vol de 

eyaculado en sus distintas fracciones. Pero con la Mot es más aceptado el hecho 

que una deficiencia ligera de Zn puede no estar relacionada, ya que las    

reservas corporales de Zn que se generan en los zincosomas celulares, pudieron 

ayudar en el testículo para que las células espermáticas no se vieran     

afectadas. Sin embargo, una restricción ligera pero por un tiempo prolongado 

puede lograr afectar a las células espermáticas, observando una diminución       

de la Mot (Hunt et al., 1992), así como otros daños en ADN nuclear          

(López-Fernández et al., 2006).  

Henkel et al. (2003) señalan que los espermatozoides deben deshacerse 

del Zn (60%), para la formación de las ODF del flagelo, durante su proceso de 

maduración en el epidídimo. El Zn excretado por el espermatozoide, es entonces 

transportado a través del epitelio de la cabeza del epidídimo, para su reutilización. 

Sin embargo, en evaluaciones de células epiteliales intestinales se ha demostrado 

que cuando existe un exceso de Zn en el medio, existen mecanismos que 

impiden la absorción de ese Zn en epitelio y es dependiente de la presentación. 

Utilizando esta información, se puede sugerir que la concentración excesiva de Zn 

en la cabeza del epidídimo en tratamientos con mayor nivel, pudo inhibir la 

importación del mineral al interior de las células epididimales. Lo que redujo la 

excreción del Zn espermático e induciendo a una menor capacidad de Mot en el 

tratamiento Zn-Met200, lo que coincide con las investigaciones realizadas por 

Bedwal y Behuguna (1994), que además señalan que la CM es menor.  

 

162



DISCUSIÓN 

 
Por otra parte es probable que el menor tiempo que permanecieron los 

espermatozoides en el epidídimo, contribuyeran a reducir la excreción de 

citoplasma y con ello el Zn, generando mayor porcentaje de MA en el eyaculado 

de los verracos tratados con Zn-Met200, las cuales fueron significativamente 

mayores al resto de los tratamientos (Tabla 23 y 26), siendo las GP y GD una de 

las causas. 

La Mot cambio durante el tiempo analizado, y esto estuvo relacionado con 

el tratamiento evaluado. Esto es normal ya que hay factores ambientales que 

pueden llegar a producir cambio en la Mot. Pero al restablecer estos cambios, la 

Mot normalmente suele regresar a los niveles previos, ese fue el caso de los 

tratamientos ZnSO4200 y ZnO150, pero no del Zn-Met200. Este último mostró 

durante 11 semanas una media de Mot de 70%, lo que puede ser debido a un 

efecto permanente del tratamiento.  

En cuanto a la CM, no existieron diferencias entre los tratamientos. Los 

valores que se obtuvieron indican que el tratamiento Zn-Met200 también produjo 

una CM ligeramente inferior (2.95) al resto de los tratamientos (3 a 3.42). Rueda 
et al. (2009) obtuvo una CM de 4.1, con una frecuencia del 75%, mientras que 

Gadea (1997) reportó que la CM más alta (3.17) fue mostrada por verracos      

que eran clasificados como de alta fertilidad (>80%), mientras que aquellos que 

tuvieron fertilidad entre 40% a 60% la CM fue de 2.38. De forma general Rueda  
et al. (2009) señala que es idóneo un eyaculado con CM de 3 y Mot de al menos 

75%. También se observó cambios durante las evaluaciones realizadas, en donde 

algunos tratamientos tendieron a mostrar un descenso, como fue el tratamiento 

ZnSO4150, que se recuperó y mejoró durante las últimas semanas. Sin embargo, 

el tratamiento Zn-Met200 no restableció la CM mostrada durante las primeras 

semanas, coincidiendo con el comportamiento que tuvo de Mot. Es evidente    

que en la medida que los verracos fueron sometidos a un proceso de eyaculación 

sistemático el tratamiento produjo un efecto constante, que para el caso de       

Zn-Met200 resultó negativo. 

En el caso del pH, se observa que los valores tampoco mostraron 

diferencias entre los tratamientos, pero son mayores en ≈0.8 unidades de pH a 

los reportados por Foley et al. (1964), King y Macpherson (1966), Trudeau y 
Sanford (1986), Gadea (2003), y Rueda et al. (2009) quienes encontraron pH de 

163



DISCUSIÓN 

7.3 a 7.69. También fue observada la existencia de una pequeña población de 

verracos que presentan valores de hasta 8.55. En esta investigación el mayor   

pH (8.26) fue producido en el tratamiento Zn-Met200. 

Los valores de pH suelen incrementar con el tiempo pos-eyaculación, y los 

valores observados en este estudio son similares a los reportados por Nevo et al. 
(1970), al tener 20 minutos de haber sido eyaculados. Es probable que los valores 

de pH de este estudio, estén relacionados con la disminución de secreción de FP 

que refleja la funcionalidad de la glándula accesoria y en particular la prostática 

(Bedwal y Bahuguna, 1994; Ali et al., 2007). El pH del eyaculado suele ser 

ácido debido a la cantidad de ácido cítrico, Zn y ácido fosfórico, pero cuando 

existe un daño en la próstata el pH suele incrementarse (Ali et al., 2007). 
Lamentablemente en este estudio no fue analizada la glándula prostática. 

El comportamiento de pH varió en el tiempo de la prueba, y este mostró 

estar relacionado con el tratamiento. En el pH  se observaron valores mayores a 8 

durante la mayoría de las semanas evaluadas. Pero los tratamientos ZnSO4200, 

ZnO200 y Zn-Met200, produjeron valores tan cercanos a los descritos por Foley 
et al. (1964), King y Macpherson (1966), Trudeau y Sanford (1986), Gadea 
(2003), Rueda et al. (2009), al menos durante 4 a 5 semanas de evaluación, para 

luego recuperar el pH por encima de 8. Lo cual indica que el nivel de Zn es 

probablemente el que controla el pH. Lo cual puede ser explicado por el efecto del 

mineral en la producción de PS y su efecto reductor en esta característica. 

La variable Spz mL-1 mostró diferencias significativas entre los 

tratamientos, obteniendo concentraciones al menos el doble de los reportados  

por Trudeau y Sanford (1986), Louis et al. (1994b), Jacyno et al. (2007), 
Rueda et al. (2009), los cuales estaban entre 118 a 680 x 106 Spz mL-1.           

Sin embargo, Fraser y Strzezek (2007) obtuvieron concentraciones de hasta   

856 x 106 Spz mL-1. Existe el reconocimiento sobre el efecto positivo que tiene el 

Zn en el crecimiento testicular, producción hormonal y espermatogénesis  

(Bedwal y Bahuguna, 1994; Rathje et al., 1995). Aunque es evidente que el 

comportamiento productivo del tratamiento Control no difirió con el resto de 

tratamientos, la explicación pudiera estar relacionada con el mayor consumo de 

pienso del tratamiento Control. Por otra parte los estudios sobre necesidades de 

Zn en verraco, que fueron realizados en los años ´70 y ´80, y que aún sirven de 

referencia, dada la incipiente investigación que se realiza en esta área, no 

164



DISCUSIÓN 

utilizaban la enzima fitasa, por lo que aparentemente un pienso base era incapaz 

de cubrir las necesidades nutricionales de los verracos, provocando alteraciones 

en la piel principalmente. Sin embargo, hoy día el uso de la enzima fitasa puede 

colaborar para que la concentración de Zn del PB sea más biodisponible, 

aumentando su aprovechamiento (Williams et al., 2005), lo que evidenciaría un 

requerimiento menor de Zn por parte de los verracos y tal vez la gran tolerancia 

que tienen a efectos citotóxicos dependiendo de la fuente de Zn y de no rebasar 

niveles de 150 ppm, como muestra este estudio.  

  La mayor concentración espermática la produjo el ZnSO4150, que fue      

de 1114.83 x 106 Spz mL-1, la cual es mayor que lo publicado por Williams et al. 
(2005), mientras que la concentración espermática de Zn-Met200 (855.7 x 106 

Spz mL-1) fue igual a lo reportado por Fraser y Strzezek (2007). Las diferencias 

encontradas entre ZnSO4150  y Zn-Met200 resultaron significativas. Pero estos a 

su vez fueron iguales al resto de los tratamientos (907.30 a 1081.57 ± 72.12 x 106 

Spz mL-1: media ± EEM). Como se ha descrito, el tamaño testicular está 

relacionado con la producción de espermatozoides, sin embargo, al realizar la 

correlación entre el PT y la Spz mL-1, no todos los tratamientos mostraron 

evidencias significativas de estar relacionadas, pero si se observó en ZnSO4150.  

Wedekins et al. (1992), Rojas et al. (1995) y Case y Carlson (2002) 
demostraron que las necesidades de Zn pueden ser cubiertas por una cantidad 

distinta de este mineral, dependiendo de la fuente utilizada y la combinación de 

ingredientes del PB. Esto explica probablemente las diferencias en la 

concentración espermática presentada en este experimento, sean debidas al 

efecto por una fuente pero con diferente nivel utilizado (Rojas et al., 1995). Por su 

parte Althouse et al. (2000) y Baker et al. (1998) señalan que el uso de FI y FO 

no producen diferencias en la concentración espermática, cuando se comparan 

entre ellas. Mientras que Fakler et al. (2002) demostraron que al utilizar el Zn 

quelatado con algún aminoácido, incrementa la concentración espermática.  

Con respecto a los resultados obtenidos de producción espermática, 

durante el periodo evaluado, estos demuestran que esta variable se comporta de 

forma distinta durante el tiempo y es afectada por el tratamiento (interacción 

Tratamiento*Tiempo). Se mostró en algunas semanas una disminución en la 

producción espermática, pero esta fue recuperada en todos los tratamientos, 

excepto en el Zn-Met200. A partir de la quinta semana, la concentración 

165



DISCUSIÓN 

espermática mostrada por el Zn-Met200 fue inferior al resto de los tratamientos. 

