Relaciones estructura-inmunogenicidad en las formas nativa y recombinante del alergeno principal de la mostaza

Abstract

Se ha amplificado mediante pcr la secuencia genómica que codifica el alergeno sin a 1. Siete clones han sido analizados, y uno de ellos se utilizo en la realización de diversas construcciones de expresion en e. Coli. La construcción llevada a cabo en el plasmido pgex-2t expresa la proteína recombinante en forma de proteína de fusión con la glutation s-transferasa. Mediante esta construcción se ha logrado aislar el alergeno recombinante en forma soluble (rsinal). Se ha caracterizado inmunologicamente a rsinal, empleando para ello suero policlonal de conejo, anticuerpos monoclonales y sueros de pacientes alérgicos a mostaza. Asimismo, se ha comprobado su resistencia a la digestión con tripsina. En todos los ensayos realizados, rsinal mostro un comportamiento virtualmente idéntico al alergeno nativo. Finalmente, se han llevado a cabo estudios de reactividad cruzada entre sin a 1 y las napinas de colza, las cuales son descritas como alergenos por vez primera en el presente trabajo