%0 Thesis
%A Díez Aguilar, María
%T Nuevas aportaciones de fosfomicina frente a Pseudomonas aeruginosa: caracterización fenotípica y molecular de la resistencia, asociaciones antibióticas y modelos de biopelículas
%D 2017
%U https://hdl.handle.net/20.500.14352/22403
%X La fosfomicina es un antibiótico de amplio espectro de acción que se ha utilizado ampliamente por vía oral para el tratamiento de infecciones urinarias, mientras que su uso por vía intravenosa ha sido limitado. En la era de la multirresistencia bacteriana a los antibióticos, el uso de fosfomicina se ha revalorizado, planteándose su uso en el tratamiento de infecciones causadas por Pseudomonas aeruginosa cuando las opciones terapéuticas son escasas. Sin embargo, el conocimiento clínico y microbiológico sobre su actividad frente a este microorganismo es limitado. Por ello, el objetivo principal del trabajo fue estudiar su acción in vitro, mediante la determinación de sensibilidad con diferentes métodos y de la actividad con asociaciones antibióticas, la caracterización molecular de la resistencia y la realización de modelos de biopelículas. En el primer capítulo se determinó la correspondencia entre los métodos de microdilución, difusión con discos y tiras en gradiente de concentración, con el método de referencia de dilución en agar, para la determinación de la sensibilidad de P. aeruginosa a fosfomicina. Mientras que para la microdilución se observaron datos aceptables de concordancia (acuerdo esencial del 84% y acuerdo de categoría del 89.3%), los datos de los métodos de difusión reflejaron una débil concordancia. Por ello se planteó la utilización de un inóculo alternativo (106 UFC/ml) para las tiras en gradiente que mejoró los datos de acuerdo esencial (de un 67.6% a un 93.6%) y de acuerdo de categoría (de un 78.2% a un 95%) y para los discos donde el índice de Spearman pasó de ser del -0.71 al -0.81. Se demostró que la adición de glucosa 6-P al medio no está justificada en P. aeruginosa, ya que este microorganismo carece del transportador UhpT y las CMI en medio con y sin glucosa 6-P fueron similares...
%X Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen responsible for a wide variety of infections. Its high intrinsic and acquired antimicrobial resistance combined with the ability to produce biofilms makes the treatment of these infections a critical challenge. This situation has forced researchers to look for new therapeutic strategies to treat these infections. Fosfomycin shows no cross-resistance with other antimicrobials and has demonstrated safety and efficacy over a broad range of infections and organisms. Its association with other antipseudomonal agents may be an option for the treatment of infections caused by this pathogen. However, studies documenting the in vitro and in vivo activity of fosfomycin against P. aeruginosa remain scarce. For in vitro susceptibility testing, agar dilution is considered the reference method but automatic microdilution and diffusion methods (disks and MIC gradient strips), widely used in clinical laboratories, have not been evaluated and clinical breakpoints have not been established. EUCAST includes an epidemiological cutoff value (ECOFF) of 128 mg/l. Fosfomycin inhibits bacterial cell wall biosynthesis by inactivating the UDP-Nacetylglucosamine- 3-o-enolpyruvultransferase. In the case of P. aeruginosa, this compound exclusively enters into bacterial cells through the glycerol-3-phosphate nutrient transporter (GlpT). Molecular mechanisms implicated in the inactivation of this permease and consequently in fosfomycin resistance are not widely studied. The high mutational rate of P. aeruginosa to fosfomycin (10-6) makes necessary its administration in combination with other antimicrobials. Synergy between fosfomycin and other antibiotics, as colistin, piperacillin-tazobactam, carbapenems or aminoglycosides using checkerboards and time-kill assays has been reported. Fosfomycin and tobramycin combination (FT) has been demonstrated to be beneficial, since fosfomycin enhances the active uptake of tobramycin into P. aeruginosa, resulting in greater inhibition of protein synthesis and enhanced bacterial killing. Indeed this combination is being developed as an inhaled antibiotic therapy for cystic fibrosis...
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