Caracterización del sistema gabaérgico en islotes pancreáticos

Abstract

Dada la importancia que parece tener el GABA en la secreción de insulina, y ante la no determinación exacta de su papel en el interior de las células , hemos desarrollado como objetivo general de esta tesis el estudio del sistema GABAérgico en los islotes pancreáticos de rata y, más concretamente, su relación con el mecanismo de secreción de insulina. Para ello hemos desarrollado una serie de objetivos: 1. Rastreo de la expresión génica, en islotes, de los enzimas que sustentan el shunt del GABA y que aún no han sido explorados: GABA transaminasa, semialdehído succínico deshidrogenasa y semialdehído succínico reductasa. 2. Determinación de la proporción de expresión del gen de la semialdehído succínico reductasa frente al de la semialdehído succínico deshidrogenasa, de manera que nos aporte información sobre el posible destino metabólico del GABA. 3. Estudio de la actividad enzimática de estos dos enzimas que metabolizan el semialdehído succínico. Caracterización en islotes y comparación con un tejido en el que abunde el sistema GABAérgico (cerebelo) y otro típicamente energético (hígado). 4. Estudio de la implicación del metabolismo del GABA en el mecanismo de secreción de insulina estimulado por nutrientes secretagogos: Modificaciones inducidas por glucosa y ácido cetoisocaproico. 5. Estudio de elevaciones controladas de la concentración intracelular de GABA utilizando precursores permeables sobre el mecanismo de secreción de insulina. 6. Caracterización de la liberación insular de GABA: exocitosis versus transporte. Identificación de GAD65 y VIAAT, proteínas asociadas con vesículas de almacenamiento de GABA, en células insulares.