Embryo development "in vitro" in cattle: role of oviduct cells, oviductal fluid and extracellular vesicles

Abstract

El conocimiento del oviducto bovino y del desarrollo embrionario preimplantacional han permitido la consolidación de técnicas como la producción in vitro de embriones, que alimitar las condiciones fisiológicas, se ha convertido en una valiosa herramienta en esquemas de mejora genética y en investigación. Sin embargo, aún presenta desventajas como la bajacantidad y calidad de los embriones obtenidos.El uso de células epiteliales oviductales (BOEC) en sistemas de cultivo in vitro ha permitido descubrir sustancias embriotróficas y mecanismos de comunicación materno-embrionario. A su vez, tanto el fluido Oviductal (OF), como componente principal del ambiente Oviductal, como las Vesículas Extracelulares (EV), como secreciones de las células somáticas y que actúan como mediadoras del transporte intercelular, pueden desempeñar un importante rol reproductivo a nivel preimplantacional. Por lo tanto, el objetivo de la tesis fue evaluar el efectode las BOEC, el OF y las EV sobre el desarrollo y la calidad de los embriones bovinos producidos in vitro. En un primer experimento se evaluó el efecto de distintos sistemas decultivo con BOEC y con sus medios condicionados y se estandarizó un protocolo para la obtención y caracterización de las EV. En un segundo experimento se evidenció que la suplementación con OF a bajas concentraciones durante el cultivo in vitro incrementan eldesarrollo y la calidad de los blastocistos, y modifican su patrones de expresión génica. En untercer experimento se caracterizaron las EV presentes en el OF y se demostró que en particularlas provenientes del istmo incrementan la calidad, y modifican la expresión génica de losblastocistos. Los resultados obtenidos evidencian una asociación esencial entre el ambienteoviductal (células-fluido-EV) y el embrión en desarrollo, confirmando un diálogo materno-embrionario en la especie bovina.Palabras Clave:in vitro, desarrollo embrionario, calidad embrionaria, células epiteliales deloviducto, fluido oviductal, vesículas extracelulares, bovino.