Person: Chacón Arguedas, Carlos Daniel
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First Name
Carlos Daniel
Last Name
Chacón Arguedas
Affiliation
Universidad Complutense de Madrid
Faculty / Institute
Medicina
Department
Inmunología, Oftalmología y ORL
Area
Identifiers
4 results
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Item Nonsense CD247 mutations show dominant-negative features in TCR expression and function(Journal of Allergy and Clinical Immunology, 2024) Briones Contreras, Alejandro; Megino, Rebeca F.; Marín Marín, Ana Victoria; Chacón Arguedas, Carlos Daniel; García Martínez, Elena; Balastegui Martín, Héctor; Rodríguez Sainz, Carmen; Sánchez-Mateos Rubio, María Paloma; Cárdenas Mastrascusa, Paula Patricia; Regueiro González-Barros, José RamónBackground The invariant TCRζ/CD247 homodimer is crucial for TCR/CD3 expression and signaling through its three immunoreceptor tyrosine‐based activation motifs (ITAMs). Homozygous null mutations in CD247 lead to immunodeficiency, while carriers exhibit 50% reduced surface CD3. It is unclear whether carriers of other CD247 variants show dominant-negative effects. Objective To analyze and model the potential impact on TCR expression and function of heterozygous nonsense CD247 mutations found in patients with signs of immunodeficiency or autoimmunity. Methods Jurkat T cells, either wild-type (WT) or CRISPR/Cas9-edited CD247-deficient (ZKO), were lentivirally transduced with wild-type CD247 or mutations ablating one (Q142X), two (Q101X), or three (Q70X) ITAMs. Results Three patients from unrelated families were studied. Two heterozygous nonsense CD247 mutations were identified (p.Y152X and p.Q101X), which affected ITAM-3 and ITAM-2+3, respectively. Both mutations were associated with low surface CD3 expression, normal intracellular CD247 levels using a transmembrane-specific antibody but very low intracellular CD247 levels using an ITAM-3-specific one, suggesting the presence of truncated variants in T cells. Transduction of the mutations lacking 1, 2, or 3 ITAMs into ZKO could not restore normal surface CD3 expression (only 60%, 22% and 10%, respectively), whereas in WT they reduced it (to 39%, 19% and 9% of normal levels), and both effects were ITAM number dependent. All six transfectants showed reduced CD69 induction (25-50%), indicating that they were unable to signal downstream properly neither isolated nor associated with wild-type CD247. Conclusion Our results suggest that CD247 variants lacking ITAMs due to nonsense, but not null, mutations are defective for normal TCR assembly and exert a dominant-negative effect on TCR expression and signaling in vitro. This, in turn, may correlate with clinical features in vivo.Item CD3G or CD3D Knockdown in Mature, but Not Immature, T Lymphocytes Similarly Cripples the Human TCRαβ Complex(Frontiers in Cell and Developmental Biology, 2021) Garcillán Goyoaga, Beatriz De; Fuentes, Patricia; Marín Marín, Ana Victoria; Fernández Megido, Rebeca; Chacón Arguedas, Carlos Daniel; Mazariegos, Marina S.; González Laborda, Raquel; Jiménez Reinoso, Anaïs; Muñoz Ruiz, Miguel; Cárdenas Mastrascusa, Paula Patricia; Fernández Malavé, Edgar Gonzalo; Toribio, Maria Luisa; Regueiro González-Barros, José RamónThe human αβ T-cell receptor (TCR) is composed of a variable heterodimer (TCRαβ) and three invariant dimers (CD3γε, CD3δε, and ζζ/CD2472). The role of each invariant chain in the stepwise interactions among TCR chains along the assembly is still not fully understood. Despite the high sequence homology between CD3γ and CD3δ, the clinical consequences of the corresponding immunodeficiencies (ID) in humans are very different (mild and severe, respectively), and mouse models do not recapitulate findings in human ID. To try to understand such disparities, we stably knocked down (KD) CD3D or CD3G expression in the human Jurkat T-cell line and analyzed comparatively their impact on TCRαβ assembly, transport, and surface expression. The results indicated that TCR ensembles were less stable and CD3ε levels were lower when CD3γ, rather than CD3δ, was scarce. However, both defective TCR ensembles were strongly retained in the ER, lacked ζζ/CD2472, and barely reached the T-cell surface (<11% of normal controls) in any of the CD3 KD cells. This is in sharp contrast to human CD3γ ID, whose mature T cells express higher levels of surface TCR (>30% vs. normal controls). CD3 KD of human T-cell progenitors followed by mouse fetal thymus organ cultures showed high plasticity in emerging immature polyclonal T lymphocytes that allowed for the expression of significant TCR levels which may then signal for survival in CD3γ, but not in CD3δ deficiency, and explain the immunological and clinical disparities of such ID cases.- Project number: PIMCD86/23-24
