Desarrollo de técnicas de ADN para el diagnóstico y caracterización de "Toxoplasma gondii" : aplicación a estudios epidemiológicos

Abstract

Se ha estudiado la aplicación de las técnicas moleculares en el diagnóstico por medio de la detección del ADN del parásito en diversos tipos de muestras procedentes de pacientes. La alta especificidad y sensibilidad obtenida con la PCR secuencial interna destacó en el diagnóstico de la toxoplasmosis. La sensibilidad se incrementa combinando el análisis de diferentes tipos de muestras y muestras secuenciales. Se realizó el estudio epidemiológico de la toxoplasmósis gestacional en el área de Madrid, determinando una seroprevalencia del 25,4%, mostrando un descenso importante. Los factores de riesgo ascociados a la infección fueron relacionados con el consumo de carne poco hecha, la frecuencia del consumo de hamburguesas y el contacto con gatos. La valoración de las técnicas para el diagnóstico de primoinfección en el embarazo mostró que el estudio rutinario de muestras de sangre y orina por PCR, no resulta determinante, debido a la parasitemia transitoria, aunque es interesante esta técnica en el líquido amniótico. La detección de la primoinfección, menos en la seroconversión, necesita el estudio en conjunto de diferentes marcadores serológicos, siendo de gran interés el índice de avidez de IgG, pero no como prueba única. Se realizó la caracterización genómica basada en la técnica PCR-RFLP del gen SAG2 de diferentes cepas de Toxoplasma gondii, siendo el primer estudio realizado en España con cepas autóctonas, de origen animal y humano. Se demostró la presencia de los tres genotipos predominantes (I, II, III) de Toxoplasma.