RT Dissertation/Thesis T1 Introducción a la biología molecular de "Scedosporium prolificans (Fungi Imperfecti)" A1 Ruiz Díez, Beatriz AB El objetivo principal de esta Tesis fue el desarrollo de técnicas moleculares específicas para el hongo patógeno humano Scedosporium prolificans, encaminadas a adquirir un mayor conocimiento de su taxonomía, variabilidad genética y patogenicifdad, así como aportar alternativas al problema de su resistencia total a los antifúngicos. El análisis de la región del rDNA nuclear que comprende los dos espaciadores transcritos y la subunidad 5,5S (ITSI-5,8S-ITSII) confirmó la relación filogenética entre las dos especies de Scedosporium (S.prolificans y S.apiospermum). Se estudió la resistencia intrínseca de S.prolificans a los antifúngicos, y en particular a la anfotericina B. Como alternativa a este problema se evaluaron combinaciones de antimicrobianos, encontrándose un resultado sinérgico en el caso de la anfotericina B combinada con cicloheximida. La comparación de aislados clínicos y ambientales de S.prolificans no reveló diferencias que pudieran afectar a su virulencia. La amplificación aleatoria de DNA polimórfico (RAPD) y la amplificación con iniciadores únicos dirigidos a secuencias de minisatélites de eucariotas ("PCR-fingerprinting") se emplearon para tipificar cepas de S.prolificans y estudiar dos brotes de infecciones hospitalarias causadas por S.prolificans. Se aislaron mediante la luz ultravioleta mutantes de S.prolificans deficientes en la síntesis de melanina que presentaron la misma resistencia a los antifúngicos que la estirpe salvaje original. También se desarrolló un método de transformación genética de S.prolificans por electroporación, empleando la resistencia a higromicina B como marcador de selección, y la región del rDNA secuenciada previamente para construir un vector específico de S.prolificas.# PB Universidad Complutense de Madrid, Servicio de Publicaciones SN 978-84-669-1659-2 YR 2003 FD 2003 LK https://hdl.handle.net/20.500.14352/63435 UL https://hdl.handle.net/20.500.14352/63435 LA spa NO Tesis de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Químicas, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I, leída el 25-11-1999 DS Docta Complutense RD 6 abr 2025