Asimismo, se identifica el efecto que tiene el crecimiento de los verracos, ya que 

se observó un aumento del  tamaño testicular y un incremento de la producción 

espermática como lo refieren Lunstra et al. (2003) y Ugwu et al. (2009). 

En cuanto a la presencia de MA no existieron diferencias entre los 

tratamientos probados. Aunque, Zn-Met200 produjo al menos 36% más MA que el 

resto de los tratamientos. En general, las MA de este estudio, fueron similares a 

los reportados por Louis et al. (1994b), Huang y Johnson (1996), Shipley 
(1999), Audet et al. (2004), Roca et al. (2006) y Sulabo et al. (2008) que 

corresponden a valores entre 5.9 a 14.4%. Roca et al. (2006), coinciden con 

Gadea (1997), Estienne y Harper (2004) y Ugwu et al. (2009) quienes mostraron 

que del 16.5 al 21% de MA puede ser frecuente en verracos con buena fertilidad  

(>80%). El Zn tiene un efecto directo sobre los espermatocitos primarios, por lo 

que puede verse alterado el porcentaje de MA. Chesters (1978) y Martin et al. 

(1994), señalan que el Zn es necesario para la expresión de genes entre la G1 y 

S, S y G2 , y la G2 y la fase M del ciclo celular, así como, en la formación de los 

receptores de unión “dedos de Zn” de ADN, por lo que cabría la posibilidad de 

encontrar daños morfológicos a nivel de cabeza, o también sería posible que las 

células estuvieran formadas anómalamente (desarrollo incompleto) debido a una 

disminución de hormonas, producción de testosterona por daño en células de 

Leydig (Bedwal y Bahuguna, 1994). Pero lo anterior no coincide con los 

resultados encontrados con el tratamiento Control, ya que la tasa de MA es menor 

al resto de tratamientos, por lo que es probable que los verracos no sufrieran 

daño en testículo, ni en vesículas seminales. Lo anterior concuerda con lo descrito 

con Ali et al. (2007) quien tampoco encontró relación entre la concentración de 

Zn y la presencia de MA. Hunt et al. (1992) encontraron que esperma de humano 

tratados con diferentes niveles de Zn (subóptimos y óptimos) no tuvieron 

diferencias significativas en la presencia de MA. Por su parte Althouse et al. 
(2000) utilizaron fuentes quelatadas de Zn y no encontraron diferencias en las 

tasas de MA, lo que coincidió con Baker et al. (1998) al utilizar ZnO y ZnSO4. 

En este caso la concentración de Zn en el tratamiento Control, no produjo 

efectos adversos sobre esta característica, pero si la concentración de 200 ppm 

con Zn-Met. Esto último sugiere que un elevado consumo de Zn puede producir 

166



DISCUSIÓN 

daños tanto en la morfología externa, como en la morfología de ADN, como se 

mostrará posteriormente. 

El valor de MA observado en los tratamientos, esta dado por una 

proporción distinta de tipos de MA (CL, GP, y GD). Al menos las CL y GD fueron 

diferentes entre tratamientos. Gadea (1997) señala que no todas las MA son de 

origen testicular, ya que su tránsito en el epidídimo puede ser factor importante 

para que se presente una mayor proporción de ella.  

En esta investigación los valores de CL no superaron el porcentaje de 

5.8%. Por lo tanto los valores de CL fueron tan bajos, como los reportados por 

Gadea (1997), quien obtuvo 4% de CL el cual se considera un porcentaje normal 

para no tener problemas de fertilidad, así mismo, Rodríguez (2008) mostró en 

verracos sin problemas genéticos (cariotipos normales) 8.6% de CL, mientras que 

Shipley (1999) encontró un 5% de CL, recomendando que este valor no se 

exceda, para evitar problemas de fertilidad en el verraco. Los datos de este 

experimento indican que las CL aumentan cuando se incrementa el nivel de Zn, 

de forma indistinta a la fuente utilizada. 

En esta investigación ningún tratamiento produjo porcentajes de GP 

considerados como elevados (>6%) (Gadea, 1997), aunque Rodríguez (2008) 
señala que valores de 2.52% son fácilmente observados cuando no existe 

problemas genéticos en los verracos. Shipley (1999) señala que las GP no deben 

exceder del 20%. El mayor valor obtenido en este experimento fue de 4.10%, y 

estadísticamente fue igual al resto de los tratamientos. No existió evidencia que el 

nivel o fuente de Zn, contribuyeran a aumentar el porcentaje de GP.  

En el caso de las GD, se observa un incremento en el porcentaje de células 

dañadas, encontrándose diferencias entre los tratamientos, ya que el Zn-Met200 

incrementó este tipo de MA en al menos 48%. Los valores a pesar de todo, no 

son mayores a los reportados por Rodríguez (2008), quien encontró hasta 18%, 

sin embargo Shipley (1999) recomienda que no se exceda de 15% esta 

característica, para evitar problemas de baja prolificidad y fertilidad.  

Las GC son productos de una deficiente eliminación del citoplasma durante 

la maduración del espermatozoide (Gadea, 1997; Sansegundo, 2008). Es 

probable que los tratamientos utilizados en este estudio no hayan afectado la 

integridad testicular, provocando que los espermatozoides tuvieran una formación 

167



DISCUSIÓN 

adecuada (presencia de complejos tiol-Zn). Pero habría que considerar la 

posibilidad de que el espermatozoide este afectado por el IE, ya que 

precisamente el que menos tiempo de IE mostró, fue el que mayor porcentaje de 

GP y GD produjo (Zn-Met200).  

La célula espermática al remover su citoplasma en el epidídimo, elimina el 

60% de Zn contenido en ella, esta eliminación probablemente no fue tan 

eficientemente realizarla debido a un posible efecto quelante del mineral tanto    

en la cola como en el núcleo, y tal vez al control homeostático de Zn, que        

está presente en el epidídimo como lo señalan los trabajos de Chesters (1978), 
Cousins (1985), Hunt et al. (1992), Krebs (2000), Henkel et al. (2003),      
Iguchi et al. (2004), y Ohana et al. (2009). Dicho control está relacionado con los 

genes transportadores de Zn (ZnT, Zip, MT) que pueden limitar la expulsión       

de Zn del espermatozoide o la entrada de este mineral a través del              

epitelio epididimario, debido a un efecto negativo de la concentración de Zn en    

el lumen epididimario, sobre las células. 

No hay evidencia científica que aclare por que una fuente puede causar 

mayor o menor MA, incluidas en estas los tipos de ellas. Pero podría pensarse 

que el incremento de Zn con una fuente orgánica, esté relacionado con su 

biodisponibilidad, su capacidad de rápida absorción y su mayor tiempo y 

concentración dentro de las células (Rojas et al., 1995).  

Por su parte el comportamiento mostrado de las MA cambió durante el 

periodo de estudio y existió un comportamiento distinto entre los tratamientos 

evaluados. Se observó que en la mayoría de las semanas los tratamientos 

difirieron en los valores de MA, las cuales fueron mayores en el tratamiento        

Zn-Met200 y ZnO150. El primer tratamiento produjo durante 5 semanas valores 

mayores al 12%, alcanzando tasas del 35% de MA. Similar situación fue 

presentada por ZnO150 debido al incremento de GP mostrado a partir de la quinta 

semana. 

Múltiples estudios han demostrado el efecto positivo que tiene el Zn en     

la integridad de membranas, debido a su actividad de eliminación de las ROS, 

protección de grupos SH para evitar la oxidación prematura de ODF (Stohs y 
Bagchis, 1995; Henkel et al., 2003; Ali et al., 2007) y acrosomas (Bedwal y 
Bahuguna, 1994; Ali et al., 2007). Debido a que no se encontró diferencias entre 

168



DISCUSIÓN 

los tratamientos probados en IAc, AD y AR, no hay razón para señalar que el Zn 

suministrado a través de alguna de las fuentes haya sido el promotor de un mejor 

comportamiento en estas variables. 

Con base a los resultados, es lógico pensar que consumos de 50.4 ppm 

día-1 puedan ser suficientes para ejercer un efecto positivo en la conservación de 

los acrosomas, pero esto no corresponde al efecto que describen los algunas 

investigaciones. Los valores de IAc observados en este estudio muestran un nivel 

similar  (82.89 a 86.62 ± 1.90%: media ± EEM) a los reportados por Gadea (1997) 
y Roca et al. (2006). Estos autores señalan que en la medida que estos valores 

aumentan la fertilización y prolificidad pueden ser mejoradas, por ello Gadea 
(1997) y Rodríguez (2008), indican que eyaculados con 91.2% de IAc producen 

una fertilidad superior a 80% y aumento de lechones nacidos vivos >12. 

La evaluación de la IAc mostró que durante el tiempo analizado se 

mantuvieron sin diferencias, y en un intervalo de valores de 75 a 90%. Por su 

parte los AD no cambiaron significativamente durante el tiempo evaluado, aunque 

se puede identificar que el tratamiento ZnO200 tuvo un comportamiento más 

irregular, llegando a valores superiores del 10%. En el caso de los AR. 

 

5.3. Evaluación del estado del ADN nuclear espermático 

 
Los resultados mostraron que el IF fue diferente entre los tratamientos, los 

cuales fueron menores a 10%, excepto el Zn-Met200. Este último tratamiento 

produjo al menos 53% más de IF, con respecto al resto de los tratamientos.  

Con base a los IF los tratamientos se pueden agrupar de la manera 

siguiente: Grupo 1 IF < 5%, que incluyen al Control, ZnSO4150 y Zn-Met150; 

grupo 2 IF = 5 a 10%, ZnSO4200, ZnO150 y ZnO200; y grupo 3 IF >15%,          

Zn-Met200. Esta agrupación permite comparar la información obtenida con los 

resultados que Pérez-Llano et al. (2006) y López-Fernández et al. (2008) han 

encontrado con frecuencia en semen fresco sin diluir. 