Item Simulación virtual de diagnóstico de inmunodeficiencias congénitas para el asentamiento de conocimientos básicos sobre inmunología(0024) Marín Marín, Ana Victoria; Martínez Naves, Eduardo; Regueiro González-Barros, José Ramón; Tortajada Alonso, Agustín; Cubero Palero, Francisco Javier; Allende Martínez, Luis Miguel; González Granado, Luis Ignacio; Muñoz Ruiz, Miguel; Chacón Arguedas, Carlos Daniel; Fernández Megino, Rebeca; Herrero Alonso, Marta; Estévez Benito, Iván; Fernández Boraita, Julia Belén; Franco Jarava, ClaraLa inmunología es una materia transversal que trata conocimientos de biología celular, bioquímica molecular, genética y patología clínica. La docencia que reciben los alumnos de primero de Medicina en nuestra Universidad, cuyas aulas se componen de 80 alumnos aproximadamente, consta de unas 36 horas anuales en una asignatura obligatoria e impartida en el segundo periodo del curso. Dada la gran complejidad inherente en el estudio inmunología, es realmente difícil lograr el interés del grupo por la asignatura a través de las técnicas docentes clásicas. En este proyecto de innovación docente, proponemos una actividad interactiva, parcialmente virtual y con una perspectiva basico-clínica interactiva mediante la cual los alumnos participarán activamente en el diagnóstico de un total de 3 pacientes pediátricos con errores congénitos de la inmunidad durante una única sesión al final del curso. Para ello, dispondremos de 3 casos clínicos reales que describirán enfermedades frecuentes dentro de la especialidad siendo presentados concisamente con datos clínicos a través de la pantalla de la misma aula docente, y de manera simultánea lanzaremos preguntas a través de una plataforma web que permitirá que los alumnos respondan utilizando un “apodo” e individualmente empleando sus teléfonos móviles. Con cada pregunta los alumnos aprenderán a identificar conceptos claves para el diagnóstico de inmunodeficiencias que no pueden abordarse en las clases magistrales por escasez de tiempo, y a la vez autoevaluarán los conocimientos adquiridos hasta el momento. - Project number: 62
Item El Sistema del Complemento, interactivo y magnético. Memoria final(2021) Tortajada Alonso, Agustín; Chacón Arguedas, Carlos Daniel; Goicoechea de Jorge, Elena; Marín Marín, Ana Victoria; Regueiro González-Barros, José RamónEl modelo didáctico más empleado en la enseñanza universitaria es de tipo transmisivo, centrado en la exposición del profesor/a con el apoyo de las presentaciones y los libros de texto, siendo el alumno/a esencialmente receptor de la enseñanza. Sin embargo, cada vez más se emplean estrategias alternativas para abordar el proceso de enseñanza-aprendizaje desde modelos más centrados en el alumno/a, que favorezcan su implicación, actividad y protagonismo. Con el proyecto de innovación docente: El Sistema del Complemento, interactivo y magnético, queremos desarrollar una herramienta didáctica que nos permita implementar una estrategia de aprendizaje interactiva para el estudio de la cascada de activación del sistema del complemento. La propuesta se ha programado para la asignatura de Fisiopatología del Complemento impartida en el Máster de Investigación en Inmunología (UCM). Para ello, elaboramos material didáctico que consiste en fichas impresas en papel imantado que representan cada uno de los componentes que forman el sistema del complemento de manera que se puedan colocar y mover sobre una pizarra magnética. Este material se pone a disposición de los estudiantes para realizar actividades concretas propuestas por los profesores/as, en las que se trabaja en grupo y de forma interactiva, sirviendo también como herramienta para el repaso de conceptos y resolución de dudas durante las clases teóricas.