Transcriptional regulation of lipopolysaccharide (LPS)-induced Toll-like Receptor (TLR) expression in murine macrophages: role of interferon regulatory factors-1 (IRF-1) and 2 (IRF-2)

Abstract

La activación de los receptores tipo Toll (TLRs) se asocia estrechamente con la inducción de la expresión génica proinflamatoria; sin embargo, también se ha demostrado que la expresión de muchos otros genes, incluidos los propios genes TLR, se modula después de su activación. Una gran familia de factores de transcripción, los factores reguladores del interferón (IRF), se ha relacionado con la señalización mediada por TLRs que conduce a la expresión génica proinflamatoria. Dado que IRF-1 e IRF-2 contrarregulan la actividad transcripcional de muchos genes, planteamos la hipótesis de que IRF-1 e IRF-2 también podrían regular la expresión génica de TLRs en macrófagos, y que podrían hacerlo de forma distinta tras la estimulación con lipopolisacárido de E. Coli (LPS). Para ello, cultivamos macrófagos peritoneales primarios procedentes de ratones knockout para IRF-2 e IRF-1. Estudiamos la expresión del ARNm de los distintos TLRs tras el tratamiento con LPS mediante PCR cuantitativa en tiempo real. El tratamiento con LPS reguló al alza la expresión del ARNm de estado estacionario de los TLRs 1-3 y 6-9, mientras que el ARNm de TLR4 se reguló modestamente a la baja. Los macrófagos procedentes de ratones IRF-2(-/-) respondieron a LPS con expresión desregulada del ARNm de TLR3, TLR4 y TLR5, mientras que la deficiencia de IRF-1 amortiguó la expresión de mRNA inducida por LPS para TLR3, TLR6 y TLR9. Los estudios funcionales revelaron una señalización aberrante de TLR3 en los macrófagos IRF-2(-/-). En conjunto, estos hallazgos revelan un nivel adicional de complejidad asociado con la regulación transcripcional de TLR y sugieren que los factores de transcripción IRF-1 e IRF-2 contribuyen a la respuesta inmune innata a las infecciones mediante la regulación de la expresión génica de TLRs.