Waberski et al. (2002), Enciso et al. (2006), Pérez-Llano et al. (2006), y 
López-Fernández et al. (2008) reconocen que valores menores al 15% de IF, no 

están relacionados con verracos que hayan mostrado fallo reproductivo y 

coinciden que el 64 a 83% de las muestras presentan valores menores al 5% de 

169



DISCUSIÓN 

IF. Por su parte Rybar et al. (2004) y López-Fernández et al. (2008) identificaron 

que valores mayores al 15% pueden provocar problemas reproductivos en el 

verraco. En humanos la metodología de valoración seminal considera normal 

15% de IF, a partir de este valor las muestras hasta 29% son calificadas de mala 

calidad, y cuando presentan 30% o más son considerados con severos 

problemas de calidad espermática y con una alta probabilidad de fallo 

reproductivo. En verracos esta clasificación esta aun en estudio, ya que el IF 

puede modificarse por la edad del animal y por efectos ambientales y sanitarios 

(López-Fernández et al., 2008;).  

En este experimento la frecuencia con la que se presenta fragmentación 

del ADN en los espermatozoides varió con el tratamiento y fue cambiando con el 

tiempo. Pero de forma general el 52.16% de las muestras seminales se 

mantuvieron por debajo del 5% de IF. Mientras que el 12.98% de las muestras 

mostró valores de fragmentación mayores al 15%.  

Está claro que el tratamiento Control produjo el nivel medio más bajo de IF 

(2.91 ± 2.6%), haciéndose evidente que al ingresar alguna fuente de Zn al PB se 

aumentó el daño en los espermatozoides, obteniendo al menos 25%. Los valores 

de IF en el tratamiento Control se mantuvieron constantes (<5%) durante todo el 

periodo evaluado, a excepción de la semana 11 en la que el IF presentó un valor 

de 6.39%. Este incremento, coincide con el mostrado por el resto de los 

tratamientos en esa semana, por lo que es posible que se deba a un efecto 

independiente al tratamiento. Todos los tratamientos volvieron a presentar un 

incremento del IF, cinco semanas después. Los valores observados en estas 

semanas, estuvieron en relación al comportamiento que presentaron los 

tratamientos, por ello el Zn-Met200 (24.55%, semana 11; 20.70%, semana 18) 

produjo valores superiores a todos los tratamientos. Este tipo de comportamiento 

(cíclico) fue también identificado por Ardón (2005). 

Al comparar las FI con la FO se presentaron diferencias de 

comportamiento entre ellas. Mientras que las FI (ZnSO4·H2O y ZnO) produjeron 

similares IF (ZnSO4·H2O, 6.03%; ZnO, 7.88%).  

La FO superó el IF del ZnSO4·H2O en un 43.89% y al ZnO con 28.5%. Lo 

anterior podría estar relacionado con las diferencias en biodisponibilidad de las 

fuentes, las cuales han sido estudiadas por Wedekind y Baker, (1990), 

170



DISCUSIÓN 

Wedekind et al. (1994), Sandoval et al. (1997), Rojas et al. (1995), Edwards y 
Baker, (1999). En estudios realizados con ovinos, pollos y cerdos, las FO (Zn-Met 

y Zn-Lis) han sido más biodisponibles, mostrando mayor concentración de Zn, en 

menos tiempo en el plasma sanguíneo, hígado, páncreas, riñón y hueso (Rojas 
et al., 1995).  

Rojas et al. (1995), sin embargo, demostró que el Zn-Met se comporta de 

forma similar al  ZnSO4, pero diferente al ZnO. Según el autor las fuentes de Zn 

tienen distinta capacidad de estimular la producción de MT, siendo el Zn oxidado 

el que menos actividad estimulante produce, demostrando con ello su pobre valor 

biológico (Rojas et al., 1995; Krebs, 2000).  

Sin embargo, los estudios antes referidos no coinciden con esta 

investigación, ya que el ZnO mostró una  concentración de Zn (ppm) ligeramente 

superior al ZnSO4·H2O, tanto en testículo, epidídimo, y PS, como en 

espermatozoides. Lo que al menos indica que el ZnO se absorbe y almacena de 

forma similar al ZnSO4·H2O. Pero el ZnO produce un efecto diferente en              

el espermatozoide, ya que indujo un 20% más de IF, que el ZnSO4·H2O.        

Rojas et al. (1995) describen que el ZnO tiene un efecto limitado en la producción 

de MT, lo que podría estar relacionado con el hecho de que la MT es necesaria 

para transferir el Zn al núcleo espermático y este a su vez es requerido para la 

integridad y estabilidad del ADN (Evenson et al., 1993).  

Existe una gran controversia sobre el efecto de las FO y las diferencias con 

las FI (Wedekind y Baker, 1990; Wedekind et al., 1994; Rojas et al., 1995; 
Sandoval et al., 1997; Edwards y Baker, 1999), pero de forma general se 

acepta que al menos el ZnSO4·H2O, se comporta de forma similar a las FO. Sin 

embargo, todos los estudios han sido encaminados a  identificar el efecto de 

estas fuentes en el crecimiento celular somático de cerdos.  

En este caso, al comparar la FO Zn-Met con las FI, se observó que la 

primera supera a las dos FI probadas en este estudio, ya que produjo 43.89% y 

28.5% más IF, con respecto a ZnSO4·H2O y ZnO respectivamente. Además, la 

fuente Zn-Met, produjo valores mayores al 10% de IF.  

Spears (1996) demostró que el ZnSO4·H2O y el Zn-Met ofrecen mayor 

retención y utilización de Zn, que el ZnO. En este estudio la fuente azufrada 

171



DISCUSIÓN 

produjo una disminución en la concentración de Zn en testículos, epidídimo, y 

espermatozoide, con respecto a la mostrada por la FO y ZnO. Es lógico pensar 

que el estimulo que ejerce el ZnSO4·H2O en la producción de MT y la expresión 

de los genes ZnT, mejoran la distribución de este mineral en la célula (Edwards y 
Baker, 1999), incluido el ingreso de este mineral al núcleo espermático. Es 

probable que el S contenido en la fuente ayudara a la integridad del ADN 

espermático, lo que se ve reflejado en los valores de IF (6.03%). 

Con respecto a la fuente Zn-Met, los estudios señalan que ofrece una 

mejor absorción y producción de MT, debido a un efecto estimulador de los  

transportadores de Zn (Zip y ZnT), e incrementa su almacenamiento en los 

zincosomas, ayudando con ello a mantener la homeostasis del Zn en el 

citoplasma para evitar un estado toxico (Rojas et al., 1995; McMahon y 
Cousins, 1998; Krebs, 2000). Sin embargo, estos estudios han sido realizados 

en células somáticas, pero desde el punto de vista reproductivo, en la célula 

espermática no existe evidencia alguna. En este estudio el Zn-Met mostró tener 

una elevada concentración de Zn en los espermatozoides, lo que hace pensar 

que la biodisponibilidad de la fuente y su comportamiento metabólico distinto a las 

FI, favoreció ese acumulo de Zn. Sin embargo, esta gran cantidad de Zn, no 

favoreció la integridad de ADN espermático.  

De manera general se puede señalar que el uso de fuentes de Zn, 

incrementan el IF (Control, 2.91±2.6%; ZnSO4·H2O, 6.03%; ZnO, 7.88%; Zn-Met, 

10.49%), el cual afortunadamente no es superior en ninguno de los casos a 15%. 

Sin embargo, los estudios realizados por  Hernández (2006) señalan que 

la concentración de Zn almacenado en las células, está más relacionado con el 

nivel de Zn consumido, que con la fuente utilizada, y por tanto el efecto de la 

fuente queda superado por el efecto del nivel. Esto ha quedado demostrado con 

este estudio, en donde el incremento de 25 ppm a 150 y 200 ppm en el PB 

mostró un efecto negativo, aumentando la fragmentación de ADN espermático 

(Control, 2.91 ± 2.6% ; 150 ppm, 5.73 ± 2.72%; 200 ppm; 10.49 ± 2.66%). 

Es evidente el hecho que dependiendo del nivel que se aplique de Zn, es 

el comportamiento que tiene la fuente. En este estudio se produjo mayor 

porcentaje de IF en las fuentes ZnSO4·H2O (150 ppm, 4.36 ± 2.63% vs 200 ppm, 

7.71 ± 2.41%) y Zn-Met (150 ppm, 3.89 ± 2.57% vs 200 ppm, 16.7 ± 2.59%), 

172



DISCUSIÓN 

cuando se incrementó de 150 a 200 ppm el nivel de Zn en el PB. Pero en el caso 

de la fuente de ZnO el incremento del nivel de Zn, no tuvo efecto significativo, 

aunque 200 ppm redujo en un 30% el IF. Esto probablemente se debe a la baja 

capacidad estimulante que tienen las fuentes oxidadas sobre la producción de 

MT, por lo tanto el Zn citoplásmico es expulsado de la célula a través de los ZnT, 

disminuyendo el ingreso de Zn al núcleo, que en este caso podría haber sido 

perjudicial por el nivel tan alto de Zn (200 ppm) que ha demostrado un efecto 

toxico en la célula espermática (Hortin et al., 1993; Rojas et al., 1995; Spears, 
1996; Smith et al., 1997; Yamasaki et al., 2007; Fukada et al., 2008). 

Evenson et al. (1993) y Smith et al. (1997), demostraron que un exceso 

de Zn en el pienso puede desestabilizar las uniones de S-S y los complejos de Zn 

dentro y entre las protaminas, llevando a la desnaturalización de la estructura 

cuaternaria de la cromatina y mayor desestabilización del ADN in situ.  

Por ello tal vez se puede asegurar que el Zn por encima de 150 ppm 

utilizando fuentes con alta biodisponibilidad como son las FO y sulfatadas, 

pueden originar un perjuicio en la estructura del ADN.  

Los resultados demostraron que los tratamientos se comportan de forma 

independiente al tiempo, revelando que aquellos que logran producir bajos 

porcentajes de IF, lo harán siempre, y aquellos como el Zn-Met200 que producen 

gran daño en la célula, estará presente siempre, esto coincide con los estudios de 

Pérez-Llano et al. (2006). Lo anterior también está relacionado al verraco, ya  

que aquellos que producían altos índices de fragmentación desde el inicio de la 

prueba, se mantuvieron en ese comportamiento. Esto ya había sido reportado  

por Ardón, (2005), De Ambrogi et al. (2006), Enciso et al., (2006),            
López-Fernández et al. (2008). Volker en 2004 (citado por Ardón, 2005) 
también señala que aquellos que son crónicos, muestran valores que pueden 

llegar a ser tan altos como 22%, en este caso los verracos crónicos llegaron a 

producir valores de hasta 60% de IF. 

