Sp1 and Sp3 Transcription Factors Mediate Malondialdehyde-induced Collagen α1(I) Gene Expression in Cultured Hepatic Stellate Cells

Abstract

Se ha demostrado que el malondialdehído, el producto final de la peroxidación lipídica, estimula la expresión del gen del colágeno alfa1(I) (Col1a1). Sin embargo, los mecanismos de este efecto no están claros. El propósito de este estudio fue aclarar estos mecanismos. Se cultivaron células estrelladas hepáticas de rata en presencia de 200 microm de malondialdehído y se analizaron los efectos sobre la expresión del gen del colágeno y la unión de las proteínas nucleares al promotor col1a1. El tratamiento con malondialdehído indujo un aumento en los niveles celulares del ARNm de col1a1 que se anuló mediante el tratamiento previo de las células con cicloheximida, p-hidroximercuribenzoato, piridoxal 5'-fosfato y mitramicina. Las transfecciones transitorias mostraron que el malondialdehído ejercía su efecto a través de elementos reguladores ubicados entre -220 y -110 pb del promotor col1a1. Los ensayos de retardo en gel demostraron que el malondialdehído aumentó la unión de las proteínas nucleares a dos elementos ubicados entre -161 y -110 pb del promotor col1a1. Estas uniones se desplazaron con anticuerpos Sp1 y Sp3. Finalmente, el malondialdehído aumentó los niveles celulares de las proteínas Sp1 y Sp3 y el ARNm de Sp1. Nuestros datos indicaron que el tratamiento de células estrelladas hepáticas con malondialdehído estimuló la expresión del gen col1a1 al inducir la síntesis de Sp1 y Sp3 y su unión a dos elementos reguladores ubicados entre -161 y -110 pb del promotor col1a1.