Defectos funcionales intrínsecos via CD3 en linfocitos T transformados con "herpesvirus saimiri" de un subgrupo de pacientes con inmunodeficiencia común variable (CVID)

Abstract

La Inmunodeficiencia Comun Variable(CVID) es un sindrome muy heterogeneo caracterizado por una hipogammaglobulinemia de etiologia desconocida. Aunque el defecto primario permanece desconocido, varios trabajos previos describen disfunciones en los linfocitos T de sangre periferica en una importante proporcion de pacientes con CVID, que pueden afectar a la colaboracion entre celulas T y B. Con la intención de investigar si tales defectos putativos son intrinsecos a las celulas T o por el contrario, secundarios a diferencias cuantitativas en la distribución de subpoblaciones T o a otros desordenes descritos, hemos utilizado el Herpesvirus saimiri(HVS) para la transformacion de linfocitos T CVID CD4+ y CD8+ T y para la posterior evaluación funcional, mediante citometria de flujo, de su capacidad para inducir moleculas de superficie (CD154,CD69) o de factores solubles(IL-2,TNF-a,IFN-y) implicados en la colaboracion con las celulas B. Inesperadamente, los resultados mostraron que la exposicion de 40 diferentes muestras de sangre de pacientes con CVID al HVS dio lugar a la obtencion de lineas transformadas de linfocitos T CD4+ con una frecuencia significativamente mayor que la obtenida con la exposición de 40 muestras de sangre de donantes sanos, pareados en sexo y edad (24% vs.3%,p=0,00002). Esto sugiere la existencia de una señal especifica en los CVID que afecta a la eficacia de transformacion de la subpoblacion CD4+. El analisis funcional de 10 lineas CD4+ y 15 lineas CD8+transformadas puras de linfocitos T de pacientes CVID no reveló ninguna diferencia estadisticamente significativa comparando con sus controles. Sin embargo, la mitad de las lineas de celulas CD4+ transformadas mostro una inducción de la molecula de superficie CD154(pero no de CD69) (valor medio de 46,8%) por debajo de la inducción mas baja conseguida en los controles tras estimulacion con anti-CD3(valor medio de 73,6%,p=0,004). Exactamente las mismas 5 lineas mostraron, ademas, una significativa reducción en la inducción del factor soluble IL-2(p=0,008), pero no de otras citocinas como TNF-a o IFN-y. Ninguna de estas diferencias fue observada en el resto de lineas CD4+ ni en ninguna de las lineas CD8+ transformadas analizadas. Por lo tanto, un subgrupo de pacientes CVID muestras una incapacidad selectiva e intrinseca de las celulas T CD4+ para la induccion tanto de moleculas de superficie (CD154) como factores solubles(IL-2) directamente implicados en la cooperación con los linfocitos B, lo que puede estar directamente afectando a la capacidad de produccion de inmunoglobulinas por parte de estas ultimas. Los linfocitos T transformados pueden ayudar para establecer los mecanismos bioquimicos responsables de los defectos descritos.