Applications of CRISPR/Cas13 technology in the treatment and diagnosis of diseases

Abstract

The discovery of the CRISPR/Cas system and its subsequent repurposing as a genome editing tool have revolutionised the field of genetic engineering. CRISPR nucleases offer a versatile, sensitive and specific tool for gene editing and gene expression regulation, thereby holding significant potential for therapeutic applications. Among these, Cas9, Cas12 (DNA targeting nucleases) and Cas13 (RNA targeting nucleases) are the most widely employed nucleases for these purposes. Furthermore, the trans activity exhibited by Cas12 and Cas13 can be harnessed for nucleic acid detection applications for the diagnosis of diseases. In this work, we explore the possibilities of the RNA targeting nuclease Cas13, as a pre-formed ribonucleoprotein, for both therapeutic and diagnostic applications...El descubrimiento del sistema CRISPR/Cas y su posterior adaptación como herramienta de edición génica han revolucionado el campo de la ingeniería genética. Las nucleasas CRISPR constituyen una herramienta versátil, sensible y específica para la edición y la regulación de la expresión génica, lo que les confiere un gran potencial para aplicaciones terapéuticas. De entre todas estas nucleasas,Cas9 y Cas12 (que actúan sobre ADN) y Cas13 (que actúan sobre ARN) son las más ampliamente utilizadas con estos fines. Además, la actividad trans que presentanCas12 y Cas13 puede utilizarse para la detección de ácidos nucleicos con aplicaciones en diagnóstico de enfermedades. En esta tesis, exploramos las posibilidades que ofrece Cas13 para aplicaciones tanto terapéuticas como diagnósticas...