 

 

 

173



DISCUSIÓN 

 
5.4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro de espermatozoides 

de verracos tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn 

 
 La utilización del PB con un contenido de 25 ppm de Zn ha mostrado ser 

suficiente para producir valores iguales de FIV que los tratamientos adicionados 

con distintas fuentes de Zn. Sin embargo, entre FI y FO hubo diferencias en el 

porcentaje de FIV, debido a que el Zn-Met registró una reducción de ≈15%.  

Los valores de FIV encontrados en este estudio muestran similitud a los 

publicados por Gil et al. (2006), aunque un 10% por debajo de los obtenidos por 

Caballero (2007).  

Aunque las características seminales han sido relacionadas con la 

capacidad de penetración de los espermatozoides tanto in vivo como in vitro 

(Blazak y Overstreet, 1982; Ng et al., 1986; Liu y Baker, 1992; Gil, 2001; 
Braundmeier et al., 2004; Caballero, 2007) otros autores señalan que no todas 

las características seminales (Mot, MA, Spz mL-1, IAc) se relacionan con los 

resultados de FIV (Gadea, 1997; Ardón, 2005). En este estudio no se encontró 

correlación entre las características de calidad seminal y el porcentaje de FIV, 

excepto en el ZnO150, en donde la correlación indicó que las MA inciden 

negativamente en el FIV en el tratamiento (r = -0.54).  

En el año 2005 Ardón mostró que la inestabilidad del ADN disminuye la 

tasa de penetración in vitro. En este estudio, el ZnSO4200 fue el único tratamiento 

que mostró correlación entre la FIV, IF y la concentración de Zn en el sedimento 

espermático (ZnSE), siendo estas correlaciones r = 0.49 y r = 0.53 

respectivamente. El Zn-Met150 sólo registró una tendencia en dichas variables:    

r = 0.52 entre FIV e IF; y r = 0.49 con la ZnSE. Estos resultados indican la 

estrecha relación entre el poder de fecundación y el estado del ADN, lo que 

concuerda con Bedwal y Bahuguna (1994) quienes mencionan que cualquier 

alteración en el IF puede producir cambios en el porcentaje de FIV. 

Aonuma et al. (1978) señalan que una alta concentración de Zn inhibe la 

reacción acrosómica, disminuyendo la capacidad fecundante de los 

espermatozoides. Además, el Zn compite por los canales de transporte de 

membrana multivalentes, desencadenando una reducción de Ca, necesario para 

dicho proceso de capacitación espermática (Cousins et al., 2006; Hernández, 

174



DISCUSIÓN 

2006). Con base en los resultados obtenidos, se puede considerar que un 

aumento de la concentración de Zn en los espermatozoides de los tratamientos 

ZnSO4200 y Zn-Met150, pudiera reducir el FIV, como ya se obtuvo con el          

Zn-Met200. Por lo tanto, la posibilidad de que una concentración máxima de 1000 

ppm de Zn en el ZnSE sea suficiente para obtener porcentajes de FIV (>80%) 

similares a los reportados por Gil (2001) sería oportuno tenerlos en cuenta.  

En relación al tipo de fuente utilizada en este experimento, las FI tuvieron 

un porcentaje mayor de FIV que las FO. El uso de 200 ppm con una FO afectó 

negativamente el porcentaje de FIV. Sin embargo, dicha concentración no tuvo 

efecto en la capacidad de penetración del espermatozoide al utilizar fuentes 

azufradas u oxidadas. 

Es lógico pensar que el comportamiento de las fuentes es debido a la 

biodisponibilidad de las mismas (Wedekin et al., 1992 y 1994; Rojas et al., 1995; 
Spears, 1996; Krebs, 2000, Hernández, 2006). Las FO almacenan mayor 

concentración de Zn en las células de hígado, páncreas, intestino, testículo y 

próstata (Evenson et al., 1993). Esto, coincide con los resultados obtenidos en la 

presente investigación, ya que con el Zn-Met200 la ZnSE registrada fue al menos 

de 250 ppm, un 26% más grande que en el resto de tratamientos. Este aumento 

se corresponde con las 50 ppm (25%) que fueron añadidas en el PB al utilizar 200 

ppm de Zn en esta FO.  

En todos los tratamientos se observó que el SE es capaz de almacenar al 

menos tres veces más de Zn (>900 ppm) del consumido por los verracos a través 

del PB. Los tratamientos con una ZnSE por debajo de 1000 ppm, mostraron un 

mayor porcentaje de FIV (Control, 920.34 ± 136.21; ZnSO4150, 931.02 ± 136.21; 

ZnSO4200, 920.41 ± 138.87; Zn-Met150, 906.63 ± 134.6 ppm). Pero la ZnSE del 

Zn-Met200 fue de 1294 ± 138.7 ppm, lo que redujo el  FIV (72.5%). Bedwal y 
Bahuguna (1994) demostraron que en espermatozoides con una mayor 

concentración de Zn se disminuye la motilidad, así como la capacidad de 

penetración de la célula espermática debido al bloqueo de la reacción 

acrosómica. 

 Diversos estudios han relacionado la calidad seminal con la capacidad 

fecundante del espermatozoide y por tanto, con el número de EO (Liu y Baker, 
1992). Por otra parte, dependiendo del tipo de conservación de la dosis seminal 

175



DISCUSIÓN 

puede variar el número de EO. Con semen congelado Romar et al. (2001) y     
Gil et al. (2003, 2006) indican que los valores de EO se sitúan entre un 1.5 a 2.5 

más en comparación con semen fresco, diluido o refrigerado. En la presente 

investigación se utilizó semen fresco, y se obtuvo 6.5 a 8.7 EO, coincidiendo con 

los resultados publicados por Caballero, (2004) y Gil et al. (2007). 

 El comportamiento reflejado por los distintos tratamientos indica que el 

nivel de Zn puede afectar el número de EO. Dentro de la FO, el aumento del nivel 

de Zn manifestó un efecto negativo sobre los EO. El tratamiento Control          

(6.9) mostró una tendencia a disminuir los EO con respecto al resto de 

tratamientos. El Zn-Met150 presentó 8.7 EO, reduciéndose significativamente 

hasta 6.9 en el Zn-Met200. Situación similar se presenta cuando se utiliza la 

fuente oxidada aunque la diferencia no fue significativa (ZnO150; 8.3 vs ZnO200; 

7.1). Sin embargo, el ZnSO4200 no se comportó de igual manera que la fuente 

oxidada y el Zn-Met. Es clara la reducción de EO cuando se utilizan niveles bajos 

(25 ppm) o altos de Zn (200 ppm). Por lo tanto se puede concluir que los EO 

dependen del nivel y fuente de Zn administrada en el PB. 

 El aumento en el número de EO mostrado por la fuente ZnSO4·H2O aún 

con 200 ppm puede ser explicado por los distintos mecanismos en los que se 

encuentra implicado el S como son: la formación de sulfolípidos y sulfoglicolípidos 

(Huacuja et al., 1990) que apoyan la actividad de movimiento de los 

espermatozoides por la formación de ODF (Henkel et al., 2003), así como           

la integridad del ADN debido a la estabilidad de los puentes disulfuro      

(Evenson et al., 1993; Ardón, 2005).  

 En cambio, el ZnO200 muestra una tendencia a disminuir los EO. Esto 

puede relacionarse con los mecanismos que tiene la célula para controlar el 

almacenamiento y excreción del Zn descritos por Iguchi et al. (2004) y Cousins 
et al. (2006). El pobre estímulo que tiene el ZnO sobre los genes transportadores 

de Zn (ZnT) y en la MT aumentaron la concentración del mineral.  

 Con el nivel de 200 ppm, la fuente azufrada de Zn tuvo menor 

concentración del mineral en los espermatozoides, que los producidos por la 

fuente oxidada y el Zn-Met, lo que indica el efecto beneficioso que ejerce esta 

fuente sobre la expresión de los mecanismos de ingreso, almacenamiento y 

expulsión de Zn.  

176



DISCUSIÓN 

 
 El Zn expulsado del espermatozoide durante la meiosis fortalece las ODF, 
pero en el espermatozoide se queda una concentración relativamente pequeña de 

Zn que junto con el S, protegen los grupos sulfhídrilos evitando la oxidación, 

favoreciendo la motilidad celular y la integridad de membranas aumentando la 

tasa de fecundación (Bedwal y Bahuguna, 1994; Stohs y Bagchi, 1995; Henkel 
et al., 2003).  

 Cuando una célula espermática contiene niveles altos de Zn, Aonuma      
et al. (1978) señalan que puede producirse una disminución de la reacción 

acrosómica y por tanto, el proceso de fecundación puede verse comprometido. 

Los valores de Zn en los espermatozoides de los distintos tratamientos, muestran 

que no está siendo expulsada la misma cantidad en las fuentes utilizadas, aun en 

el mismo nivel de Zn. Las fuentes ZnO y Zn-Met expulsan menos Zn que la fuente 

azufrada, pudiendo estar relacionado con los mecanismos de activación de los 

genes de expulsión ZnT  (McMahon y Cousins, 1998). 

 Por su parte los OM demostraron que los tratamientos producen un efecto 

significativamente igual, registrándose una gran variabilidad entre los valores 

(EEM, 2.46).  

 Los OM más altos correspondieron al tratamiento Control (8.0%), 

ZnSO4150 (9.1%) y Zn-Met200 (8.9%). No obstante, es importante señalar que  

los valores de OM de este estudio son inferiores a los publicados por Romar et al. 
(2001), Gil et al. (2003; 2006), Popwell y Flowers (2004), cuyas proporciones 

estimadas van del 18 al 67%, mientras que en esta investigación oscilaron de 2.3 

al 9.1%. Caballero (2007) y Macedo et al. (2010) han publicado valores entre un 

4.7 y 10.6%, para semen diluido y conservado a 17ºC, coincidiendo con los 

resultados de esta investigación. 

