Caracterización de la citología de impresión corneal en la especie canina y su aplicación en el diagnóstico de la queratoconjuntivitis seca (QCS)

Abstract

La citología de impresión corneal es una técnica atraumática, simple, rápida y carente de efectos secundarios que permite estudiar las capas celulares más externas de la superficie ocular, posibilitando el diagnóstico de enfermedades de la misma y su monitorización durante y después del tratamiento. Los objetivos de la presente Tesis Doctoral han sido normalizar la técnica de obtención y procesamiento de muestras obtenidas por citología de impresión corneal en la especie canina, determinar los parámetros morfológicos y morfométricos fisiológicos de las células epiteliales corneales en perros sanos y establecer las alteraciones celulares corneales en el transcurso de la QCS canina. Además, se ha estudiado la existencia de una correlación entre las alteraciones del epitelio corneal y la producción lagrimal valorada mediante la prueba lagrimal de Schirmer I (PLS I). En este estudio se han incluido 60 perros de diferentes razas que han sido divididos en dos poblaciones: el grupo I, formado por pacientes sanos, con unos valores en la prueba lagrimal de Schirmer I (PLS I) iguales o superiores a 15 mm/min y el grupo II, formado por pacientes diagnosticados de QCS con unos valores en la PLS I comprendidos entre 0 y 14 mm/min. Los ojos de los animales del grupo II han sido categorizados a su vez en 3 subgrupos, estableciendo la gravedad de la enfermedad en función de los resultados obtenidos en la PLS I como grave, moderada o leve. Para facilitar la recogida y el manejo de las muestras, adecuar la técnica para su empleo en animales y disminuir al mínimo cualquier tipo de lesión iatrogénica sobre la superficie ocular se ha utilizado un dispositivo simple y eficaz, diferente a los que se han venido empleando tradicionalmente en oftalmología humana y veterinaria. La valoración morfométrica de las células se ha realizado atendiendo a los criterios de celularidad de la muestra, separación intercelular, morfología de las células, tinción citoplasmática, área celular, área nuclear, ratio núcleo/citoplasma (ratio N:C) y alteraciones nucleares...Corneal impression cytology is an atraumatic, simple, fast, lacking side effects technique that allows to study the outermost cell layers of the ocular surface, enabling the diagnosis of diseases and the monitoring during and after treatment. This Doctoral Thesis has sought to standardize the technique of obtaining and processing samples by corneal impression cytology on the canine species, determine the morphological and morphometric physiological parameters of corneal epithelial cells in healthy dogs and set corneal cellular alterations during canine KCS. The correlation between corneal epithelium alterations and lacrimal production, assessed using Schirmer tear test I (STT I), has also been studied. This study included 60 dogs of different breeds that were divided into two populations: group I, formed by healthy patients, with Schirmer tear test I (STT I) values equal or greater than 15 mm/min, and group II, which included patients diagnosed with KCS, with STT I values between 0 and 14 mm/min. The eyes of the animals in group II were categorized in turn into 3 subgroups, establishing the severity of the disease based on the results of the STT I as severe, moderate or mild. In order to ease the collection and handling of samples, adapt the technique for use in animals and minimize any iatrogenic injury on the ocular surface, a simple and effective device was used, other than those that have traditionally been used in human and veterinary ophthalmology. The morphometric evaluation of the cells was performed according to the criteria of cellularity of the sample, intercellular separation, cell morphology, cytoplasmic staining, cell area, nuclear area, N:C ratio and nuclear alterations...