Producción y liberación de proteínas heterólogas en mutantes de Saccharomyces cerevisiae afectados en la integridad celular

Abstract

Se ha desarrollado un sistema para la liberación de proteinas heterólogas de S. cerevisiae. Se basa en el uso de mutantes slt2 termosensibles, con un fenotipo complementable por sorbitol, ya que son deficientes en el mantenimiento de la integridad celular. La combinacion de la mutacion slt2 con mutaciones en los genes de proteasas (pep 4 prb1) aumenta la estabilidad de las proteínas liberadas al medio de cultivo. Células slt2 transformadas con el gen bacteriano cat después hasta un 70% de la proteína heteróloga cat después de cambio a 37 grados C o mediante un choque osmótico de células preincubadas a 37 grados C en presencia de sorbitol. Se propone este sistema basado en los mutantes slt2 para la obtención a gran escala de preparaciones de proteínas sin necesidad de emplear métodos físicos de rotura mecánica, tratamientos enzimáticos o extracciones químicas