  El análisis de correlación entre las características del semen y los OM, no 

mostró ninguna asociación, excepto en el ZnSO4200 (r = 0.47), en donde se 

observó que en la medida que se pierden la IAc, se aumenta el porcentaje de 

OM. 

 Diversos estudios determinan que eyaculados con menor porcentaje de 

Mot, CM, y altos porcentajes de MA y acrosomas dañados, producen un 

incremento de los OM (Katz et al., 1982; Ng et al., 1986; Chan et al., 1989; Liu y 

177



DISCUSIÓN 

Baker, 1992; Kendall et al., 2000). Además, Bhattacharya y Kanjilal (2003) 
encuentran una relación entre espermatozoides con núcleo inmaduro o ADN 

fragmentado y OM, debido al proceso de selección del propio ovocito, evitando la 

penetración de espermatozoides dañados. Sin embargo, en el presente estudio 

no se encontró correlación significativa entre IF y OM.  

 Caballero (2007) y Gil et al. (2006) señalan que la polispermia está 

relacionada con una tasa de FIV alta y por tanto, inversa a la tasa de EF           

(Gil et al., 2007). La EF con semen congelado publicada por Gil et al.          

(2003; 2007) indica porcentajes cercanos al 48 %, valores superiores a los 

encontrados en esta investigación (1.9 a 7.7%) los cuales, no mostraron 

diferencias entre tratamientos.  

 En cuanto a la tasa de DPn masculinos, los valores oscilaron entre el 34.5 

al 58.9%, no existiendo diferencias entre tratamientos. Sin embargo, los 

tratamientos ZnSO4150, ZnO150 y ZnO200, disminuyeron el porcentaje de DPn  

al menos un 20% con respecto al tratamiento Control, que fue además, el de 

mayor porcentaje de DPn. En general, los resultados demuestran que los 

tratamientos aplicados en este estudio producen DPn inferiores a los obtenidos 

por Romar et al. (2001) quienes obtuvieron valores de 89.29 a 98.71% de DPn 

utilizando espermatozoides de epidídimo y congelados,  considerando para su 

cálculo el valor de los ovocitos penetrados y no el de ovocitos inseminados como 

es el caso de este estudio. Por su parte, Chan et al. (1989) señalan que la 

capacidad de fecundación de los espermatozoides se establece cuando un 

ovocito presenta dos o más pronúcleos. En este experimento, existió una media 

de 3.87 Pn por ovocito, siendo los valores de las distintas fuentes de Zn los 

siguientes: Control 4.15%; ZnSO4·H2O, 3.86%; ZnO, 3.45%; y Zn-Met, 3.85%.  

 Asimismo, los análisis de regresión indicaron que la tasa de MA                

se relaciona negativamente con la tasa de DPn en el tratamiento ZnSO4200         

(r = -0.54). El Control registró el valor más alto de DPn (58.9 ± 6.5%),  

probablemente debido al efecto positivo de un nivel bajo de Zn en el pienso, aun 

existiendo una gran variación en este tratamiento. No obstante, con 200 ppm se 

observa una tendencia a aumentar el DPn, no reflejándose dicho efecto en el 

resto de variables analizadas. Se considera que un espermatozoide que ha sido 

capaz de penetrar al ovocito, tiene las condiciones morfológicas y fisiológicas 

necesarias para desencadenar los mecanismos implicados en unión de 

178



DISCUSIÓN 

pronúcleos y desarrollo embrionario posterior. Por ello, a pesar de las diferencias 

mostradas por los espermatozoides en los distintos tratamientos es probable que 

el DPn no se vea afectado.  

 Entre tratamientos, se observan evidentes diferencias en el porcentaje de 

CE y SpzO-1. Los resultados reflejan que aquellos tratamientos con alguna fuente 

de Zn se comportan de forma distinta al Control, ya que este último presentaba 

menos CE que el resto de los tratamientos. Los tratamientos con FI y FO, tuvieron 

más del 40% de espermatozoides penetrados (CE y SpzO-1) que no formaron Pn, 

lo que puede estar relacionado con el efecto del Zn. Según Bedwal y Bahuguna 
(1994) la normal y completa descondensación de la cromatina depende del 

contenido de Zn en la cabeza del espermatozoide, y de la presencia de enzimas 

como la glutatión peroxidasa (GSH) la cual, está estrechamente relacionada con 

el DPn masculinos. La actividad de la GSH en la reducción de los puentes 

disulfuro de las protaminas espermáticas generan la descondensación, pero 

cuando el Zn se incrementa, este inhibe la actividad enzimática (Blazak y 
Overstreet, 1982; Fushida et al., 1993; Evenson et al., 1994; Popwell y 
Flowers, 2004; y Enciso et al., 2006. Evenson et al. (1993) encontraron que un 

nivel bajo de Zn puede alterar la condensación de la cromatina, así como altas 

concentraciones producir un aumento en la formación de puentes S-S 

(quelatación) que incrementará la hipersensibilización de la cromatina, impidiendo 

que el ADN se descondense correctamente alterándose el proceso de 

fecundación. En esta investigación se observa claramente como un aumento de 

Zn produce efectos negativos sobre varias características del espermatozoide en 

los procesos de fecundación, haciéndose necesario un estudio más profundo de 

los mismos.  

 

5.5. Evaluación de la concentración de Zn en tejidos (testículos y 
epidídimos), plasma seminal (PS) y sedimento espermático (SE) 

 
La composición química de testículos y epidídimos no mostró diferencias 

en cuanto a MS, H y C.  

El nivel de Zn en el PB no afectó significativamente la concentración de 

ZnTes, ni la utilización de alguna fuente de Zn aumentó el contenido del mismo. 

Esto, puede estar relacionado con los estudios desarrollados por Shell y 

179



DISCUSIÓN 

Kornegary (1996) quienes observaron que para encontrar diferencias en el 

contenido de Zn en tejidos como riñón, hueso (10º costilla), y músculo era 

necesario utilizar cantidades superiores a 1000 ppm de Zn en el PB.  

Si bien, los resultados demuestran que el contenido de Zn no puede 

considerarse diferente entre tratamientos, hay que tener en cuenta que los 

análisis de espectrofotometría indican que la fuente Zn-Met incrementa el 

contenido de Zn al menos entre 14 a 17 ppm cuando se utilizaron niveles de 200 

ppm en el PB. A partir de esta concentración, sería necesario identificar si este 

aumento se mantiene cuando se incrementan las ppm de Zn, ya que un nivel 

elevado de Zn en testículo produciría un aumento del Zn espermático. 

Bedwal y Bahuguna (1994) señalan que el tejido testicular tiene un 

crecimiento corporal muy rápido. Por ello, un consumo deficiente de Zn produce 

un decremento sustancial de este mineral en el testículo (Hunt et al., 1992;  
Evenson et al., 1993; Oteiza et al., 1995). La disminución en el contenido de Zn 
del testículo (al menos 11%) puede producir una cantidad inadecuada de enzimas 

de transcripción, necesarias en la cabeza de la célula espermática (Bedwal y 
Bahuguna, 1994), o una reducción de la unión del Zn con el grupo SH de la 

cisteína, para formar el grupo tiol que ayuda a las células espermáticas a no 

oxidarse prematuramente en el epidídimo (Oteiza et al., 1995; Henkel et al., 
2003). 

Los mecanismos por los que el contenido de Zn testicular cambia, han sido 

asociados por Rojas et al. (1995) al nivel de Zn aplicado en el PB, mientras que 

Bedwal y Bahuguna (1994) mencionan que en la medida que los machos 

maduran, el requerimiento nutricional se mantiene, pero el contenido de Zn en 

testículo aumenta. Esto puede soportar la hipótesis de que existe una estrecha 

relación entre necesidad de este mineral y el crecimiento de tejidos, ya que la 

velocidad con la que crecen los testículos después de la pubertad no es la misma 

con la que crecieron previamente.  

En este experimento los resultados demuestran que en animales jóvenes 

(<12 meses) el nivel de Zn no produjo diferencias en el contenido testicular, 

manteniéndose en niveles de 76.25 a 93.42 ppm. Asimismo, el tratamiento 

Control no afectó el contenido del mineral en el parénquima, lo que hace suponer 

180



DISCUSIÓN 

que niveles de 25 ppm son suficientes para concentrar la misma cantidad de Zn 
que aquellos que recibieron alguna fuente de Zn. 

La adición de fuentes de Zn no mejoró el contenido del mismo, aunque el 

Zn-Met200 registró un incremento del mineral en el tejido testicular, por lo que es 

probable que dependiendo de la fuente de Zn, existan diferentes mecanismos de 

estímulo en las células, que ayuden a aumentar la concentración de Zn como ya 

ha sido descrito en hígado, riñón, hueso y pancreas por Schell y Kornegay 
(1996). 

Las células testiculares eliminan Zn transfiriéndolo a los espermatozoides 

inmaduros, principalmente en la fase G1 (síntesis de proteínas, expresión de 

genes, aumento de tamaño y desarrollo de orgánulos celulares) y S (replicación 

del ADN) del ciclo celular (Hunt et al., 1992), periodos donde se requiere mayor 

concentración de Zn. Por tanto, una intoxicación del testículo parece ser poco 

probable. 

En el epidídimo la concentración de Zn (ZnEp) tampoco fue afectada de 

forma distinta por los tratamientos, lo que provocó que la concentración fuera 

similar, aún cuando una diferencia en la concentración de 30.9 a 34.4 ppm de Zn 

se registró al comparar el Zn-Met200 con el resto de los tratamientos. Pero este 

incremento no fue suficiente para obtener diferencias significativas entre los 

tratamientos.  

La concentración de ZnEp tiende a ser constante en cerdos, y es similar a 

la encontrada en los testículos. La eficiente maduración espermática que se 

realiza en el epidídimo depende de las condiciones que guarda este órgano. 

