Actividad sinérgica entre la proteína A del surfactante pulmonar (SP-A) y péptidos antimicrobianos en la defensa del pulmón frente a infecciones

Abstract

La proteína A del surfactante pulmonar SP A y péptidos antimicrobianos AMPs catiónicos Beta defensinas y aniónicos SP BN son factores solubles presentes en el fluido alveolar, implicados en la defensa inmune innata en el pulmón. El objetivo principal de esta tesis fue determinar si SP A y AMPs actúan de una manera sinérgica para incrementar el potencial efecto bactericida que tienen estos componentes por separado.Los resultados indican que in vitro la SP A fue capaz de actuar sinérgicamente con AMPs endógenos beta defensinas o SP BN y exógenos polimixina B y colistina frente a diferentes patógenos respiratorios Klebsiella pneumoniae K2, Pseudomonas aeruginosa O1 y Haemophilus influenzae no tipificado que son resistentes a la SP A. La SP A y un derivado de la polimixina B PMBN , que no tiene actividad bactericida, son capaces de matar conjuntamente a estos patógenos respiratorios. El mecanismo molecular por el que este proceso ocurre es mediante la formación de complejos proteicos macromoleculares que facilitan la unión de la SP A y AMPs a la bacteria, perturbando la membrana externa. Estudios con modelos de la membrana externa de bacterias Gram negativas nos han permitido demostrar que el complejo SP A PMBN pero no cada factor por separado es capaz de perturbar y permeabilizar dicha membrana.Por otra parte, mediante estudios in vivo, hemos demostrado que el efecto protector del tratamiento conjunto de SP A y SP BN frente a K. pneumoniae K2 fue mucho mayor que la administración intratraqueal de cada una de las proteínas por separado. La acción cooperativa de SP A SP BN se debe a: 1 la actividad microbicida de SP A SP BN pero no de cada uno de los factores; 2 el reclutamiento temprano de neutrófilos en el fluido broncoalveolar inducido por SP A SP BN; y 3 la inducción de una respuesta inflamatoria temprana del huésped. Finalmente hemos demostrado el efecto terapéutico de SP A SP BN frente a la infección por K. pneumoniae K2 mediante su administración 6h o 24 h después de la inoculación del patógeno, es decir, cuando la infección ya estaba instaurada. Los resultados indican que el complejo SP A SP BN disminuye significativamente la carga bacteriana 24 o 48h post infección. En conjunto, estos resultados demuestran que la proteína del fluido alveolar SP A aumenta la defensa inmune innata del pulmón frente a infección por bacterias Gram negativas patógenas al fortalecer la actividad de péptidos antimicrobianos presentes en el del fluido alveolar.