Cuando existe un bajo consumo de Zn existe una reducción en la producción de 

proteínas para la maduración espermática y proteínas de transporte de Zn 

(Bedwal y Bahuguna, 1994). Las proteínas son andrógeno-dependientes, por lo 

que una concentración de Zn en el PB menor a lo que requieren los animales, 

disminuyen la secreción de las hormonas, debido al efecto que este ión tiene en el 

desarrollo de las células de Leydig y Sertoli, y su relación con el nivel de 

hormonas secretadas por el hipotálamo (Estienne y Harper, 2005). Pero cuando 

se excede el consumo de Zn, el epidídimo que es sensible a pequeñas 

variaciones en el contenido del mineral, reduce la producción de proteínas 

transportadoras de Zn, cierra los canales de ingreso a su tejido impidiendo que se 

181



DISCUSIÓN 

expresen los genes (Zip), y con ello, el contenido epididimario se mantiene 

constante.  

 En el SE no existió efecto de los tratamientos en la concentración de Zn 

(ZnSE). A pesar de ello, vale la pena considerar que el Zn-Met200 aumentó 

aproximadamente 300 ppm de Zn en el SE. Un nivel superior a 150 ppm en el PB 
puede inducir a un elevado contenido del mineral en la célula espermática, 

provocando una disminución en la motilidad, aumento de morfoanomalías, un 

proceso mayor de fragmentación y alteraciones en la capacidad fecundante, lo 

cual, concuerda con lo descrito por Bedwal y Bahuguna (1994). Henkel et al. 
(2003) quienes señalan que el 93% del Zn espermático se encuentra en el flagelo, 

especialmente en las ODF, y el 7% restante se encuentra en la cabeza. Este 

último, puede ser aumentado de 4 a 5 veces más, lo que provocaría su unión a la 

matriz nuclear, produciendo una desestabilización de las uniones de S-S y Zn 

dentro y entre la moléculas de protaminas induciendo la desestabilización de la 

estructura cuaternaria y haciendo más susceptible al ADN a la desnaturalización 

in situ (Evenson et al., 1993; Henkel et al., 2003). 

En todos los tratamientos se observó una concentración media de Zn      

por encima de 900 ppm, correspondiendo a los espermatozoides del ZnO200 y 

Zn-Met200 niveles de Zn superiores a 1000 ppm.  

Al analizar la ZnSE, se registró en al menos cinco semanas, una 

concentración mínima de Zn en los espermatozoides de 600 ppm, en tanto que la 

máxima concentración de Zn fue 1600 ppm. También se observó que dentro de 

cada tratamiento la ZnSE no fue constante, ya que presentó un patrón de 

comportamiento semejante a “picos de sierra”. 

Los cambios en la concentración de ZnSE, reflejan que el contenido del 

mineral es al menos dos tercios más grande que el consumo máximo de Zn al 

que fueron sometidos los verracos. Y en los casos donde se utilizó Zn-Met200, 

tuvo al menos 1000 ppm más de Zn que lo que consumían a través del PB. 

Los valores de ZnSE indican que cada fuente se comporta de forma 

distinta. A pesar de contener el mismo nivel de Zn en el PB, la concentración de 

ZnSE tendió a incrementarse en el ZnO200 (1088.59 ± 151.52 ppm) y Zn-Met200  

(1294 ± 134.60 ppm), mientras que el almacenamiento fue menor en el 

tratamiento ZnSO4200 (920.41 ± 138.87 ppm). Por tanto, sería conveniente 

182



DISCUSIÓN 

considerar, en el momento de utilizar fuentes con alta biodisponibilidad, la 

posibilidad de no suplementar el pienso con niveles de Zn superiores a 150 ppm.  

Los resultados muestran como el SE de los tratamientos que contenía más 

ppm de Zn, tuvieron un efecto inverso en el PS, ya que fueron los que menor 

concentración ZnPS presentaron, coincidiendo con los tratamientos con FO.  

El PS tiene un papel importante para mantener el nivel óptimo de iones de 

Zn (Strzezek et al., 2004), tanto en los espermatozoides como en el epidídimo. El 

Zn del PS proviene en su mayor parte de la próstata. En este estudio, se observó 

que ningún tratamiento desarrolló un efecto diferente, y mantuvo los valores de Zn 

dentro de un intervalo que osciló entre 13.53 ± 3.0 a 22.75± 3.38 ppm. Los valores 

de ZnPS son similares (19.53 a 26.68 ppm) a los que encontraron Saiz et al. 
(1997), Oteiza et al. (1995) y Gadea (1997). 

 Gadea (1997) señala que aquellos animales con una fertilidad alta, 

presentaron valores mayores de ZnPS. Esto, pudiera explicar que los bajos 

valores obtenidos en este estudio con el Zn-Met200 estén implicados en la 

reducción de la capacidad de fecundación de los espermatozoides. 

 

 

 

183



 



 

 

 

   

CONCLUSIONES 



 



CONCLUSIONES 
 
6. CONCLUSIONES 
 
De los resultados obtenidos en esta investigación, se concluye lo siguiente:  

1. Los verracos no mostraron diferencias en su desarrollo corporal, 

crecimiento testicular y epididimario durante el periodo evaluado con los 

diferentes tratamientos. Pero, se observó que cuando el tratamiento no 

contenía una fuente adicional de Zn, era requerida mayor cantidad de 

pienso para mantener una adecuada CC y ganancia de peso. 

 
2. El tratamiento Zn-Met200 afectó significativamente algunas características 

de producción y calidad seminal, reduciendo la concentración espermática 

y la Mot. Asimismo, se aumentó el porcentaje de CL y GD.  

 
3. Ninguno de los tratamientos produjo IF que indicaran que los machos 

tuvieran problemas de fertilidad. Pero se observa que el Zn-Met200 

incrementa el porcentaje de IF un 50% con respecto a los demás 

tratamientos. El IF presentó un comportamiento cíclico que refleja la 

importancia de considerarlo como un indicador de calidad para determinar 

la utilidad de los eyaculados en los procesos de inseminación o 

fecundación artificial. 

 
4. El Zn-Met200 produjo un efecto negativo sobre el FIV al compararlo con el 

resto de los tratamientos, indicando que el incremento del nivel de Zn con 

una FO reduce la capacidad de penetrabilidad de los espermatozoides. 

Con respecto al número de espermatozoides por ovocito penetrado el ZnO 

redujo este parámetro. Asimismo, las características de calidad seminal, IF 
y ZnSE no están relacionadas en todos los tratamientos con el FIV. 

 
5. La concentración de Zn en testículos y epidídimos no se vio afectada por la 

utilización de alguna de las fuentes de Zn a los dos niveles incluidos. Por 

su parte, el ZnSE no mostró estar afectado por los tratamientos, ni 

tampoco varió durante el periodo evaluado. En el caso del ZnPS se 

observó que los valores medios no sufrieron efecto del tratamiento, pero si 

existió un comportamiento diferente de los tratamientos durante el tiempo 

evaluado. 

185



 



   

RESUMEN 



 



RESUMEN 

 
7. RESUMEN 

El objetivo principal de la presente investigación se centró en evaluar 

diferentes fuentes (ZnSO4 ZnO y Zn-Met) y niveles (150 y 200 ppm) de Zn en la 

eficacia reproductiva de verracos. Para ello, se realizaron cinco experimentos 

utilizando 35 verracos F1 (Landrace x York), de 8.5 meses de edad y un peso 

inicial (PI) de 145.68 ± 2.99 Kg (P = 0.33) y se utilizó un pienso base (PB) 
formulado con una mezcla de cebada-maíz y soja, el cual contenía únicamente el 

Zn presente en los ingredientes (25 ppm). Los tratamientos realizados fueron: 

Control (PB); T2, PB + ZnSO4 a 150 ppm de Zn; T3, PB + ZnSO4 a 200 ppm; T4, 

PB + ZnO a 150 ppm; T5, PB + ZnO a 200 ppm; T6, PB + Zn-Met a 150 ppm y; 

T7, PB + Zn-Met a 200 ppm, y fueron asignados aleatoriamente a los verracos. El 

pienso fue suministrado diariamente, utilizando un sistema restringido, el cual 

consistió en 1.8 a 2.5 Kg día-1 verraco-1 y agua ad libitum. Los sementales se 

alojaron en jaulas individuales con bebedero de chupete, comedero de canaleta y 

sistema automático de suministro del pienso. Los resultados de cada variable 

fueron analizados con un Diseño Completamente al Azar (DCA), utilizando el 

programa SAS (2003). 

Experimento 1. Durante un periodo de 16 semanas, los verracos fueron 

evaluados en su comportamiento productivo (peso vivo, PV; ganancia de peso por 

semana, GPS; consumo de pienso diario, CPD; peso final, PF y condición 

corporal, CC) y parámetros morfométricos de testículos (semicircunferencia 

testicular derecha, SCTD; semicircunferencia testicular izquierda, SCTI; 
semicircunferencia testicular total SCTT; longitud testicular derecha, LTD y 

longitud testicular izquierda, LTI). El pienso para cada verraco era pesado 

diariamente, y ajustada la cantidad semanalmente, según fuera el caso. Para ello 

se consideraba el PV y la CC. En este periodo se entrenaron los verracos a saltar 

en el potro de recogida. Durante el periodo experimental los verracos tuvieron un 

ritmo de recogidas de un salto semanal (IE). Los resultados mostraron que los 

tratamientos se comportaron diferente (P = 0.0001), al evaluar el CPD, los 

tratamientos T1 y T2 consumieron mayor cantidad de pienso, lo cual no se vio 

reflejado en la CC (P = 0.0001), ya que al menos el tratamiento T1 mostró valores 

de CC menores a la media del resto de tratamientos. El IE también mostró 

diferencias entre los tratamientos, ya que los verracos del T2 incrementaron el IE, 

mientras que el T7 indujo un comportamiento constante de salto en el potro. Los 

187



RESUMEN 

valores medios de la región testicular no mostraron diferencias (P > 0.05) entre los 

tratamientos, aunque la SCTT indica una tendencia (P = 0.06) a ser menor en T7. 

El PV reflejó una correlación (P = 0.0001) mayor a 0.4 con las medidas de la 

región escrotal. Los valores morfométricos testiculares y de epidídimo y el índice 

gonadosomático (IG) no fueron distintos entre los tratamientos (P > 0.05).  

Experimento 2. A los animales se les hizo eyacular y se evaluó la 

dinámica de producción y calidad seminal mediante el análisis básico del 

eyaculado (volumen total, VT; fracción rica, FR; fracción pobre, FP; concentración 

espermática, Spz mL-1 x 106; motilidad, Mot; calidad de movimiento, CM, pH y; 

morfoanomalías, MA), incluyendo la valoración del estado del acrosoma, 

analizando la integridad acrosomal (IAc), acrosoma dañado (AD) y acrosoma 

reaccionado (AR). De las variables analizadas en este experimento, solamente la 

Spz mL-1 x 106 mostró efecto de los tratamientos (P = 0.02), siendo el tratamiento 

T7 el que presentó un valor medio menor al resto de los tratamientos. Sin 

embargo, dentro del tipo de MA observadas, las cola en látigo (CL) y gota distal 

(GD) resultaron ser (P = 0.0001) diferentes, debido al tratamiento recibido. En el 

caso de las CL, los tratamientos T3 y T7 presentaron mayor porcentaje de MA y 

para GD fue el T7.  

Experimento 3. En este experimento se determinó el índice de 

fragmentación del ADN espermático (IF), utilizando 416 muestras de la FR (2 mL) 

obtenidas de cada verraco. Los valores de IF de los tratamientos no superaron el 

10%, exceptuando el T7 (16.71 + 2.64%) (P < 0.05). El 52.16% de las muestras 

seminales se mantuvieron por debajo del 5% de IF, mientras que el 12.98% 

mostró valores mayores al 15%. La adición de alguna fuente de Zn al PB 

aumenta 25 % la tasa de IF. Las FI se comportan de forma similar (P > 0.05), pero 

al compararlas con las FO se observó diferencias (P < 0.001). El uso de 200 ppm 

de Zn con una FO como el Zn-Met afecta negativamente el ADN de los 

espermatozoides.  

Experimento 4, En este experimento se utilizó el semen de 21 verracos 

(los tres mejores de cada tratamiento) y se realizó la prueba de fecundación        

in vitro (FIV), para estudiar la capacidad fecundante de los espermatozoides, 

utilizando ovocitos de ovarios de cerdas prepuberales. Además, se evaluaron los 

espermatozoides que penetraban cada ovocito (EO) y la proporción de ovocitos 

que tuvieron un solo espermatozoide (OM). Al analizar los resultados con 

respecto al FIV, se observa que el T7 reduce la taza de fecundación con respecto 

188



RESUMEN 

al resto de los tratamientos. (P = 0.02), afectando así el comportamiento de las 

FO, ya que el valor de FIV, producido por las FI fue mayor que el de la FO          

(P = 0.01). También se redujo EO al utilizar T7 (P = 0.03) y en cuanto a OM y EF, 

se observó una tendencia de disminución con el uso de T3 (P = 0.09).  

Experimento 5. Una vez terminado el periodo de extracción seminal, los 

verracos se sacrificaron, obteniendo los testículos y los epidídimos, 

procediéndose a analizar la concentración de Zn mediante espectrofotometría de 

absorción atómica (AEAA) en ambos tejidos y en las muestras de plasma seminal 

(PS) y sedimento espermático (SE). Aunque no se encontraron diferencias en la 

concentración de Zn debidas al tratamiento, en ninguno de los testículos, ni 

epidídimos analizados (P = 0.07), la mayor concentración del ión fue presentada 

por el T7. La concentración de Zn en SE y PS no presentó efecto del tratamiento 

(P = 0.39 y P = 0.33, respectivamente), pero el SE del tratamiento T7 presentó 

una mayor concentración. En tanto que el ZnPS se redujo en los tratamientos que 

utilizaron la FO Zn-Met. Aunque, los resultados fueron variables, se observó que 

la FO a mayor concentración, es la que presentó mayor efecto negativo sobre los 

parámetros estudiados, por lo que la biodisponibilidad, es un factor importante a 

tener en cuenta al momento de la utilización de las fuentes de Zn. 

 

 

 

189



 



   

SUMMARY 



 



SUMMARY 

 
8. SUMMARY 

In order to evaluate inorganic and organic Zinc (Zn) sources on boar’s 

reproductive efficiency, thirty-five F1 Landrace x York White boars, 8.5 months 

age and 145.68 ± 2.99 Kg initial body weight (BWi) were randomized housed to 

individual pen with automatic feeder and water systems. The basal diet (BD)    
was a barley-corn and soybean meal mixture with 25 ppm Zn. The data were 

analyzed as a completely randomized design with repeated measures using 

PROC MIXED of SAS (2003). The treatment were:T1,Control BD; T2, BD + ZnSO4 

to 150 ppm of Zn; T3, BD + ZnSO4 to 200 ppm; T4,BD + ZnO to 150 ppm; T5,BD 

+ ZnO to 200 ppm; T6, BD + Zn-Met to 150 ppm and; T7, BD + Zn-Met to 200 ppm 

where the experimental unit was individual boar.  

Experiment 1. Productive performance of individual boars (body weight, 

BW; body gain by week, BGw; daily intake, DI; final body weight, BWf and body 

condition, BC) and morphometrics parameters of testis (semicircumference of right 

testicle, SCRT; semicircumference of left testicle, SCLT; total testicular 

semicircumference TTSC; length right testicle, LRT and length of left testicle, LLT 
were evaluated during 16 weeks. The diet was adjusted weekly, using BW and BC 
criteria. During the experimental period the boars jump once a week for semen 

collection (SC). The results showed that the treatments were different                  

(P = 0.0001), for T1 and T2 in DI of BD, which did not reflected in the BC             

(P = 0.0001), because of the treatment T1 showed lower values of BC than the 

average of the others treatments. The SC also was different among treatments, 

since the boars of the treatment T2 increased the SC, whereas the T7 was 

constant throughout the experiment. The average values of testicular zone were 

not different (P > 0.05) among the treatments, though the TTSC indicates a trend 

(P = 0.06) to being a lower in T7. The BW showed a correlation (P = 0.0001) 

bigger than 0.4 with the measures of the scrotal area. The morphometric values of 

testis, epididymis and gonadosomatic index (GI) was not different between 

treatments (P > 0.05).  

 

 

 

191



SUMMARY 

 
Experiment 2. The ejaculates were evaluated for dynamics of production 

and seminal quality by the basic analysis of the ejaculated (total volume, TV; rich 

fraction, RF; poor fraction, PF; spermatic concentration, Spz ml-1 x 106; motility, 

Mot; quality of movement, QM, pH and morphoanomaly, MA), including the 

evaluation of the acrosomal condition, analyzing the acrosomal integrity (AcI), 
damaged acrosomal (DA) and reacted acrosomal (RA). Variables analyzed in this 

experiment, only the Spz ml-1 x 106 showed effect of treatments (P = 0.02), being 

the T7 with less average value than the rest of treatments. Nevertheless, inside 

the type of MA observed, the tail in whip (TW) and drop distal (DD) showed to be 

(P = 0.0001) different, due the treatment. In case of the TW, the treatments T3 and 

T7 presented more degree of MA's and for DD it was the T7. 

Experiment 3. To determine the fragmentation index (FI) of the spermatic 

DNA, were utilized 416 samples of the RF (2 mL) obtained from each boar. The 

values of FI of treatments did not overcome 10%, except the T7 (16.71 + 2.64 %) 

(P < 0.05). From the seminal samples 52.16% were below 5% in FI, whereas 

12.98% showed values bigger than 15%. The addition of some source of Zn to   

the BD increases 25% FI. The inorganic sources (IS) were similar (P > 0.05),     

but when are compared with the organic sources (OS) differences were observed 

(P < 0.001). The use of 200 ppm of Zn with OS like the Zn-Met affects negatively 

the DNA of the sperms.  

Experiment 4. In this experiment semen of 21 boars (the best three of 

every treatment) was used for test of in vitro fertilization (IVF), to study the 

fertilizing capacity of the sperms, using oocytes of ovaries from gilts. In addition, 

there were evaluated the sperms that were penetrating every oocyte (SO) and the 

proportion of oocytes that had only one sperm (OM) and efficiency of fertilization 
(EF). On having analyzed the results with regard to the IVF, is observed that the 

T7 reduces the rate of fertilization with regard to the rest of the treatments           

(P = 0.02), affecting this way the behavior of the OS, since IVF's value,    

produced by the IS was major that of the OS (P = 0.01). Also SO was reduced with 

T7 (P = 0.03) and the other hand, OM and EF, decreased by the use of T3          

(P = 0.09) was observed.  

 

192



SUMMARY 

 
Experiment 5. Once finished the period of seminal extraction, the boars 

were slaughtered, obtaining its testicles and epididymis, for analyze Zn 

concentration by atomic absorption spectrophotometry (AAS) in both and samples 

of seminal plasma (SP) and spermatic sediment (SS) too. Though don’t find 

differences in the concentration of Zn due to treatment, in any of the testis, or 

epididymis (P = 0.07), the more concentration of the ion was in the T7. The 

concentration of Zn in SS and SP don’t had effect of treatment (P = 0.39 and        

P = 0.33, respectively), but SS of the treatment T7 had higher concentration. On 

the other hand, the ZnPS decreased in the treatments with OS (Zn-Met). Though, 

the results varied, is observed that the highest concentration of OS presented high 

negative effect on the studied parameters, because of the biodisponibility, is an 

important factor to bearing in mind to the moment of the utilization of Zn's sources. 

 

 

193



 



 

   

ABREVIATURAS 



 



ABREVIATURAS 
 
9. ABREVIATURAS 
  
  
5'-ND 5'- nucleótidos 
A Espermatogonias tipo A 
ACE Enzima convertidora de  angiotensina 

«Angiotensin converting enzyme» 
AD Acrosoma Dañado 
ADN Ácido desoxirribonucleico 
ADP Adenosín difosfato 
AEAA Análisis de espectrofotometría de absorción 

atómica  
AIC Criterios de información de Alkaike 
AMD Degeneración ocular macular 
AQN1 Alanina-glutamina-asparagina 
AR Acrosoma Reaccionado 
AR1 Autoregresiva 
As Arsénico 
AT Ancho testicular 
ATD Ancho testicular derecho 
ATI Ancho testicular izquierdo   
ATP Adenosín trifosfato 
AWN1 Alanina-triptófano-asparagina 
BD Biodisponibilidad 
BIC Criterios  Bayesiano  de Swarz 
BSA Albumina de suero bovino «Bovine serum 

albumin» 
BTS Beltville Thawing Solution 
C Cenizas 
C1,C2, C3….C6 Contrastes ortogonales 
Ca Calcio  
CC Condición corporal   
Cd Cadmio 
CF Capacidad fecundante 
CL Cola látigo 
CM Calidad de movimiento 
Co Cobalto 
CO2 Dióxido de carbono 
Con A Concavalina A 
COOH Grupo carboxilo 
CPD Consumo de pienso día-1  
CS Simetría compuesta 
CT Circunferencia testicular 
CTD Circunferencia testicular derecha  
CTI Circunferencia testicular izquierda  
Cu Cobre 
DABCO  1,4-Diazabyciclo-[2.2.2]Octano  
DCA Diseño completamente al azar 
DMM Daño en membrana mitocondrial 
DCT1 
 

Transportador de cationes divalentes 
«Divalent Cation Transporter 1» 

195



ABREVIATURAS 

 
Dp Diploteno 
DPn Desarrollo de Pronúcleos 
EA Espermátidas alargadas 
EB Espermatogonias tipo B 
ED Epidídimo derecho 
EEM Error estándar de la media 
EF Eficiencia de fecundación 
EI Epidídimo izquierdo 
EIn  Espermatogonias intermedias  
EM Energía metabolizable 
EO Espermatozoides por ovocito 
ER Espermátidas redondas 
ES Espermatositos secundarios 
FA Fosfatasa alcalina 
Fe Hierro 
FEDNA Fundación Española para el desarrollo de la 

nutrición animal 
FI Fuente (s)  inorgánica (s) 
FITC Fluoresceína-5-Isotiocinato 
FIV Fecundación in vitro 
FP Fracción pobre 
FO Fuente(s) orgánica(s) 
FR Fracción rica 
GC Gota Citoplásmica  
GD Gota Citoplásmica  Distal 
GDP Guanidina difosfato 
GP Gota  Citoplásmica proximal 
GPS Ganancia de peso semana-1 
GPx Glutatión peroxidasa 
H  Humedad 
H+ Hidrógeno 
H2CO3 Ácido carbónico 
H2O2 Peróxido de hidrógeno 
HCl  Acido Hidroclorhídrico 
HOST Prueba hiposmótica «hyposmotic swelling 

test» 
IA Inseminación Artificial 
IAc Integridad Acrosomal 
IE Ritmo de recogida o trabajo 
IF Índice de Fragmentación del ADN 

espermático 
IG Índice gonadosomático  
INRA I’nstitut national de la recherche agronomique 
INOS Síntesis de óxido nítrico 
Kg Kilogramos 
L Leptoteno 
LDH-X Lactado deshidrogenasa 
LH Hormona luteinizante 
LSMEANS Medias de mínimos cuadrados 
LT Longitud del testículo 
LTD Longitud testicular derecha  

196



ABREVIATURAS 
 
LTI 

 
Longitud testicular izquierda 

M Molar 
MA Morfoanomalías 
MF Medio de fecundación 
Mn Manganeso 
mg Miligramos 
Mot Motilidad espermática 
MS Materia seca 
MT Metalotioneina 
MTF1 Gen de regulación de los factores de 

transcripción, vinculante al factor de 
transcripción 1 

n Número de observaciones 
Na Sodio  
Ni Níquel 
NAD Nicotinamida adenina dinucleótido 
NO  Óxido nítrico 
Nramp2 Proteína  asociada a la resistencia natural de 

los macrófagos 
NRC National Research Council 
NS No significativo / No existió diferencias 
ODF Fibras densas externas «outer dense fibres» 
OI     Ovocitos inseminados 
OM     Ovocitos monospérmicos 
OP     Ovocitos penetrados 
OH oxhidrilo 
O2 Oxígeno 
P2 Protamina P2 
P Fosforo 
Pb Plomo 
pH Potencial hidrógeno 
PB Pienso base 
PBS Solución fosfatada tamponada 
PBSDm    Solución fosfatada tamponada de Dulbecco 

modificada «Phosphate Buffered Saline» 
PE Peso epididimario 
PED Peso epidídimo derecho 
PEI Peso epidídimo izquierdo 
PF Peso final  
PI Peso inicial 
PL Espermatocitos en preleptoteno 
ppm   Partes por millón 
Pq Paquiteno 
PROC MIXED Procedimiento de medidas repetidas 
PROC STEPWISE Regresión por pasos 
PS Plasma seminal 
PSP Proteína del PS porcino 
PSA Pisum sativum agglutinin 
PT Peso testicular  
PTD Peso testicular derecho 
PTI Peso testicular izquierdo 

197



ABREVIATURAS 

 
PV Peso vivo 
r Correlación 
R2 Coeficiente de determinación 
ROS Especies reactivas de oxígeno «reactive 

oxigen active» 
S Azufre 
SAS  Statistical analysis systems 
SBTI Trypsin inhibitor from Soybean 
SCTD Semicircunferencia testicular  derecha 
SCTI Semicircunferencia testicular izquierda 
SCTT Semicircunferencia testicular total 
SE Sedimento espermático 
-SH  Grupo sulfhidrilo 
Si Silicio 
SoDH Sorbitol deshidrogenasa 
SOD Superóxido dismutasa 
Spz mL-1 Concentración espermática por mililitro 
Spz eyaculado-1 Concentración espermática total 
SpzF Espermatozoide fragmentado 
SpzO-1 Espermatozoides por ovocito fecundado 
S-S Puentes disulfuro 
T Tioneina 
TT Tamaño testicular 
TE Tamaño del epidídimo 
Ub Ubiquinización 
UDZ Laboratorio de la Unidad Docente de 

Zoología 
UV No estructurada 
VC Componentes de varianza 
Vol Volumen de eyaculado o de fracciones 

espermáticas 
VT Volumen total 
Z Zigoteno 
Zn Zinc 
ZnEp Concentración de Zn en epidídimo 
Zn-Lis Lisinato de Zn 
Zn-Met Metionato de Zn 
ZnO Óxido de Zn 
Zip, Zip II, gufA, LZT,Zip1, Zip6, 
Zip7, Zip10 

 
Gen transportador “importación” de Zn 

ZnPS Zn en plasma seminal 
ZnSE Zn en el sedimento espermático  
ZnSO4 Sulfato de Zn 
Zn-SH Grupos Zn-tiol 
ZnT, ZnT-1, ZnT-2, ZnT-3, ZnT-4, 
ZnT-5, ZnT-8, ZnT-9, ZnT-10  

 
Genes transportadores de Zn 

ZnTes Concentración de Zn en testículo 
 

198



 

 

 

   

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	AGRADECIMIENTOS
	ÍNDICE
	ÍNDICE DE TABLAS
	ÍNDICE DE GRÁFICAS
	ÍNDICE DE FIGURAS
	ÍNDICE DE ESQUEMAS
	ÍNDICE DE ILUSTRACIONES
	1. INTRODUCCIÓN
	1.1. Objetivo General

	2. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
	2.1. Generalidades
	2.2. Características físicas y químicas del Zn
	2.3. Absorción y metabolismo de Zn
	2.4. Almacenamiento del Zn
	2.5. Secreción, reabsorción y excreción de Zn
	2.6. Funciones del Zn
	2.7. Relación de Zn con otros micronutrientes
	2.8. Efecto de la deficiencia de Zn
	2.9. Efecto tóxico del Zn
	2.10. Requerimientos nutricionales de Zn en verracos
	2.11. Fuentes alimenticias de Zn para la elaboración de piensos de verraco
	2.12. Espermatogénesis
	2.13. Calidad seminal y pruebas de valoración

	3. MATERIAL Y MÉTODOS
	3.1. Diseño de la investigación
	3.2. Instalaciones
	3.3. Asignación de tratamientos
	3.4. Metodología
	3.5. Desarrollo de los experimentos
	3.6. Análisis estadísticos de los resultados

	4. RESULTADOS
	4.1. Evaluación del comportamiento productivo de los verracos
	4.2. Análisis de la dinámica de producción y calidad seminal quepresentan los verracos, a través del espermiograma básico deleyaculado y de la evaluación de la integridad acrosomal
	 4.3. Evaluación del estado del ADN nuclear espermático 
	4.4.Evaluación de la capacidad fecundante in vitro (FIV) de espermatozoides de verracos tratados con diferente fuente y nivel de Zn
	4.5. Evaluación de la concentración de Zn de tejidos (testículos y epidídimos), plasma seminal (ZnPS) y sedimento espermático (ZnSE

	5. DISCUSIÓN
	5.1. Evaluación del comportamiento productivo de los verracos
	5.2. Análisis de la dinámica de producción y calidad seminal que presentan los verracos, a través del espermiograma básico del eyaculado y de la evaluación de la integridad acrosomal
	5.3. Evaluación del estado del ADN nuclear espermático
	5.4. Evaluación de la capacidad fecundante in vitro de espermatozoides de verracos tratados con diferentes fuentes y niveles de Zn
	5.5. Evaluación de la concentración de Zn en tejidos (testículos y epidídimos), plasma seminal (PS) y sedimento espermático (SE)

	6. CONCLUSIONES
	7. RESUMEN
	8. SUMMARY
	9. ABREVIATURAS
	10. BIBLIOGRAFÍA